脱氧雪腐镰刀菌烯醇(CBD_1)的毒性探讨:CBD_1对DNA合成的抑制作用观察

为了评价 CBD1的诱变和/或致癌作用,用3（?）-胸腺嘧啶核苷研究 CBD1对雄性小鼠睾丸 DNA合成的影（?）。实验结果表明 CBD1抑制睾丸 DNA 合成。CBD1剂量越大,睾丸 DNA 合成抑制越明显,具有剂量——效应关系。结合 Ames 试验的阳性结果,可初步检测CBD1的诱变和/或致癌作用。

ConA诱导的人脐血基质细胞上清对脐血细胞DNA合成代谢的影响

目的探讨脐血综合利用途径.方法收集脐血基质细胞培养1～5周的上清,观测其对脐血细胞DNA合成代谢的影响.结果ConA诱导的人脐血基质细胞上清对脐血细胞DNA合成随培养时间变化而表现出抑制和刺激作用.结论该上清中至少含有两种以上生长因子.

瑞香狼毒水提物小鼠药物血清对小鼠白血病L_(1210)细胞增殖、克隆形成和DNA合成的影响

目的 从整体水平探讨瑞香狼毒水提物 (SCL A)的抗癌作用及机制。方法 以不同剂量 SCL A ig给药后 ,不同时间采集小鼠血清 ,处理体外培养的小鼠白血病 L1 2 1 0 细胞 ,观察肿瘤细胞 MTT还原 ,克隆形成能力和 DNA合成的改变。结果 SCL A 3,6 ,12 g/ kg给药 1,2 ,4,8h后的药物血清处理肿瘤细胞后 ,其 MTT还原及克隆形成率均显著降低 ;给药 2 h时的药物血清表现出更强的抑制肿瘤细胞增殖作用。SCL A小鼠药物血清也显著抑制 [3H]Td R掺入 L1 2 1 0 细胞 DNA。结论 直接抑制癌细胞增殖及 DNA合成是瑞香狼毒的重要抗癌机制。

重组人肝再生增强因子在体外能刺激HTC肝癌细胞DNA合成

在成功克隆人肝再生增强因子（hALR）CDNA的基础上，本研究将人ALR编码区cDNA亚克隆于真核瞬间表达质粒pCDNAⅠ，构建了真核表达质粒pCDNAⅠ－hALR，转染cos-7细胞后，表达产物生物活性检测表明：真核表达的hALR在体外能刺激HTC肝癌细胞增殖，这一体外活性的确定为重组人ALR的纯化提供了简洁、可靠的检测方法。

荷人鼻咽癌裸鼠骨髓细胞DNA合成及凋亡相关基因表达的生物节律的初步研究

背景与目的:有关鼻咽癌的生物节律特征尚未见文献报道。本文拟探索荷人鼻咽癌裸鼠骨髓细胞的DNA合成及几种凋亡相关基因表达的生物节律,为临床制定鼻咽癌时辰化疗方案提供必要的参数。方法:BALB/C裸小鼠69只,置于程控的独立光照系统(12h光照,12h黑暗)同步化至少3周。然后双侧腋窝皮下接种人鼻咽低分化鳞癌细胞(CNE-2)裸小鼠移植瘤,成瘤后按6个不同时间点分批处死小鼠,收集骨髓细胞,固定、染色后流式细胞仪测DNA含量,用ANOVA法检验各期细胞在6个时间点差异的显著性,Cosinor法考察G1、S、G2/M期细胞在24h的分布是否符合余弦函数。部分骨髓细胞经裂解、蛋白定量后用WesternBlot法检测不同时间点p53、p21和Bcl-2三种基因蛋白表达的变化情况。结果:G1、S、G2/M期细胞在3、7、11、15、19、23HALO(HoursAfterLightOnset即灯亮后第3、7、11、19、23h)的分布随时间变化有显著性差异,G1、G2/M期细胞24h变化符合余弦节律,高峰值分别位于10.8HALO和1.8HALO。骨髓细胞p53和Bcl-2蛋白表达24h强度不同。p53在11HALO最强,在7HALO最弱;Bcl-2在15HALO最强,在19HALO最弱,p21蛋白未见表达。结论:荷人鼻咽癌裸小鼠骨髓细胞DNA合成随昼夜交替呈节律变化,p53和Bcl-2蛋白表达随昼夜时间变化而规律性波动。

移植于裸鼠的人鼻咽癌细胞DNA合成生物节律的初步研究

目的:探索鼻咽癌细胞DNA合成的生物节律为临床制订鼻咽癌时辰化疗方案提供必要的参数。方法:BALB/C裸小鼠15只,置于程控的独立光照系统中(12h光照,12h黑暗)中同步化至少3周。然后双侧腋下接种人鼻咽低分化鳞癌细胞裸小鼠移植瘤CNE2,成瘤后按灯亮后3、9、15、21h(即3、9、15、21HALO)的时间点取瘤块,制成单个细胞悬液固定,染色后流式细胞仪测DNA含量。用SPSS软件系统ANOVA法检验各期细胞在4个时间点差异的显著性,用Cosinor法考察G1、S、G2/M期细胞在24h的分布是否符合余弦函数。结果:G1、S、G2/M期细胞在3、9、15、21HALO的分布随时间变化有显著性差异,G1、G2/M期细胞变化符合余弦节律。结论:移植于裸鼠的人鼻咽癌细胞的DNA合成随昼夜交替呈节律性变化。

辛伐他汀对鼠心脏成纤维细胞DNA合成的影响

目的探讨辛伐他汀(Sim)对新生SD大鼠心脏成纤维细胞(CFs)DNA合成的影响及甲羟戊酸(MVA)的干预效应。方法采用胰酶消化、差速贴壁法培养新生SD大鼠CFs,以3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测定DNA合成,观察不同浓度Sim及MVA分别作用不同时间对CFsDNA合成功能的影响。结果 (1)CFs的3H-TdR掺入率随着Sim干预浓度的增加而降低,其中10-6和10-5mol／L Sim组的3H-TdR掺入率分别为(1175±202．66)、(771±164．86)cpm／2000细胞, 显著低于对照组的(1608±204．32)cpm／2000细胞(均P<0．01);(2)10-5mol／L Sim作用CFs 6、12、18、24、30、36、42、48 h, 随着Sim作用时间的延长,CFs的3H-TdR掺入率呈递减趋势,与时间呈明显的负相关(r=-919,P<0．01);(3)CFs的3H-TdR 掺入率随着MVA干预浓度的增加呈进行性上升,其中10-4、10-3 mol／L MVA+10-5 mol／LSim组3H-TdR掺入率分别为 (1612±308．57)、(1995±353．83)cpm／2000细胞,显著高于对照10-5mol/L Sim组的(771±164．86)cpm／2000细胞(P<0．01); (4)10-3 mol／L MVA分别作用CFs 6-48 h,CFs的3H-TdR掺入率随着MVA作用时间的延长而逐渐增加,呈明显的正相关(r=0．968,P<0．01)。结论 Sim呈浓度-时间依赖方式抑制CFs DNA的合成且可被MVA拮抗,提示Sim可抑制CFs 增殖,延缓心肌纤维化,其作用可能通过MVA途径实现。

大鼠血管平滑肌细胞形态和DNA合成对基底膜周期性应变的响应

目的 :探索基底膜伸张应变与血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖和重排的关系 ,了解融合和非融合细胞生长状况对应力作用的响应。方法 :应用自行研制的基底膜伸张装置 ,模拟生理状况下血管平滑肌细胞受到的二维拉伸应变 ,通过基底膜伸张的单向循环加载方式 ,使膜上生长的细胞变形 ,结合显微形态观测 ,计算机图象处理 ,[甲基3 氢 ]胸腺嘧啶核苷 (3 H TdR)掺入实验 ,综合考查应变对VSMC形态变化和DNA合成的影响。结果 :(1)加载 30′ 6h细胞铺展面积进行性增加 ,6～ 2 4h细胞铺展面积缩小 ;②非融合生长的细胞随细胞增殖和加载时间延长 ,细胞排布处于调整变化中 ;③融合生长的细胞 ,加载 10h后 ,细胞排布趋于稳定并呈平行排列 ,且有舒缩活动 ;④与对照组比较加载 2 4h3 H TdR掺入明显升高。结论 :未融合生长的细胞对应变刺激的响应以细胞增殖为主 ,融合生长的细胞对应变刺激的响应以细胞重排为主 ,并表现组织特异功能一收缩活动。

人参皂甙Rb_1、Rg_1、Re和Rh_1对人胚肺成纤维细胞非程序DNA合成的影响

应用３Ｈ－ＴｄＲ和１４Ｃ－ＴｄＲ双标记法，液闪测定不同代龄人胚肺成纤维细胞（２ＢＳ）由丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）诱导的非程序ＤＭＡ合成（ＵＤＳ），以及人参皂甙Ｒｂ１、Ｒｇ１、Ｒｈ１和Ｒｅ对细胞ＵＤＳ的影响。结果表明，当ＭＭＣ剂量在１０ｎｇ／ｍｌ时，衰老细胞的ＵＤＳ水平下降，而年轻细胞的ＵＤＳ水平显著升高。人参皂甙Ｒｂ１、Ｒｇ１、Ｒｈ１、Ｒｅ均能显著提高衰老细胞的ＵＤＳ水平，且Ｒｂ１、Ｒｇ１作用更明显。

地塞米松对实验性哮喘大鼠气道细胞DNA合成和气道重塑的影响

目的观察地塞米松对实验性哮喘大鼠气道细胞ＤＮＡ合成和气道重塑的干预效果。 方法 应用ＳＤ大鼠建立哮喘动物模型，采用免疫组化技术和其它形态学研究的方法，研究雾化吸入地塞米松对气道细胞ＤＮＡ合成和气道重塑反应的影响。 结果 ① 地塞米松治疗组气道上皮下胶原沉积以及粘液的分泌比模型组明显减少。② 模型组气道平滑肌细胞Ｂｒｄｕ阳性计数（１０．２５±２．０９）明显高于正常对照组（７．１５±２．０５）和地塞米松治疗组（６．８５±２．２０）（Ｐ＜０．０１）；模型组气道上皮细胞Ｂｒｄｕ阳性计数（２１．８３±７．０１）亦明显高于正常对照组（１６．２２±４．３６）和地塞米松治疗组（１６．９２±３．４８）（Ｐ ＜ ０．０５）。 结论 应用地塞米松干预可减轻实验性哮喘大鼠气道炎症，抑制气道细胞ＤＮＡ合成，延缓气道重塑反应的发生。

Cd^(2+)、Al^(3+)对蚕豆(Vicia faba)DNA合成及修复的影响

利用３Ｈ－ＴｄＲ 掺入方法，研究了不同浓度单金属离子Ｃｄ２＋ 、Ａｌ３＋ 对蚕豆ＤＮＡ 合成、ＤＮＡ 修复（以ＵＤＳ为指标）的影响。结果表明：在低浓度Ｃｄ２＋ 、Ａｌ３＋ （Ｃｄ２＋ 浓度＜ ２０ｍ ｇ／ｌ，Ａｌ３＋ 浓度＜ １００ｍ ｇ／ｌ）处理后，蚕豆ＤＮＡ 合成加快，并且不同程度地诱导了ＵＤＳ的发生；但在高于此浓度的Ｃｄ２＋ 、Ａｌ３＋ 作用下，蚕豆ＤＮＡ合成受抑制，浓度越高，抑制作用越强；并且几乎不表现出ＵＤＳ效应。这一结果说明Ｃｄ２＋ 、Ａｌ３＋ 对蚕豆的遗传物质ＤＮＡ有损伤作用。在一定受损范围内，蚕豆自身有ＤＮＡ损伤修复能力，超过这个限度，ＤＮＡ损伤不能被修复。Ｃｄ２＋ 、Ａｌ３＋ 对ＤＮＡ 合成和修复的影响是高等植物金属中毒的机制之一。

有机锗多酸衍生物对S_(180)肿瘤细胞DNA合成的抑制作用

目的 探讨有机锗多酸衍生物对S1 80 肿瘤细胞DNA合成的抑制作用。方法 用3H TdR掺入法检测有机锗多酸衍生物在体外对S1 80 肿瘤细胞DNA合成的抑制作用 ,观察不同剂量有机锗多酸衍生物对S1 80 实体瘤的抑制作用和对免疫器官的影响。结果 体外实验表明 ,有机锗多酸衍生物对S1 80 细胞的生长具有明显的抑制作用 ,而且浓度越高 ,抑制作用越强。体内实验也表明 ,有机锗多酸衍生物对S1 80 实体瘤的生长具有抑制作用 ,而且剂量越大 ,抑制作用越强。且有机锗多酸衍生物可防止荷瘤鼠脾脏重量的下降。结论 有机锗多酸衍生物可抑制肿瘤细胞生长 。

腺病毒介导的p27kip1基因对胃癌细胞周期和DNA合成的影响

背景：近年来胃癌基因治疗的研究取得了一定的进展，但总体疗效尚不尽人意，目前正积极寻求组织特异性基因作为胃癌基因治疗的突破点。目的：以腺病毒为载体，研究p27kipl基因对胃癌细胞周期和DNA合成的影响。方法：将成功构建的携带人p27kipl基因的重组腺病毒载体Ad-p27kipl和LacZ重组腺病毒Ad-LacZ转染胃癌细胞系SGC-7901，并观察细胞形态的变化，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡，^3H-胸腺嘧啶核苷(TdR)掺入实验测定细胞DNA合成。结果：Ad-p27kip1转染SGC-7901细胞后，细胞变圆、呈葡萄串样聚集以致脱落，G0／G1期细胞比例增加，8期、G2／M期细胞比例降低，并有凋亡发生，^3H-TdR掺入量亦显著降低。结论：腺病毒介导的p27kipl基因能使SGC-7901细胞产生G0／G1期阻滞，并能诱导细胞凋亡，抑制DNA合成，表明该基因疗法能有效抑制体外胃癌细胞的生长。

硒对大鼠肝细胞增殖周期和DNA合成的影响

目的 研究亚硒酸钠对大鼠肝细胞增殖周期和DNA合成的影响。方法 选用雄性SD大鼠 ,每组 5只 ,用 5 ,10和 2 0 μmol/kg的亚硒酸钠腹腔注射染毒。用流式细胞术研究大鼠肝细胞增殖周期和DNA相对含量(DNARC) ,用单细胞凝胶电泳检测DNA损伤。结果 10和 2 0 μmol/kg的亚硒酸钠均可使大鼠肝细胞G0 /G1期细胞显著减少 ,5 μmol/kg的亚硒酸钠虽可使G0 /G1期细胞减少 ,但无显著性差异。S期和G2 /M期细胞以及增殖指数变化不明显。 5 ,10和 2 0 μmol/kg的亚硒酸钠可引起大鼠肝细胞DNARC下降 ,DNA损伤率较对照组显著增高 ,而且DNARC和DNA损伤率之间存在负相关关系 ,随DNA损伤率的增高 ,DNARC下降 ,相关系数为 :- 0 9887(P <0 0 1)。结论 一定剂量的亚硒酸钠不仅改变了大鼠肝细胞的增殖周期 ,还引起DNA损伤 ,并影响DNA合成 ,使DNA相对含量显著下降。

非程序DNA合成试验检测某些金属诱变性的研究

本试验以人外周血淋巴细胞非程序DNA合成为观察指标,研究了11种金属化合物的遗传毒性效应,其中硫酸锰、硫酸钛、硫酸镍、硫酸锌、重铬酸钾、硝酸铅和硫酸镉可大量诱发非程序化DNA合成(UDS),且存在剂量-效应关系。由此表明,这些金属化合物在一定剂量时,对人体的遗传物质具有致突变作用。此外,我们还对职业接触金属汞蒸气的工人进行了UDS测试,受试者的测试结果大多数为阳性。

五肽胃泌素对体外原代培养牛瘤胃上皮细胞DNA合成的影响

采用3 H -TdR掺入法 ,分 3个系列分别研究了不同剂量五肽胃泌素 ( pentagastrin)对体外原代培养的牛瘤胃上皮细胞DNA合成的影响 ,五肽胃泌素受体拮抗剂丙谷胺对五肽胃泌素营养作用的影响 ,以及五肽胃泌素对新生奶公牛瘤胃上皮细胞DNA合成的影响。结果如下 :1)用终浓度 10 -11,10 -10 和 10 -9mol·L-1的五肽胃泌素分别处理成年奶牛瘤胃上皮细胞 ,使3 H -TdR掺入量增加 30 4 2 % ,2 4 2 6 %和 4 7 16 % (P <0 0 5 ,n =3) ;在 10 -12 ,10 -11,10 -10 和 10 -9mol·L-1的五肽胃泌素作用下 ,成年黄牛瘤胃上皮细胞3 H -TdR掺入量提高了 34 2 5 % ,2 7 6 4 % ,2 6 4 7%和 39 0 8%(P <0 0 5 ,n =3) ;在 10 -12 ～ 10 -9mol·L-1范围内 ,3 H -TdR掺入量随五肽胃泌素剂量增加而呈上升趋势 ;在 10 -8mol·L-1时 ,3 H -TdR掺入量出现下降。 2 ) 10 -12 ,10 -11,10 -10 和 10 -9mol·L-1的五肽胃泌素均增加奶牛瘤胃上皮细胞3 H -TdR的掺入 (P <0 0 5 ) ,CCK 2 /gastrin受体拮抗剂丙谷胺抑制五肽胃泌素的营养作用。 3)用 10 -10 mol·L-1五肽胃泌素处理新生奶公牛瘤胃上皮细胞 ,未见其促进3 H -TdR掺入的作用。以上结果表明 ,胃泌素促进成年牛瘤胃上皮细胞DNA合成 。

燃煤砷污染对人体血细胞DNA合成、DNA损伤及修复的影响

:目的与方法 :采用液体闪烁计数法及12 5I后标记法检测燃煤型砷中毒人群血细胞DNA自发合成、DNA -蛋白质交联物(DPC)水平及非程序外DNA合成 (UDS)反应 ,以探讨燃煤砷污染对人体DNA合成、DNA损伤及修复的影响。结果 :病区非病人及中毒病人的DNA合成明显降低 ,DPC水平随病情加重而升高 ;而UDS反应则只在中毒病人体内增强 ,差异均有显著性。结论 :燃煤砷可在早期致人体内DPC形成 ,引起严重的DNA损伤 ;亦能诱导中毒人群UDS反应增强 ,明显抑制DNA合成和修复 ,此可能为砷致皮肤癌敏感性增加的原因之一。

川芎嗪注射液对血管内皮细胞DNA合成的影响

目的 :探讨川芎嗪注射液对血管内皮细胞DNA合成的影响。方法 :采用3H -TdR掺入法 ,测定经川芎嗪注射液作用后体外培养的人脐静脉血管内皮细胞的放射性强度 (CPM )值。结果 :川芎嗪注射液可显著降低血管内皮细胞的CPM值 ,且均呈剂量依赖性。结论 :川芎嗪注射液抑制肿瘤血管生成的作用可能与其抑制血管内皮细胞DNA合成有关。

鹿茸对阳虚和骨髓损伤模型小鼠DNA合成的影响

药理实验证明，鹿茸Ｄ组分具有雄性激素样作用，可使阳虚和骨髓损伤小鼠睾丸、包皮腺、附睾，前列腺及精液囊的重量增加；用同位素掺入法证明，鹿茸Ｄ组分对骨髓损伤小鼠睾丸、包皮腺、精液囊、肝脏ＤＮＡ合成低下确有其纠正作用，而对阳虚模型小鼠除精液囊外，影响较小。

寒下药物对致病大肠杆菌DNA合成的抑制作用

本实验选用大承气汤、承气合剂及单味大黄对临床腹腔感染患者体内分离出的致病大肠杆菌行体外DNA合成抑制试验.结果表明,随着寒下药物浓度增高,大肠杆菌DNA合成是下降趋势,其抑制 E.coli DNA合成程度几与庆大霉素相同,表明寒下药物抑菌机制是通过抑制细菌的DNA合成,从而抑制致病菌的增殖生长.