红景天注射液对帕金森病患者治疗效果及血清DJ-1/Nrf2通路相关氧化应激指标的影响

目的 探究红景天注射液对帕金森病患者治疗效果及血清DJ-1/核因子相关因子2(Nrf2)通路相关氧化应激指标的影响。方法 前瞻性选取2021年6月至2022年6月来河北北方学院附属第一医院治疗的120例帕金森病患者作为研究对象,按照随机数字表法将患者分为研究组与对照组,每组各60例。对照组患者接受常规抗帕金森病治疗,研究组患者在此基础上联用红景天注射液治疗,连续治疗4周。比较两组患者的临床疗效,治疗前、治疗后4周的氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)、DJ-1蛋白、Nrf2],治疗前、治疗后4个月的帕金森病综合症状、生活质量情况,并观察两组患者不良反应发生情况。结果 治疗后,观察组患者的治疗有效率为96.61%,明显高于对照组(83.05%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后4周,观察组患者血清SOD、GSH-Px、Nrf2水平分别为(44.27±2.19) U/mL、(44.12±6.72) U/L、(669.68±87.23) U/L,均明显高于对照组[(31.29±2.97) U/mL、(40.82±4.12) U/L、(602.09±52.31) U/L],而血清丙二醛、DJ-1蛋白水平分别为(2.27±0.86) nmol/mL、(7.08±2.19)μg/L,均明显低于对照组(3.69±1.15) nmol/mL、(10.92±1.29)μg/L,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后4个月,观察组患者的UPDRS评分为(46.23±2.34)分,明显低于对照组[(63.28±1.93)分],差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后4个月,观察组患者的生理功能、躯体功能、社会功能、心理状态、情感功能5个方面的评分分别为(73.12±5.22)、(78.23±2.34)、(81.23±2.13)、(88.29±3.91)、(86.39±3.23)分,均明显高于对照组[(53.13±6.48)、(59.28±4.92)、(69.24±5.91)、(71.23±2.03)、(71.13±3.25)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组患者不良反应发生率为8.47%,明显低于对照组(23.73%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 在常规抗帕金森病治疗基础上,采用红景天注射液治疗帕金森病可明显提高患者的临床疗效,抑制DJ-1/Nrf2通路相关氧化应激反应,改善帕金森病症状,提高患者生活质量,降低不良反应发生率。

秦川牛宰后成熟过程中蛋白质DJ-1对肉品质变化的影响机制

为探究宰后秦川牛成熟期间核酸脱甘糖酶DJ-1蛋白表达对肉品质的影响,以25月龄秦川牛背最长肌为研究对象,测定其在4℃条件下成熟0、2、4、6、8 d时的肉品质、DJ-1表达量及活性氧(reaction oxygen species,ROS)相对含量,并对DJ-1表达量与肉品质指标及ROS进行相关性分析;基于4D-非标定量(4D-label free quantification,4D-LFQ)蛋白质组学筛选DJ-1并分析相关差异蛋白。结果表明:随成熟时间的延长,pH值呈先减小后增大趋势,L^(*)值、a^(*)值、剪切力、离心损失和滴水损失呈先增大后减小趋势,b^(*)、ROS、DJ-1表达量呈上升趋势;DJ-1表达量与离心损失、L^(*)值、b^(*)值和ROS相对含量呈极显著正相关(P<0.01),与pH值呈极显著负相关(P<0.01),与剪切力呈显著负相关(P<0.05),与a^(*)值和滴水损失无显著相关性(P>0.05)。故宰后成熟期间DJ-1表达量变化与牛肉嫩度密切相关。4D-LFQ蛋白质组学鉴定出DJ-1及其功能相关的差异蛋白在细胞内通过发挥蛋白质均二聚活性并与激酶、离子通道和泛素蛋白酶等结合,同时通过蛋白酶体蛋白分解、糖酵解以及氧化应激反应对凋亡信号通路的调控等,促进宰后秦川牛肌肉结构发生变化,并经过复杂的生物化学反应引起细胞内环境改变,进而影响秦川牛的嫩度等品质。

瑞香素调控DJ-1表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的影响

目的探讨中药活性成分瑞香素调控DJ-1表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的影响。方法以子宫内膜癌Ishikawa细胞为研究对象,CCK-8法分析瑞香素对Ishikawa细胞增殖的影响,qRT-PCR检测瑞香素对Ishikawa细胞DJ-1 mRNA表达,流式细胞术检测瑞香素对Ishikawa细胞凋亡的影响。结果不同浓度瑞香素处理Ishikawa细胞后,细胞增殖抑制率较对照组明显增加,且呈现时间-浓度依赖性,瑞香素处理Ishikawa细胞48 h,抑制率IC50值为78μmol/L;与对照组相比,78μmol/L瑞香素处理Ishikawa细胞48 h,其DJ-1mRNA表达量明显降低(P<0.05),同时早期凋亡率(P<0.01)和晚期凋亡率(P<0.05)均明显升高。结论瑞香素可通过降调DJ-1的表达促进子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡,并呈剂量依赖关系。

牦牛DJ-1基因克隆、生物信息学及组织表达分析

为了研究牦牛DJ-1基因的结构及功能,为后续深入研究牦牛DJ-1基因的生物学功能提供了重要的理论依据。以美仁牦牛脂肪组织cDNA为模板,利用RT-PCR克隆牦牛DJ-1基因的编码区序列(CDS),并且利用基因序列进行生物信息学分析,预测结构域及蛋白质理化性质等,再利用RT-qPCR技术进行组织表达分析。结果表明,美仁牦牛DJ-1基因的CDS区全长570 bp,共编码189个氨基酸;牦牛DJ-1结构域预测显示,在DJ-1氨基酸序列的29—168位中有1个含有Pfam的PfpI结构域;通过对DJ-1蛋白结构和功能进行预测,结果显示,无跨膜结构且无信号肽区域,分子质量20.03531 ku,原子总数2870,理论等电点6.84,不稳定系数28.37,表示为稳定的蛋白质;脂肪系数101.11,总平均亲水系数-0.004,为亲水蛋白,共有11个磷酸化位点;同时,亚细胞定位预测结果表明,美仁牦牛DJ-1蛋白主要分布于细胞质和线粒体中,系统进化树表明,美仁牦牛与野牦牛和欧洲牛亲缘关系最近,与北极狐和宽吻海牛亲缘关系最远;RT-qPCR结果表明,在成年美仁牦牛的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肌肉、脂肪和睾丸组织中均有所表达,在心脏组织和肌肉组织中表达水平最高,在肝脏和睾丸组织中表达水平最低。

二烯丙基二硫增强DJ-1过表达人胃癌SGC7901细胞对5-FU的敏感性

目的 探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)是否增强DJ-1(protein/nucleic acid deglycase,蛋白/核酸去糖化酶)过表达人胃癌SGC7901细胞对5-FU(5-fluorouracil, 5-氟尿嘧啶)的敏感性。方法 实验分为Control组、DADS组、VCR(Vincristine,长春新碱)组、VCR+DADS组、DJ-1组、DJ-1+DADS组;MTT检测DADS对5-FU抑制细胞增殖的影响;流式细胞术检测DADS对细胞凋亡的影响;qRT-PCR、Western blot、免疫荧光检测DADS对耐药相关基因表达的影响。结果 DADS增强5-FU对VCR耐药细胞和DJ-1过表达细胞增殖的抑制作用;DADS诱导VCR耐药细胞凋亡;DADS下调DJ-1表达、诱导DJ-1过表达细胞凋亡;过表达DJ-1上调P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)、Bcl-2、XIAP(X连锁凋亡抑制蛋白),下调caspase-3表达;DADS降低DJ-1过表达细胞和VCR耐药细胞P-gp、Bcl-2、XIAP,升高caspase-3表达。结论 DADS能增强DJ-1过表达细胞对5-FU的敏感性,与其拮抗DJ-1介导的P-gp、Bcl-2、XIAP上调、caspase-3下调有关。

南蛇藤提取物通过DJ-1/PTEN/FAK轴抑制非小细胞肺癌侵袭转移

目的研究南蛇藤提取物(Celastrus orbiculatus Thunb.Extract,COE)抑制非小细胞肺癌侵袭转移的具体机制。方法通过CCK-8法测定COE抑制H1299细胞的生物活性,并依此选取低毒浓度进行细胞侵袭转移的功能研究。使用伤口愈合实验和高内涵成像追踪细胞轨迹对细胞运动功能进行测定。通过Western bolt实验进行分子层面的研究,探究COE抑制肺癌侵袭转移的具体分子机制。实验的分组采用剂量梯度进行设置,分别为Control组(0.05%DMSO),COE组:20,40,80μg/mL。结果COE以剂量依赖的形式明显抑制了H1299的细胞活性。伤口愈合实验结果显示,COE显著抑制了H1299细胞的迁徙能力,统计分析显示差异有显著统计学意义。高内涵成像实时动态追踪细胞轨迹显示,80μg/mL浓度的COE显著抑制了H1299细胞的迁徙能力,表现在运动速度的降低和均方位移量的下降。Western bolt实验结果表明,COE通过DJ-1/PTEN/FAK轴抑制非小细胞侵袭转移。蛋白质印迹的归一化分析均具有统计学意义。结论南蛇藤提取物能在低细胞毒浓度下通过DJ-1/PTEN/FAK轴抑制非小细胞侵袭转移。

DJ-1/Nrf2在精索静脉曲张相关性弱精症生精细胞氧化应激中的表达及意义

目的:考察蛋白DJ-1(DJ-1)/稳定核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)在精索静脉曲张相关性弱精症患者生精细胞氧化应激中的表达及意义。方法:收集本院2021年12月-2023年12月收治的120例确诊为精索静脉曲张相关性弱精症的男性患者临床资料,60例为新诊断患者纳入新诊断病例组,60例为接受维生素C联合维生素E治疗3个月的患者纳入病例治疗组;同期婚前健康检查健康男性40例为对照组。检测3组精液生精细胞形态、精液生精细胞的DJ-1、Nrf2蛋白及mRNA,外周血氧化应激[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)]、DJ-1、Nrf2。结果:3组年龄、体质指数、精液体积及精子尾部畸形率均无差异(P>0.05);对照组、病例治疗组、新诊断病例组精子正常形态依次降低,精子头畸形率、体畸形率、头体环合畸形率依次增高,生精细胞DJ-1(0.35±0.11、0.71±0.16、0.89±0.12)、Nrf2蛋白(0.31±0.09、0.62±0.14、0.78±0.13)及mRNA均依次增高,血清MDA、DJ-1、Nrf2依次增高,SOD、GSH-Px依次降低(均P<0.05)。结论:激活DJ-1/Nrf2通路有助于增强精索静脉曲张相关性弱精症生精细胞的抗氧化能力,保护细胞免受由氧化应激引起的损伤,DJ-1/Nrf2通路或是精索静脉曲张相关性弱精症的治疗的潜在分子靶点。

DJ-1过表达通过PTEN/Akt通路促进人胃癌MGC803细胞的增殖、迁移、侵袭与上皮间质转化

目的:探讨DJ-1基因过表达对人胃癌MGC803细胞增殖、迁移、侵袭与上皮间质转化(EMT)的影响及其机制。方法:利用基因转染技术构建DJ-1基因过表达MGC803细胞,实验分为MGC803、空载体和DJ-1过表达组。采用MTT、平板克隆形成、细胞划痕和Transwell实验分别检测DJ-1过表达对MGC803细胞增殖、克隆形成、迁移与侵袭的影响;qPCR和WB法检测DJ-1过表达对各组细胞DJ-1、PTEN、Akt、p-Akt、Snail、vimentin、E-cadherin、MMP-9与TIMP-3表达的影响,相差显微镜下观察MGC803细胞形态学的变化。裸鼠荷瘤实验检测DJ-1过表达对MGC803细胞移植瘤体内生长的影响。结果:成功构建DJ-1基因稳定过表达的MGC803细胞。与MGC803组和空载体组比较,DJ-1过表达组细胞的增殖能力与克隆形成数均显著增加(均P<0.05),细胞迁移距离明显增加、划痕距离明显缩短(均P<0.05),迁移与侵袭细胞数显著增多(均P<0.05),DJ-1 mRNA与蛋白表达明显上调、PTEN mRNA与蛋白表达下调(均P<0.05),Akt总蛋白各组比较无明显差异(均P>0.05),p-Akt蛋白表达明显上调(P<0.05),Snail、vimentin与MMP-9表达上调、E-cadherin与TIMP-3表达下调(均P<0.05)。相差显微镜下见长梭形细胞数目增多,圆形与椭圆形细胞减少,异型性更为明显。荷瘤裸鼠体内实验结果表明,与MGC803组相比较,DJ-1过表达组MGC803细胞移植瘤生长速度明显加快、移植瘤质量显著增加(均P<0.05)。结论:DJ-1过表达可通过PTEN/Akt通路在体内外抑制MGC803细胞的增殖、迁移、侵袭与EMT。

DJ-1通过保护线粒体复合体I活性介导白藜芦醇减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的:从DJ-1蛋白调节线粒体复合体I活性的角度,探讨DJ-1介导白藜芦醇(RES)预处理对抗大鼠心肌缺血再灌注(I/R)所诱发的氧化应激损伤的分子机制。方法:心肌内注射DJ-1敲减(sh-DJ-1)或阴性对照(NC)慢病毒后,通过结扎大鼠冠状动脉左前降支法构建心肌I/R模型。将SD大鼠随机分为6组:假手术(sham)组、I/R组、RES+I/R组、NC+RES+I/R组、sh-DJ-1+RES+I/R组和I_(A)CS-010759(线粒体复合体I抑制剂)+RES+I/R组,每组10只。在心肌I/R模型前7 d通过灌胃给予RES(20 mg/kg),每日一次。此外,sham和I/R组大鼠均通过灌胃接受等体积的生理盐水。TTC染色和超声心动图分别观察心肌梗死面积和心功能变化情况;MitoSOX荧光探针检测心肌中线粒体活性氧(ROS)水平;试剂盒检测血清中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和乳酸脱氢酶(LDH)活性;结合Western blot和免疫共沉淀实验观察DJ-1与线粒体复合体I的两个亚基ND-1和NDUFA4的相互作用。结果:与I/R组相比,RES预处理可显著降低心肌梗死面积、心脏组织中线粒体ROS水平,以及血清中LDH活性和MDA含量(P<0.01),提高左室射血分数、左室短轴缩短率和血清中SOD活性(P<0.01),增加DJ-1的表达及DJ-1的线粒体转位(P<0.01),促进DJ-1与ND-1/NDUFA4的相互作用进而保护线粒体复合体I的活性(P<0.01)。然而,与RES+I/R组相比,敲减DJ-1的表达后,RES减轻心肌I/R损伤的作用被显著抑制(P<0.05或P<0.01)。结论:RES预处理可增加DJ-1的表达和线粒体易位,促进DJ-1与线粒体复合体I的ND1和NDUFA4亚基的相互作用,从而保护线粒体复合体I的活性并减轻心肌I/R所诱发的氧化应激损伤。

DJ-1调控线粒体功能研究进展

DJ-1是PARK7基因编码的蛋白,属于肽酶C56蛋白质家族,PARK7基因的缺陷会导致常染色体隐性遗传早发性帕金森症。DJ-1蛋白是一个多功能蛋白,它可以作为一个积极的雄激素受体介导的转录调节子,也可以用作氧化还原敏感的分子伴侣,氧化应激传感器,还可以保护神经元免于氧化应激和细胞死亡。此外,DJ-1还与线粒体自噬、能量代谢、线粒体稳态、内质网-线粒体结构偶联等生命过程有关。然而目前,DJ-1蛋白的精确功能尚不是很清楚。该文对DJ-1蛋白调控线粒体功能的作用、机制、分子基础展开综述,并结合临床疾病探讨其潜在价值,具有较好的时效性、必要性、创新性和科学性,也有助于为临床药物开发提供新的靶点和思路。

彩色多普勒超声联合血清miR-128-3p和DJ-1测定对膀胱癌及其临床分期的诊断价值研究

目的:探讨彩色多普勒超声联合血清miR-128-3p及DJ-1测定在诊断膀胱癌及其临床分期中的价值。方法:选取医院收治的136例疑似膀胱癌患者,根据病理学检查结果将其分为膀胱癌组(56例)和良性病变组(80例)。所有患者均行彩色多普勒超声检查,测定血清miR-128-3p及DJ-1水平;以病理结果为“金标准”,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析彩色多普勒超声检查联合血清miR-128-3p和DJ-1对膀胱癌及其临床分期的诊断效能。结果:彩色多普勒超声诊断膀胱癌及其临床分期的灵敏度分别为75.00%和80.49%,特异度分别为86.25%和80.00%,准确率分别为81.62%和80.36%。膀胱癌组与良性病变组相比,患者血清miR-128-3p水平降低,DJ-1水平升高,差异有统计学意义(t=8.842,t=8.844;P<0.05)。膀胱癌组患者中,浸润型患者血清miR-128-3p水平低于浅表型患者,DJ-1水平高于浅表型患者,差异有统计学意义(t=5.722,t=6.327;P<0.05)。ROC曲线结果显示,彩色多普勒超声联合血清miR-128-3p和DJ-1诊断膀胱癌及其临床分期的曲线下面积(AUC)、灵敏度及特异度均高于单项指标测定,差异有统计学意义(Z膀胱癌=4.028,Z=2.535,Z=3.386;Z临床分期=2.131,Z=2.137,Z=2.063;P<0.05)。结论:彩色多普勒超声联合血清miR-128-3p及DJ-1测定可提高对膀胱癌及其临床分期的诊断效能,在诊断膀胱癌和判断临床分期具有重要临床意义。

膀胱癌组织中高迁移率族蛋白B1、DJ-1的表达及其临床意义研究

目的:探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)和帕金森病相关蛋白(DJ-1)在膀胱癌不同组织中的表达及其临床意义。方法:收集2005年1月—2015年1月天津医科大学第二医院和天津市南开医院收治的58例膀胱癌组织为实验组,其癌旁正常组织为对照组。应用免疫组织化学方法检测膀胱癌组织与癌旁组织中HMGB-1和DJ-1蛋白表达情况,分析二者的表达率与膀胱癌临床病理特征及患者预后的关系,Spearman相关分析膀胱癌中HMGB-1与DJ-1表达的相关性,Cox多因素回归分析膀胱癌患者预后的影响因素。结果:膀胱癌中HMGB-1、DJ-1阳性表达率高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);HMGB-1蛋白表达水平与病理分型、病理分级、淋巴结转移、TNM分期有关,肿瘤分化越差、淋巴结有转移、分期越高,HMGB-1蛋白表达水平越高(P<0.05)。DJ-1在58例膀胱癌中的表达与肿瘤数目、淋巴结转移、TNM分期有关,肿瘤多发、分期越高、淋巴结有转移,DJ-1蛋白表达水平越高(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,HMGB-1与DJ-1表达水平呈正相关(r=0.421,P<0.05)。HMGB-1和DJ-1蛋白表达水平较高的患者无病生存期低于HMGB-1和DJ-1蛋白低表达组(P<0.05)。Cox回归模型分析显示,HMGB-1和DJ-1阳性、腺癌、鳞癌、病理分级高、有淋巴结转移、TNM分期高是膀胱癌患者预后的独立危险因素。结论:检测膀胱癌组织中HMGB-1和DJ-1的表达水平有助于预测与评估膀胱癌的侵袭、转移及预后的风险,为膀胱癌围手术期的合理治疗方案选择提供重要依据。

非小细胞肺癌血清sMICA、microRNA-99a、DJ-1表达及临床意义

目的 分析血清可溶性MHCⅠ类链相关分子A(sMICA)、microRNA-99a、DJ-1蛋白(DJ-1)对非小细胞肺癌(NSCLC)诊断及预后评估价值。方法 收集2019年6月至2022年6月本院收治的NSCLC患者90例(NSCLC组),另选取本院同期健康体检志愿者90例(对照组)。对患者进行为期6个月随访,随访截止至2023年1月。采用ROC曲线评估sMICA、microRNA-99a、DJ-1对NSCLC诊断价值。采用多元Logistic回归分析影响NSCLC患者预后的关系。结果 NSCLC组sMIC、DJ-1表达水平高于对照组,microRNA-99a表达水平低于对照组(P<0.05);ROC曲线结果显示:sMICA、microRNA-99a、DJ-1对NSCLC诊断AUC值分别为0.742(95%CI:0.642~0.842)、0.759(95%CI:0.660~0.859)、0.789(95%CI:0.698~0.901)。90例患者中预后良好69例,预后不良21例。预后不良者sMIC、DJ-1表达水平高于预后良好组,microRNA-99a表达水平低于预后良好组(P<0.05);预后不良者TNM分期(III-IV期)、低分化占比高于预后良好组(P<0.05);两组在年龄、性别、肿瘤直径、病理类型中比较差异无统计学意义(P>0.05)。经多元Logistic回归分析:临床分期、分化程度、sMICA、microRNA-99a、DJ-1为影响NSCLC患者预后不良的危险因素(P<0.05)。结论 相对健康人群,NSCLC患者sMICA、DJ-1水平高,microRNA-99a水平低;三指标水平与患者预后密切相关,通过检测血清三者水平可为患者后续诊疗、预后评估提供参考资料。

DJ-1通过调控Fra-1信号通路对宫颈癌细胞能量代谢的影响

目的探究DJ-1通过调控FOS样抗原(Fra)-1信号通路对宫颈癌细胞能量代谢的影响。方法将Hela细胞转染siRNA DJ-1和siRNA NC,实验共分为3组,正常对照组(Normal组)、阴性对照组(siRNA NC组)和阳性转染组(siRNA DJ-1组)。Western印迹检测3组细胞中DJ-1蛋白和Fra-1蛋白表达;双荧光素酶实验检测Fra-1是DJ-1的靶基因;分别比较3组细胞的线粒体膜电位变化、活性氧含量、葡糖糖吸收水平、乳酸生成量和ATP含量。结果和Normal组、siRNA NC组相比,siRNA DJ-1组细胞中DJ-1和Fra-1蛋白表达显著降低(P<0.05)。Normal组和siRNA NC组细胞红/绿荧光强度的比值分别为(0.37±0.04)和(0.38±0.03),两组比较无显著差异(P>0.05);和Normal组相比,转染后的siRNA DJ-1组细胞线粒体膜电位的红/绿荧光强度的比值显著升高(P<0.05)。Normal组和siRNA NC组细胞内活性氧荧光强度无显著差异(P>0.05);和Normal组相比,siRNA DJ-1组细胞内活性氧荧光强度显著增加(P<0.05)。Normal组和siRNA NC组细胞的葡萄糖消耗量、乳酸生成和ATP含量无显著差异性(P>0.05);和Normal组相比,siRNA DJ-1组细胞的葡萄糖消耗量明显增加,乳酸生成量和ATP含量均显著减少(P<0.05)。结论低表达DJ-1可增加宫颈癌细胞内活性氧含量,抑制乳酸生产、减少细胞内ATP含量,进而通过调控Fra-1信号来调控宫颈癌细胞的能量代谢。

帕金森病患者唾液中α-syn、DJ-1、HO-1、AchE水平变化及其辅助诊断价值

目的分析帕金森病患者唾液中α-突触核蛋白(α-syn)、DJ-1、血红素加氧酶-1(HO-1)、乙酰胆碱酯酶(AchE)水平变化及其辅助诊断价值。方法选取2021年8月至2022年8月该院收治的帕金森病患者96例作为帕金森病组,另选取同期在该院体检的健康人群80例作为健康对照组。根据蒙特利尔认知量表(MoCA)评分将帕金森病患者分为合并认知障碍组和无认知障碍组,采集所有受检者的唾液标本,采用酶联免疫吸附试验检测HO-1、α-syn、DJ-1水平,酶比色法检测AChE水平,比较各组受检者的唾液指标水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析α-syn、DJ-1、HO-1、AchE指标单独及联合诊断帕金森病的效能。结果帕金森病组患者唾液α-syn、DJ-1、HO-1水平低于健康对照组,AchE水平高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。合并认知障碍组患者唾液α-syn、DJ-1、HO-1水平低于无认知障碍组,AchE水平高于无认知障碍组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,α-syn、DJ-1、HO-1、AchE单独检测诊断帕金森病的曲线下面积(AUC)分别为0.723、0.781、0.816、0.671,4项指标联合检测诊断帕金森病的AUC为0.876。结论帕金森病患者唾液中α-syn、DJ-1、HO-1、AchE水平呈明显异常,且与患者认知功能改变相关,4项指标在辅助诊断帕金森病方面具有一定价值。

DJ-1、HE4、CA125联合检测在子宫内膜癌诊断中的临床价值

目的探讨人蛋白DJ-1、人附睾蛋白4(HE4)以及糖类抗原125(CA125)联合检测在子宫内膜癌诊断中的价值。方法收集子宫内膜癌患者39例(子宫内膜癌组)、子宫肌瘤患者39例(良性组)以及健康体检者38例(健康组)的血清标本并测定DJ-1、HE4、CA125水平。绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)并结合ROC曲线下面积(AUC)综合分析DJ-1、HE4、CA125以及三者联合检测对子宫内膜癌的诊断作用。结果与健康组和良性组相比,子宫内膜癌组血清HE4和CA125含量显著增加,而DJ-1水平明显下降(P<0.05)。CA125在健康组与良性组之间的差异无统计学意义(P>0.05),DJ-1和HE4在任意两组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜癌患者血清HE4表达与淋巴结转移、FIGO分期有关,血清CA125和HE4表达与肌层浸润有关(P<0.05)。DJ-1、HE4和CA125单项及三者联合检测的AUC分别为0.776、0.917、0.741与0.953,三者联合检测的AUC最大。DJ-1、HE4和CA125诊断子宫内膜癌的敏感度分别为76.92%、69.23%、71.79%,特异度分别为76.32%、100%、71.05%,而三者联合检测的敏感度为92.31%,特异度为86.84%。结论DJ-1、HE4以及CA125三者联合检测诊断效能优于各指标单独检测,可为子宫内膜癌临床综合诊断提供参考。

DJ-1调控GRP78诱发内质网应激促进结直肠癌5-FU耐药

目的 探讨DJ-1是否通过调控GRP78激活内质网应激从而诱导适应性的未折叠蛋白反应(UPR),强化肿瘤细胞存活能力且促进细胞药物外排,导致CRC化疗耐药。方法 利用免疫组织化学和免疫印迹(Wb)检测临床CRC患者的5-FU化疗耐药组织和化疗敏感组织中DJ-1蛋白的表达水平。构建5-FU耐药细胞株SW480/5-FU、HCT116/5-FU,Wb检测DJ-1在细胞水平的表达变化。改变DJ-1的表达,观察细胞对5-FU敏感性的变化,在细胞水平明确DJ-1是否参与耐药的发生。利用生信分析CRC中DJ-1与UPR中常见分子标志物表达的相关性,并RT-qPCR验证。往SW480细胞中,加入毒胡萝卜素(Thapsigargin,Tg)、衣霉素(Tunicamycin,Tm),诱导ERS中UPR信号转导通路的发生,改变DJ-1的表达,MTT实验检测细胞活性;往SW480细胞中,加入ERS抑制剂TUDCA,检测细胞活性的变化。在SW480/5-FU细胞中,干扰DJ-1表达,Wb分析UPR中GRP78、ATF6、eIF2α、ATF4的表达变化。结果 DJ-1在CRC耐药组织中显著高表达(P<0.01);相对于亲本细胞,耐药细胞株SW480/5-FU、HCT116/5-FU中DJ-1表达增高(P<0.05)。在细胞水平,改变DJ-1的表达,可显著影响CRC细胞对5-FU化疗的敏感性(P<0.01)。生信分析、RT-qPCR结果显示CRC中DJ-1的表达与UPR中GRP78、ATF6、eIF2α、ATF4密切相关(P<0.05);往SW480细胞中加入Tg、Tm以及TUDCA均可显著影响细胞化疗敏感性(P<0.05),证明DJ-1是通过诱导ERS中UPR信号通路促进5-FU耐药,且机制与正向调控GRP78有关(P<0.05)。结论 DJ-1通过调控GRP78,进而激活UPR信号转导机制促进CRC化疗耐药。

主动脉夹层患者发病与主动脉壁中DJ-1以及Clusterin基因的相关性分析

目的:分析Clusterin基因与主动脉壁中DJ-1对主动脉夹层疾病形成是否有参与性。方法:选取2020年1月至2022年3月收治的Stanford A型主动脉夹层患者20例为病例组,均行血管置换手术;另选取同期主动脉瓣狭窄患者20例为对照组,均行主动脉瓣置换术。比较两组高血压、糖尿病、心率等一般资料,根据实时荧光定量PCR检测、苏木精-伊红染色、蛋白质印迹检测、弹性纤维染色对DJ-1及Clusterin mRNA水平与患者主动脉各部位直径开展综合性分析。结果:两组一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05);通过CT血管造影三维重建显示,患者主动脉经内膜破口撕裂,出现巨大假腔,器官血液循环出现明显障碍;苏木精-伊红染色、弹性纤维染色观察到病变;病例组DJ-1 mRNA降低,Clusterin mRNA高表达;病例组Western Blot显示:Clusterin蛋白升高,DJ-1表达量与主动脉直径并无关联,Clusterin基因mRNA表达水平与腹主动脉直径呈正向相关关系。结论:主动脉夹层患者发病与主动脉壁中DJ-1表达量无关,且与主动脉直径并无关,但Clusterin基因mRNA表达水平与腹主动脉直径存在一定关系,表现为正向相关关系。

重复经颅磁刺激对小鼠缺血性脑损伤修复及DJ-1表达的影响

目的 探讨重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)通过调控DJ-1的表达,使小鼠缺血性脑损伤后的神经功能缺损得到恢复的机制。方法 选取8~12周健康雄性C57BL/6J小鼠30只,随机分为3组:假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(MCAO组)和治疗组(rTMS组),每组10只。MCAO组使用线栓法制备大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)小鼠模型,Sham组小鼠处理同MCAO组但不插入线栓。Sham组和rTMS组给予rTMS治疗,MCAO组不予治疗。造模后1 h拔出线栓进行再灌注,再灌注24 h后开始给予rTMS治疗,频率为1 Hz,每次持续25 s,每日5次,连续治疗7 d。在治疗前后对各组小鼠进行神经功能缺损评分;使用TTC染色确定各组小鼠脑组织梗死灶面积;并采用免疫组化技术检测梗死灶周围区域神经元中DJ-1表达变化;使用免疫印迹技术检测DJ-1的蛋白水平表达变化。结果 与Sham组(0.50±0.53)比较,MCAO组(2.80±0.63)和rTMS组(2.10±0.32)的神经功能缺损评分显著增高(P<0.05);与MCAO组比较,rTMS组的神经功能缺损评分显著降低(P<0.05)。与MCAO组比较,rTMS组的梗死灶面积明显减小,DJ-1表达显著提高(P<0.01)。结论 rTMS可有效促进缺血性脑损伤的小鼠神经功能恢复,并显著减少梗死灶面积,可能分子机制是通过上调神经DJ-1蛋白表达干预损伤预后。

DJ-1与肿瘤的关系

现已明确,恶性肿瘤是一种基因病,各种原癌基因的激活、异常扩增及抑癌基因的失活最终导致恶性肿瘤的发生和发展.DJ-1基因是日本学者NAGAKUBO等[1]于1997年发现的一种新的丝裂原依赖性癌基因,其编码的DJ-1蛋白能够协同Ras蛋白引起小鼠NIH-3T3细胞的转化.