木兰花碱调控CD44s/STAT3通路对肺癌细胞迁移、侵袭及干性特征的影响实验研究

目的:探讨木兰花碱(Mag)对肺癌细胞迁移、侵袭、干性特征的影响及其作用机制。方法:使用不同浓度的Mag(0、10、20、40、80、160μmol/L)作用于肺癌细胞A549,检测细胞存活率,根据半抑制浓度(IC 50)值选择10、20、40μmol/L Mag进行后续实验。将肺癌细胞A549随机分为A549组、Mag-L组(10μmol/L Mag培养基培养)、Mag-M组(20μmol/L Mag培养基培养)、Mag-H组(40μmol/L Mag培养基培养)和Mag-H+信号转导及转录激活因子3(STAT3)激活剂Colivelin组(40μmol/L Mag+10μmol/L Colivelin培养基培养)。采用平板克隆形成实验检测各组细胞克隆形成数量。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。采用Transwell实验检测各组细胞迁移及侵袭能力。采用肿瘤细胞成球实验检测细胞干性。采用Western blot检测各组细胞CD44s/STAT3通路及细胞干性相关蛋白表达。结果:与A549组比较,Mag-L组、Mag-M组、Mag-H组细胞克隆形成数量、迁移及侵袭细胞数、干细胞成球数和细胞中CD44s、STAT3、CD133、八聚体结合转录因子4(OCT4)、SRY-box转录因子2(SOX2)表达水平逐渐降低,而细胞凋亡率逐渐升高(均P<0.05)。在高浓度Mag的基础上加入STAT3激活剂Colivelin逆转了以上指标的变化趋势。结论:Mag能够抑制肺癌细胞迁移、侵袭及干性特征,其机制可能与下调CD44s/STAT3通路有关。

cyclin E、p53、CD44s、CD44v6与早期乳腺癌的相关性及预后预测分析

目的分析肿瘤组织的细胞周期素E(cyclin E)和p53、CD44s、CD44v6蛋白与早期乳腺癌的相关性及预后预测价值。方法选取2018年7月—2020年7月喀什地区第二人民医院收治的80例临床分期为Ⅰ~Ⅱ期的早期乳腺癌患者进行回顾性分析,将其分为恶性组;另选取同期喀什地区第二人民医院收治的80例通过病理学检验确诊为良性乳腺肿瘤患者,将其分为良性组。分别对两组患者留存的肿瘤组织进行免疫组化检测,检测cyclin E、p53、CD44s、CD44v6表达,并对比上述指标的阳性率,应用Spearman相关分析方法分析cyclin E、p53、CD44s、CD44v6与早期乳腺癌的相关性。所有患者均采取手术治疗,随后对80例早期乳腺癌患者进行3年随访,依照随访结果将患者分为2个亚组,即预后不良组(n=25)和预后良好组(n=55),对比两组患者一般临床特征及cyclin E、p53、CD44s、CD44v6阳性率,并应用Logistic回归分析cyclin E、p53、CD44s、CD44v6对早期乳腺癌预后的预测价值。结果恶性组患者cyclin E、p53、CD44s、CD44v6阳性率分别为42.50%、61.25%、77.50%、81.25%,明显高于良性组1.25%、5.00%、10.00%、12.50%(P<0.05);Spearman相关分析结果显示:cyclin E、p53、CD44s、CD44v6与早期乳腺癌呈正相关(P<0.05);预后良好组与预后不良组患者绝经情况、年龄、病理类型、治疗方式、三阴性乳腺癌、肿瘤大小、组织分化程度对比,差异无统计学意义(P>0.05),预后良好组与预后不良组患者临床分期、cyclin E、p53、CD44s、CD44v6阳性例数对比,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析结果表明:cyclin E、p53、CD44s、CD44v6阳性表达为影响早期乳腺癌预后的独立影响因素(P<0.05)。结论cyclin E、p53、CD44s、CD44v6表达水平与乳腺癌的发生、发展具有明显关系,且上述指标呈阳性表达为早期乳腺癌预后不良的独立预测因素。

CD44s、MMP-9、Ki-67的表达与骨肉瘤侵袭、转移、复发的关系

背景及目的:近期研究表明,细胞表面粘附分子CD44和基质金属蛋白酶类(MMPs)在多种肿瘤组织中有高水平表达,且与肿瘤的侵袭转移关系密切;Ki-67是一种细胞增殖核抗原,表示肿瘤细胞的增殖速率;但三者与骨肉瘤的局部侵袭、远处转移及术后是否复发之间的关系尚不清楚,本研究拟探讨细胞表面粘附分子标准型CD44蛋白(CD44s)以及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和细胞增殖核抗原(Ki-67)在骨肉瘤中的表达情况及其与骨肉瘤侵袭、转移、复发的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测了62例骨肉瘤(初发性骨肉瘤51例、复发性骨肉瘤11例,确诊时即伴有肺转移者9例、不伴有肺转移者53例)以及骨纤维结构不良和正常对照组织中CD44s、MMP-9、Ki-67的表达,并根据阳性瘤细胞占肿瘤细胞总数的比率进行半定量量化分析和非参数秩和检验。结果:CD44s、MMP-9、Ki-67在骨肉瘤中的阳性表达率分别为71.0%、75.8%和35.5%,与三种分子在骨良性病变和正常对照组织中的阳性表达率相比,其表达水平显著性升高(P值均小于0.05)。CD44s和MMP-9在初发性和复发性骨肉瘤之间的表达差异无显著性意义,但Ki-67在术后复发的骨肉瘤中的阳性率为81.8%,比初发性骨肉瘤中的阳性率显著性升高。CD44s和Ki-67在伴有肺转移的骨肉瘤中的阳性率分别为88.9%和66.7%。

胃癌中CD44s和CD44v6的表达及意义

目的研究CD44s和CD44v6的表达与胃癌发生及临床病理学相关性。方法利用各种类型的胃癌56例、非典型增生18例及正常胃黏膜组织22例,通过免疫组化ABC法检测CD44s和CD44v6的表达。结果在胃癌、非典型增生及正常胃黏膜中CD44s蛋白的阳性表达率分别为80.4%、72.2%和13.6%;CD44v6蛋白的阳性表达率分别为83.9%、77.8%和4.6%。胃癌及非典型增生中CD44s和CD44v6蛋白的表达与正常胃黏膜相比均差异有显著性(P<0.01)。CD44s和CD44v6蛋白在进展期胃癌中浸润到肌层时强阳性表达率分别为60.7%和57.1%;浸润到浆膜层的胃癌中强阳性表达率分别为82.4%和88.2%,与早期胃癌的强阳性率18.2%和9.1%相比均具差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。有淋巴结转移的胃癌中CD44s蛋白的强阳性表达率为90.5%,CD44v6蛋白的强阳性表达率为85.7%,与无淋巴结转移的胃癌中强阳性表达率为40.0%相比均差异有显著性(P<0.01)。结论CD44s和CD44v6蛋白的高表达与胃癌的发生有密切相关,CD44s和CD44v6蛋白与癌组织浸润深度及淋巴结转移有关,可做为胃癌的早期诊断及预后断定的重要指标之一。

糙叶败酱大孔吸附树脂提取物对荷瘤小鼠红细胞膜CD35和CD44s的影响

目的:观察糙叶败酱大孔吸附树脂提取物对荷瘤小鼠红细胞免疫功能的调节作用。方法:D101大孔吸附树脂分离糙叶败酱水提物,测定其组分;糙叶败酱提取物作用于荷瘤小鼠(S180),观察生命延长率,检测红细胞天然免疫活性和红细胞膜CD35、CD44 s数量。结果:糙叶败酱大孔吸附树脂提取物中多糖含量为8.4%,皂苷含量为48.4%,作用于荷瘤小鼠,生命延长率增加,红细胞天然免疫活性得到改善,CD35和CD44 s数量增加。结论:糙叶败酱大孔吸附树脂提取物有一定的红细胞免疫调节作用。

可溶性CD44s、SF、LDH在鉴别巨幼细胞贫血和骨髓增生异常综合征中的意义

目的测定巨幼细胞贫血(MA)和骨髓增生异常综合征(MDS)患者的血清可溶性CD44s(sol CD44s)、乳酸脱氢酶(LDH)、血清铁蛋白(SF)水平,来探讨此三项指标在MDS与MA的鉴别诊断中的意义。方法 112例初诊患者为研究对象,其中MDS患者58例(MDS组),MA患者39例(MA组),健康成年人15例作为对照(对照组)。留取血清标本,采用ELISA法检测血清sol CD44s,速率法测定LDH水平及电化学发光免疫分析法(ECLIA)测定SF水平。结果 MDS组血清sol CD44s水平明显高于对照组与MA组(P<0.05),MA组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。MDS组与MA组血清LDH水平均明显高于对照组,两两比较MDS组LDH水平低于MA组(P<0.05)。MDS组与MA组血清SF水平均明显高于对照组,两两比较MDS组SF水平高于MA组(P<0.05)。结论MDS患者血清可溶性CD44s、SF水平较MA患者明显升高,MDS患者LDH水平低于MA患者。血清可溶性CD44s、LDH、SF可作为MA与MDS鉴别诊断的参考指标。

整合素α_5β_1与CD44s在非小细胞肺癌中表达的意义

目的:研究整合素α5β1与CD44s在NSCLC中表达的意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测53例非小细胞肺癌标本中整合素α5β1和CD44s的表达情况,用卡方检验对各指标表达情况与临床病理参数的关系进行分析,用Spearman分析探讨NSCLC组织中整合素α5β1和CD44s表达强度的相关性。结果:有淋巴结转移组和无淋巴结转移组的NSCLC中整合素α5β1的表达阳性率分别为67.50%和30.77%,差异有显著性(P<0.05);CD44s在鳞癌组织中的表达强度明显高于腺癌,表达率分别为46.87%和14.29%,P<0.05;有淋巴结转移组与无淋巴结转移组的NSCLC组织中CD44s的表达率分别为54.55%和23.00%,两者有显著性差异(P<0.05)。NSCLC组织中整合素α5β1与CD44s表达程度呈正相关(rs=0.502,P<0.001)。结论:整合素α5β1和CD44s在NSCLC的表达呈正相关,是预测NSCLC病人预后的有意义的指标。

人脑胶质瘤CD44s、CD44v6表达及与其增殖活性相关性研究

目的 :探讨CD4 4s、CD4 4v6在人脑胶质瘤中的表达及与肿瘤恶性程度和增殖活性的相关性。方法 :采用免疫组化SP法检测 6 7例人脑胶质瘤及 15例正常脑组织中CD4 4s、CD4 4v6的表达水平 ;用Ki 6 7标记指数 (Ki 6 7LI)检测肿瘤的增殖活性。结果 :CD4 4s和CD4 4v6在正常脑组织中均无表达 ,在脑胶质瘤中CD4 4s阳性表达率为 85 1% ,表达强度在高恶性度胶质瘤中大多为 (+++) (5 7 6 % ) ,而低中恶性度胶质瘤中只有 14 7%表达 (+++) ,随肿瘤分级升高而升高 ,有显著性差异(P <0 0 5 ) ;CD4 4s表达强度与肿瘤级别、Ki 6 7LI呈正相关 (r分别为 0 6 0 6、0 6 71,P <0 0 0 1)。CD4 4v6在脑胶质瘤中表达较少 ,阳性表达率为 2 0 9% ,表达强度弱 ,与肿瘤级别、CD4 4s表达及Ki 6 7LI无相关性 (r分别为 0 2 15、0 2 0 6和 0 2 2 8,P >0 0 5 )。结论 :CD4 4s在脑胶质瘤中高表达 ,表达水平与肿瘤恶性度及肿瘤细胞增殖活性密切相关。在脑胶质瘤的发生、发展和侵袭中起重要作用。可为脑胶质瘤恶性度和预后等生物学行为的评估提供了有价值的参考指标。

CD44s、CD44v6在颅内转移瘤与胶质母细胞瘤中的表达研究

目的:探讨粘附分子CD44基因蛋白在颅内转移瘤及胶质母细胞瘤中的表达及其与这些肿瘤侵袭、转移之间的关系。方法:应用标准型CD44(CD44s)和变异型CD44v6基因蛋白单克隆抗体,微波-LSAB免疫组化染色检测20例正常脑组织、35例脑胶质母细胞瘤和30例颅内转移瘤中CD44基因蛋白的表达情况。结果:20例正常脑组织中CD44s和CD44v6表达均为阴性;35例脑胶质母细胞瘤CD44s阳性表达率为100%(35/35),CD44v6表达为阴性;30例颅内转移瘤中CD44s阳性表达率为86.7%(26/30),CD44v6阳性表达率为66.7%(20/30)。CD44v6在颅内转移瘤及脑胶质母细胞瘤的表达差异有显著性(P<0.01)。结论:脑胶质母细胞瘤中CD44s的表达可能与其脑内侵袭过程有关,无CD44v6表达可能与其很少发生颅外转移有关,并有可能成为颅内转移瘤诊治的有用指标之一。

CD44s、CD44v6、CD44v9在骨肉瘤、骨巨细胞瘤及骨软骨瘤标本的表达及临床意义

目的探究变异体CD44s、CD44v6及CD44v9与骨肉瘤分化、转移及恶性程度的关系。方法通过q PCR技术检测10例骨肉瘤、8例骨巨细胞瘤、5例骨软骨瘤标本中变异体CD44s、CD44v6及CD44v9的表达水平,应用统计学方法进行数据处理,同时结合患者临床资料和病理资料进行相关性分析。结果(1)CD44s、CD44v6在骨肉瘤和骨巨细胞瘤中的表达明显高于骨软骨瘤(均P<0.05),但在骨肉瘤和骨巨细胞瘤之间的表达无显著差异(均P>0.05)。(2)CD44v9在骨软骨瘤中无表达,在骨肉瘤和骨巨细胞瘤之间的表达无显著差异(P>0.05)。(2)CD44v9在低分化骨肉瘤表达高于高分化骨肉瘤(P<0.05),在转移性骨肉瘤表达高于非转移性骨肉瘤(P<0.05),而CD44s和CD44v6与骨肉瘤分化和转移无显著相关性(P>0.05)。结论 CD44s、CD44v6及CD44v9在不同骨肿瘤之间表达有差异。CD44s、CD44v6及CD44v9三者当中只有CD44v9的表达与骨肉瘤的分化和转移有相关性,并且分化和转移关系密切。CD44v9可作为判断骨肉瘤恶性程度的一个指标。

溃疡性结肠炎患者结肠粘膜ICAM-1及CD44s的表达

目的探讨溃疡性结肠炎结肠粘膜中两种黏附分子——细胞间黏附分子-1(ICAM-1、CD54)与CD44s的表达情况及其与活动期溃疡性结肠炎的关系。方法用免疫组化法对25例活动期溃疡性结肠炎(轻度10例,中重度15例)、5例缓解期溃疡性结肠炎和10例正常对照组的结肠粘膜组织中ICAM-1及CD44s表达情况进行研究。结果中重度溃疡性结肠炎组的CD44s表达最高,轻度组、缓解期次之,正常对照组最低,四组间均有显著差异(P<0.01)。而中重度组的ICAM-1阳性表达高于轻度组(P<0.05),两组均高于缓解期及正常对照组(P<0.01),缓解期ICAM-1阳性表达高于正常对照组(P<0.01)。结论黏附分子ICAM-1、CD44s作为炎性反应中的重要环节,在溃疡性结肠炎发病过程中起到了重要作用,该两项指标的测定可间接反应结肠组织的炎症程度,有助于临床选择治疗方案。

CD44s和CD44V6在非小细胞肺癌组织中的表达

目的 探讨CD4 4s和CD4 4V6在非小细胞肺癌 (NSCLC)组织中的表达及与预后的关系。方法 应用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶连接法 (S P法 ) ,对 6 2例非癌组织和 6 0例非小细胞肺癌组织进行了CD4 4s和CD4 4V6蛋白的检测。结果 CD4 4s和CD4 4V6在非癌组织中均有表达 ,前者的阳性表达率显著高于后者 ,P值小于 0 0 5 ;CD4 4s在NSCLC的早期和无淋巴结转移时分别为 72 7%和 75 % ,显著高于中后期 (5 0 % )和有淋巴结转移者 (5 0 % ) ,P值均小于 0 0 5 ;CD4 4V6在NSCLC的中后期和有淋巴结转移时分别为 84 2 %和 85 % ,显著高于早期 (5 4 5 % )和无淋巴结转移者 (5 0 % ) ,P值均小于 0 0 5。结论 CD4 4s强表达和CD4 4V6弱表达的NSCLC病人多为早期 ,发生转移的可能性较小 ,是NSCLC预后良好的一个指标 ,相反 ,预后较差。

肺癌患者红细胞CD35、CD44s、CD58测定及其意义

目的 :探讨肺癌患者红细胞CD35、CD4 4s、CD5 8在不同病理类型、不同分期及化疗前后分子的数量变化。方法 :参照王海滨方法 ,将经过处理的定量红细胞悬液 ,移入V型板中 ,依次加入CD35、CD4 4s、CD5 8单克隆抗体。进行细胞酶免疫分析。取上清液 ,在酶标仪 4 0 5nm读取其吸光度A值 ;减去对照孔A值为标本的的测定值。结果 :不同病理类型的肺癌红细胞CD35、CD4 4s和CD5 8除差分化癌外 ,均较正常组降低 (P <0 .0 5～P <0 .0 1 )。但各病理类型之间红细胞CD35、CD4 4s、CD5 8比较 ,差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。Ⅲ、Ⅳ期肺癌组红细胞CD35和CD4 4s较Ⅰ、Ⅱ期肺癌组降低 (P <0 .0 5 )。化疗组肺癌红细胞CD35较非化疗组降低 (P <0 .0 5 ) ,CD4 4s和CD5 8两组比较 ,差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :肺癌患者红细胞CD35、CD4 4s、CD5 8较正常人降低 ,且随着病情的进展红细胞免疫功能进一步下降 ,表明红细胞CD35、CD4 4s、CD5 8分子数量的变化与肿瘤的转移和恶化程度有关。这种关系的紊乱可能对肺癌的发生、发展。

CD44s和Ki-67在脑胶质瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨黏附分子CD44s和核相关抗原Ki-67在脑胶质瘤中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法对58例不同级别脑胶质瘤标本进行CD44s和Ki-67表达情况检测。结果:CD44s在高级别脑胶质瘤中的阳性表达率为92.31%,显著高于低级别脑胶质瘤(P<0.05);Ki-67在高级别脑胶质瘤中的高表达率为76.92%,亦显著高于低级别脑胶质瘤(P<0.01);CD44s阳性病人术后1年和3年生存率均低于CD44s阴性的病人(P<0.05);CD44s和Ki-67表达呈显著正相关。结论:CD44s与胶质瘤的病理分级、增殖侵袭以及患者预后密切相关。

CD44s的表达与胶质瘤分级的关系

目的 研究CD4 4s (standardformofclusterofdifferentiation 4 4 )在脑胶质瘤中的表达 ,明确CD4 4s与胶质瘤分级和复发的关系 ,探讨其与脑恶性肿瘤侵袭浸润的相关性。方法 收集脑胶质瘤 4 3例 ,免疫组化法检测CD4 4s蛋白的表达 ,同时以RT PCR法检测CD4 4smRNA的表达。正常脑组织标本作阴性对照。结果 CD4 4s蛋白和CD4 4smRNA在胶质瘤中异常高表达 ,且与胶质瘤分级、术后复发密切相关 ,是胶质瘤术后复发的主要风险因子。结论 CD4 4s的表达与胶质瘤分级密切相关 ,其定量分析有助于胶质瘤术后复发判断的主要因素之一。

流式细胞仪检测胃癌中CD44s及CD44v6表达

目的 探讨黏附因子ＣＤ４４ｓ和ＣＤ４４ｖ６的表达与胃癌生物学行为的关系。方法 应用流式细胞术对５８例胃癌及４０例胃良性病变的新鲜标本检测ＣＤ４４ｓ和ＣＤ４４ｖ６，并应用免疫组化测定ＰＣＮＡＬ１。结果 胃癌组ＣＤ４４ｓ的阳性率（６２．１％，３６／５８）明显高于良性病变组（２７．５％，１１／４０，Ｐ＜０．０１），且与ＰＣＮＡＬＩ（Ｐ＜０．０５）有关。胃癌组ＣＤ４４ｖ６的阳性率（５８．６％，３４／５８）高于良性病变组（３２．５％，１３／４０，Ｐ＜０．０５），且与肿瘤部位（Ｐ＜０．０５）、淋巴结转移（Ｐ＜０．０５）及ＰＣＮＡＬＩ（Ｐ＜０．０５）有关。ＣＤ４４ｓ与ＣＤ４４ｖ６表达在胃良性病变组（Ｒｓ＝０．５９，Ｐ＜０．０１）及胃癌组中（Ｒｓ＝０．２９，Ｐ＜０．０５）存在相关性。结论 ＣＤ４４ｓ和ＣＤ４４ｖ６之间存在相关性并在胃癌中表达增强并和增殖活性有关，ＣＤ４４ｖ６与肿瘤部位及淋巴结转移有关。

扶正抑瘤颗粒对荷瘤小鼠红细胞膜CD35和CD44s的影响

目的:观察扶正抑瘤颗粒(FYK)对荷瘤小鼠红细胞免疫功能的作用。方法:FYK灌服给予荷瘤小鼠(H22),观察生命延长率,检测红细胞天然免疫活性和红细胞膜CD35和CD44s数量。结果:FYK可使荷瘤小鼠生命延长率增加,红细胞天然免疫活性得到改善,CD35和CD44s数量增加。结论:FYK有一定的红细胞免疫调节作用。

胰腺癌组织中CD44s和ESA的表达及其与临床病理特征的关系

目的:探讨CD44s和ESA在胰腺癌组织中表达及其与临床病理特征的关系。方法:应用免疫组化SP法检测20例癌旁组织和50例胰腺癌组织中CD44s和ESA的表达。结果:CD44s和ESA在胰腺癌中的表达明显高于癌旁正常组织中的表达,CD44s的表达与淋巴结转移和病理分级有关(P<0.05);而ESA的表达仅与病理分级有关(P<0.05);两者之间表达呈正相关(P=0.017,rs=5.747)。结论:CD44s和ESA在胰腺的发生发展、浸润转移中密切相关,发挥重要作用,两者可作为胰腺癌浸润、转移及评估预后的指标。