Preliminary Report on the Breeding of F_1 Hybrid Between Broccolini with High Sulforaphane

Through the use of broccolini innovation resources, a group of unique ex- cellent broccolini and male sterile lines, as well as inbred lines were bred. In the research, 4 hybrid strains were bred by the use of male sterile lines which had vigorous growth, high resistance, good quality, good commodity and high yield, in- cluding Beauty No.l, Beauty No.2, Beauty No.3, Beauty No.4. The results showed that Beauty No.2 behaved the best comprehensive characters of high yield, high commercial value and good taste. The yield of Beauty No.2 was 28 185 kg/hm2 and 25% higher than the control Qianxiu, the sulforaphane content was as high as 48 mg/kg and 77.8%, 272.1% higher than the control of Qianxiu and Manuolv broc- coli, respectively. The comprehensive character of Beauty No.1 ranked the second, the yield was the highest （29 265 kg/hm2） and 30% than the control Qianxiu.

西兰苔叶黄酮体外抗癌活性的研究

[目的]探讨西兰苔叶黄酮粗提物(EOF)的抗癌机制。[方法]通过四甲基偶氮唑盐(MTT)试验检测EOF对细胞生长的抑制率,并用流式细胞仪采用Annexi-V/PI双染法进行细胞凋亡检测,以探讨西兰苔叶EOF对癌细胞增殖的抑制作用及其诱导的癌细胞凋亡机制。[结果]西兰苔叶EOF对SW480、HepG2、Hela和A549这4种细胞的生长均表现出抑制作用,抑制率随药物浓度的增加而增大,呈明显的量效关系,其50%抑制浓度(IC50)值分别为88.14、99.65、104.43、79.77μg/ml,对SW480细胞的作用最为明显。通过Annexi-V/PI双染法流式细胞仪测得其浓度为30、60、80、120、160μg/ml时,诱导的SW480细胞的早期凋亡率分别为12.74%、16.41%、19.61%、28.28%和50.66%。[结论]西兰苔叶EOF是通过抑制增殖和诱导细胞凋亡来发挥对肿瘤的治疗作用的。

西兰苔籽中异硫氰酸盐鉴定及诱导OVCAR-3细胞凋亡研究

[目的]研究西兰苔籽中异硫氰酸盐的抗肿瘤活性。[方法]利用GC-MS联用仪对西兰苔籽中的异硫氰酸盐进行了分析和鉴定,并通过MTT试验和相差显微镜观察研究了其抗肿瘤活性。[结果]通过GC-MS分析从西兰苔籽提取物中成功鉴定出5种异硫氰酸盐,占挥发性物质的80%。体外细胞毒性试验表明,异硫氰酸盐能有效抑制卵巢癌细胞OVCAR-3的生长,且抑制率随药物浓度的增大而增大,呈明显的剂量关系。异硫氰酸盐浓度为78.3μg/ml时,对OVCAR-3细胞生长的抑制率为50%。对照组的OVCAR-3细胞生长良好,低浓度加药组(10、30、60μg/ml)OVCAR-3细胞的形态和数目发生了变化,圆形脱壁细胞逐渐增多。随着药物浓度的继续增加,OVCAR-3细胞的形态变得很不规则,凋亡小体出现。[结论]该试验为我国天然抗癌药物研究奠定了基础。

西兰薹与芥兰遗传多样性的RAPD分析

利用RAPD分子标记技术对10个西兰薹与芥兰品种进行遗传多样性分析。结果表明,RAPD技术是准确评估西兰薹与芥兰遗传多样性的有效方法。100条随机引物中筛选出18条多态性引物,共检测出73条条带,其中多态性条带39条,多态率为53.4%。供试材料间遗传相似系数(GS)变幅在0.3611～0.9000之间,平均相似系数为0.6306,表明西兰薹与芥兰遗传变异较丰富。聚类分析结果表明,在相似系数0.53水平上可将10个品种分为3大类群。

西兰苔籽中硫代葡萄糖苷酶解条件的研究及产物的鉴定

[目的]研究西兰苔籽中硫代葡萄糖苷酶解的影响因素,确定硫苷酶解的最佳条件并分析和鉴定酶解产物。[方法]以西兰苔籽粉末为材料,研究不同的温度、pH以及时间对酶水解的影响,并且利用气相色谱-质谱连用技术分析鉴定了酶解产物。[结果]酶解时间为8h,水解温度为25℃,pH值为7是最佳酶解条件。利用气象色谱-质谱连用技术分析鉴定出5种化合物,占硫苷酶解产物中挥发性化合物总量的80%。[结论]确定了西兰苔籽中硫代葡萄糖苷酶解的最佳条件,并为西兰苔籽的抗癌活性研究提供了一定的理论基础。

唑虫酰胺在西兰苔中的残留消解动态与膳食风险评估

通过田间试验研究露地栽培条件下唑虫酰胺在西兰苔上的消解动态和最终残留情况,明确使用该药剂防治害虫可能产生的食用安全风险。结果表明,15%唑虫酰胺悬浮剂按2倍最高推荐剂量(有效成分225 g·hm^(-2))施药1次,在西兰苔上的消解半衰期为3.35 d。最终残留量试验结果表明,该药剂的残留超标风险与田间用药量、用药次数正相关。经膳食风险评估,以225 g·hm^(-2)的剂量施药1次,药后1 h~17 d风险商值RQ均小于1,施药2~3次则药后1~7 d均存在较大膳食风险;以112.5 g·hm^(-2)的剂量施药2次,药后3 d起膳食风险处于可接受水平。建议生产中采用15%唑虫酰胺悬浮剂以有效成分112.5 g·hm^(-2)的剂量用药,每季最多使用2次,在露地栽培西兰苔上安全间隔期为5 d。

新型蔬菜西兰薹栽培技术研究

研究了不同播种期、不同种植密度和复合肥施入量对国外新型蔬菜西兰薹产量的影响。研究结果表明,西兰薹在广东省的适宜播种期为7～11月,以8～9月播种的产量最高;最佳定植密度为株距40～45 cm,行距50～55 cm;每667 m2复合肥施入总量为100 kg左右时产量最高,并且应结合植株生长情况分批施入。

西蓝薹RAPD-PCR反应体系的建立与优化

以新型蔬菜西蓝薹为研究对象,采用改良的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取基因组DNA,并通过单因素多水平梯度试验,筛选了Taq酶、引物、DNA模板、Mg2+、dNTPs的浓度或用量,建立了西蓝薹RAPD-PCR的最佳反应体系:25μL反应体系中含0.8 UTaq酶、0.40μmol/L引物、30 ng DNA模板、1.6 mmol/LMg2+、0.25 mmol/L dNTPs、2.5μL 10×PCR buffer.利用优化的反应体系,对5个西蓝薹品种进行体系稳定性检测,结果表明该反应体系的重复性和稳定性良好.

西兰苔凝集素的分离纯化及性质研究

本文采用硫酸铵沉淀法,分别以生理盐水,蒸馏水,pH=7.2的Tris-HCl缓冲液,pH=7.2的磷酸缓冲液为浸提液,对西兰苔凝集素进行提取,然后依次利用DEAE-52阴离子交换层析和SephadexG-75对凝集素粗品进行分离纯化,并对纯化后的西兰苔凝集素的部分性质进行研究。结果表明：pH=7.2的Tris-HCl缓冲液的提取率最高,为3.57±0.02%;纯化后的西兰苔凝集素分子量约为27 ku,糖含量为7.60±0.03%,其凝血活力为28;糖抑制试验表明,西兰苔凝集素的凝集活性受D-甘露糖和阿拉伯糖的抑制;热稳定性实验表明90℃以下凝集素的凝集活性不受温度影响,有较好的热稳定性。此外,西兰苔凝集素的最适pH范围是7-8,强酸强碱环境中其凝血活性明显下降。在含有Ca2＋的溶液中其凝集活性有所增强,表明西兰苔凝集素活性受Ca2＋影响较大。