外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期宫颈癌患者腹腔镜根治术后预后的预测价值

目的分析外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期宫颈癌(CC)患者腹腔镜根治术后预后的预测价值。方法招募2018年9月至2020年9月于儋州市人民医院接受腹腔镜根治术治疗的早期CC患者204例,根据患者术后随访期间预后情况分为预后不良组(43例)和预后良好组(161例)。比较两组临床资料。采用Spearman秩相关分析外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平与CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平的相关性。采用多因素logistic回归分析早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平对早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良的预测价值。结果预后不良组CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)水平,术后切缘阳性占比以及术中宫旁浸润占比高于预后良好组,CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman秩相关分析结果显示,早期CC患者外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平与CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平呈负相关(r_(s)=-0.478,P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,较高的CEA、CA125、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞水平是促进早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良发生的独立危险因素(P<0.05),较高的CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平是抑制早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良发生的独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平能有效预测早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良(P<0.05),两项指标联合可进一步提高预测效能[AUC(95%CI)=0.939(0.898~0.979),P<0.001],灵敏度和特异度分别为86.00%、88.20%。结论外周血CD4^(+)CD25^(+)、CD8^(+)CD28^(+)调节性T细胞水平与早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良有关,二者能有效预测早期CC患者腹腔镜根治术后预后不良。

RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2在胃癌患者中的表达及对预后和生存时间的影响

目的:探讨RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBL2)在胃癌患者中的表达及对预后和生存时间的影响。方法:选取2017年1月至2019年1月于本院就诊的134例胃癌患者术后癌组织标本作为研究对象,另选取其中62例胃癌患者相应的癌旁组织标本及40例同期非胃癌患者正常胃黏膜组织标本进行对照,检测癌组织、癌旁组织、正常胃黏膜组织中RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2的表达情况,分析其对胃癌预后及生存时间的影响。结果:RhoA,CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2在癌组织中的阳性率均明显高于癌旁组织和正常胃黏膜组织(P<0.05)。胃癌患者术后平均生存时间为(28.61±1.34)个月,其中RhoA、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2阳性患者的生存时间均短于阴性患者(P<0.05)。RhoA(+)、CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞(+)、MYBL2(+)是胃癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论:检测RhoA,CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞、MYBL2的表达可作为胃癌病情严重程度、预后及生存时间评估的重要补充手段。

多发性骨髓瘤患者外周血CD4^+ CD25^+和CD8^+ CD28^-调节性T细胞研究

目的:探讨CD4+CD25+和CD8+CD28-调节性T细胞(Tregs)在多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中的变化及意义。方法:采用流式细胞术检测38例MM患者及20例健康对照外周血CD4+CD25+和CD8+CD28-Tregs水平。分别采用溴甲酚绿法、透射免疫比浊法测定患者血清白蛋白(Alb)、β2-微球蛋白(β2-MG)。结果:初诊MM患者外周血CD4+CD25+/high、CD4+CD25highCD127low及CD8+CD28-Tregs比率均明显升高;CD4+CD25+/high和CD4+CD25highCD127lowTregs比率在各临床分期均较对照组升高,随分期增高呈现增加趋势,且CD4+CD25high和CD4+CD25highCD127lowTregs在Ⅲ期患者显著高于Ⅰ期患者;CD8+CD28-Tregs在Ⅱ、Ⅲ期显著高于正常对照,且Ⅱ期高于Ⅰ期,Ⅲ期高于Ⅱ期,逐期递增,而在Ⅰ期与对照组比较无显著差异;CD4+CD25+/high和CD4+CD25highCD127lowTregs比率在进展期和稳定期均较对照组升高,但两期之间比较无明显差异,而CD8+CD28-Tregs在进展期高于稳定期及对照组,稳定期和对照组间比较无明显差异;CD4+CD25highTregs和CD4+CD25highCD127lowTregs比率与Alb水平均呈负相关。结论:MM患者体内存在CD4+CD25+Tregs和CD8+CD28-Tregs异常增加,可能是MM免疫逃逸的一个重要机制,这些变化同临床分期、病情进展及预后存在一定程度相关性。

浆细胞性乳腺炎患者外周血CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞变化

目的:观察浆细胞性乳腺炎(Plasma cell mastitis,PCM)患者外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞(CD4+CD25+CD127-Treg)数量和功能变化,以探讨PCM免疫病理机制。方法:将58例浆细胞乳腺炎患者分成三组:其中急性组13例(22%)、亚急性组25例(43%)和慢性组20例(34%)。并设正常对照组20例及乳腺癌对照组16例。以流式细胞术检测各型PCM患者外周血中CD4+CD25+CD127-Treg细胞百分率;实时荧光定量RT-PCR检测转录因子Foxp3表达及ELISA检测TGF-β水平。结果:三组PCM组与正常组相比,外周血CD4+CD25+CD127-Treg数量,外周血PBMC中Foxp3表达及血浆TGF-β水平均下降(P<0.05),其中急性PCM组下降最为明显(P<0.01),乳腺癌组三项指标均升高(P<0.05)。结论:浆细胞性乳腺炎患者的CD4+CD25+CD127-Treg数量及功能有所下降。

CD4^+ CD25^+细胞和CD8^+ CD28^-调节性T细胞在原发性肝癌患者外周血中的水平变化

目的研究原发性肝癌(HCC)患者外周血中CD4+ CD25+细胞和CD8+ CD28-调节性T细胞的表达及意义。方法采用流式细胞仪测定93例HCC患者和24名健康人外周血中的CD4+ CD25+细胞和CD8+ CD28-调节性T细胞水平。结果 HCC患者外周血中的CD4+ CD25+细胞[(14.39±4.58)%]和CD8+ CD28-调节性T细胞[(24.05±5.64)%]表达均显著高于对照组[(8.37±1.73)%、(15.93±4.84)%,P<0.05];CD8+CD28-调节性T细胞与HCC的分期呈正相关(r=0.463,P<0.001)。结论 CD4+ CD25+细胞和CD8+ CD28-调节性T细胞在HCC患者外周血中呈高表达,且CD8+ CD28-调节性T细胞与HCC的病情及预后相关。

卵巢癌患者外周血CD4^＋ CD25^＋ CD127^-调节性T细胞的检测及其临床意义

目的探讨卵巢癌患者外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞数量的变化。方法采集30例卵巢癌患者和10例健康人的外周抗凝血,应用CD4(PE-CY5),CD25(FITC),CD127(PE)等特异性荧光抗体标记后,通过流式细胞仪对CD4+CD25+CD127-调节性T细胞进行三色荧光抗体检测。结果卵巢癌患者的外周血中CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的百分比明显高于正常人(P<0.05),其中卵巢癌患者外周血调节性T细胞的比例高达4.39%±1.36%,而正常人仅为0.77%±0.09%。结论CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的比例增加可能引起卵巢癌免疫逃逸,并可能在卵巢癌的发生发展中起了重要作用。

他克莫司与环孢菌素A对肝移植受者CD8^+ CD28^-调节性T细胞的不同调节特性

目的探讨他克莫司(FK506)与环孢菌素A(CsA)对肝移植受者CD8+ CD28-调节性T细胞(Treg)及细胞因子IL-10的调节效应。方法采用荧光标记单克隆抗体结合流式细胞技术分析接受FK506或CsA治疗的肝移植受者外周血CD8+ T细胞及共刺激分子CD28的表达情况,采用流式细胞小球微阵列术(CBA)分析血浆中IL-10浓度。以健康志愿者和患终末期肝脏疾病拟进行肝移植者作为对照。结果疾病对照组CD8+ T细胞和CD8+ CD28- T细胞/CD8+ CD28+ T细胞比值(Ratio值)显著低于健康对照组(P<0.05)。FK506治疗组CD8+ T细胞表达显著回升(P<0.05),且增加的CD8+ T细胞主要为CD8+ CD28- Treg(P<0.05)。CsA治疗组CD8+ T细胞和CD8+ CD28- Treg未出现明显回升(P>0.05)。且FK506治疗组CD8+ CD28- Treg表达显著高于CsA治疗组(P<0.05)。两治疗组血浆IL-10水平均显著高于健康对照组和疾病对照组(P<0.05),但组间差别无显著性(P>0.05)。结论FK506可促进肝移植受者外周血CD8+ CD28- Treg表达并同时促进IL-10的产生从而加强T细胞的免疫耐受,而CsA虽不能有效促进CD8+ CD28- Treg的表达但却能促进IL-10的产生。

原因不明复发性流产与蜕膜CD4^+ CD25^+ T调节细胞和CD8^+ CD28^- T细胞的关系

目的:探讨原因不明复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)与蜕膜CD4+ CD25+ T细胞和CD8+ CD28-T细胞的关系。方法:采用流式细胞四色荧光法,检测原因不明复发性流产17例(URSA组)和正常早孕人流20例(对照组)的蜕膜CD4+ CD25+ T细胞及其FoxP3(+)表达,CD8+ CD28- T细胞及其表面CD95、CD95L表达。结果:两组蜕膜中CD4+ CD25+ T细胞比例无明显差异(P>0.05),URSA组蜕膜CD4+ CD25+ T细胞中FoxP3阳性率明显低于对照组(P<0.0001)。两组蜕膜CD8+ CD28- T细胞比例及其细胞表面CD95和CD95L的阳性表达率均无明显差异(P>0.05);结论:蜕膜CD4+ CD25+ FoxP3(+)T调节细胞明显减少,是导致URSA患者母胎界面免疫耐受异常的重要原因。

CD4^+CD25^+调节性T细胞的发育与胸腺CD4^-CD25^+细胞关联性的探讨

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+regulatoryTcells,CD4+CD25+Tr)的发育及其与胸腺CD4-CD25+细胞的关系。方法:以流式细胞术检测小鼠从出生至发育成熟过程中,胸腺、脾脏、淋巴结和外周血中CD4+CD25+Tr比例变化,以及胸腺CD4-CD25+细胞比例变化;通过磁激活细胞分选(MACS)从小鼠淋巴结纯化CD4+CD25+T和CD4+CD25-T细胞,经CFDA-SE标记,以多种刺激形式诱导增殖。结果:小鼠出生1d到10周的发育过程中,胸腺CD4+CD25+Tr比例一直比较恒定,但在脾脏、淋巴结和外周血,随鼠龄增加而不断升高,从1d龄到1周时升高最迅速,其后的升高速度逐渐减慢,10周龄时达平台期。胸腺中CD4-CD25+细胞在出生1d的小鼠比例非常高,1d龄到1周龄期间迅速下降,10周龄时达平台期。ConA不能诱导CD4+CD25+Tr和CD4+CD25-T细胞增殖,但CD4+CD25+Tr出现一过性细胞增大;佛波醇酯加离子霉素能诱导CD4+CD25+Tr和CD4+CD25-T细胞增殖;包被的抗CD3抗体加可溶性抗CD28抗体能刺激CD4+CD25-T细胞增殖,但CD4+CD25+Tr不增殖,加入高浓度IL-2,CD4+CD25-T细胞增殖更强,CD4+CD25+Tr出现增殖。结论:胸腺CD4-CD25+细胞很有可能是CD4+CD25+Tr的前体。

慢性丙型肝炎患者中CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞的表达及意义

目的探讨CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞在慢性丙型肝炎(HCV)患者中的表达及其临床意义。方法收集HCV患者67例,并根据是否吸毒分为吸毒丙肝组35例和非吸毒丙肝组32例;健康体检人员32例作为对照。采用流式细胞仪检测患者外周血中CD^4+CD25^+CD127^-调节性T细胞的表达;应用实时荧光定量PCR的方法检测其HCV RNA含量。结果慢性HCV患者中的吸毒感染组与非吸毒感染组的外周血中CD4+CD25+CD127-调节性T细胞在CD4+T细胞中所占比率分别为:3.84±1.95%、4.44±1.67%,明显低于对照组6.10±1.65%(P<0.01);而吸毒组与非吸毒组慢性HCV患者血液CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞的表达值相比差异无统计学意义;HCV患者抗病毒治疗前血液CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞的表达值明显低于治疗后和正常对照组(P<0.01)。结论 HCV患者治疗前患者外周血CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞的表达值较正常对照组明显降低,而在治疗有效后升高,说明CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞参与了HCV患者的机体免疫过程,而CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞在外周血中的表达水平可能成为监测HCV患者体内细胞免疫状态和机体抗病毒免疫应答的指标。

CD8^+CD28^-调节性T细胞与肾癌患者复发及生存期的关系

目的:探讨CD8^+CD28^-调节性T细胞(Treg)与肾细胞癌(RCC)患者复发及生存期的关系。方法:对38例RCC患者进行为期60个月的随访,检测其外周血CD8^+CD28^-Treg含量变化,并分析其预测复发的效能及其与生存期的关系。结果:38例RCC患者生存期为11~69个月;其中11例(28.9%)复发并死亡,平均复发区间24个月。手术组患者CD8^+CD28^-Treg含量明显低于非手术组(P=0.037),无复发组的CD8^+CD28^-Treg含量明显低于复发组(P=0.029)。CD8^+CD28^-Treg的曲线下面积为0.827,与复发存在显著相关性(P=0.002);当CD8^+CD28^-Treg为8.16%时,其预测复发的敏感度为89.5%,特异度为92.4%。生存分析显示RCC患者的5年生存率为76.31%(29/38);手术组患者的生存期(57.35±12.76个月)与非手术患者生存期(50.26±7.19个月)差异存在统计学意义。结论:术后2年内是肾癌复发的主要时间区间,CD8^+CD28^-Treg有助于预测复发,且其百分比接近8.16%时需高度注意复发可能;接受肾癌根治术患者的CD8^+CD28^-Treg更低,生存期越长,提示该T细胞具有重要临床意义。

CD4^(+)CD28^(−)T细胞的特点及其在疾病中的作用研究进展

在健康的年轻人体内,传统CD4^(+)T细胞的CD28表达高达97.5%,而研究发现在老年人、慢性炎症和持续感染的患者体内CD4^(+)T细胞的CD28阳性率显著下降,甚至不足50%,即出现CD4^(+)CD28^(−)T细胞积累。CD4^(+)CD28^(−)T细胞是一群独特的CD4^(+)T细胞亚群,本文综述了该亚群的表型特征、功能特点及其在慢性病毒感染、自身免疫病和心血管疾病中的作用,为CD4^(+)CD28^(−)T细胞相关疾病的治疗和预后改善提供了新策略。

γ-干扰素诱导人外周血CD4^+CD25^-T细胞转化为CD4^+CD25^+调节性T细胞的可行性研究

目的研究γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)将人外周血CD4^+CD25^- T细胞诱导为CD4^+CD25^+调节性T细胞(CD4^+CD25^+Tregs)的可行性。方法采用免疫磁珠法分离19名健康志愿者外周血单个核细胞中的CD4^+CD25^- T细胞,在抗CD3和抗CD28抗体存在条件下给予不同水平IFN-γ刺激72 h,以流式细胞仪检测CD4^+CD25^+T细胞比例并以real time-PCR法检测其特异性表型标志FoxP3表达水平。将诱导生成的CD4^+CD25^+T细胞与自体CD4^+CD25^-T细胞共培养检测诱导生成的CD4^+CD25^+T细胞抑制CD4^+CD25^-T细胞增殖的能力。结果IFN-γ刺激后CD4^+CD25^+T细胞比例上调且其FoxP3表达较诱导前明显增高,当IFN-γ水平为20、40 ng/mL时,CD4^+CD25^+T细胞上调比例最高;40 ng/mL IFN-γ诱导的CD4^+CD25^+T细胞FoxP3表达最高,但不及CD4^+CD25^+Tregs。IFN-γ诱导所得CD4^+CD25^+T细胞可抑制自体CD4^+CD25^-T细胞增殖,40 ng/mL IFN-γ诱导的CD4^+CD25^+T细胞抑制能力与CD4^+CD25^+Tregs相当。结论 IFN-γ可诱导CD4^+CD25^-T细胞转化为CD4^+CD25^+T细胞,当IFN-γ水平为40 ng/mL时诱导率最高且诱导生成的CD4^+CD25^+T细胞表型和功能与CD4^+CD25^+Tregs相当。

CD8^+ CD28^-调节性T细胞在急性非ST段抬高心肌梗死患者的表达与意义

目的:探讨CD8+CD28-调节性T细胞在急性非ST段抬高心肌梗死(NSTEMI)患者中的表达与意义。方法:收集59例NSTEMI患者,以65例急性ST段抬高心肌梗死(STEMI)、71例心绞痛患者及56例健康人作为对照,采用流式细胞术检测CD8+CD28-调节性T细胞及其转化生长因子β1(TGF-β1)及白介素10(IL-10)的百分含量;比较NSTEMI及STEMI患者的ST段电压、肌钙蛋白I(c Tn I)及肌红蛋白(Mb)含量差异,并分析CD8+CD28-T细胞及其细胞因子与上述三者的相关性。结果:NSTEMI患者CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10含量显著低于STEMI组、心绞痛组及健康组(P<0.05),且后3组之间任意两组CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10含量比较差异均无统计学意义。与STEMI组比较,NSTEMI组患者ST段压低幅度显著小于STEMI组患者的ST段抬高幅度(P=0.011),但c Tn I及Mb的含量比较差异无统计学意义。相关性分析显示CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10三者当中任意一者均与ST段压低电压、c Tn I及Mb三者当中任意一者呈显著负相关性(r绝对值均>0.750,均P<0.05)。结论:NSTEMI患者CD8+CD28-T细胞及其细胞因子含量显著下降,且与心电图改变及心肌坏死物呈显著密切相关,因此具有重要临床意义。

肺癌患者CD4^+ CD25^(high) Foxp3^+调节性T细胞的格局变化及意义

目的:研究肺癌患者外周血(PBMC)及肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)中CD4+CD25h ighFoxp3+调节性T细胞(Treg)的比例改变,探讨其在抗肿瘤免疫中的调节作用。方法:分离肺癌患者PBMC及TIL,FACS分析CD4+/CD8+T细胞的比值及CD4+CD25h ighT细胞占CD4+T细胞的比例。Real-tim e PCR检测Treg特异性转录因子Foxp3基因在PBMC及TIL中的表达。结果:肺癌患者PBMC及TIL中CD4+/CD8+比值降低;而CD4+CD25h ighT细胞在CD4+T细胞中所占比例升高;Foxp3基因仅在TIL中高表达,而在PBMC中低或不表达,表明肿瘤局部的CD4+CD25h ighT细胞主要是CD4+CD25h ighFoxp3+Treg。结合临床资料分析显示Treg在肺腺癌比例较高。结论:CD4+CD25h ighFoxp3+Treg在肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中明显升高,可能与其通过细胞与细胞间接触抑制CD8+T细胞的杀伤效应,最终发挥免疫抑制效应相关。

糖皮质激素对哮喘小鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞的作用

目的建立哮喘小鼠动物模型并给予吸入糖皮质激素治疗,通过分析CD4+CD25+调节性T细胞及相关细胞因子在哮喘发病中的变化情况,以及观察糖皮质激素治疗对该细胞的影响和干预作用,探讨哮喘发作的新的免疫机制。方法分别制备哮喘组(OVA),哮喘吸入激素治疗组(OVA/GC)及对照组(NS)动物模型。所有小鼠于末次激发后24 h,取右肺中叶标本作病理切片,观察炎症改变;同时收集外周抗凝血及肺组织细胞悬液,通过流式细胞仪及酶联免疫吸附试验(ELISA)测定CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的百分比和血浆中IL-10和TGF-β1水平。结果①哮喘小鼠外周血及肺组织细胞悬液中CD4+CD25+调节性T细胞百分率明显降低(P<0.01),吸入糖皮质激素治疗后CD4+CD25+调节性T细胞百分率明显升高(P<0.01)。②IL-10在哮喘组较对照组明显降低(P<0.01),糖皮质激素治疗组IL-10明显升高(P<0.01)。③TGF-β1在哮喘小鼠较对照组明显降低(P<0.01),吸入糖皮质激素治疗后TGF-β1有所升高,但差异无显著性。结论①哮喘小鼠CD4+CD25+调节性T细胞和IL-10,TGF-β1数量和分泌水平降低,尤其是肺部CD4+CD25+调节性T细胞不能有效聚集,导致全身和局部对炎症反应的抑制作用减弱,可能是导致哮喘发生的原因之一。②糖皮质激素可通过增加CD4+CD25+调节性T细胞及IL-10数量和分泌水平,增强其免疫抑制功能而发挥治疗作用。③外周血和肺部CD4+CD25+调节性T细胞百分率变化具有一致性,监测外周血CD4+CD25+调节性T细胞变化情况可以了解肺部变化趋势。

中国健康人外周血中具有CD4^+CD25^(nt/hi)CD127^(lo)特征的调节性T细胞频率

目的:初步确定健康人外周血中具有CD4+CD25nt/hiCD127lo特征的调节性T细胞(Treg)频率,为临床相关疾病的研究及Treg的分选提供参考。方法:采集312名8~60岁(5个年龄组)、不同性别健康人的静脉血,经三重免疫荧光染色,用流式细胞术分析CD4+CD25nt/hiCD127loTreg细胞频率,并观察细胞内Foxp3转录因子的表达。结果:健康人CD4+CD25nt/hiCD127loTreg细胞在外周血中约占CD4+T细胞的(6.55±0.11)%,各年龄组之间有差异(P=0.015),组内性别之间也存在统计学意义(P<0.05);CD25nt/hiCD127lo细胞特异性地表达Foxp3转录因子。结论:初步确定了中国健康人外周血中具有CD4+CD25nt/hiCD127lo表达特征的细胞频率,为Treg细胞的临床研究奠定了基础;CD25nt/hiCD127lo作为CD4+CD25+Treg细胞表面的特征性标志,可在分选时排除其他细胞干扰,获得较完整的Treg细胞。

骨髓间充质干细胞在CD4^+CD25^+调节性T细胞减轻大鼠移植物抗宿主反应中的作用

本研究探讨间充质干细胞(MSC)对GVHD的作用及其机制。建立大鼠同种异体骨髓移植模型,同时输入供者的T淋巴细胞诱导出移植物抗宿主反应,联合或不联合移植供体来源的MSC,观察受鼠的GVHD的发生情况;利用双荧光标记抗体标记受鼠脾脏和胸腺单个淋巴细胞,通过流式细胞术分析CD4+CD25+调节性T细胞亚群比例的变化,分析MSC的作用机制。结果显示实验组的GVHD的发生程度减轻,存活率提高,而CD4/CD8比值在GVHD组出现不同程度的减少,CD4+CD25+调节性T细胞在实验组中的脾淋巴细胞和胸腺淋巴细胞的比例分别为31.55±7.58%、93.20±2.69%,在GVHD组中的比例分别为20.90±1.90%、57.17±6.79%,实验组中CD4+CD25+调节性T细胞比例比GVHD组中增多,具有显著性差异。结论MSC能有效抑制HSC移植后致死性GVHD的发生,提高生存率,同时MSC可能通过作用于体内调节性T淋巴细胞而间接发挥了抑制GVHD的作用。

标本放置时间及年龄对CD4^+CD25^+调节性T细胞的影响

目的探讨标本放置时间及年龄对外周血CD4+CD25+调节性T细胞的影响,明确标本可放置的时间界限,建立不同年龄段的正常参考值范围。方法以171例不同年龄健康人的外周血为标本,采用双色直接荧光素标记法和多参数流式细胞术检测和分析。结果10份标本均分别在室温下放置0、1、2、3、4、5和6h检测时,CD4+CD25+Treg及CD4+CD25highT细胞分别为(12.00±1.12)%、(11.56±1.19)%、(10.72±1.29)%、(10.29±1.57)%、(8.11±1.28)%、(7.97±1.07)%、(7.70±0.93)%及(1.41±0.26)%、(1.45±0.26)%、(1.32±0.26)%、(1.27±0.28)%、(1.09±0.24)%、(0.95±0.18)%、(0.91±0.21)%。4~6岁组(n=34)、7~14岁组(n=24)、20~59岁组(n=95)、60岁以上组(n=18)健康人群CD4+CD25+Treg参考值分别是(6.55±1.28)%、(9.41±2.08)%、(11.67±2.14)%和(9.73±2.79)%,CD4+CD25high分别是(0.92±0.30)%、(1.21±0.45)%、(1.44±0.52)%及(1.51±0.55)%。结论外周血CD4+CD25+Treg和CD4+CD25highT细胞的检测结果随标本放置时间延长呈逐渐降低趋势,因此为真实反映体内CD4+CD25+Treg水平,标本放置时间应限制在3h以内。不同年龄段健康人群外周血中的CD4+CD25+Treg和CD4+CD25highT数值有明显差异,在探讨各种免疫相关性疾病与CD4+CD25+Treg之间的关系时,应该以与其年龄段相匹配的正常参考值为依据。

MOG诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中枢及外周神经系统CD4^+ T及CD8^+ T调节性细胞变化

目的：观察实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中枢及外周CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg），CD8^＋CD28^-调节性T细胞（CD8^＋CD28^-Treg）表达的变化情况，并探讨相关的细胞免疫学机制。方法：雌性C57BL／6小鼠随机分为未使用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35—55（MEVGWYR-SPFSRVVHLYRNGK）（MOG35-55）免疫的对照组和使用MOG35-55免疫诱导的EAE小鼠模型组，采用临床症状评分记录小鼠行为学变化、HE染色观察CNS炎症细胞浸润及病理改变，使用流式细胞术（FCM）检测小鼠中枢及外周CD8^＋CD28^-Treg，CD4^＋CD25^＋Treg细胞表达水平。结果：MOG35-55诱导的EAE模型组动物出现典型的EAE临床行为学及病理学表现，FCM检测EAE模型组小鼠脾细胞CD4^＋CD25^＋Treg较对照组升高但无统计学差异，CD8^＋CD28^-Treg表达水平明显低于对照组（P〈0．01），EAE模型组中枢有CD4^＋CD25^＋Treg，CD8^＋CD28^-Treg淋巴细胞的浸润，且CD4^＋CD25^＋Treg，CD8^＋CD28^-Treg在中枢的表达均高于外周，对照组中枢神经系统未检测到淋巴细胞浸润。结论：CD4^＋CD25^＋Treg，CD8^＋CD28^-Treg均参与调控EAE的病理过程，CD4^＋CD25^＋Treg，CD8^＋CD28^-Treg在EAE小鼠中枢及外周分布及变化的不同，提示其进人中枢神经系统（CNS）并参与调节中枢局部炎症。