利用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)和图模型分析方法,寻找脂代谢异常患者可能的血浆代谢标志物群。采用GC-MS技术对37例脂代谢异常患者和10例健康人的血浆样品进行分析,得到血浆代谢物的表达谱。偏最小二乘-判别分析(Partial least squa...利用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)和图模型分析方法,寻找脂代谢异常患者可能的血浆代谢标志物群。采用GC-MS技术对37例脂代谢异常患者和10例健康人的血浆样品进行分析,得到血浆代谢物的表达谱。偏最小二乘-判别分析(Partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA)得分图可区分脂代谢异常患者与健康人,运用PLS-DA载荷图及t检验发现有9个代谢物在两组间存在显著性差异。经NIST谱库检索,它们分别为缬氨酸、甘氨酸、丙氨酸、焦谷氨酸、葡萄糖醛酸、半乳糖、甘露糖、亚油酸和甘油。在脂代谢异常患者血浆中,除甘油浓度显著高于健康人外,其余8种代谢物浓度均明显低于健康人。图模型分析结果发现这些代谢物与脂代谢异常临床常用诊断指标之间具有很好的相关性。它们可能是脂代谢异常疾病早期诊断和预后新的特异性代谢标志物群。展开更多
文摘利用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)和图模型分析方法,寻找脂代谢异常患者可能的血浆代谢标志物群。采用GC-MS技术对37例脂代谢异常患者和10例健康人的血浆样品进行分析,得到血浆代谢物的表达谱。偏最小二乘-判别分析(Partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA)得分图可区分脂代谢异常患者与健康人,运用PLS-DA载荷图及t检验发现有9个代谢物在两组间存在显著性差异。经NIST谱库检索,它们分别为缬氨酸、甘氨酸、丙氨酸、焦谷氨酸、葡萄糖醛酸、半乳糖、甘露糖、亚油酸和甘油。在脂代谢异常患者血浆中,除甘油浓度显著高于健康人外,其余8种代谢物浓度均明显低于健康人。图模型分析结果发现这些代谢物与脂代谢异常临床常用诊断指标之间具有很好的相关性。它们可能是脂代谢异常疾病早期诊断和预后新的特异性代谢标志物群。
文摘目的通过构建大鼠胃寒证模型,分析该模型大鼠的尿液代谢物,以阐释胃寒证大鼠的代谢特征。方法将20只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组。采用5%醋酸和精炼猪油灌胃制备大鼠胃寒证模型,观察各组大鼠的一般行为学情况,14 d后采集各组大鼠尿液,HE染色观察胃黏膜组织病理学变化,对尿液进行样品前处理,加入质控样本评价实验系统的稳定性和操作的可重复性,运用液相色谱-质谱联用技术进行数据采集,使用Agilent Mass Hunter Profinder软件提取代谢物的分子特征。将获得的数据集导入SIMCA-14.1执行PCA和OPLS-DA,根据OPLS-DA项目中变量重要性投影>1的差异变量,运用t检验对筛选到的差异变量进行验证,P<0.05的差异变量为筛选出的潜在标志物,将筛选出的潜在生物标志物运用Metaboanalyst进行代谢通路分析,筛选出与胃寒证相关的代谢通路。结果通过一般行为学观察和胃组织病理检查证实胃寒证模型建立成功。在PCA模型中对质控样品检测,证明数据采集方法具有可靠性和重复性,PCA模型表明2组样本间尿液代谢物存在差异,OPLS-DA模型表明各组样本之间分离明显,存在一定的代谢差异。代谢标志物筛选中共有12个生物标志物,分别是硫脲嘧啶、6-甲巯基嘌呤、乙醇胺、肌酐、δ-己内酯、N1-甲基烟酰胺、3-苯基苯甲醇、N1-乙酰基亚精胺、东莨菪内酯、N-乙酰-L-组氨酸、D-葡糖胺-6-磷酸、雌三醇。通过代谢通路分析发现,D-葡糖胺-6-磷酸和雌三醇、D-葡糖胺-6-磷酸参与了丙氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸代谢通路,雌三醇参与了甾类激素生物合成通路,乙醇胺参与了甘油磷脂代谢通路,D-葡糖胺-6-磷酸也参与了氨基糖和核苷酸糖代谢通路。结论采用5%醋酸和精炼猪油灌胃可以成功构建大鼠胃寒证模型。本实验通过对大鼠尿液的代谢组学研究发现胃寒证大鼠代谢机制包括丙氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸代谢、甘油磷脂代谢、氨基糖和核苷酸糖代谢、甾类激素生物合成4条代谢通路,涉及能量代谢、炎性反应调节等。
