慢性肾脏病血尿Col-Ⅳ LN变化与中医辨证分型的关系辨析

目的 :探讨慢性肾脏病患者血、尿Col-Ⅳ、LN水平变化与内生肌酐清除率的关系及应用价值及血、尿Col-Ⅳ、LN变化与中医证型之间的关系。方法 :应用酶联免疫吸附法测定慢性肾脏病患者 90例和健康对照者 2 0例血、尿Col-Ⅳ、LN水平 ,同时测定内生肌酐清除率、2 4h尿蛋白定量。结果 :气阴两虚组血、尿Col-Ⅳ、LN最高 ,与其他组相比有显著性差异 ;失代偿期血、尿Col -Ⅳ、LN最高与其它组相比具有显著差异 ;血Col-Ⅳ、LN与无明显相关性 ;各期血、尿Col-Ⅳ、LN无等级相关。结论 :气阴两虚组肾小球固有细胞分泌合成Col-Ⅳ、LN最多 ,尿Col-Ⅳ、LN可以反映肾小球及小管间质的损害。

黄芪、水蛭、大黄及其复方含药血清影响大鼠MC产生FN及Col-Ⅳ的研究

目的:研究黄芪、水蛭、大黄及其复方抑制大鼠系膜细胞(mesangial cells,MC)产生纤维连接蛋白(fibronec-tin,FN)及Ⅳ型胶原(typeⅣcollagen,Col-Ⅳ)的强弱。方法:在大鼠MC体外培养的基础上,将脂多苷糖(lipopolysac-charide,LPS)刺激的MC增生模型分为9组:控制组、模型组、对照组、黄芪组、水蛭组、大黄组、雷公藤多苷组、复方组、复方+雷公藤多苷组。采用ELISA法检测黄芪、水蛭、大黄及其复方等含药血清对MC表达FN及Col-Ⅳ的影响。结果:各含药血清组均能明显降低经LPS刺激后的大鼠MC产生FN及Col-Ⅳ的量,以复方+雷公藤组作用最佳,水蛭组、大黄组抑制作用较强,优于黄芪组。结论:证实了化瘀、泄浊中药水蛭、大黄在抑制MC产生FN及Col-Ⅳ方面优于益气类中药黄芪,复方+雷公藤组作用效果最佳。

人血清白蛋白对HK-2细胞col-Ⅳ、TIMP-1、MMP-9mRNA表达水平的影响

目的探讨人血清白蛋白对体外培养的HK-2细胞Ⅳ型胶原(Ⅳcollagen,col-Ⅳ)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)mRNA表达水平的影响。方法 HK-2细胞随机分为4组。A组细胞(空白对照组),未添加刺激物;B组、C组和D组细胞分别与5 mg.mL-1人血清白蛋白培养12、24、48 h。在0、12、24、48 h应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测col-Ⅳ、TIMP-1和MMP-9 mRNA的相对表达量。结果人血清白蛋白刺激HK-2细胞可上调col-Ⅳ、TIMP-1 mRNA的表达,且随着刺激时间延长,表达水平逐渐增高。B、C、D 3组HK-2细胞col-Ⅳ、TIMP-1mRNA表达水平均明显高于A组(均P<0.01)。人血清白蛋白刺激HK-2细胞,MMP-9 mRNA的表达随着刺激时间的延长,表达水平先增高后下降。B、C 2组HK-2细胞MMP-9 mRNA表达水平均明显高于A组(均P<0.01),D组HK-2细胞MMP-9 mRNA表达水平低于A组(P<0.05)。相关性分析结果显示,TIMP-1 mRNA表达与col-ⅣmRNA表达呈正相关(r=0.987,P<0.05),MMP-9 mRNA表达与col-ⅣmRNA表达无关(r=0.146,P>0.05)。结论人血清白蛋白刺激HK-2细胞可能通过促进col-Ⅳ的合成及上调TIMP-1、下调MMP-9使细胞外基质积聚,参与肾间质纤维化。

肾炎四味片对肾硬化大鼠肾组织FN、LN、Col-Ⅳ表达的影响

目的:探讨肾炎四味片对肾硬化大鼠肾组织纤维黏连蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)表达的影响。方法:建立单侧肾切除合并阿霉素静脉双次注射大鼠肾硬化模型,予肾炎四味片干预8周后取肾脏,用HE染色及免疫组化法观察其对硬化肾组织细胞外基质FN、LN、Col-Ⅳ表达的影响,对结果进行半定量分析。结果:肾硬化大鼠经肾炎四味片治疗8周后,肾组织FN、LN、Col-Ⅳ表达较模型组减少(P<0.05)。结论:肾炎四味片在一定程度上可以抑制肾组织FN、LN、Col-Ⅳ表达,改善肾硬化程度。

通脉口服液对实验性DN模型大鼠肾组织Col-Ⅳ及MMP-9/TIMP-1的影响

目的:观察通脉口服液对实验性DN模型大鼠肾组织Col-Ⅳ蛋白表达及MMP-9/TIMP-1作用的影响。方法:SD雄性大鼠,予STZ单次腹腔注射及高脂饲料造模,筛选DN成模大鼠,随机分组,药物干预;6周后处死大鼠取肾组织,以免疫组化方法测定Col-Ⅳ、MMP-9及TIMP-1的蛋白表达,计算积分光密度及面密度比值。结果:Col-Ⅳ表达主要定位于肾小球;MMP-9表达主要定位于肾小球,肾间质内有少量表达;TIMP-1表达主要定位于肾小球,肾小管及间质区内有少量表达。通脉组Col-Ⅳ免疫组化染色面密度及积分光密度较模型组降低,MMP-9免疫组化染色面密度及积分光密度较模型组升高,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);MMP-9/TIMP-1比值与Col-Ⅳ免疫组化染色面积存在负相关(r=-0.919,P<0.01)。结论:益气活血中药复方通脉口服液可能通过调节肾组织MMP-9/TIMP-1蛋白表达,改善Col-Ⅳ代谢,发挥DN肾脏保护作用。

1,25(OH)_(2)D_(3)对miR-130b转染的高糖条件下HMC细胞TGF-β1/Smad3及Col-Ⅳ表达的影响

目的观察高糖环境下1,25(OH)_(2)D_(3)对miR-130b转染肾小球系膜细胞TGF-β1/Smad3、Col-IV表达水平的变化,探索1,25(OH)_(2)D_(3)是否可通过miR-130b改善糖尿病肾病肾脏纤维化的过程。方法HMC细胞传代培养,miR-130b mimics及miR-130b inhibitor经LipofectamineTM 2000转染肾小球系膜细胞,依据分组加入1,25(OH)_(2)D_(3)1.0×10^(-8) mol/L,37℃、5%CO_(2)饱和湿度条件下继续培养48 h,共分为6组:①空白对照组;②细胞+无水乙醇组(A组);③细胞+miR-130b mimics+无水乙醇组(B组);④细胞+miR-130b mimics+1,25(OH)_(2)D_(3)组(C组);⑤细胞+miR-130b inhibitor+无水乙醇组(D组);⑥细胞+miR-130b inhibitor+1,25(OH)_(2)D_(3)组(E组)。以实时荧光定量PCR检测细胞miR-130b及TGF-β1、Smad3、Col-IVmRNA的表达水平,以Western blot方法检测细胞TGF-β1、Smad3、Col-IV蛋白的表达水平。采用多组间比较的单因素方差分析及组内两两比较采用LSD、Dunnett s T3法比较各组数据。结果空白对照组与A组细胞miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平,差异无统计学意义(P>0.05),与A组相比,B组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平明显升高(P<0.05),D组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平明显降低(P<0.05)。经1,25(OH)_(2)D_(3)治疗发现,与B组相比,C组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平明显降低(P<0.05),与D组相比,E组miR-130b、TGF-β1、Smad3、Col-IV表达水平明显降低(P<0.05)。结论1,25(OH)_(2)D_(3)可降低miR-130b转染肾小球系膜细胞miR-130b及纤维化相关因子TGF-β1、Smad3、Col-IV的表达水平,1,25(OH)_(2)D_(3)可能通过miR-130b改善糖尿病肾病肾脏纤维化的过程。

复方黄芪合剂对早期DN模型鼠Col-Ⅳ及MMP-2/TIMP-2的影响

为研究复方黄芪合剂 (主药 :黄芪、牛蒡子 )治疗DN的疗效与机理 ,4 5只大鼠以STZ诱导造成糖尿病模型 ,3d后分为 3组 ,B组给予复方黄芪合剂 ( 5g·kg- 1·d- 1)、C组给予洛汀新 ( 4mg·kg- 1·d- 1)药液灌胃 ,D组予等量生理盐水灌胃 (模型组 ) ,另一组大鼠为对照组 (A组 ) ,不作任何处理。 6周后比较各组大鼠的有关指标。结果 :B、C组大鼠的Ccr、Ualb、肾脏基质阳性面积比、Col Ⅳ、MMP 2、TIMP 2诸项指标均高于D组 ,其中GLU、HbAlc、Ccr三项指标B组优于C组。提示 :降低肾脏Col Ⅳ、MMP 2 /TIMP 2的表达 。

慢性肾炎血瘀证血尿Col-Ⅳ LN的改变及丹参注射液的作用初探

目的:观察肾功能正常的慢性肾炎血瘀证患者的血、尿Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)及层粘蛋白(LN)含量的变化与中医本虚证、血瘀证症状积分的关系及临床应用价值;观察复方丹参注射液治疗前后的血、尿Col-Ⅳ及LN含量的变化,探讨复方丹参注射液治疗肾脏纤维化的疗效及可能机制。方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定67例肾功能正常的慢性肾炎血瘀症患者和20例健康人的血、尿Col-Ⅳ与LN含量,观察以上指标与中医本虚证及血瘀证症状积分的关系;67例慢性肾炎患者随机分为35例复方丹参治疗组和32例对照组,对照组给以潘生丁、雷公藤多苷等常规处理,伴肾病综合征者加用激素,血压高者加用降压药,治疗组给予以上对照组治疗+复方丹参注射液50mL静脉滴注。比较治疗前后两组的血、尿Col-Ⅳ及LN含量的变化。结果:与健康人相比,慢性肾炎组患者血、尿Col-Ⅳ及LN水平均明显增高(P<0.05);各本虚证型血、尿Col-Ⅳ及尿LN较健康者均明显增高(P<0.01),气阴两虚与健康者相比,血LN明显增高(P<0.01),气阴两虚与肺肾气虚比较,血Col-Ⅳ及血、尿LN均明显增高(P<0.05),脾肾阳虚与肝肾阴虚比较,尿Col-Ⅳ明显下降(P<0.01);各血瘀证组与健康人组比较,血、尿Col-Ⅳ及LN均明显增高(P<0.05,P<0.01),而各血瘀证组间两两比较,各指标均无显著差异,Spearm an相关分析结果显示,血、尿Col-Ⅳ与LN水平与血瘀证积分均无线性相关关系;治疗组治疗前后血Col-Ⅳ、LN及尿Col-Ⅳ、LN均明显下降(P<0.05)。治疗组与对照组治疗前后血Col-Ⅳ、LN及尿Col-Ⅳ、LN差值比较有显著差异(P<0.05)。Spearm an相关分析:治疗前后血Col-Ⅳ与血LN二者水平的改变呈显著正相关(P<0.01)。结论:肾脏纤维化可能是慢性肾炎血瘀证的内在物质基础,肾脏纤维化是肾脏局部的血瘀状态,即所谓的微型癥积。外在的血瘀证症状积分难于体现肾脏局部的瘀血严重程度。复方丹参注射液对于减轻慢性肾炎的纤维化程度,延缓纤维化进展可能有一定的益处,其抗肾脏纤维化作用可能是通过多个途径而实现的。对延缓肾脏纤维化的治疗提供了又一药物选择。

怡肾汤对5/6肾切除大鼠残肾组织形态与Col-Ⅳ及MMP-2的干预作用

目的:研究怡肾汤在改善肾功能和减轻肾小球硬化中的作用。方法:将72只SD大鼠随机取8只为正常对照组,其余分为模型组(n=32)及怡肾汤治疗组(n=32)。模型组和治疗组大鼠行5/6肾切除术。术后,模型组大鼠予以自由饮食、生理盐水灌胃1ml·100g-1·d-1;怡肾汤治疗组大鼠予以怡肾汤灌胃(0.3ml·100g-1·d-1),1次/d。于术后第5、6、7、8周4个时间点分别分批处死大鼠,用PAS染色观察大鼠残肾肾组织形态学改变,计算肾小球硬化指数(GSI);用免疫组织化学方法分别检测肾组织中Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达。结果:(1)细胞形态学观察示:模型组中肾小球内细胞数目增多明显,基质增多,有新月体形成;系膜区增宽染色深,毛细血管开放不良甚至闭塞,肾小囊囊壁增厚。治疗组细胞增生明显轻于模型组,毛细血管开放较好,肾小管结构基本正常。治疗组和模型组大鼠肾小球呈不同程度硬化表现,治疗组GSI显著低于模型组(P<0.05)。(2)免疫组化发现:与正常组和治疗组比较,模型组肾组织中Ⅳ型胶原表达强烈,肾小球硬化严重;怡肾汤治疗组大鼠Ⅳ型胶原表达减少而MMP-2表达强于模型组。结论:Ⅳ型胶原在5/6肾切除大鼠肾组织中有较高的表达。怡肾汤可减轻肾组织中炎性细胞浸润和细胞增生,降低Ⅳ型胶原的表达、增加MMP-2的表达,延缓肾小球硬化进程和肾功能恶化的速度。

柴胡解毒汤对实验性酒精性肝纤维化复合模型大鼠Col-Ⅳ,HA的影响

目的:观察柴胡解毒汤对实验性酒精性肝纤维化复合模型大鼠Col-Ⅳ、HA血清含量的影响。方法:通过采用酒、猪油混合灌胃诱导大鼠实验性酒精性肝纤维化复合模型,并分为柴胡解毒汤干预Ⅰ组(简称干预Ⅰ组)、柴胡解毒汤兼酒精高脂饮食组(简称干预Ⅱ组)、酒精兼高脂饮食组(简称模型组)及空白对照组予以灌胃,最终取大鼠血清进行检测。称量大鼠体重,并用ELISA Kit法检测透明质酸(HA)和Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的含量。结果:12周后,造模各组大鼠毛发灰暗,杂乱,消瘦,活动度减弱,大便溏稀。血清Col-Ⅳ、HA较空白对照组均有显著升高(P<0.01),与模型组比较,干预Ⅰ组和干预Ⅱ组均下降明显(P<0.01)。干预Ⅰ组、干预Ⅱ组、模型组、空白对照组HA含量依次为219.17±41.64、184.89±22.83、249.32±34.60、123.48±25.85。Col-Ⅳ含量依次为9.59±1.81、12.57±1.41、19.71±6.04、7.62±5.36。结论:柴胡解毒汤可能通过抑制Col-Ⅳ、HA的表达水平,对大鼠实验性酒精性肝纤维化复合模型具有一定的干预作用。

灯盏花素对肾损害模型小鼠肾脏TGF-β_1、Col-Ⅳ表达的影响

目的:研究灯盏花素对肾损害模型小鼠肾功能和转化生长因子(TGF)-β1、Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ)表达的影响。方法:腹腔注射顺铂8mg/kg以复制小鼠肾损害模型。实验分为对照(5%羧甲基纤维素钠)、模型(5%羧甲基纤维素钠)与灯盏花素高、低剂量(50、25mg/kg)组。灌胃给药,每天1次,连续7d。给药结束后HE染色观察大鼠肾组织改变,进行肾脏指数、尿蛋白(Upr)/尿肌酐(Ucr)比值、N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG-U)等肾功能指标测定;免疫组化法检测肾组织TGF-β1、Col-Ⅳ的表达。结果:病理切片显示高、低剂量灯盏花素可显著改善顺铂致肾损害小鼠的肾组织结构。与模型组比较,灯盏花素高、低剂量组小鼠肾脏指数、Upr/Ucr比值与NAG-U活性均显著下降(P<0.01或P<0.05),Col-Ⅳ表达显著增强(P<0.05);灯盏花素高剂量组小鼠肾组织TGF-β1表达显著下降(P<0.05)。结论:灯盏花素对顺铂致肾损害小鼠肾脏具有保护作用,其机制可能与下调肾组织TGF-β1及上调Col-Ⅳ的表达有关。

降糖保肾方联合西医疗法治疗Ⅲ～Ⅳ期糖尿病肾病临床观察

目的:观察降糖保肾方联合西医疗法治疗Ⅲ~Ⅳ期糖尿病肾病患者的临床疗效。方法:将60例糖尿病肾病患者随机分为治疗组和对照组各30例,对照组予糖尿病肾病常规治疗,治疗组在对照组治疗基础上加服降糖保肾方。2组疗程均为60天,比较2组患者的临床疗效,观察治疗前后中医证候积分、肾功能指标[血肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)]、尿纤维粘连蛋白(FN)、尿Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、24 h尿蛋白定量的变化。结果:治疗后,治疗组总有效率高于对照组(P<0.05)。2组中医证候积分均较治疗前下降,治疗组中医证候积分低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组SCr、BUN水平降低不明显,与治疗前比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗组SCr水平较治疗前降低(P<0.05),并低于对照组(P<0.05),而BUN水平与治疗前比较无统计学差异(P>0.05)。对照组尿FN、Col-Ⅳ水平治疗前后比较,差异均无统计学意义(P>0.05),24 h尿蛋白定量较治疗前减少,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗后3项指标值均较治疗前减少,并且低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:降糖保肾方可使患者的肾功能得到保护,有效改善临床症状,其机制可能是通过降低尿液中FN、Col-Ⅳ水平,从而在一定程度上减轻肾小球细胞外基质的过度积聚,改善患者的临床症状,延缓肾功能恶化。

尿Ⅳ型胶原浓度与IgA肾病肾组织损害的关系

目的:观察IgA肾病(IgAN)患者尿Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)浓度及其与肾组织Col-Ⅳ表达和肾脏病理之间的关系,以期寻找一种能反映IgAN肾损害的非创伤性临床检测指标。方法:ELISA法测定IgAN患者血、尿Col-Ⅳ浓度;免疫组化法检测肾组织Col-Ⅳ表达;应用计算机病理图像分析系统对肾小球基质基底膜面密度、小球细胞个数及肾小管间质病变程度进行半定量分析,观察尿Col-Ⅳ浓度与IgAN患者肾组织Col -Ⅳ表达及肾病理损伤的关系。结果:IgAN患者尿Col-Ⅳ浓度、肾组织Col-Ⅳ表达较健康人明显增高,尤其是增生硬化和间质纤维化显著者更为明显;尿Col-Ⅳ浓度与肾组织Col-Ⅳ表达、肾小球基质基底膜面密度、小管间质损害显著正相关,且在轻度细胞外基质积聚和小管间质损害时,尿Col-Ⅳ浓度即增高;与小球内细胞个数呈负相关,而与肾小球系膜区、毛细血管襻区免疫球蛋白IgA、IgG、IgM和C3 沉积的量和沉积范围无关,与血Col -Ⅳ水平无显著相关。结论:IgAN患者尿Col-Ⅳ浓度明显增高,尿Col-Ⅳ水平可作为监测IgAN患者早期肾硬化的一项指标。

慢性肾小球肾炎血、尿Ⅳ型胶原及尿黏蛋白的改变与肾脏病理关系初探

目的:观察肾功能正常的慢性肾炎患者的血、尿Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)及层黏蛋白(LN)含量的变化与肾脏病理改变的关系及临床应用价值。方法:(1)采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定67例肾功能正常的慢性肾炎患者和20例健康人的血、尿Col-Ⅳ与LN含量。(2)慢性肾炎患者均接受肾活检病理检查。观察以上指标与肾脏病理改变的关系。结果:(1)与健康人相比,慢性肾炎组患者血、尿Col-Ⅳ及LN水平均明显增高(P<0.05)。(2)系膜细胞增生Ⅲ级组、Ⅳ级组与健康人组比较,血、尿Col-Ⅳ及LN均明显增高(P<0.05)。系膜细胞增生程度与血Col-Ⅳ水平关系最密切(P<0.05)。(3)各系膜基质增生组与健康组比较,血、尿Col-Ⅳ及LN均显著增高(P<0.05)。系膜基质增生程度与尿Col-Ⅳ水平关系最为密切(P<0.05)。(4)肾小球球性硬化10%～25%组与健康人比较,血、尿Col-Ⅳ及LN均明显增高(P<0.05)。硬化率与血LN关系最密切(P<0.05)。(5)间质纤维化程度与尿Col-Ⅳ水平关系最密切(P<0.01)。(6)小管萎缩≤10%者较健康者,尿Col-Ⅳ、LN均显著增高(P<0.01)。小管萎缩>5%者较健康者,血Col-Ⅳ明显增高(P<0.01)。小管萎缩>10%者尿Col-Ⅳ则明显降低(P<0.05)。(7)血Col-Ⅳ水平与血LN水平正相关(P<0.01)。尿Col-Ⅳ水平与尿LN水平正相关(P<0.01)。但血、尿Col-Ⅳ水平之间及血、尿LN水平之间均无线性相关关系。结论:(1)肾功能正常的慢性肾炎患者血、尿Col-Ⅳ与LN水平显著高于健康人群。(2)血与尿Col-Ⅳ、LN水平的变化可在一定程度上反映肾脏病理的改变,与系膜细胞基质的增生程度、间质纤维化、肾小球球性硬化有一定的关系。但血Col-Ⅳ、LN水平主要反映了Col-Ⅳ、LN代谢的活跃,与系膜细胞增生关系更为密切;而尿Col-Ⅳ、LN水平则与基质增生、间质纤维化关系更为密切。它们之间均存在着相关关系。因此监测血与尿Col-Ⅳ、LN的动态变化,综合判断,对于监测肾脏纤维化倾向有一定价值。

健脾补土法组方对脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织t-PA、PAI-1、Col Ⅳ的影响

目的观察健脾补土法组方对脑缺血/再灌注损伤大鼠t-PA、PAI-1、ColⅣ的影响,探讨其保护神经细胞可能作用机制。方法将72只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、健脾补土方小剂量组、健脾补土方中剂量组、健脾补土方大剂量组,每组12只。采用线栓法制备MCAO模型,治疗7 d后处死,并在大鼠处死前进行神经功能缺损评分,应用酶联免疫吸附(ELISA)法测定中组织型纤溶酶原激活物(tPA)及组织型纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的变化,运用免疫组化法测定胶原蛋白Ⅳ(ColⅣ)的含量变化。结果与模型组相比,健脾补土小、中、大剂量组神经功能缺损症状评分减少(P<0.05);健脾补土方小、中、大剂量组t-PA表达明显降低(P<0.05或P<0.01);健脾补土方小、中、大剂量组PAI-1表达明显升高(P<0.05或P<0.01);健脾补土方小、中剂量组Col IV表达明显升高(P<0.05)。结论健脾补土法组方能改善脑缺血/再灌注损伤大鼠神经缺损,可能与其下调t-PA及上调PAI-1的表达,从而减少细胞外基质(ECM)的降解,上调ColⅣ的表达有关。

乳腺癌中Ⅳ型胶原的表达及临床意义

目的研究Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)在乳腺癌中的表达及临床意义。方法用免疫组化方法检测108例乳腺癌及8例良性肿瘤组织中ColⅣ的表达情况,分析ColⅣ与乳腺癌患者临床资料间的关系及预后价值。结果8例良性肿瘤ColⅣ表达完整呈闭和线状。108例乳腺癌中,ColⅣ表达完整,局部断裂、碎片状或缺如分别为32例,11例,65例。ColⅣ不完整或缺如与差预后,腋窝淋巴结受累、肿瘤大小、TNM分期呈正相关。结论乳腺癌ColⅣ完整表达或局部断裂者比碎片缺如者生存期长(5年生存期)。因此,Ⅳ型胶原可作为肿瘤侵袭能力的参考指标。

益气活血方对慢性肾炎患者血、尿Ⅳ型胶原和层粘蛋白的影响

目的:观察中药益气活血方对慢性肾炎患者血、尿Ⅳ型胶原和层粘蛋白的影响。方法:将入选120例患者随机分为治疗组和对照组,每组各60例,健康人群组30例来自医院体检中心和医院职工。治疗组和对照组组均给予控制血脂、血压、尿蛋白以及抗凝等常规治疗,治疗组加用益气活血中药(黄芪、丹参、山药、茯苓、桃仁、蜈蚣、白术、川牛膝);观察2组治疗前后的血、尿Ⅳ型胶原和层粘蛋白变化。结果:健康组与治疗组、对照组治疗前比较有着显著差异(P<0.05),治疗组与对照组治疗前比较无差别(P>0.05),治疗组治疗前后比较检测的4项指标均有统计学意义,其中血IV胶原(P<0.05)、血层粘连蛋白(P<0.01)、尿IV胶原(P<0.05)、尿层粘连蛋白(P<0.05);对照组治疗前后比较检测的4项指标均有统计学意义,其中IV胶原(P<0.05)、血层粘连蛋白(P<0.05)、尿IV胶原(P<0.05)、尿层粘连蛋白(P<0.05),治疗组与对照组治疗后比较仅有尿层粘连蛋白统计学意义(P<0.05)。结论:中药益气活血在治疗慢性肾炎过程中发挥重要作用,中西结合治疗有着明显的优势。

益气解毒化瘀小复方及其单味药对大鼠肾小球系膜细胞MMP3、TIMP1表达及细胞外基质产生的影响

目的:探讨益气解毒化瘀小复方及其单味药对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠肾小球系膜细胞MMP3(GMCs),TIMP1表达及细胞外基质FN,Col-IV胶原蛋白的影响。方法:常规培养大鼠肾小球系膜细胞,RT-PCR法检测各组对大鼠肾小球系膜细胞MMP3、TIMP1的表达,双抗体ELISA夹心法检测各组对细胞外基质FN,Col-IV胶原蛋白的影响。结果:小复方组降低系膜细胞MMP3、TIMP1表达最为明显,小复方组降低细胞外基质FN,Col-IV胶原蛋白的影响最为明显,与各单味药,西药对照组比较,有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。结论:益气解毒化瘀小复方可有效地抑制肾小球系膜细胞增殖,有效地促进系膜细胞凋亡,并优于单味药,从而达到抗肾小球硬化,保护肾脏的目的。

补肾固精方结合激素对BXSB狼疮小鼠肾脏基质金属蛋白酶表达的研究

目的:探讨中药补肾固精方结合激素对BXSB狼疮小鼠肾脏基质金属蛋白酶表达的影响与治疗狼疮性肾炎的作用机制。方法:BXSB小鼠随机分为4组。检测尿蛋白定量及MMP-2、TIMP-2、Col-Ⅳ的阳性表达。结果:与模型组相比,补肾固精方组尿蛋白定量显著减少,Col-Ⅳ表达显著降低;结合组MMP-2,TIMP-2,Col-Ⅳ均有显著差异。与其他两治疗组相比,结合组显著降低TIMP-2、Col-Ⅳ的阳性表达,促进MMP-2的表达。结论:补肾固精方可以降低尿蛋白定量和Col-Ⅳ在肾组织中的沉积。其与激素协同作用,可以通过调节肾组织中MMP-2/TIMP-2的表达,抑制Col-Ⅳ的聚集,延缓肾脏病变,从而达到治疗狼疮性肾炎的目的。

健脾益肾活血中药干预治疗糖尿病肾病大鼠的实验研究

目的探讨健脾益肾活血中药对2型糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用的机理。方法采用链脲佐菌素+高脂饲料诱导糖尿病肾病(DN)大鼠动物模型,造模成功后分为4组:正常对照组、模型组、贝那普利组和中西药结合治疗组。贝那普利组给予贝那普利10 mg/kg灌胃,中药组加予中药煎剂,连续给药20周后观察大鼠一般状态,检测血清和尿液中BUN、Cr、TC、TG、24 h尿蛋白、HbAlc和FINS水平,并取肾组织染色后行病理检验,观察其组织学改变,测定肾组织内TGF-β1、Col-Ⅳ的表达。结果中西药结合治疗组实验大鼠一般状态较模型组改善较为明显,贝那普利组和中西药结合治疗组BUN、Cr、TC、TG、24 h尿蛋白、HbAlc和FINS均有所下降,其中中西药结合治疗组指标下降更明显(P<0.05,P<0.01),模型组肾脏形态学病理检测结果观察有明显病变,中西药结合治疗组和贝那普利组有不同程度改善,中西药结合治疗组的TGF-β1、Col-Ⅳ的表达下降明显,与模型组有极显著差异(P<0.01)。结论健脾益肾活血中药可改善2型糖尿病肾病大鼠肾脏损害,延缓肾功能损害进程,对DN大鼠肾功能具有保护作用。