肠毒素性大肠杆菌CS3纤毛抗原在痢疾菌中的表达及其免疫效果研究

首先通过体内外重组的方法,构建了福氏2a痢疾菌T32asd基因缺陷的突变体FaD,作为抗原载体菌;同时,构建包含asd基因的表达质粒pYX102,与FaD一起,构成宿主-载体平衡致死系统,用于在没有抗生素条件选择的情况下,稳定表达克隆在表达质粒上的外源抗原基因.将肠毒素性大肠杆菌的CS3菌毛抗原基因克隆至pYX102,构建成重组表达质粒pYX103,ELISA检测结果证实CS3在痢疾菌中可以很好地表达.免疫小鼠后可诱生相应的抗体,虽然口服免疫和注射免疫产生的CS3抗体效价有一定差别,但对痢疾菌的毒株攻击均可提供较好保护.该结果为细菌性腹泻疫苗的研制提供了候选株.

CTB/CS3融合蛋白与GM1结合能力和免疫原性的分析

免疫霍乱毒素B亚单位 (CTB)或肠毒素大肠杆菌 (ETEC)定居因子CS3可使人体对ETEC的侵染有保护作用 .为探索研制ETEC双组分亚单位疫苗的可行性 ,利用大肠杆菌诱导表达系统表达了CTB与CS3的融合蛋白 (CTB/CS3) .蛋白质印迹结果表明 ,诱导表达的 2 9ku蛋白具有CTB和CS3蛋白双重抗原性 .经Ni NTA亲和层析纯化获得重组蛋白CTB/CS3,复性的重组蛋白可以部分形成五聚体并保留了与神经节苷脂GM1的结合能力 .动物实验表明 ,融合蛋白CTB/CS3具有CTB和CS3蛋白的双重免疫原性 ,同时 。

外源抗原表位在大肠杆菌CS3菌毛上的呈现

为了探讨CS3菌毛多位点用于外源表位呈现以及重组蛋白的免疫原性 ,通过对CS3亚基蛋白二级结构、抗原表位、亲水性及柔韧性的预测分析 ,找出了两个新的插入位点 72位和 136位 ,将口蹄疫病毒VP1、脊髓灰质炎病毒C3等多种表位插入到CS3中 ,全细胞ELISA、免疫荧光检测和电镜观察等均表明外源表位在大肠杆菌表面得到了表达 ,而且 72位表达水平明显高于 136位。用重组菌腹腔注射免疫小鼠 ,可诱发机体产生针对CS3和外源表位的双重免疫应答。以上结果表明 ,CS3上有多个位点可实现外源表位的表面呈现 ,可望成为研制多价基因工程活菌疫苗的表达载体。

CS3纤毛抗原表达调控机理的研究

ＣＳ３是某些肠毒素大肠杆菌菌体表面上的多聚物，它能使病原菌粘附于宿主的小肠上皮细胞上，是致病的重要因素．为了探索ＣＳ３菌毛抗原基因的表达调控机制，根据ＣＳ３亚基结构基因的核苷酸序列分析表明，在其翻译起始位点的上游存在着ｒｂｓ位点及原核启动子的－１０区和－３５区ＤＮＡ序列．采用基因重组技术将ＣＳ３结构基因上游１２０ｂｐ的ＤＮＡ片段亚克隆进缺乏启动子而只含报告基因ｌａｃＺ的质粒ｐＣＢ２６７中．凝胶滞留和启动报告基因表达的实验证明了ＣＳ３亚基结构基因具有自身的启动子（Ｐｓ）．将该启动子上游区域不同长度的核苷酸片段克隆进ｐＣＢ２６７中，报告基因表达结果表明ＣＳ３结构基因的表达受其上游区域的抑制．核苷酸序列分析发现，在Ｐｓ－３５区上游５５０ｂｐ和８４０ｂｐ处各存在一个富Ａ－Ｔ簇．结合原核启动子的一般作用规律推知，ＣＳ３的表达可能受ＤＮＡ结合蛋白型的正向调节因子的作用．用ＣＦＡ／１菌毛抗原基因的正向调节基因ｃｆａＤ对ＣＳ３基因进行的互补表达试验表明ｃｆａＤ基因不仅可消除上游区对Ｐｓ的抑制，而且可大幅度地提高Ｐｓ的启动能力．在分析表达调控的基础上获得ＣＳ３重组高效表达．同时提出了其表达调控模型．

肠毒素大肠杆菌定居因子CS3和肠毒素融合抗原基因在减毒鼠伤寒沙门氏菌中的共表达(英文)

不耐热肠毒素 (LT)和耐热肠毒素 (ST)是产肠毒素大肠杆菌的主要致病因素 ,CS3为该菌的优势定居因子 ,是定居因子CFA/II菌毛抗原的共有抗原组分。采用基因操作技术将编码CS3和融合肠毒素蛋白基因转化到减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗候选株X4 0 72中进行表达。用重组菌株口服免疫小鼠后 ,免疫动物能产生抗CS3、LT和ST的血清抗体。特别有意义的是 ,所产生的抗ST抗体能中和天然ST的生物活性。

PhotoShop CS3中重定图像像素之图像插值方法研究

在Photoshop CS3中,重定图像像素是经常使用的一个功能,其主要涉及到图像的几种插值。本文就是对这几种插值进行算法研究,以帮助更多的图像爱好者更好地理解并使用它。

用人源肠毒素性大肠杆菌CS3菌毛构建新型呈现载体(英文)

根据对人源大肠杆菌菌毛CS3亚单位亲水性、表位、二级结构和柔韧性计算机预测结果 ,以CS3亚单位第 72位氨基酸残基之后作为外源表位的插入位点 ,构建了一种新的表面呈现载体pCSX72。用该载体分别表达口蹄疫病毒 (FMDV)的VP1表位和C -myc的十肽表位 (4 1 0～ 4 1 9aa)。SDS -PAGE结果以及电镜和免疫电镜观察证明 ,插入的外源表位和CS3亚单位以杂合菌毛的形式呈现在菌体表面。ELISA检测结果表明 ,pCSX72表达的杂合蛋白的抗原性较之其他插入位点的载体要高得多。用重组细菌腹腔免疫小鼠 ,能够诱发机体对杂合蛋白的双重免疫应答。

图像处理软件Photoshop CS3的教学探讨

主要介绍上海大学计算中心多媒体课程的组成部分——图像处理软件Photoshop CS3的教学理念、教学方法和教学手段。在有限的课时内通过典型案例,激发学生的学习兴趣;联系生活实际,向学生展现软件的魅力。培养懂理论、会操作、有再学习能力的新型大学生。

CS3抗原基因的表达及纤毛装配元件的研究

在肠毒素大肠杆菌（ＥＴＥＣ）的已知定居因子中，ＣＳ３是临床分离株中最常见的抗原之一。为了研究ＣＳ３纤毛装配的基本元件，绘制了ＣＳ３亚基结构基因和辅助蛋白编码区的限制酶谱。通过亚克隆的亚基基因和不同辅助蛋白基因之间的互补性表达结果，确定了ＣＳ３纤毛装配所需要的辅助蛋白的ＤＮＡ功能片段。微细胞分析结果显示，ＣＳ３基因的有效表达和纤毛的装配至少需要６条蛋白多肽分子量分别为１５ｋＤａ，１７ｋＤａ，２４ｋＤａ，２７ｋＤａ，４８ｋＤａ和９０ｋＤａ。除了１５／１７ｋＤａ的蛋白多肽为ＣＳ３亚基外，其余的蛋白多肽参与ＣＳ３亚基的转运及纤毛的装配。根据以上结果初步确定了上述相关基因的相对位置。

大肠杆菌表面CS3菌毛展示随机肽库的构建

目的:在肠毒素性大肠杆菌CS3菌毛表面构建 10肽随机肽库．方法:首先将原有的单酶切CS3菌毛呈现载体改造为双酶切载体,并证实改造后的载体能正确形成CS3菌毛．同时设计合成2条寡核苷酸序列,链1含有1个10肽随机编码序列(NNS)10, 链2可与链1的3′端互补．两条链经过退火、延伸、酶切和回收与经过同样酶切的呈现载体连接,连接产物纯化后分多次电击转化,获得随机肽库．随机挑选10个克隆进行测序并对测序结果进行分析．结果:获得1个库容量为1．8×106大小的随机肽库．测序结果显示,所构建肽库的基本框架与预期设计相符,4个寡核苷酸出现的频率也与理论值相接近．结论:在肠毒素性大肠杆菌CS3菌毛表面成功构建库容量为1．8×106大小的10肽随机肽库．为下一步利用肽库进行筛选奠定了基础．

巧用premiere pro cs3键控类视频特效实现抠像

抠像又称为键控，使用抠像可以将图像中具有不同色彩或者亮度的部分变为透明。通过使用键控特效，图像中目标颜色区域或者亮度区域被设置成透明，从而显示出背景画面，没有进行抠像的部分仍旧保留原有的图像，以达到画面合成的目的。下面我们通过介绍premiereprocs3的亮度键、色度键、

CS3菌毛可以作为异源抗原决定簇的嵌合表达载体

CS3是肠毒素源性大肠杆菌的菌毛蛋白,是一种很强的免疫原。研究了利用CS3菌毛作为异源抗原决定簇载体的可能性。在计算机分析预测CS3亚基的抗原表位区、二级结构的基础上,运用PCR定点突变在CS3亚基结构基因中引入了SacⅡ酶切位点序列,插入编码霍乱毒素B亚基抗原表位CTP3的DNA序列,构建了表达CS3/CTP3的重组菌株。电镜和免疫电镜观察证明,CS3/CTP3以杂合菌毛的形式存在于菌体表面,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳显示了CS3/CTP3杂合蛋白的存在。口服和腹腔注射免疫Bal b/c小鼠,该重组菌株可诱发抗CS3和抗CTP3的双重免疫应答。结果表明CS3可以作为表达异源抗原决定簇的表达载体,可望成为研制口服粘膜免疫多价疫苗的新型系统。

CS3纤毛抗原表达调控机理的研究

CS3亚基结构基因的核苷酸序列分析表明,在其翻译起始位点的上游存在着rbs位点及原核启动子的—10区和—35区DNA序列。凝胶阻滞和启动报告基因表达的实验确证了CS3亚基结构基因具有自身的启动子(Ps),怛它的作用受其上游区域的抑制。核苷酸序列分析发现,在Ps—35区上游550bp和840bp处各存在一个富A-T簇。结合原核启动子的一般作用规律推知,CS3的表达可能受DNA结合蛋白型的正向调节因子的作用,互补实验结果表明cfaD基因不仅可消除上游区对Ps的抑制,而且可大幅度地提高Ps的启动能力。在分析表达调控的基础上获得CS3重组高效表达。同时提出了其表达调控模型。

Premiere Pro CS3在精品课视频制作中的应用

精品课视频录制是高校精品课建设的重要组成部分，录制包括前期录像和后期编辑制作。专业录像设备和技术是前提，而后期的编辑制作效果更是决定精品课质量的重要因素。无论是自动录播的精品课，还是人工录制的精品课素材，

表达CS3菌毛和CT-B抗原双价疫苗候选株的构建

肠毒素性大扬杆菌(ETEC)是幼儿腹泻和旅游者腹泻的重要致病菌。理想的ETEC腹泻菌苗应具有抗菌和中和毒素的能力。本研究以Bluescript质粒为载体构建了表达CS3和CT-B的双价重组抗原的克隆株。口服免疫接种Bal b/c小鼠和肌肉注射免疫家兔,该重组菌株可以诱发抗CT-B和抗CS3的双重免疫应答,为构建多价腹泻疫苗株奠定了基础。

CS3抗原基因的表达及纤毛装配元件的研究

在肠毒素大肠杆菌(ETEC)的已知定居因子中,CS3是临床分离株中最常见的抗原之一。为了研究CS3纤毛装配的基本元件,绘制了CS3亚基结构基因和辅助蛋白编码区的限制酶谱。通过亚克隆的亚基基因和不同辅助蛋白基因之间的互补性表达结果,确定了CS3纤毛装配所需要的辅助蛋白的DNA功能片段。微细胞分析结果显示,CS3基因的有效表达和纤毛装配至少需要6条蛋白多肽,分子量分别为(×10~3)15、17、24、27、48和90。除了15×10~3/17×10~3的蛋白多肽为CS3亚基外,其余的蛋白多肽参与CS3亚基的转运及纤毛的装配。根据以上结果初步确定了上述相关基因的相对位置。

CS3纤毛抗原表达调控机理的研究

定居因子抗原(CFA)是肠毒素大肠杆菌(ETEC)的重要毒性因子和保护性抗原,大多以菌毛的形式存在。此类抗原的表达及菌毛的装配需要2类基因的共同作用,即亚基结构基因和辅助蛋白结构基因。亚基是纤毛抗原的基本组成单位,而辅助蛋白则参与亚基蛋白分子的输送及装配过程。CS3亚基结构基因位于辅助蛋白结构基因的下游,处于CS3操纵子的3′端。CS3亚基结构基因的核苷酸序列分析揭示。

表达CS3菌毛和CT-B抗原双价疫苗候选株的构建

人源肠毒素大肠杆菌(ETEC)是引起婴幼儿及旅游者腹泻的主要病原菌。ETEC的致病因子包括定居因子抗原和肠毒素。定居因子抗原多以菌毛的形式存在于细菌表面,是致病的先决条件;肠毒素则是致病的直接原因。理想的ETEC腹泻菌苗应具有定居因子抗原和肠毒素类毒素抗原,以便免疫接种后,使宿主既产生抗病原菌定居宿主肠道的抗定居因子抗体,又能产生中和肠毒素的抗肠毒素抗体。

利用Photoshop CS3软件检验激光打印变造文件研究

目的通过激光打印文件上的字符特征,区分不同激光打印机的打印文件,检验打印变造文件。方法使用扫描仪得到激光打印文件的字符图像,利用PhotoshopCS3软件对图像进行观察、比较和检验。结果通过对激光打印文件上的字符笔画特征、印字质量进行观察,并进行重合比对、拼接比对和测量比对,发现不同品牌或型号的激光打印机打印的字符存在明显差异。结论依据打印字符的特征,可对激光打印变造文件进行识别和检验。

Premiere Pro CS3制作歌词同步的几种方法

该文主要介绍了Premiere Pro CS3制作歌词同步的三种方法,为素材Roll Away滚离转场特效、为素材添加Clip裁剪或Four-Point Garbage Matte四点蒙板扫除视频特效、KBuilder小灰熊卡拉OK字幕软件制作歌词同步。