CHB合并EBV感染患者外周血双阴性T淋巴细胞和滤泡辅助性T细胞水平及其临床意义

目的评价慢性乙型病毒性肝炎(CHB)合并爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)感染患者外周血双阴性T淋巴细胞(DN T)、滤泡辅助性T细胞(Tfh)和CD4+T细胞水平以及CD4+/CD8+比值(CD4-CD8 Ratio)变化,并分析其与肝功能各项指标的相关性,探讨其临床意义。方法收集2021年10月至2023年8月南京中医药大学附属医院30例CHB合并原发性EBV感染患者(CHB+EBV组)、30例CHB患者(CHB组)及30名健康对照者(对照组)的外周血,采用流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中Tfh细胞和DN T细胞、CD4+细胞、CD8+的水平,使用生化分析仪检测肝功能指标:天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、直接胆红素(DBIL)、总胆红素(TBIL)、间接胆红素(IBIL)。结果外周血Tfh细胞水平:CHB+EBV组>CHB组>对照组,外周血DN T细胞水平:CHB组>CHB+EBV组>对照组,外周血CD4+T细胞水平:对照组>CHB组>CHB+EBV组,CD4+/CD8+比值:对照组>CHB组>CHB+EBV组,差异有统计学意义(P<0.05)。CHB+EBV组患者血液中ALT、AST、TBIL、DBIL、IBIL和ALP水平均明显高于CHB组和对照组(P<0.05)。相关性分析结果显示,患者外周血Tfh细胞与血液中ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL和IBIL呈正相关(P<0.05)。DNT细胞与血ALT,AST,TBIL,DBIL和IBIL呈正相关(P<0.05),但与ALP无明显相关性(P>0.05)。CD4+细胞及CD4+/CD8+值与血ALT,AST,ALP,TBIL,DBIL及IBIL呈负相关(P<0.05)。结论双阴性T淋巴细胞和滤泡辅助性T细胞参与了CHB合并EBV感染免疫进程,且与患者肝损害有关。

鼻咽部EBV阳性大细胞神经内分泌癌1例并文献分析

神经内分泌癌(neuroendocrine carcinoma,NEC)多发于胃、肠及肺部,鼻咽部罕见[1-2]。鼻咽部NEC主要发生于中老年男性,EBV感染及吸烟可能会导致该病发生[1,3]。目前WHO根据细胞形态学特征和有丝分裂活性将NEC分为三类:分化好的NEC,即具有最小核异型性和核分裂<2个/10HPF;中分化的NEC,即具有坏死和/或核分裂2~10个/10HPF;低分化的NEC,包括大细胞NEC(large cell neuroendocrine carcinoma,LCNEC)和小细胞NEC(small cell neuroendocrine carcinoma,Sm CC),核分裂>10个/10HPF[4]。

EBV阳性滤泡性淋巴瘤2例临床病理观察

EBV阳性滤泡性淋巴瘤(follicular lymphoma,FL)是一类较为罕见的淋巴瘤类型,其以结节状分布、结节内见中心细胞及中心母细胞,伴有EBV阳性表达为特征。在这种FL中,EBV阳性的淋巴细胞位于滤泡分布区。本文对2例EBV阳性FL的病例进行回顾性分析,以探讨该病独特的临床病理学特征,为今后的临床病理诊断与治疗提供依据。

鼻咽部EBV阳性小细胞神经内分泌癌伴颈部淋巴结转移1例

患者,男性,54岁,因“回吸涕血1+年,发现颈部包块3+月”入院。MRI示:鼻咽右侧壁增厚,边界不清,向右后咽旁间隙呈铸形生成,向上累及右侧海绵窦,较大层面大小约3.1 cm×1.8 cm×5.4 cm,T1WI呈等低信号,T2WI呈等高信号,DWI水分子明显弥散受限,增强扫描明显强化。

EBV阳性炎性滤泡树突细胞肉瘤8例临床病理分析

目的探讨EBV阳性炎性滤泡树突细胞肉瘤的临床病理学特征。方法回顾性分析8例EBV阳性炎性滤泡树突状细胞肉瘤的临床病理学特征、免疫表型、诊断及鉴别诊断等,并复习相关文献。结果8例患者中男性5例(肝脏3例,脾脏2例),女性3例(肝脏2例,脾脏1例),男女比约1.7∶1。年龄36~85岁,中位年龄66岁,平均58岁。临床多为体检或因发热、腹泻等症状检查时发现肝脏或脾脏占位,2例具有乙肝病史,1例具有乳腺癌病史,1例合并肝细胞肝癌。影像学检查示肝脏或脾脏内见单个或多个境界清楚的结节。镜检:大量淋巴细胞及浆细胞背景内见不同比例的肿瘤细胞,肿瘤细胞具有轻度异型,细胞边界不清,梭形或卵圆形,呈席纹状、束状排列或单个散在分布。胞质淡染或略有嗜酸性,细胞核呈空泡状,染色质细腻,核仁可见。部分肿瘤细胞似R-S细胞。免疫表型:肿瘤细胞不同程度表达CD21、CD23和CD35。8例EBER原位杂交检查均阳性。随访1~15个月,除1例肝脏有2枚肿瘤患者于术后2个月复发外,其余均无瘤生存。结论EBV阳性炎性滤泡树突细胞肉瘤少见,临床特征不明显,预后差异较大,诊断时需结合组织学及免疫表型特征。

EBV阳性炎性滤泡树突状细胞肉瘤9例临床病理特征

目的探讨EBV阳性炎性滤泡树突状细胞肉瘤(epstein-barr virus-positive inflammatory follicular dendritic cell sarcoma,EBV^(+)IFDCS)的临床病理学特征。方法回顾性分析9例EBV^(+)IFDCS的临床病理特征、免疫表型及随访,行HE及免疫组化EnVision法检测,并复习相关文献。结果9例EBV^(+)IFDCS患者年龄22~78岁,平均44.7岁。7例发生于肝,2例发生于脾。肿瘤内可见血管壁纤维样及透明变性(6/9)、嗜酸性粒细胞浸润(3/9)和上皮样肉芽肿(2/9)。免疫表型:瘤细胞表达滤泡树突状细胞标志物CD21(7/9)、CD23(8/9)和CD35(9/9),部分表达SMA(6/9)和D2-40(1/9)。2例脾IgG4阳性浆细胞明显增高(80~135个/10 HPF),7例肝IgG4阳性浆细胞为0~36个/10 HPF。术后随访3~84个月,6例无瘤生存,2例转移,1例失访。结论EBV^(+)IFDCS罕见,低度恶性。EBER原位杂交和免疫组化检测在EBV^(+)IFDCS诊断和鉴别诊断中具有重要作用。治疗以手术切除为主,术后需长期随访。

EBV相关噬血细胞综合征并发急性肾损伤患者的临床特点分析

目的:分析EB病毒(EBV)感染相关噬血细胞综合征(HLH)患者并发急性肾损伤(AKI)的临床特点。方法:收集2014年1月至2020年12月期间于本院住院治疗的EBV相关HLH患者,对患者的临床特征、治疗、并发AKI情况及预后进行回顾性分析。结果:本研究中EBV-HLH患者的AKI发生率为65.5%,28 d死亡率为15.3%。与未发生AKI组患者比较,并发AKI的EBV-HLH患者的胆红素、乳酸脱氢酶、肌酐、尿素氮、β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)的水平更高,凝血功能更差,可溶性白细胞介素-2受体(sCD25)更低。AKI组患者接受化疗、移植、机械通气、应用血管活性药物的比例更高,住院时间更长,住院病死率及28 d病死率更高。AKI患者按照改善全球肾脏预后组织(KDIGO)分级进行亚组分析,白细胞、胆红素、白蛋白、肌酐、尿素氮、β_(2)-MG、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PTA)水平更能反应患者病情的严重程度,KDIGO 2级和3级的患者接受移植、利尿剂、脏器支持(机械通气、应用血管活性药物、肾替代治疗)和入住重症监护病房的比例更高,住院病死率和28 d病死率更高。回归分析发现,肌酐、β_(2)-MG、APTT、移植、化疗是AKI发生的独立危险因素;应用血管活性药物既是AKI发生的独立危险因素,也是28 d死亡的独立危险因素;化疗、住院时间、HGB及纤维蛋白原水平是28天死亡的保护性因素。结论:EBV-HLH患者的AKI发生率高,进展为重症病死率高,应早期重视、加强关注,从而进行早期治疗以改善预后。

儿童EBV传染性单核细胞增多症细胞因子IL-6、γ-IFN、IL-10的改变

目的探讨EB病毒(EBV)感染的传染性单核细胞增多症(IM)患儿淋巴细胞亚群和细胞因子IL-6、γ-IFN、IL-10的变化及临床意义。方法选择2018年9月至2020年8月苏州大学附属儿童医院感染科收治的EBV感染的IM患儿100例作为病例组。同期在苏州大学附属儿童医院儿童保健科体检的健康儿童60名作为对照组。采用流式细胞术和酶联免疫吸附试验分别检测IM患儿及对照组的外周血淋巴细胞亚群和细胞因子(IL-6、IL-10、γ-IFN)水平。结果病例组细胞因子IL-6、IL-10、γ-IFN高于对照组(P<0.05或0.001)。病例组CD3^(+)、CD3^(+)CD8^(+)百分比高于对照组,而CD3^(+)CD4^(+)、CD19^(+)CD23^(+)、CD3^(-)CD(16+56)+、CD3^(-)CD19^(+)百分比、CD4^(+)/CD8^(+)比值低于对照组,两组差异均有统计学意义(P<0.001)。两组间异型淋巴细胞百分比、WBC、ALT、AST、LDH差异均有统计学意义(P<0.05或0.01)。病例组IL-6与异型淋巴细胞百分比、WBC、血浆EBV-DNA病毒载量、ALT、LDH无相关性(P>0.05),与AST呈正相关(P<0.05)。病例组IL-10与异型淋巴细胞百分比、WBC、血浆EBV-DNA病毒载量、ALT、AST、LDH均无相关性(P>0.05)。病例组γ-IFN与异型淋巴细胞百分比、WBC、ALT、LDH无相关性(P>0.05),与血浆EBV-DNA病毒载量和AST呈正相关(P<0.05)。病例组IL-6与CD3^(+)、CD3^(+)CD8^(+)百分比呈负相关(P<0.05或0.001),与CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(-)CD19^(+)百分比、CD4^(+)/CD8^(+)呈正相关(P<0.05或0.001),与CD19^(+)CD23^(+)、CD3^(-)CD(16+56)^(+)百分比无相关性(P>0.05)。病例组IL-10与CD19^(+)CD23^(+)、CD3^(-)CD19^(+)百分比呈正相关(P<0.05),与CD3^(+)呈负相关(P<0.05),与CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、CD3^(-)CD(16+56)^(+)百分比、CD4^(+)/CD8^(+)无相关性(P>0.05)。病例组γ-IFN与CD3^(+)、CD3^(+)CD8^(+)百分比呈负相关(P<0.05),与CD19^(+)CD23^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(-)CD(16+56)^(+)、CD3^(-)CD19^(+)百分比、CD4^(+)/CD8^(+)无相关性(P>0.05)。结论EBV感染的传染性单核细胞增多症患儿的免疫改变和炎症反应与疾病的发生、发展有关,IL-6、IL-10、γ-IFN参与传染性单核细胞增多症的免疫发病过程。

EBV miR-BART17-3p对原发免疫性血小板减少症患儿Treg/Th17平衡的影响

目的探讨EBV mi R-BART17-3p影响原发免疫性血小板减少症(ITP)患儿Treg/Th17平衡的机制。方法收集ITP患儿(ITP组,20例)和健康儿童(对照组,20例)外周血并分离CD_(4)^(+)T细胞。采用实时荧光定量聚合酶链式反应法、Western blot法、酶联免疫吸附法检测EBV mi R-BART17-3p、T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3)、叉头框蛋白P3(Fox P3)、白细胞介素17A(IL-17A)和转化生长因子-β(TGF-β)的m RNA、蛋白表达水平及含量。采用双荧光素酶报告基因实验考察EBV mi R-BART17-3p对Tim-3表达水平的影响。将15只BALB/C小鼠随机分为空白对照组、模型组、观察组,各5只。腹腔注射抗血小板抗体MWReg30以复制ITP小鼠模型,建模4 d后观察组小鼠予尾静脉注射携带EBV mi R-BART17-3p inhibitor的腺病毒载体。细胞染色并观察形态,检测外周血中TGF-β、IL-17A含量及血小板计数,采用流式细胞仪分别检测CD_(4)^(+)T细胞中Th17和Treg水平,并计算二者百分比。结果与对照组比较,ITP组患儿外周血EBV mi R-BART17-3p表达水平显著升高,Tim-3和TGF-βm RNA表达水平显著降低(P<0.05);Tim-3 m RNA表达水平与EBV mi R-BART17-3p表达水平呈显著负相关(r=-0.732,P<0.001)。Tim-3慢病毒载体p LKO.1-sh-Tim-3(sh-Tim-3)可显著降低Tim-3、Fox P3、TGF-β水平(P<0.05)。mi R-BART17-3p mimic显著升高了CD_(4)^(+)T细胞中mi R-BART17-3p的表达水平,并显著降低了Tim-3、Fox P3、TGF-βm RNA和蛋白表达水平(P<0.05);mi R-BART17-3p mimic可显著降低TGF-β含量,Tim-3+mi R-BART17-3p过表达逆转了mi R-BART17-3p mimic对TGF-β的抑制作用。动物实验结果显示,沉默EBV mi R-BART17-3p可促进Treg分化,减少脾脏和骨髓组织中的巨核细胞计数,并显著增加外周血中血小板计数。结论EBV mi R-BART17-3p可通过Fox P3/Tim-3途径调节ITP患儿Treg/Th17的免疫失衡。

胰腺EBV阴性的炎性假瘤样滤泡树突细胞肉瘤1例

患者男性,48岁。因左上腹部轻度疼痛于2017年4月入梅州市人民医院。腹部CT示:胰尾部囊实性肿物,最大径10.2 cm,囊内可见分隔,肿块紧贴胃小弯侧及肝左叶,边界尚清(图1A)。MR检查示:稍长T1,稍长T2信号,DWI序列呈高低混杂信号,ADC值减低,增强扫描实性部分呈渐进性欠均匀中度强化,囊性部分未见强化(图1B)。临床诊断为胰腺癌,经多学科讨论,决定手术治疗。术中见胰尾肿物,大小约10 cm×8 cm,与胃壁黏连紧密,脾动静脉包裹在其中,难以分离。为完全切除肿瘤,进行了胰体尾部切除术、脾切除术和胃部分切除术。

EBV重激活的研究进展

EB病毒(Epstein-Barr Virus, EBV)是一种在人群中广泛存在的病毒,它在人类生命周期中的某个时刻几乎无一例外地会感染到每个人。EBV通常能在人体B细胞和上皮细胞中建立长期潜伏感染,且在特定条件下可能重新激活。EBV的重激活与多种肿瘤性疾病相关,包括淋巴瘤和胃肠癌等。虽然目前没有官方批准的治疗方法,但已有研究显示某些抗病毒药物和质子泵抑制剂能有效抑制EBV的复制。但对于潜伏感染的治疗效果有限,因此需要更多研究来开发新的治疗策略。

1例异基因造血干细胞移植术后并发CMV和EBV共激活患儿的护理

异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)是指将健康人的造血干细胞移植至病人体内,目的是帮助其重建造血和免疫功能。越来越多的研究已经证实allo-HSCT是地中海贫血病人能够重新获得生命的主要治疗方法,目前在各大移植中心广泛开展。

EBV感染与胃癌风险关联的流行病学研究进展

Epstein-Barr病毒(Epstein-Barr virus,EBV)是首个被发现与人类肿瘤相关的病毒,其与胃癌的关联近年来受到广泛关注。2014年癌症基因组图谱根据分子特征首次将胃癌分为4种亚型,并将EBV感染者单独归为一类—EBV阳性胃癌,该亚型胃癌患者具有独特的分子和临床病理特征。EBV感染胃上皮细胞,诱导宿主基因突变及表观遗传异常,通常被认为可能是EBV致癌的重要基础,但个体EBV感染与胃癌发生风险之间的关系尚不明确。本文汇总既往探讨不同EBV感染指标与胃癌之间关联的流行病学证据,并对EBV在胃癌致癌过程中的可能作用及潜在作用机制进行综述,以期为进一步阐明EBV感染与胃癌发生发展的关系提供借鉴。

护肝片联合抗感颗粒治疗EBV肝损伤的网络药理学分析

目的:通过网络药理学联合分子对接技术探讨护肝片联合抗感颗粒治疗EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)肝损伤的分子机制。方法:利用TCMSP、HERB数据库和Swiss Target Prediction平台筛选和预测护肝片联合抗感颗粒的活性成分及潜在靶点。通过GeneCards数据库检索EBV肝损伤的相关基因。运用Cytoscape 3.9.1软件构建药物活性成分-靶点网络,并筛选出关键成分。对护肝片联合抗感颗粒治疗EBV肝损伤的潜在作用靶点进行GO及KEGG通路富集分析,并将其导入STRING平台,构建PPI网络,利用MCC和MNC算法筛选出核心靶点。最后,利用CB-Dock对关键成分与核心靶点进行分子对接。结果:共收集护肝片联合抗感颗粒的活性成分96个,护肝片联合抗感颗粒治疗EBV肝损伤的作用靶点57个。GO和KEGG通路富集分析结果主要与细胞因子受体结合、细胞因子活性、人巨细胞病毒感染等功能和通路相关。分子对接结果证实核心靶点STAT3、AKT1、JUN、TP53能稳定地与关键成分槲皮素、山柰酚、木犀草素、金合欢素、异鼠李素结合。结论:护肝片联合抗感颗粒主要通过槲皮素、山柰酚、木犀草素、金合欢素和异鼠李素等关键成分作用于STAT3、AKT1、JUN和TP53等核心靶点,参与细胞因子相关生物细胞过程的调节,最终起到治疗EBV肝损伤的作用。

EBV阳性弥漫大B细胞淋巴瘤的临床特征及预后分析

分析EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)阳性弥漫大B细胞淋巴瘤患者的临床特征及预后情况,探讨其与BCL-2的相关性及预后分析。方法 回顾性分析在新疆医科大学附属肿瘤医院诊断为新发DLBCL的261例患者的临床资料,分析EBV相关 DLBCL 患者的临床特征、 蛋白表达及预后比较。结果 261例DLBCL患者中EBV(+)患者比例约31.03%,与EBV(-) 组相比,国际预后指数(IPI)评分更高 (49.4% vs 64.4% ,P = 0.022),两组在性别分布、年龄、免疫学亚型、 分布特征、临床分期、β2-微球蛋白、乳酸脱氢酶(LDH)无显著差异; EBV(+)组 BCL-2 蛋白表达高于EBV (-)组(74.1%vs 60.6%,P=0.028),两组在CMYC 蛋白、双表达方面,差异有统计学意义( P <0. 05) ;通过Cox 多因素回归模型分析,显示EB病毒感染、CMYC / BCL2 共表达、高危组均为 OS、PFS 独立的不良预后因素,差异有统计学意义 (P<0.05) 。结论 EBV感染、IPI、BCL-2、CMYC、BCL-2 /CMYC 双表达均与 EBV阳性DLBCL患者预后相关,这些指标可以初步判断预后,对指导临床治疗有一定意义。

血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤伴EBV阴性的DLBCL一例:附文献复习

目的:对血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(angioimmunoblastic T-cell lymphoma,AITL)的临床特征、发病机制、病理学特点及治疗预后进行探讨。方法:对一例AITL伴EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)阴性的弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-celllymphoma,DLBCL)病例进行报道,并结合国内外相关文献对AITL的研究进展进行综述。结果:结合病理学活检、免疫组化、PCR、血液学、影像学检查等结果,本例患者确诊为AITL伴DLBCL转化型,EBV阴性。给予R-CHOP联合西达苯胺方案治疗,4周期后疗效部分缓解。结论:AITL可转化为DLBCL,目前发病机制尚未阐明,EBV感染是其诱发因素,但非必须。临床过程中对于EBV阴性的AITL仍需予以关注,其亦有转化为DLBCL的可能。

血浆EBV DNA变化预测晚期胃癌化疗近期疗效的价值

目的探究胃癌患者血浆EBV DNA基础值及化疗后的变化及与化疗近期疗效间的关系。方法入组350例经影像学和组织病理学确诊为进展期的符合研究条件的胃腺癌患者,采取EBV-RNA(EBVR)原位杂交法及PCR诊断胃癌组织中是否存在EBV(EBV诊断金标准),将原位杂交法诊断胃腺癌组织中存在EBV阳性的胃腺癌患者筛选出后,应用PCR检测胃癌患者基础值和每2周期化疗前血浆EBV-DNA表达水平的变化;每完成2周期化疗,采用B超、CT等影像学检查评估肿瘤病灶,依据RECIST标准评价客观疗效,分析患者无进展生存率。结果每完成2周期化疗后进行两两比较,血浆EBV DNA阳性率较前明显下降,差异有统计学意义。每完成2周期化疗,结合阳性率,显示患者无进展人数与血浆EBV阳性具有相关性。结论血浆EBV DNA在胃腺癌中有较高的表达,对原位杂交法诊断EBV阳性的胃腺癌患者检测血浆EBV DNA的表达来预测晚期胃癌化疗的近期疗效具有一定的可行性和便利性。

鼻咽癌患者EBV、HPV共感染状况真实世界初步研究

目的:初步分析四川南充地区鼻咽癌患者EB病毒(EBV)与人乳头瘤病毒(HPV)共感染状况及其临床意义。方法:收集经鼻咽镜活检证实的初诊鼻咽癌患者的石蜡包埋组织,采用分子杂交技术以及PCR荧光定量行EBV核酸定量(EBV-DNA)检测及HPV分型检测,分析EBV、HPV共感染状况与人口学特征、分期、治疗相关副反应、近期疗效等指标的相关性。结果:鼻咽癌患者总体EBV感染率为81.7%,HPV感染率为40%,28.3%的鼻咽癌患者存在HPV和EBV共感染;中晚期患者EBV感染高于HPV感染,EBV单感染患者CR率为29.4%,HPV感染(HPV单感染+EBV/HPV共感染)患者CR率为63.6%,差异接近有统计学差异(P=0.074),四种感染状态在性别、年龄、吸烟状况、T分期等方面无差异。结论:鼻咽癌EBV感染率高于HPV,中晚期患者EBV感染率更高,<60岁患者HPV感染更常见;鼻咽癌患者存在一定比例EBV/HPV共感染状态;鼻咽癌EBV感染背景下,合并HPV感染可能是预后良好的一个分子标记物。

EBV多抗体、EBV-DNA与外周血异型淋巴细胞联合检测对儿童EB病毒感染的诊断价值研究

研究EB病毒感染患儿在诊断过程中采用EBV多抗体、EBV-DNA与外周血异型淋巴细胞联合检测方式的临床价值。方法 选择2022年1月-2023年2月在我院接受治疗后证实为EB病毒感染的患儿40例,再抽取同期接受健康体检的40例健康同龄儿童资料,将其分成定义为研究组和对照组。采用酶联免疫法、实时荧光定量法、镜检法对两组研究对象的EBV多抗体、EBV-DNA、外周血异型淋巴细胞比例进行测定。结果 EBV多抗体、EBV-DNA、外周血异型淋巴细胞比例,均以研究组较高,且P<0.05。且EBV多抗体、EBV-DNA、外周血异型淋巴细胞比例阳性率均高于对照组,且P<0.05。结论 EB病毒感染患儿的EBV多抗体、EBV-DNA、外周血异型淋巴细胞比例检测结果,会明显异于健康同龄儿童,临床上可以将这一特征作为对EB感染进行诊断的重要参考依据,使诊断的准确性提高,为患儿争取更多有效治疗时间,使其转归更加理想。

靶向EBV潜伏膜蛋白1的单克隆抗体促进HIV相关EBV阳性伯基特淋巴瘤细胞凋亡的分子机制

目的制备和筛选抑制伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma,BL)的抗EBV潜伏膜蛋白1(latent membrane protein-1,LMP1)单克隆抗体。方法人工合成EBV潜伏膜蛋白1的跨膜结构域5(transmembrane domain 5,TMD5),并以此为抗原,采用杂交瘤法制备抗TMD5单抗。ELISA法测定小鼠腹水中的抗体效价。7-氨基放线菌素D(7-Aminoactinomycin D,7-AAD)/Annexin V-PE双标记流式细胞术和JC-1染色联合流式细胞术测定线粒体膜电势评估单抗对BL细胞系Daudi细胞的促凋亡活性。蛋白质印迹法测定Daudi细胞内促存活信号通路p38-MAPK/IKK/NF-κB相关蛋白的表达水平。结果经过2轮筛选,获得R2-2-5E-6C和R2-2-8D-3A两种单抗,这2种单抗均能与TMD5发生抗体-抗原特异性结合,而与GAPDH无免疫反应。与NC组相比,R2-2-5E-6C组和R2-2-8D-3A组处理后的Daudi细胞中Annexin V+7-AAD+细胞所占百分比增加;JC-1荧光强度<104的细胞所占百分比增加;胞内p38-MAPK、IKK和NF-κB的表达水平降低(P<0.05)。结论筛选获得的抗TMD5单抗R2-2-5E-6C和R2-2-8D-3A可通过抑制LMP1介导的p38-MAPK/IKK/NF-κB信号通路的活性促进BL凋亡。