齿瓣石斛多糖对小鼠胃溃疡的防治作用及机制研究

目的:研究齿瓣石斛多糖对小鼠胃溃疡的防治作用并阐述其作用机制。方法:分别采用水浸法、乙醇法和消炎痛法进行造模。动物实验分3批次进行,每批次将96只昆明种雄性小鼠(体重18~22 g)随机分为正常组、模型组、阳性药(枸橼酸铋钾1560 mg/kg/d)组及齿瓣石斛多糖高剂量(600 mg/kg/d)组、中剂量(500 mg/kg/d)组、低剂量(400 mg/kg/d)组,每组各16只小鼠。各给药组连续灌胃给予相应剂量药物14天,正常组和模型组给予等体积蒸馏水,每天1次。除正常组外,各组小鼠于第14天给药30 min后进行造模,再将各组16只小鼠随机分为两小组,其中1个小组8只小鼠的胃组织固定后用于胃黏膜损伤程度观察和病理组织学观察,并计算溃疡指数及溃疡抑制率。另1个小组8只小鼠用于测定胃组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:三种方法中,与正常组比较,模型组小鼠胃溃疡指数极显著升高(P<0.001),胃组织中SOD活力极显著降低(P<0.01),MDA含量极显著升高(P<0.01),胃溃疡模型造模成功。与模型组比较,阳性药组和齿瓣石斛多糖高剂量组能极显著降低小鼠胃溃疡指数(P<0.001),显著升高小鼠胃组织中SOD活力(P<0.05)并显著降低MDA含量(P<0.05);病理切片观察结果显示,上述两组小鼠胃组织再生黏膜较厚,黏膜修复较完全,胃黏膜上皮细胞排列较整齐,溃疡程度较轻。结论:齿瓣石斛多糖对胃溃疡具有确切的防治效果,其作用机制与保护胃黏膜和抗氧化作用有关。

2种pH敏感性石斛花色苷/壳聚糖复合膜的制备及性能研究

目的制备具有一定力学性能、阻隔性能和抗氧化活性的pH敏感性包装膜。方法以壳聚糖(CS)为基材,铁皮石斛花色苷(DOA)和紫皮石斛花色苷(DDA)为添加剂,采用溶液共混法制备铁皮石斛花色苷-壳聚糖复合膜(DOA-CS)和紫皮石斛花色苷-壳聚糖复合膜(DDA-CS)。通过扫描电子显微镜和傅里叶变换红外光谱对复合膜进行表征;研究DOA和DDA的质量分数对复合膜的物理性能、力学性能、热稳定性能和抗氧化能力的影响;通过复合膜对不同pH值的颜色响应考察其pH敏感性。结果DOA和DDA的添加显著改善了壳聚糖膜的力学性能、阻隔性能和热稳定性,特别是当2种花色苷添加量达到10%时,复合膜展现出最优的拉伸强度和较低的水蒸气透过率。在200~300nm内,复合膜均具有较好的紫外光阻隔能力。复合膜的抗氧化试验显示,添加DOA和DDA能显著提高膜的抗氧化能力,且DOA-CS的抗氧化能力优于DDA-CS的。此外,复合膜还表现出良好的pH敏感性,能够随pH值的变化而改变颜色,这为食品包装提供了潜在的新功能。结论DOA-CS和DDA-CS复合膜具有良好的应用前景,不仅可以作为食品包装材料,还可以作为食品新鲜度的指示剂。

铁皮石斛和紫皮石斛破壁粉工艺对醇溶性浸出物影响的初步研究

铁皮石斛和紫皮石斛破壁粉工艺对醇溶性浸出物影响的初步研究。使用振动式细胞级粉碎机对铁皮石斛和紫皮石斛进行破壁粉碎,通过分析铁皮石斛和紫皮石斛水分、粉碎时间、粉碎温度等参数探究该工艺对铁皮石斛醇溶性浸出物的影响。铁皮石斛水分、粉碎温度、粉碎时间工艺参数对醇溶性浸出物的影响显著,影响程度由大到小为:B(粉碎时间)>C(粉碎温度)>A(水分)。在水分为6%,粉碎时间为50 min,粉碎温度为-15℃时醇溶性浸出物效果最佳为9.95%。紫皮石斛的水分、粉碎时间工艺参数对醇溶性浸出物的影响显著,而粉碎温度影响较小,影响程度由大到小为:A(水分)>B(粉碎时间)>C(粉碎温度)。在水分为4%,粉碎时间为50 min,粉碎温度为-15℃条件下,醇溶性浸出物效果最佳为6.47%。醇溶性浸出物会随铁皮石斛和紫皮石斛破壁粉的粉碎程度而变化,可作为研究铁皮石斛和紫皮石斛破壁粉工艺研究的检测性指标和关键质量参数,同时也可以作为区分鉴别紫皮石斛和铁皮石斛的一个参数指标。

齿瓣石斛不同营养器官多糖的含量测定

目的探讨齿瓣石斛不同营养器官的多糖含量。方法采用硫酸-苯酚法对齿瓣石斛根、嫩条、叶、老条多糖含量进行测定。结果嫩条中的多糖含量明显高于其它部位,其含量的顺序分别为嫩条>叶>根>老条。结论齿瓣石斛采收嫩条部位比较合理,老条可用于分株繁殖和压条繁殖。

齿瓣石斛提取物体外抗菌作用初步研究

[目的]研究齿瓣石斛的无水甲醇和水提取物的抗菌活性。[方法]采用试管稀释法测定齿瓣石斛无水甲醇和水提取物对11种临床常见的病原菌的MIC及MBC,初步判定其抑菌效果。[结果]无水甲醇和水提取物在体外对7种细菌有不同程度的抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌的抑制作用最强,对痢疾志贺菌、伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌和乙型副伤寒沙门菌无明显作用;无水甲醇提取物的抗菌作用强于水提取物。[结论]齿瓣石斛无水甲醇和水提取物对所测试菌种具有良好的体外抗菌作用。

齿瓣石斛的原生境播种及其株丛生长特性研究

兰科(Orchidaceae)植物是植物保护中的"旗舰"类群,其种子细小粉末状,缺乏萌发所需的营养物质,研究种子萌发和幼苗生长特性对于兰科植物保育、资源可持续利用和产业化等具有重要意义。本研究以附生齿瓣石斛(Dendrobium devonianum Paxt.)为对象,建立原生境播种方法,研究其生活史周期和不同附主树种齿瓣石斛株丛生长特性。结果显示,采取稀牛粪+种子(或米汤+种子)的原生境播种方法,齿瓣石斛种子可大量萌发生长形成幼苗;种子萌发当年生长缓慢,完成由种子到种子的生活史周期需3~5年或更长;不同附主树种的齿瓣石斛株丛生长及结果情况存在差异,4年生假鳞茎在不同附主树种上的茎节数指标为:李树>梨树>桃树>披针叶楠;茎粗指标为:披针叶楠>梨树>桃树>李树;茎长指标为:梨树>披针叶楠>李树>桃树;结实率指标为:梨树>桃树>李树>披针叶楠,其中,梨树上的齿瓣石斛株丛自然结果率达24.86%。该研究为附生石斛的原生态栽培和回归保育提供了一条新途径。

珍稀林药植物齿瓣石斛芽增殖和快繁研究

以齿瓣石斛(Dendrobium devonianum Paxt)组培苗为外植体,对适合齿瓣石斛丛生芽增殖和生根的培养基进行筛选,并建立齿瓣石斛无性繁殖体系。研究结果表明,丛生芽增殖的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+25 g/L蔗糖,在此培养基上,增殖系数高,幼苗生长状况好;继代苗在MS+0.3 mg/L NAA+20 g/L蔗糖的培养基上生根效果最好,根系长而粗壮;适于组培苗炼苗的最佳基质为甘蔗渣,两个月后,成活率达90%以上。其研究结果对野生石斛资源的保护和合理开发具有重要的意义,并为齿瓣石斛的规模化生产提供科学依据。

齿瓣石斛病原链格孢菌生物学特性研究

对齿瓣石斛（Dendrobium devonianum Paxt，）黑斑病病原物链格孢菌（Alternaria tenuis Nees）进行分离并对其生物学特性进行研究。用常规组织分离法从齿瓣石斛叶片中分离黑斑病病原物链格孢菌，以PSA为基本培养基，研究培养基pH值、附加不同碳源和氮源、温度、光照等培养条件对链格孢菌菌丝生长及产孢的影响。齿瓣石斛链格孢菌菌丝最适宜生长的温度25℃，20℃最宜产孢；最适宜的pH值为5—6；光照对菌丝生长影响不显著，产孢量以光暗交替下培养最多；在PSA培养基上加入淀粉或硝酸铵对菌丝生长最好，产孢则以葡萄糖较好，在其他碳源或氮源的培养基上极少产孢。齿瓣石斛链格孢菌适宜在PSA培养基pH值为5—6，附加一定葡萄糖和硝酸铵，25℃和光暗交替下生长。

超临界二氧化碳萃取齿瓣石斛

目的采用超临界二氧化碳萃取(SFE)法萃取齿瓣石斛。方法使用正己烷、异丙醇、乙酸乙酯、乙醇作为夹带剂。SFE萃取分两阶段和一阶段萃取,前者使用纯CO2萃取,再添加夹带剂萃取;后者直接泵入夹带剂与CO2共同萃取,以比较两法的萃取效率。结果乙酸乙酯作为夹带剂更有利于齿瓣石斛中低极性化合物的溶出。直接泵入乙酸乙酯与CO2共萃的方式更有利于齿瓣石斛中各成分的溶出。结论本实验萃取方式为未来齿瓣石斛的进一步研究提供良好的基础。

齿瓣石斛的位点特异性PCR鉴别

目的 设计出齿瓣石斛的位点特异性鉴别引物 ,仅通过PCR就能完成对齿瓣石斛真伪进行准确鉴别。方法 根据齿瓣石斛及其他枫斗类、黄草类石斛的rDNAITS序列数据库 ,设计了齿瓣石斛的位点特异性PCR鉴别引物JB Chiban 0 1S和JB Chiban 0 1X。然后 ,对 38种石斛属植物模板DNA进行了PCR扩增 ,阳性者即为齿瓣石斛正品。结果 当退火温度设定为 5 8℃时 ,只有齿瓣石斛的模板DNA能被扩增出来 ,而其他的 37种石斛属植物均为阴性。该鉴别反应重复性好 ,已在鉴别齿瓣石斛时发挥重要作用。结论 运用位点特异性鉴别引物能成功地对齿瓣石斛进行PCR鉴别 ,与DNA测序鉴别方法相比 ,位点特异性PCR具有高效、准确、简便、省时等优点。

齿瓣石斛栽培基质筛选及其栽培方式研究

通过对齿瓣石斛栽培基质和栽培方式的对比试验研究,结果表明:(1)不同栽培基质中,树皮∶苔藓(1∶1)中新枝数最多,树皮中枝条生长最好,树皮∶锯末∶羊粪(5∶3∶2)中产量最高;(2)不同栽培方式中直立捆绑产量最高。因此在齿瓣石斛生产中宜选择树皮基质和直立捆绑栽培方式。

不同种类石斛多糖成分对小鼠脾脏免疫功能的影响

目的:研究不同种属石斛多糖对小鼠免疫功能的调节作用。方法:培养小鼠脾淋巴细胞,观察不同浓度铁皮石斛、齿瓣石斛、兜唇石斛、晶帽石斛中多糖成分对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;研究口服给药不同剂量石斛多糖,对小鼠碳粒廓清能力、脾脏指数的影响。结果:齿瓣石斛多糖可以刺激脾淋巴细胞的增殖,增加小鼠碳粒廓清能力和脾脏指数,与铁皮石斛具有类似的作用,而其他种类石斛中的多糖成分的增强免疫活性较差。结论:齿瓣石斛多糖具有增强脾脏免疫的作用。

齿瓣石斛多糖及醇溶性浸出物含量积累规律研究

[目的]研究不同海拔、不同采收时间齿瓣石斛鲜条内的多糖含量以及醇溶性浸出物含量变化规律。[方法]采用循环水浴加热法提取齿瓣石斛中的多糖、醇溶性浸出物,并进一步运用化学试剂反应显色以及形成络合物;采用紫外分光光度法对石斛样品中的多糖含量进行测定,用差量法对石斛样品中的醇溶性浸出物含量进行测定。[结果]齿瓣石斛受海拔、采收时间的影响较大,不同海拔、不同采收时间所测齿瓣石斛所含多糖含量及醇溶性浸出物含量变化较大。在适宜种植齿瓣石斛的滇西地区,海拔越高,齿瓣石斛所含多糖及醇溶性浸出物含量越高;采收时间越长,齿瓣石斛所含多糖含量呈减少的趋势,但变化不明显,相反醇溶性浸出物含量却逐渐增加。[结论]该研究为齿瓣石斛种植和采收提供参考。

石斛锈病病原初步鉴定及其防治药剂筛选

石斛锈病为齿瓣石斛(Dendrobium devonianum Paxt.)上的一种新病害。通过对锈病病斑的形状、颜色和冬孢子的外观形态进行观察,确定病原为担子菌门冬孢菌纲锈菌目柄锈菌属真菌。对锈病进行田间药剂防治试验,结果表明,43%戊唑醇SC、10%苯醚甲环唑WG、15%三唑酮WP三种药剂对该病防治效果较好,相对防效分别达到81.14%、76.36%和76.33%。

龙陵紫皮石斛色素的提取及其稳定性

以3种类型的龙陵紫皮石斛(Dendrobium devonianum)茎为试材,用溶剂法提取色素,并研究其稳定性。结果表明:3种类型龙陵紫皮石斛色素溶液在可见光533.0 nm波长处有吸收峰,其色素的主要成分为花色苷。紫鞘型、紫条型和血草型紫皮石斛花色苷含量分别为39.65、35.05、15.85 mg/L。温度的改变对紫皮石斛花色苷影响较大,随着温度升高,颜色逐渐加深;在阳光照射下,花色苷极不稳定,Mg2+和Al3+对花色苷有很好的增色、稳定作用;Cu2+、Zn2+和Fe3+使花色苷明显褪色,并伴有沉淀;随着H2O2和VC、Na2SO3浓度的增大,颜色逐渐消退;食盐对紫皮石斛花色苷有一定的增色作用;蔗糖和柠檬酸使花色苷明显褪色。

西双版纳地区铁皮石斛及齿瓣石斛品质的初步研究

目的对比铁皮石斛与其常用替代品在品质方面的差异。方法采用苯酚-硫酸法与重量法,研究对比了西双版纳地区不同来源铁皮石斛及齿瓣石斛多糖含量及折干率的差异。结果铁皮石斛的多糖含量及折干率分别为20.29%,20.16%,齿瓣石斛为16.93%,18.92%。结论不同栽培类型的铁皮石斛存在品质差异;齿瓣石斛的野生苗品质优于组培苗。

珍稀齿瓣石斛的生物学特性及其野生资源保护

阐述了齿瓣石斛的生物学特性及资源情况。为附生草本植物,主要分布于热带、亚热带温暖湿润地区,高温环境下茎条细长,低温(1℃以下)容易受冻,为冬季落叶型石斛。自然条件下,齿瓣石斛繁殖方式包括有性繁殖和营养繁殖,有性繁殖对环境要求严格,果实种子量大,为明显的"以量取胜"繁殖,是扩大种群分布范围的主要途径;营养繁殖分合轴生长和高芽繁殖,合轴生长形成并壮大株丛,有春秋两个萌芽峰期,而高芽是扦插、压条繁殖的保证。野生资源过度采摘、生境破坏与植树造林、繁殖特性缺陷、人工种植产业发展缓慢、供需矛盾突出等是齿瓣石斛野生资源濒危的主要原因。应制定相关政策,加强野生资源保护,推进齿瓣石斛工厂化育苗,并积极开展种子自然繁殖技术研究,降低种苗培育成本,加快规模化种植产业发展,实现齿瓣石斛资源的可持续利用。

齿瓣石斛研究进展

为推进齿瓣石斛产业发展,对齿瓣石斛的化学成分、药理作用以及繁殖技术作了全面综述,为产业发展提供参考。

齿瓣石斛群体性状的变异及主成分分析

探索齿瓣石斛群体变异情况,为生产和育种提供参考。选择齿瓣石斛人工仿野生栽培1～3年的基地6个,每个基地随机选择3个样点,每样点面积2m2,统计6个主要变异类型的植株数;每个变异类型统计茎长、茎粗、茎节数、单条鲜重、叶长、叶宽、长宽比、叶面积;采用SPSS软件对不同类型齿瓣石斛性状进行差异显著性分析和主成分分析。结果表明齿瓣石斛狭叶粗壮型所占比例最高,血草型最少;铁线草的茎长、茎节数最大,显著高于血草型(P<0.05)和紫鞘粗壮型(P<0.05);宽叶粗壮型的茎粗和单条鲜重均显著高于其他各组(P<0.05);在叶长、叶宽、叶面积上,宽叶粗壮型、狭叶粗壮型、紫鞘粗壮型分列前三位,属于大叶类型,与血草型相比均有显著差异((P<0.05);齿瓣石斛主要群体性状指标存在不同程度的变异,以单条鲜重和叶面积变异程度最大;在齿瓣石斛育种工作中,可以尝试集中考察能反映齿瓣石斛综合性状的茎长和茎粗这2个植物学性状指标,以提高齿瓣石斛新品种选育的效率。

兜唇石斛多糖提取及脱蛋白工艺研究

目的研究兜唇石斛多糖提取及脱蛋白的制备工艺。方法采用正交实验设计制备不同提取条件多糖溶液,苯酚-硫酸法测定溶液中多糖含量,光密度差值法测定蛋白含量。结果兜唇石斛多糖提取的最佳条件,提取温度100℃,提取时间2 h,加水量200 ml,醇析浓度为80%,醇析时间30 h,多糖脱蛋白的最佳条件,样品/萃取剂(V/V)为4∶1,氯仿/正丁醇(V/V)为4∶1,萃取时间30 min。结论不同提取及萃取条件下,兜唇石斛多糖提取及脱蛋白测定结果存在明显差异。