新型的华支睾吸虫病快速—ELISA诊断试剂盒现场应用评价

为对新型的华支睾吸虫病快速－ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒首次现场应用进行评价．在本病流行区选２５９名职工．以双盲法用粪便清水沉淀法进行对照检测，抗体阳性率５０．２％（１３０／２５９）．虫卵阳性率４７．５％（１２３／２５９）．两者无显著性差异。其中两法均阳性１０６例．阳性符合率８６．２％．两法均阴性１１２例．阴性符合率８２．４％．总符合率８１．２％．与我省常规ＥＬＩＳＡ法结果相近．显示试剂盒有良好的应用价值．特别适用于乡、镇卫生院。

鸡传染性法氏囊病间接ELISA诊断试剂盒的研制及初步应用

采用 vero细胞增殖的 IBDV抗原建立了间接 EL ISA,用于定量检测 IBDV抗体。对该方法进行了标准化研究 ,确立了该方法的最佳工作条件。在此基础上研制了相应的诊断试剂盒 ,并对盒内各组分的性状、保存、质量控制以及诊断试剂盒的特异性、敏感性、可重复性、符合率、与国外同类产品的比较、保存期等进行了全面、详细的研究。结果表明 ,研制的试剂盒在 - 2 0℃保存至 6个月时各项性能都很好。该试剂盒与进口试剂盒对同样血清样品检测 ,符合率为86 .7%。间接 EL ISA试剂盒与琼扩试验的符合率为 92 .5 %。该试剂盒可对大量血清样品进行检测 ,操作简单方便、结果特异性强、敏感性高、快速 ,更适合于大型鸡场 IBD免疫抗体水平的监测及现地疫病诊断等需要。

鸡传染性鼻炎单抗阻断ELISA诊断试剂盒的研究

本研究在单抗阻断ELISA方法的基础上成功地建立了鸡传染性鼻炎阻断ELISA诊断试剂盒，结果证明，本盒具有较子的敏感性、特异性和重复性，在对临床病鸡、人工感染鸡和免疫鸡的检测中，A型检出率可高达75％-90％，C型的检出率也可达到60％。试剂盒在37℃可保存7天以上，4℃可保存10个月，-20℃可保存1年以上。是一种适合推广应用的良好的鸡传染生鼻炎诊断产品。

禽流感间接ELISA诊断试剂盒的研制及应用

将成熟的禽流感间接ELISA快速诊断技术试剂盒化 ,确定其外包装、规格、盒内组成 ,对盒内各组分的性状、保存、质量控制以及诊断试剂盒的特异性、敏感性、可重复性、符合率、与国外同类产品比较、保存期等进行了全面、详细的研究。试剂盒由 9种成套试剂组成 ,在 - 15℃至 - 2 0℃保存 5 40天各项性能仍然很好。该试剂盒与进口禽流感间接ELISA诊断试剂盒对同样血清样品检测 ,符合率为 10 0 %。拥有该试剂盒 ,只需准备生理盐水 ,即可对大量血清样品同时进行检测 ,操作简单方便、结果特异性强、敏感性高、稳定、快速 ,更适合于禽流感免疫抗体的监测及现地疫病诊断等需要。先后制备诊断试剂盒 16个批次 ,已成功应用于我国省、市兽医站、兽医研究所、农业院校、农科院、农业公司、口岸检疫部门及鸡场等各领域对禽流感的定性诊断、流行病学调查、免疫抗体监测等。

旋毛虫基因重组抗原快速ELISA诊断试剂盒的研究

用旋毛虫基因重组抗原 (TSRA)建立了诊断猪旋毛虫病的快速ELISA诊断试剂盒。用TSRA和旋毛虫肌幼虫排泄 -分泌抗原 (ES)分别对 12份人工感染旋毛虫病猪血清进行快速ELISA检测 ,阳性率为 10 0 %。在猪旋毛虫病发病区随机采集 10 3份血清和肉样 ,分别用TSRA和ES作抗原对血清进行快速ELISA检测 ,结果显示 ,它们与肌肉消化法的诊断符合率分别为95 12 %和 96 3%。研究证明 ,用TSRA组装的诊断试剂盒具有良好的灵敏性、特异性和重复性。

猪戊型肝炎ELISA诊断试剂盒的研制及应用

本试验旨在建立有效的针对猪戊型肝炎病毒(HEV)的诊断技术及试剂盒。作者建立了应用猪HEVORF3筛选出来的一段序列合成肽swHEV11检测HEV血清抗体的间接ELISA诊断方法,确定的抗原最适包被浓度为3μg·mL-1;血清最适稀释度为1∶10,作用时间为30min;酶标抗体最适稀释度为1∶12000,作用时间为60min。用HEV ORF3合成肽swHEV11研制的猪HEV ELISA诊断试剂盒,与北京万泰试剂盒检测比较,符合率为73.4%(205/279),灵敏度和特异性分别为73.3%(200/273)和83.3%(5/6)。该试剂盒批内重复的变异系数<10%,批间变异系数<20%。结果表明,该方法的建立和所研制的猪戊型肝炎诊断试剂盒灵敏度高,特异性强,稳定性合格,为猪戊型肝炎病毒抗体的检测和流行病学的调查提供了一种简便快速的血清学诊断方法。

禽流感病毒夹心ELISA诊断试剂盒的研制及应用

将成熟的禽流感病毒(AIV)夹心ELISA快速检测方法组装成诊断试剂盒.试剂盒由1～11号试剂、一块酶标板和一份说明书组成.对试剂盒内各组份进行了特异性、敏感性、重复性及保存期的测定.结果表明,在-10℃下能保存6个月,而且特异性强、敏感性高、重复性好,操作简单、方便,能快速、准确地检测出样品中是否带有AIV抗原.先后制备了8个批次的诊断试剂盒,于湖北、安徽及河南等地的养禽场、兽医站、农科院、农业院校等化验室应用,取得了良好的效果.

华支睾吸虫病快速ELISA诊断试剂盒的建立

本文报告一种华支睾吸虫病快速诊断试剂盒。全程操作１５ｍｉｎ，内容完善，使用简便，可肉眼判断结果及用自来水洗涤。敏感性９２．１０％（４１７／４５３），假阳性率２．２５％（１１／４８８），优于常规ＥＬＩＳＡ。试剂盒重复性好，稳定性高，４℃存放有效期达６个月。初步现场使用，效果良好。

REV重组env蛋白间接ELISA诊断试剂盒的研制

以纯化的env蛋白为包被抗原,建立了检测REV抗体的间接ELISA(ienv-ELISA)方法。ienv-ELISA工作条件优化结果表明,最佳包被液为CB;最佳封闭液浓度为1%BSA-PBS;最佳抗原包被量为8μg/mL;血清最佳稀释度为1∶300;血清最佳作用时间为1 h;二抗的最佳稀释度为1∶5000;二抗最佳作用时间为1 h;底物最佳显色时间为25 min。重复性试验、特异性试验和对比试验结果显示,建立的ienv-ELISA方法有良好的可重复性,标准差均小于15%;与鸡MDV、ALV、NDV、H5N1、H9N1等病毒阳性抗体均无交叉反应;与REV抗体检测试剂盒(以REV全病毒为包被抗原)对比,所建立的ienv-ELISA诊断敏感性、诊断特异性以及准确率分别为90.625%9、3.75%和92.7%。

猴免疫缺陷病毒(SIV)双抗原夹心ELISA诊断试剂盒的研制及应用

目的研制灵敏、特异的检测血清中猴免疫缺陷病毒(Simian Immunodeficiency Virus,SIV)的双抗原夹心ELISA(dsELISA)诊断试剂盒并进行初步应用。方法采用原核表达系统表达并纯化的人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)包膜蛋白(gp41)作为包被用抗原,建立dsELISA诊断方法。通过优化反应条件和筛选试剂,研制ELISA诊断试剂盒,经敏感性、特异性和重复性试验考核试剂盒的质量,并与美国BIORELIANCE公司试剂盒进行比较,将结果经美国VRL验证,判断本试剂盒与美国BIORELIANCE公司试剂盒两者之间的符合率。结果该试剂盒具有良好的灵敏度、稳定性和准确性。4℃条件下能保存8个月,与其他血清无交叉反应,与美国BIORELIANCE公司试剂盒检测结果的符合率为96%。结论研制成功的实验猴SIV ELISA检测试剂盒可用于临床检测。

猪瘟Dot－ELISA诊断试剂盒的研究

猪瘟Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒的研究黄骏明，朱庆虎（中国农科院哈尔滨兽医研究所）应用与猪瘟病毒有共同可溶性ＰＰ抗原的牛病毒性腹泻病毒ＯｒｅｇｏｎＣ。；Ｖ毒株制备抗原，进行免疫斑点试验（ＤＯｔ－ＥＬＩＳＡ）已成功地用于猪瘟血清抗体的监测［、’］。为了...

猪口蹄疫ELISA诊断试剂盒质量检测

利用参考血清,按试剂盒标明的使用方法,对上海优耐特生物医药有限公司提供的3批猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体和3批猪口蹄疫病毒NS非结构蛋白抗体ELISA诊断试剂盒的敏感性和特异性分别进行了检测。结果表明,2种试剂盒的敏感性和特异性均符合标准规定。

小鼠肝炎病毒抗体Dot—ELISA诊断试剂盒的研制

本文报道以硝酸纤维素膜为固相载体制备的小鼠肝炎病毒（MHV）抗原诊断膜片，用以检测MHV抗体的斑点酶联免疫吸附试验（Dot－ELISA）诊断试剂盒的研制。研究结果表明：试剂盒不仅具有特异性强、灵敏性高、重复性和稳定性好等特点，而且还具有成本低、操作简便快速（2～3h即可作出诊断），结果客观，便于长期保存，不需特殊仪器，肉眼易判定等优点，具有推广和应用价值。本研究在国内尚未见报道。

仙台病毒抗体PPA-ELISA诊断试剂盒的研制和初步考核

实验动物病毒性疾病诊断试剂盒,1980年代已在国外相继问世,并广泛应用于动物微生物学监测和流行病学调查。市售的病毒酶标试剂盒,多采用抗单一动物IgG的酶结合试剂,在检测上受到动物种类的限制。本试剂盒采用葡萄球菌A蛋白酶结合试剂,能检测小鼠、豚鼠和家兔等多种实验动物的仙台病毒抗体。我们在确立最适工作条件的基础上,同国内外同类试剂及常规应用的血凝抑制试验进行了比较,并作了方法学方面的测试。

仔猪大肠杆菌性腹泻3P—ELISA诊断试剂盒的研究区域性试验总结

自1985年以来,我们研制的仔猪大肠杆菌性腹泻3P-ELISA 诊断试剂经田间试验表明,检测结果与传统的细菌分离、玻板凝集反应方法(传统法)成94%以上的符合率。中间试制结果也表明,3P-ELISA 试剂盒检测的特异性强,敏感性高。

仔猪大肠杆菌性腹泻3P—ELISA诊断试剂盒的研究中间试制及检验总结

仔猪腹泻是仔猪的一种主要疾病,给养猪业,尤其是集约化养猪业带来了很大的经济损失。据资料报道,在仔猪腹泻中,约有40%为肠毒素原性大肠杆菌引起。肠毒素原性大肠杆菌产生二种致病因子,即肠毒素(LT,ST)和纤毛粘着素(纤毛抗原)。与仔猪腹泻有关的大肠杆菌纤毛粘着素主要有 K88、K99和987P,F41较少见。