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‘大白谷’CC-NBS-LRR蛋白编码基因抗干尖线虫侵染时空表达研究 被引量:5
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作者 陈俏丽 王峰 +7 位作者 李丹蕾 孔畅仪 牛春阳 张瑞芝 王博文 刘爽 史欣悦 张荣 《中国农学通报》 2015年第21期279-283,共5页
为深入探究‘大白谷’(Oryza sativa L.ssp.Indica)感病的分子机理,以及抗病基因在发病过程中所起的作用,克隆了‘大白谷’CC-NBS-LRR蛋白编码基因Os11g RGA8,对Os11g RGA8基因进行了生物信息学分析,并对其在水稻抗干尖线虫侵染过程中... 为深入探究‘大白谷’(Oryza sativa L.ssp.Indica)感病的分子机理,以及抗病基因在发病过程中所起的作用,克隆了‘大白谷’CC-NBS-LRR蛋白编码基因Os11g RGA8,对Os11g RGA8基因进行了生物信息学分析,并对其在水稻抗干尖线虫侵染过程中的功能进行了研究。Os11g RGA8基因位于11号染色体,其编码蛋白含有733个氨基酸,等电点为5.99,相对分子质量为84355.07。序列分析表明该氨基酸序列含有RX-CC、AAA_22、NBS和LRR_4这4个结构域,Os11g RGA8基因编码抗病蛋白属于CC-NBSLRR抗病蛋白家族。Q-PCR结果显示,接种水稻干尖线虫SAMN02420038的籼型常规稻‘大白谷’,与CK组‘大白谷’相比,Os11g RGA8基因表达量表现为上调,且24 h内上调增幅较缓,48 h时上调增幅突然上涨,72 h时上调增幅又出现下降,表明该基因参与‘大白谷’天然免疫反应过程,在水稻干尖线虫侵染过程中起到一定抗性作用。 展开更多
关键词 cc-nbs-lrr 大白谷 水稻干尖线虫 Q-PCR R基因
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青花菜CC-NBS-LRR抗病基因BoCNL1的克隆与分析
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作者 黄笑梅 金建峰 +4 位作者 张雪 朱思眉 朱柯柯 赵罗鹏 蒋明 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第2期259-263,共5页
根据已知序列设计PCR引物,从青花菜中克隆1个NBS-LRR(核苷酸结合位点-富含亮氨酸重复)抗病基因BoCNL1;在生物信息学分析的基础上,利用RT-PCR研究该基因在不同器官中的表达模式。测序结果表明,BoCNL1基因的编码区全长为2 550 bp,编码849... 根据已知序列设计PCR引物,从青花菜中克隆1个NBS-LRR(核苷酸结合位点-富含亮氨酸重复)抗病基因BoCNL1;在生物信息学分析的基础上,利用RT-PCR研究该基因在不同器官中的表达模式。测序结果表明,BoCNL1基因的编码区全长为2 550 bp,编码849个氨基酸;编码蛋白具CC(卷曲螺旋)、NBS和LRR结构域;进化分析结果表明,BoCNL1与不结球白菜的关系最近,在进化树上处于同一分支,与醉蝶花的关系最远;RT-PCR结果表明,BoCNL1在根、花茎、叶、花蕾、开放的花和嫩角果中均有表达,但表达量低。 展开更多
关键词 青花菜 抗病基因 cc-nbs-lrr 基因克隆
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黄瓜CC-NBS-LRR家族基因鉴定及在霜霉病和白粉病胁迫下的表达分析
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作者 康忱 赵雪芳 +3 位作者 李亚栋 田哲娟 王鹏 吴志明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第19期3751-3766,共16页
【目的】对黄瓜全基因组的CC-NBS-LRR(CNL)基因家族进行生物信息学和表达模式分析,为深入研究CNL基因家族在黄瓜生长、发育和病害胁迫响应中的功能提供参考。【方法】以拟南芥CNL为参考序列,利用本地Perl语言和Pfam等软件检索黄瓜‘993... 【目的】对黄瓜全基因组的CC-NBS-LRR(CNL)基因家族进行生物信息学和表达模式分析,为深入研究CNL基因家族在黄瓜生长、发育和病害胁迫响应中的功能提供参考。【方法】以拟南芥CNL为参考序列,利用本地Perl语言和Pfam等软件检索黄瓜‘9930’基因组并确定黄瓜CNL基因家族成员。通过ExPASy、GSDS2.0、MEGA、MEME、Tbtools、Mev等工具对黄瓜CNL家族基因进行生物信息学分析。根据转录组数据库、霜霉病菌(Pseudoperonospora cubensis)、白粉病菌(Podosphaera xanthii)接种处理和实时荧光定量PCR技术分析该类基因的表达模式。【结果】从黄瓜全基因组中鉴定得到17个CsCNL,这些基因分布在除1号染色体外的6条染色体上,其编码蛋白与其他植物CNL结构相似,均含有CC、NBS和LRR保守结构域,蛋白质大小介于197—1148 aa,分子量在22.6—131.3 kD,等电点在5.71—8.38。共线性分析表明其中不存在片段重复和串联重复基因,多物种系统进化关系表明,CsCNL基因家族成员在葫芦科植物之间具有较高的结构和功能相似性。CsCNL启动子中存在多种与抗病相关的顺式作用元件。CsCNL表达具有组织特异性。在接种霜霉病菌2 d和5 d后,Csa3G815400、Csa3G822360和Csa7G420890在抗性品种中均显著上调表达,Csa4G015850在抗性品种中下调表达,在敏感品种中显著性表现不一;在接种白粉病菌2 d和5 d后,Csa2G008000和Csa3G684170在敏感品种中显著上调表达,在抗性品种中显著下调表达;Csa4G016360、Csa7G420890和Csa7G425940在抗性品种中显著上调表达,在敏感品种中表达量无变化或显著下调。【结论】CsCNL家族成员具有组织表达特异性并且多数基因能够响应霜霉病菌和白粉病菌的胁迫。推测Csa3G815400、Csa3G822360和Csa7G420890表达量增加,Csa4G015850表达量减少可诱发抗病黄瓜品种的霜霉病抗病反应;Csa4G016360、Csa7G420890和Csa7G425940表达量增加,Csa2G008000和Csa3G684170表达量减少可诱发抗病黄瓜品种的白粉病抗病反应;而Csa7G420890表达量的增加能同时诱发抗病黄瓜品种的霜霉病和白粉病的抗病反应。 展开更多
关键词 黄瓜 cc-nbs-lrr(CNL) 霜霉病 白粉病 基因表达
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Characterization of an Organ Specific and Pathogen Responsive CC-NBS-LRR Gene from Cotton(Gossypium hirsutum L.) 被引量:3
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作者 ZHANG Bao-long,NI Wan-chao,YANG Yu-wen,SHEN Xin-lian(Institute of Agro-biotechnology,Jiangsu Academy of Agricultural Sciences,Zhongling Street 50,Nanjing 210014,China) 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2008年第S1期74-,共1页
Cotton diseases represent a major challenge to cotton growth.Cloning of a cotton pathogen response gene and promoter is of great importance to improve disease resistance.In this study,a
关键词 LRR NBS Characterization of an Organ Specific and Pathogen Responsive cc-nbs-lrr Gene from Cotton CC
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Structural and Functional Insights into an Arabidopsis NBS-LRR Receptor in Nicotiana benthamiana
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作者 Jianzhong Huang Xiuying Guan +3 位作者 Xiaoju Zhong Peng Jia Hongbin Zhang Honglei Ruan 《American Journal of Molecular Biology》 CAS 2024年第2期84-96,共13页
Nucleotide-binding site leucine-rich repeat receptors (NBS-LRR/NLRs) are crucial intracellular immune proteins in plants. Previous article reported a novel NLR protein SUT1 (SUPPRESSORS OF TOPP4-1, 1), which is involv... Nucleotide-binding site leucine-rich repeat receptors (NBS-LRR/NLRs) are crucial intracellular immune proteins in plants. Previous article reported a novel NLR protein SUT1 (SUPPRESSORS OF TOPP4-1, 1), which is involved in autoimmunity initiated by type one protein phosphatase 4 mutation (topp4-1) in Arabidopsis, however, its role in planta is still unclear. This study employed Nicotiana benthamiana, a model platform, to conduct an overall structural and functional analysis of SUT1 protein. The transient expression results revealed that SUT1 is a typical CNL (CC-NBS-LRR) receptor, both fluorescence data and biochemical results showed the protein is mainly anchored on the plasma membrane due to its N-terminal acylation site. Further truncation experiments announced that its CC (coiled-coil) domain possessed cell-death-inducing activity. The outcomes of point mutations analysis revealed that not only the CC domain, but also the full-length SUT1 protein, whose function and subcellular localization are influenced by highly conserved hydrophobic residues. These research outcomes provided favorable clues for elucidating the activation mechanism of SUT1. 展开更多
关键词 cc-nbs-lrr Hypersensitive Response Nicotiana benthamiana Plasma Membrane Localization
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马铃薯抗晚疫病种质资源中抗病基因的筛选 被引量:1
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作者 李晓川 王朝海 +9 位作者 周平 马维 陈军 陆燚 吴显 王宗明 吴瑞 宋治豪 马杰 付毅 《贵州农业科学》 CAS 2023年第2期1-7,共7页
【目的】筛选晚疫病抗病种质资源的晚疫病抗病基因,为马铃薯晚疫病抗性种质创新与利用提供依据。【方法】利用转录组测序技术分析马铃薯抗感晚疫病材料(广谱晚疫病抗性材料野生种Solanum demissum品系cs47)和易感材料(卡它丁、大西洋、... 【目的】筛选晚疫病抗病种质资源的晚疫病抗病基因,为马铃薯晚疫病抗性种质创新与利用提供依据。【方法】利用转录组测序技术分析马铃薯抗感晚疫病材料(广谱晚疫病抗性材料野生种Solanum demissum品系cs47)和易感材料(卡它丁、大西洋、底西瑞)间差异表达基因,利用GO数据库预测差异表达基因的功能,Clustal Omega程序比对氨基酸序列,MEGA6绘制氨基酸序列进化树。【结果】利用马铃薯抗病种质资源cs47筛选得到PGSC0003DMP400045185、PGSC0003DMP400015105和PGSC0003DMP400015107共3个潜在的晚疫病抗性基因,与3个易感晚疫病品种比分别有6 084~6 547个和6 264~6 316个基因表达水平显著上升和显著下降。在显著差异表达水平的基因中,3个cc-NBS-LRR类基因和已克隆的晚疫病抗性基因拥有类似的蛋白结构域。【结论】广谱晚疫病抗性材料野生种S.demissum品系cs47含有PGSC0003DMP400045185、PGSC0003DMP400015105和PGSC0003DMP400015107共3个潜在的晚疫病抗性基因,转录组测序技术有助于分离晚疫病抗病基因。 展开更多
关键词 马铃薯 晚疫病 抗病基因 转录组测序 cc-nbs-lrr类基因
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High-resolution genetic mapping and identification of candidate genes for the wheat stem rust resistance gene Sr8155B1
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作者 Jian Wang Hongyu Li +13 位作者 Tao Shen Shikai Lyu Shams ur Rehman Hongna Li Guiping Wang Binyang Xu Qing Wang Wanyi Hu Kairong Li Shengsheng Bai Jian Ma Haitao Yu Matthew N.Rouse Shisheng Chen 《The Crop Journal》 SCIE CSCD 2023年第6期1852-1861,共10页
Stem rust,caused by Puccinia graminis f.sp.tritici(Pgt),threatens global wheat production.Development of cultivars with increased resistance to stem rust by identification,mapping,and deployment of resistance genes is... Stem rust,caused by Puccinia graminis f.sp.tritici(Pgt),threatens global wheat production.Development of cultivars with increased resistance to stem rust by identification,mapping,and deployment of resistance genes is the best strategy for controlling the disease.In this study,we performed fine mapping and characterization of the all-stage stem rust resistance(Sr)gene Sr8155B1 from the durum wheat line 8155-B1.In seedling tests of biparental populations,Sr8155B1 was effective against six Chinese Pgt races tested.In a segregating population of 5060 gametes,Sr8155B1 was mapped to a 0.06-cM region flanked by markers Pku2772 and Pku43365,corresponding to 1.5-and 2.7-Mb regions in the Svevo and Chinese Spring reference genomes.Both regions include several typical nucleotide-binding leucine-rich repeat(NLR)and protein kinase genes that represent candidate genes.Among them,three NLR genes and three receptor-like protein kinases were highly polymorphic between the parental lines and their transcripts were upregulated in the homozygous resistant line TdR2 relative to its susceptible sister line TdS4.Four markers(Pku2772,Pku43365,Pku2950,and Pku3721)developed in this study,together with seedling resistance responses,correctly predicted Sr8155B1 absence or presence in 78 tetraploid wheat genotypes tested.The presence of Sr8155B1 in tetraploid wheat accessions CItr 14916,PI 197492,and PI 197493 was confirmed by mapping in three F_(2)populations.The genetic map and linked markers developed in this study may accelerate the deployment of Sr8155B1-mediated resistance in wheat breeding programs. 展开更多
关键词 Durum wheat Stem rust Resistance gene Sr8155B1 cc-nbs-lrr
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番茄中一个抗病基因功能的研究
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作者 许伟 苗敏 +1 位作者 唐晓凤 刘永胜 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2017年第4期547-552,共6页
植物中最大的一类抗病基因(R)编码的蛋白质含有卷曲螺旋结构(coiled-coil,CC)、核苷酸结合位点(nucleotide-binding site,NBS)和富含亮氨基酸的重复序列(leucine-rich repeat,LRR)结构域。R基因以抗病著称。文章通过酵母双杂筛选方式获... 植物中最大的一类抗病基因(R)编码的蛋白质含有卷曲螺旋结构(coiled-coil,CC)、核苷酸结合位点(nucleotide-binding site,NBS)和富含亮氨基酸的重复序列(leucine-rich repeat,LRR)结构域。R基因以抗病著称。文章通过酵母双杂筛选方式获得了DDI3基因,该基因与番茄中重要功能基因DDB1具有相互作用,而又含有CC-NBS-LRR结构,预测具有R基因抗病性,参与植物抗病。研究中构建了DDI3过表达载体并通过根瘤农杆菌介导转化到野生型番茄中,筛选获得DDI3高表达的阳性转基因株系。通过病菌接种实验,观察植株发病情况和统计细菌菌落数,结果发现,转基因植株的抗病性明显高于野生型番茄。DDI3基因对提高番茄的抗病性有很高的价值,为采用基因工程方法改良番茄植株抗病性做出新的尝试,同时又与番茄DDB1基因具有相互作用,对研究DDB1基因在参与植物抗病途径中的功能研究提供新的方向。 展开更多
关键词 DD13基因 cc-nbs-lrr结构域 转基因番茄 抗病性
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番茄SlNBRP1基因的克隆及抗病性的研究 被引量:1
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作者 黄曼 于淑坤 +2 位作者 张琳 刘永胜 苗敏 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2020年第8期1131-1135,共5页
作物病害是农业生产的主要限制因子之一,利用植物抗病基因(R基因)培育抗性品种是防治植物病害最环保、有效、直接的手段。植物体内绝大多数R基因编码含有卷曲螺旋结构、核苷酸结合位点和富含亮氨酸重复序列(coiled-coil nucleotide-bind... 作物病害是农业生产的主要限制因子之一,利用植物抗病基因(R基因)培育抗性品种是防治植物病害最环保、有效、直接的手段。植物体内绝大多数R基因编码含有卷曲螺旋结构、核苷酸结合位点和富含亮氨酸重复序列(coiled-coil nucleotide-binding site and leucine-rich-repeat,CC-NBS-LRR)结构域的蛋白质。文章通过酵母双杂筛选鉴定得SlNBRP1基因,利用植物基因工程技术,构建植物过表达载体pBI121-35S::SlNBRP1;通过农杆菌介导法,将SlNBRP1基因导入野生型番茄基因组中,得到转基因植株。通过生物信息学分析SlNBRP1蛋白序列,发现含有高度保守的CC结构域和NBS结构域。采用Real-time聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)分析转基因植株中SlNBRP1 mRNA的表达情况,结果显示SlNBRP1的表达量显著下调,表现出共抑制(co-suppression,CoR),即基因间相互作用引起的失活现象。番茄病原菌丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae pv.Tomato DC3000,Pst DC3000)侵染野生型和共抑制转基因植株发现,共抑制转基因植株抗病性下降且叶片菌量增加,表明SlNBRP1基因正调控植物对病原菌的免疫反应。该文为遗传育种改良作物抗病性增加了新的分子靶标。 展开更多
关键词 番茄 cc-nbs-lrr结构域 共抑制 Pst DC3000 抗病性
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An Integrated Approach to Comprehend MYMIV-Susceptibility of Blackgram Cv. T9 Possessing Allele of CYR1, the Cognate R-Gene
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作者 Anju Patel Soumitra Maiti +2 位作者 Santosh Kumar Sayak Ganguli Amita Pal 《American Journal of Plant Sciences》 2016年第2期267-278,共12页
Blackgram, an important legume crop, faces the constraint of Mungbean yellow mosaic India virus (MYMIV)-stress resulting in severe crop penalty. MYMIV-resistant plants exhibit incompatible response via a cognate CYR1 ... Blackgram, an important legume crop, faces the constraint of Mungbean yellow mosaic India virus (MYMIV)-stress resulting in severe crop penalty. MYMIV-resistant plants exhibit incompatible response via a cognate CYR1 gene-mediated interaction with virus effector molecule. In this study, we searched for the susceptible allele of the “R” gene in Cv. T9. Southern hybridization study confirmed presence of an allele in Cv. T9. However, transcripts of the CYR1 could not be detected either by RT-PCR or by Northern hybridization in Cv. T9 and also in other susceptible blackgram line. The allele was isolated, sequenced and referred as cyr1. In silico study revealed that cyr1 also encodes a CC-NBS-LRR protein like CYR1. However the CC domain of cyr1 is truncated by 128 amino acid residues indicating functional impairment with respect to the signal transduction after pathogen invasion. Comparative 3D structural modeling, hydrogen bonding and Van der Waals interaction studies revealed differences between CYR1 and cyr1. Lys519 and Thr490 present in the largest pockets of the CYR1 are the key interacting hotspots between CYR1 and MYMIV coat protein (CP). The weak Van der Waals interactions and intermolecular hydrogen bonding between cyr1 and CP confers less stability to the molecular recognition complex, unlike CYR1. Thus, the present investigation revealed Cv. T9 shows compatible interaction with MYMIV due to the truncation in the cyr1 sequence and consequent structural difference in the N-terminal of CC-domain. 展开更多
关键词 BLACKGRAM cc-nbs-lrr CYR1 cyr1 Incompatible Interaction Mungbean Yellow Mosaic India Virus
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