伴微乳头及实性成分的浸润性肺腺癌患者EGFR基因突变状态和临床病理特征的相关性

目的:探讨伴微乳头及实体成分的浸润性肺腺癌EGFR基因突变状态及其临床病理特征。方法:回顾性筛选2018年09月至2023年03月就诊于上海市中医医院及上海市肺科医院808例术后病理为浸润性肺腺癌并行过基因检测的患者,根据是否伴有微乳头成分(micropapillary,MP)及实体成分(solid,SD)分为微乳头/实体型阳性组(MP/SD^(+))和微乳头/实体型阴性组(MP/SD-),又根据微乳头/实体型阳性组中微乳头及实体成分所占比例分为MP/SD^(+)(<10%)、MP/SD^(++)(10%~40%)、MP/SD^(++)+(>40%)三个亚组。用软件SPSS26.0分析基因突变情况与MP/SD状态以及与患者临床病理特征之间的关系。结果:808例患者中含有MP/SD成分的肺腺癌有396例(49%),MP/SD成分与性别、吸烟史、胸膜侵犯、脉管侵犯、胸腔播散、肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期、EGFR突变状态等有关。579例(71.7%)患者检测到有EGFR突变,81.6%的MP/SD阳性(323/396)组中存在EGFR突变,MP/SD^(+)组EGFR突变率高于MP/SD-组(P<0.001)。EGFR基因突变类型以19-del和L858R为主(占90%),突变类型在MP/SD三个亚组中无明显差异(P=0.51)。结论:伴微乳头、实性成分结构的肺腺癌EGFR突变频率高于不伴有微乳头、实性成分结构的肺腺癌。

帕博利珠单抗治疗EGFR基因突变阴性和ALK阴性的晚期或转移性非小细胞肺癌的预算影响分析

目的从国家医疗保障支付方的角度出发,基于真实世界数据预测将帕博利珠单抗(PEM)纳入国家医保后,其作为一线药物治疗晚期或转移性非小细胞肺癌对医保基金可能产生的影响,从而为医保部门决策提供依据。方法构建预算影响分析模型,以2023年为基线年,比较PEM未纳入医保和纳入医保后对未来5年(2024-2028年)医保基金支出的影响。目标人群为EGFR基因突变阴性和间变性淋巴瘤激酶(ALK)阴性的局部晚期或转移性非小细胞肺癌患者;测算成本主要包括药品成本、不良反应处理成本、检查费用、入院监护费用等;以广东省183家医院2020-2022年PEM的配备率作为市场份额。采用单因素敏感性分析检验基础分析结果的稳健性。结果PEM未纳入医保时,2024-2028年目标人群的医保报销金额为493362.35万~515119.83万元;若将PEM纳入医保,上述数据范围为1187197.22万~1454057.10万元;两种情境下的医保报销增额为672077.39万~960694.75万元。PEM纳入医保后的医保报销金额占当年医保基金支出的比例分别为0.2980%、0.2621%、0.2288%、0.2082%、0.1857%,医保报销增额占当年医保基金支出增加部分的1.0840%、0.9957%、0.8886%、0.8863%、0.8616%,均呈逐年递减趋势。结论若将PEM纳入医保,由于其单价较高,导致医疗支出相应增加,将对医保基金支出产生较大冲击;但是,将该药用于EGFR基因突变阴性和ALK阴性的局部晚期或转移性非小细胞肺癌患者时,其医保报销金额占当年医保基金支出的比例以及医保报销增额占当年医保基金支出增长部分的比例均逐年降低。

四川地区肺腺癌中EGFR基因19、21外显子突变研究

目的探讨EGFR基因19、21外显子突变与肺癌组织学类型、人种、年龄、性别、是否吸烟和所在地域的关系。方法收集65例四川地区肺腺癌患者石蜡包埋组织样本,选用针对19、21外显子的野生型和突变型基因的特异性引物,采用等位基因特异性寡核苷酸PCR法(allele-specific oligonucleotide polymerase chain reaction,ASO-PCR)检测突变。结果 65例肺腺癌样本中,35例发生19、21外显子突变(53.85%),其中19外显子缺失突变13例(20%),21外显子L858R错义突变23例(35.38%);男性38.24%(13/34),女性70.97%(22/31);吸烟者31.25%(5/16),非吸烟者61.22%(30/49);≤60岁的患者为57.14%(16/28),>60岁的患者为51.35%(19/37)。结论 65例四川地区原发肺腺癌中EGFR基因19、21外显子突变在女性、非吸烟患者中更常见(P<0.05),其中21外显子L858R突变率高于19外显子缺失率(P<0.05)。与文献报道比较,肺腺癌EGFR基因总突变率较其他类型肺癌高,且高于白种人。

吉非替尼与厄洛替尼在EGFR基因敏感突变晚期NSCLC患者一线治疗中的疗效比较

目的探讨吉非替尼与厄洛替尼在EGFR基因敏感突变晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者一线治疗中疗效差异。方法按照入组标准选择既往未接受过治疗的EGFR基因敏感突变晚期NSCLCL患者,随机分为两组:一组接受吉非替尼250 mg/d治疗,一组接受厄洛替尼150 mg/d治疗,主要观察指标为无进展生存时间(PFS),次要观察指标为总有效率(ORR)和疾病控制率(DCR)。结果共入组50例患者,其中吉非替尼组27例,厄洛替尼组23例,吉非替尼和厄洛替组的中位PFS分别为8.0个月和10.0个月,疗效无统计学差异(P=0.293),但厄洛替尼组略显优势。ORR分别为55.6%和60.9%(P=0.711);DCR分别为85.2%和87.0%(P=0.861)。无论19号外显子的缺失突变还是21号外显子的L858R错义突变均可以从EGFR-TKI治疗中获益,且突变位点的不同不能导致EGFR-TKI疗效的差异(P=0.072)。结论吉非替尼和厄洛替尼均是EGFR基因敏感突变晚期NSCLCL患者有效的一线治疗方案,疗效无统计学差异,但厄洛替尼略显优势。无论19号外显子的缺失突变还是21号外显子的L858R错义突变均可以从EGFR-TKI治疗中获益。

肺癌胸水细胞块与组织学EGFR基因扩增检测对比研究

目的:对比肺癌胸水细胞块与组织学中EGFR基因扩增情况,探讨非小细胞肺癌患者阳性胸水细胞块检测EGFR基因扩增情况及临床意义。方法:收集60例非小细胞肺癌患者阳性胸水离心获取肿瘤细胞制作成石蜡细胞块,其中有28例的组织学对照,免疫组化分型后进行FISH检测EGFR基因,荧光显微镜观察基因扩增情况。结果:28例细胞块有组织学EGFR基因检测对照,在有组织学对照细胞块EGFR基因检测相符率100%。肺腺癌31例中,EGFR基因簇状扩增4例(12.9%),点状扩增14例(45.2%),无扩增13例(41.9%),肺腺癌扩增率为58.1%;肺鳞癌25例中,EGFR基因簇状扩增2例(8.0%),点状扩增9例(36.0%),无扩增14例(56.0%),肺鳞癌扩增率为44.0%;其他类型NSCLC患者4例中2例点状扩增,扩增率为50%。结论:肺腺癌及肺鳞癌胸水细胞块EGFR检测结果与组织学一致,EGFR基因在肺腺癌的扩增率高于肺鳞癌。应用FISH技术检测胸水细胞块中的EGFR基因扩增情况具有临床应用价值。

靶向EGFR基因的siRNA表达载体构建及其生物学效应的研究

目的构建靶向表皮生长因子受体(EGFR)基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(pSi-EGFR),并观察其抑制人肺腺癌细胞株A549中EGFR基因表达的效果及生物学效应。方法利用Lipofectamine2000将构建的pSi-EGFR载体转入A549细胞中,应用实时定量荧光PCR、免疫荧光和流式细胞仪检测EGFR基因mRNA和蛋白水平的表达,并采用四甲基偶氮唑蓝显色法(MTT)、集落形成实验观察细胞生长变化。结果pSi-EGFR可显著抑制A549细胞中EGFR基因的表达;转染pSi-EGFR细胞生长抑制率为67.8%,集落形成抑制率为59·4%。结论pSi-EGFR载体能够在A549细胞中引发RNA干扰(RNAi)效应下调EGFR基因表达来抑制细胞增殖。

湖南地区238例非小细胞肺癌EGFR基因突变状态分析

目的：评价湖南地区非小细胞肺癌患者EGFR基因突变状态及其与临床特征之间的关系。方法收集2012年1月至2013年6月中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院手术切除的非小细胞肺癌石蜡包埋组织238例，采用PCR扩增结合直接基因测序的方法，对组织DNA中EGFR基因第18-21外显子突变进行检测。结果在238例非小细胞肺癌中，EGFR突变的检出率为35.3％（84/238）。其中，第18、19、20、21号外显子突变占总突变的比例分别为2.4％（2/84）、67.9％（57/84）、3.6％（3/84）、26.2％（22/84）。19号外显子的突变均为第746-753密码子的碱基缺失，以Del E746-A750为主；21号外显子突变类型以L858R为主。女性EGFR基因的突变率显著高于男性，不吸烟者显著高于吸烟者（P〈0.05）。而EGFR基因的突变率与非小细胞肺癌患者的年龄、临床分期和淋巴结转移均无相关性（P〉0.05）。结论湖南地区的非小细胞肺癌EGFR基因突变以19、21外显子为主，且19外显子的突变率高于21外显子，多见于女性、腺癌、不吸烟患者。

非小细胞肺癌原发灶与相应转移灶之间EGFR基因突变状况的不一致性研究

背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变是晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者获益于酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)治疗的预测因子,本研究旨在探讨NSCLC原发灶与相应转移灶之间EGFR基因突变状况的不一致性。方法应用TaqManRT-PCR的方法检测35例病理确诊为NSCLC患者原发灶和相应转移灶的EGFR基因突变状况。结果原发肺癌病灶中有29例为EGFR基因突变型,余下6例为EGFR野生型。35例转移灶中18例为EGFR基因突变型,17例为EGFR野生型。35对配对标本中,11对(31.43%)标本出现原发灶EGFR基因突变,而转移灶为EGFR基因野生型,18对原发灶及转移灶均为EGFR基因突变型,且突变具体位点相同,6对原发灶及转移灶均为EGFR基因野生型。NSCLC原发灶与转移灶的EGFR基因表达不一致率为31.43%(11/35,P=0.008)。结论 NSCLC原发灶与转移灶的EGFR基因表达存在不一致性。

HER2和EGFR基因在胃癌组织中的状态及其与临床病理的关系

目的:探讨胃癌组织中HER2和EGFR基因扩增及其临床意义.方法:采用FISH技术和免疫组织化学SP法检测52例胃癌组织中HER2和EGFR基因及其蛋白的表达.结果:FISH检测HER2基因扩增率17.3%(9/52),HER2基因无扩增的43例中三体者3例、四体者7例、多体者6例,HER2基因拷贝数增加和基因扩增者共48.1%(25/52).HER2蛋白表达率42.3%(22/52),在HER2蛋白表达+++、++者中HER2基因扩增比例分别为2/3和4/7与+者3/12比较差异有统计学意义(P<0.05).FISH检测EGFR基因扩增率26.9%(14/52),EGFR基因无扩增的38例中三体者2例、四体者9例、多体者10例,EGFR基因拷贝数增加和基因扩增者共67.3%(35/52).EGFR蛋白表达率55.8%(29/52),在EGFR蛋白表达+++、++者中EGFR基因扩增比例分别为4/5和6/8与+者4/16比较差异有统计学意义(P<0.05).HER2和EGFR基因二者均异常(基因扩增和拷贝数增高)36.5%(19/52).HER2和EGFR基因扩增率与胃癌的浸润深度、淋巴结有无转移差异有显著性;与组织学类型、发病年龄、性别差异无显著性.结论:HER2、EGFR基因异常有其相关性,可作为胃癌诊断和预后的重要参考指标;检测HER2、EGFR基因扩增对指导临床制定个体化治疗方案有重要意义.

胸水细胞块EGFR基因突变检测在非小细胞肺癌中的临床意义

目的探讨应用实时荧光定量PCR方法检测非小细胞肺癌阳性胸水细胞块EGFR突变的临床意义。方法收集具有组织标本作为对照的非小细胞肺癌阳性胸水60例,制作细胞块,提取DNA,应用实时荧光定量PCR法同时对细胞块和组织标本的EGFR第19外显子(19-Del)和21外显子(L858R)突变进行检测,分析细胞块与组织标本的EGFR突变率的差异。结果胸水细胞块中EGFR突变率为35%(21/60),其中19-Del突变11例,L858R突变9例,19-Del和L858R双突变1例;组织标本中EGFR突变率为36.7%(22/60),其中19-Del突变12例,L858R突变9例,19-Del和L858R双突变1例。两种标本的EGFR突变率差异无统计学意义(P>0.05);胸水细胞块EGFR突变类型与其对应的组织标本相一致。结论胸水细胞块与组织样本在EGFR基因突变上具有较高的一致性。

云南不同地区非小细胞肺癌EGFR基因突变检测分析

目的探讨云南不同地区非小细胞肺癌（NSCLC）患者的表皮因子生长受体（EGFR）基因突变情况。方法收集2012年5月～2015年1月本院云南不同地区NSCLC患者手术标本250例，其中昆明86例，宣威81例，其他地区83例。运用ARMS-Taqman探针法检测标本中EGFR基因突变情况。结果昆明地区86例中，48例（55．8％）存在EGFR基因突变，其中19Del、L858R占总突变的81．3％（39／48），有4例同时存在19Del、L858R突变；宣威地区81例中，43例（53．1％）存在EGFR基因的突变，其中19Del占总突变的14．0％（6／43），L858R占总突变的34．9％（15／43），G719X及S768I占总突变的41．9％（18／43），有4例同时存在G719X、S768I双突变；其他地区83例中，40例（48．2％）存在EGFR基因的突变，其中19Del、L858R占总突变的77．5％（31140）。结论云南大部分地区EGFR基因突变情况与国内报道一致，主要以EGFR基因19Del及L858R突变为主；而宣威地区NSCLC患者中，EGFR基因突变主要以L858R为主，19Del的突变低于云南其他地区。S768I则明显高于云南其他地区。

血浆EGFR基因突变指导进展期肺腺癌的靶向治疗

目的:研究进展期肺腺癌患者血浆中EGFR基因突变与小分子酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)吉非替尼(gefitinib,又称易瑞沙Iressa)治疗进展期肺腺癌患者疗效间的关系。方法:选择上海交通大学医学院附属第三人民医院肿瘤科一线治疗失败后的44例进展期肺腺癌患者(男32例,女12例)和15位健康志愿者(男11例,女4例)。采集受试者血浆,利用改良酚-氯仿方法提取血浆DNA,利用突变富集型PCR(mutatant-enriched PCR,ME-PCR)扩增EGFR基因外显子19和21,然后进行基因测序。分析肺腺癌患者EGFR基因突变与与患者年龄、性别、吸烟史、体力状况(performance status,PS)评分、临床分期、是否接受放疗、一线化疗周期数间的关系,Kaplan-Meier法和Log-rank检验分析EGFR基因突变组与EGFR野生型组接受吉非替尼治疗的PFS和疗效差异。结果:44例肺腺癌患者血浆中有13例检出EGFR基因突变,其中外显子19缺失突变8例、外显子21点突变5例;健康对照组中未发现EGFR基因突变。肺腺癌患者EGFR基因突变与患者性别、吸烟史相关,与患者年龄、PS评分、分期、是否接受放疗及化疗周期数无关。EGFR基因突变的肺腺癌患者经吉非替尼治疗后中位无疾病进展时间(PFS)明显长于无EGFR突变患者(8个月vs3.7个月,P=0.008)。结论:进展期肺腺癌患者血浆中EGFR基因突变检测可以作为分子靶向药物治疗的参考。

非小细胞肺癌患者EGFR基因突变与CT征象及临床特征的关系

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLCs)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与CT征像及临床特征的关系。方法回顾性分析2014年9月—2016年7月我院收治的187例接受EGFR突变基因检测的NSCLCs中腺癌患者的临床资料,其中EGFR有效突变67例(有效突变组)、未有效突变120例(非有效突变组)。2组患者临床资料肺部CT影像学资料完整,分别采用单因素和多因素Logistic回归分析NSCLCs患者发生EGFR的影响因素。结果与非有效突变组比较,EGFR有效突变组中女性患病比例较高,吸烟指数较低,患者肺组织病灶CT表现为边缘较清晰,呈现分叶、毛刺,病灶多含有磨玻璃影(GGO)成分,伴有气道支气管征和胸膜凹陷征的表现,并易伴发癌性淋巴管炎和肺转移(均P<0.05)。2组肺组织出现坏死、空洞、钙化、晕征和空泡征的比例差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析显示,女性、含有GGO成分、毛刺、有气道受累、癌性淋巴管炎是NSCLCs患者发生EGFR有效突变的危险因素。结论 EGFR有效突变好发于女性,其CT的可靠预测征象为含有GGO成分、毛刺、含气支气管征、癌性淋巴管炎。对临床中不易获取病理的危重患者,进行EGFR有效突变的CT影像学评估及预后预测具有一定指导意义。

非小细胞肺癌患者血清EGFR基因突变循环DNA检测的临床研究

目的:探讨非小细胞肺癌患者血清EGFR基因突变循环DNA检测的临床意义。方法:选取2011年1月-2014年5月于我院接受治疗的124例非小细胞肺癌患者为研究对象,收集血清及组织标本DNA,检测DNA EGFR基因突变情况。结果:124例非小细胞肺癌患者血清EGFR基因检测结果显示:19号外显子突变11例,21号外显子突变8例,血清总检出19例,检出率为15.3%。组织样本中EGFR基因检测结果显示:19号外显子突变27例,21号外显子突变13例,血清总检出40例,检出率为32.3%。在组织样本中,79例男性EGFR基因突变检出14例,比例为17.7%;45例女性EGFR基因突变检出26例,比例为57.8%,相比具有显著性差异(P<0.05)。76例吸烟史患者检出突变16例,比例为21.1%;48例无吸烟史者检出突变24例,比例为50.0%,两者相比差异显著(P<0.05)。血清样本检测中结果与组织样本基本吻合,在性别和吸烟史方面患者基因突变有显著性差异(P<0.05),在癌症分期及类型方面无显著性差异(P>0.05)。结论:非小细胞肺癌患者血清循环DNA检测EGFR基因突变与肿瘤组织检测具有高度的一致性,这对肺癌患者的诊断、筛查和治疗有着重要的意义,为临床检测提供方便、有效的诊断方法。

非小细胞肺癌患者外周血与组织中EGFR基因突变的研究

目的检测非小细胞肺癌患者外周血与肿瘤组织EGFR基因突变率及两者的一致性,探讨外周血EGFR基因突变的临床应用价值。方法应用实时荧光定量PCR方法检测453例非小细胞肺癌组织,229例非小细胞肺癌外周血,其中132例外周血标本和组织标本配对,检测其中EGFR基因突变,比较外周血和组织标本突变一致性,分析EGFR基因突变和患者临床特征相关性。结果外周血标本中检测出66例突变(28.82%),组织中185例突变(40.84%),两种标本一致性为84.09%,差异有统计学意义(Kappa=0.652,P=0.000)。结论非小细胞肺癌患者外周血与组织EGFR基因突变一致性较高,在无法获得组织学标本时可以检测外周血EGFR基因状态,为非小细胞肺癌的临床诊疗提供帮助。

化疗药物对晚期非小细胞肺癌患者血清EGFR基因突变的影响

目的检测晚期非小细胞肺癌患者化疗前后血清EGFR基因外显子19和外显子21的突变状态,探讨化疗药物对血清EGFR基因突变状态的影响。方法 48例非小细胞肺癌患者均接受了至少4-6周期的全身化疗,应用磁珠法提取患者化疗前后的血清游离DNA,RT-PCR技术扩增患者血清游离DNA中EGFR外显子19和外显子21,所有扩增样本均经基因测序法验证EGFR基因突变状态,分析EGFR基因外显子19和外显子21化疗前后突变状态。结果 48例肺癌患者化疗前后血清EGFR的突变以外显子21为主,化疗前后外显子19和外显子21的突变率无显著性差异(P>0.05),血清EGFR的突变状态与患者病理类型具有相关性(P<0.02),但与性别无关(P>0.05),化疗前血清EGFR基因突变率为35.4%(17/48),化疗后血清EGFR基因突变率为43.8%(21/48),化疗前后患者EGFR基因突变的一致率为62.5%(30/48),化疗前后EGFR基因的突变率无统计学差异(P>0.05),在不一致的18例患者中,7例患者由化疗前的EGFR突变阳性变为阴性,11例患者由化疗前的EGFR突变阴性变为阳性。结论化疗药物可能导致肺癌患者血清EGFR基因突变的改变,对于一线化疗后拟应用EGFR-TKI治疗的患者宜动态观察血清EGFR基因的变化,避免患者治疗的盲目性。

盐酸埃克替尼治疗体力状况较差EGFR基因状态不明肺腺癌的临床疗效

目的评价埃克替尼治疗EGFR基因状态不明体力状况较差晚期肺腺癌患者的疗效及安全性。方法分析2012年8月至2014年8月在重庆市肿瘤研究所就诊的27例美国东部肿瘤协作组一体力状况（ECOG-PS）评分大于或等于2分的晚期EGFR基因状态不明肺腺癌患者，口服盐酸埃克替尼125mg，3次／d，评价近期疗效和不良反应，计算生存率。结果27例患者，客观缓解率（ORR）为29．6％，疾病控制率（DCR）为81．5％，中位无进展生存期（PFS）6个月。ECOG-PS评分得到改善的比例为70．4％，治疗前、后比较差异有统计学意义（Z=-2．157，P=0．031）。毒性反应主要为Ⅰ～Ⅱ度的皮疹、乏力、纳差及腹泻。结论埃克替尼治疗ECOG-PS≥2分、EGFR基因状态不明的晚期肺腺癌患者，不良反应未明显增加，耐受性良好，患者可以从埃克替尼的治疗中明显获益。

重叠PCR法构建宫颈癌相关的EGFR基因G719S和T790M融合重组载体

目的构建包含与宫颈癌相关的EGFR基因G719S和T790M位点重组p MD19-exon18-exon20载体,为制备突变型EGFR基因重组载体提供模板。方法以健康人全血基因组DNA作为模板,设计2对有重叠互补区的特异性引物,对EGFR基因的exon18和exon20两片段分别进行扩增,用重叠PCR技术将exon18和exon20片段进行连接,再将连接产物exon18-exon20片段插入p MD19-T质粒,构建成野生型p MD19-exon18-exon20载体,转入至大肠埃希菌感受态细胞DH5α中进行表达,利用菌液PCR和基因组测序进行鉴定。结果琼脂糖凝胶电泳结果显示,exon18和exon20两位点扩增片段在778 bp和596 bp处有清晰的目的条带,两片段的融合产物exon18-exon20片段可在1 374 bp处见一清晰目的条带;经菌液PCR和基因组测序结果鉴定,EGFR基因融合重组质粒均与预期结果一致。结论利用重叠PCR法将exon18和exon20片段进行融合,且成功构建了EGFR基因重组表达载体。

三种方法获取胸水细胞蜡块中肿瘤细胞进行EGFR基因检测

随着分子生物学技术的广泛应用，肿瘤的分子检测与临床靶向用药为患者提供新的治疗。目前，肺癌已进入精准治疗时代，方案及药物的选择是根据其组织学亚型和分子学检测结果共同制定。

高分辨率熔解曲线分析技术检测EGFR基因突变方法的建立及其初步临床应用

目的建立高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)分析技术检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变的方法,并探讨其的临床应用价值。方法建立HRM技术检测EGFR基因突变方法,并用其检测200例非小细胞肺癌患者肿瘤石蜡包埋标本,并与测序法的结果进行比较。结果所建HRM检测方法 Tm与ct值的CV值均较小,重复性好。HRM法检测标本EGFR基因突变的结果与测序法相比,突变总检出率分别为40.0%和37.0%,敏感性为100%,特异性>95%。结论 HRM法检测EGFR基因突变,敏感性高,特异性强,重复性好,操作简便,节约时间,成本低,适用于临床。