牛耳枫生物碱F21对HepG-2细胞的抑制作用及机制

目的探讨牛耳枫生物碱F21对HepG-2增殖的影响及抗肿瘤作用机制。方法 F21 6.25～100 mg.L-1作用24,48和72 h,MTT法检测细胞抑制率并计算IC50。F21 10～100 mg.L-1作用48 h,瑞姬氏染色光学显微镜下观察细胞形态,琼脂糖凝胶电泳观察DNA的梯形条带,流式细胞仪检测细胞凋亡。F2110,30 mg.L-1+Z-VAD-FMK(胱天蛋白酶抑制剂)20μmol·L-1作用48 h,MTT法检测抑制率。结果 F21可明显抑制HepG-2细胞增殖,其于24,48和72 h的IC50值分别为5.3±0.1,1.3±0.1和(0.13±0.1)mg.L-1,且具有量效(F=232.39,P<0.05)和时效(F=65.59,P<0.05)关系。F21 10～30 mg.L-1可使HepG-2细胞体积增大、胞质内细胞核周围出现大量空泡、细胞膜完整、细胞核破碎甚至细胞形态消失。琼脂糖凝胶电泳未观察到典型的凋亡细胞DNA梯形条带。流式细胞术分析显示,与正常对照组比较,F21 10,30和100 mg.L-1处理HepG-2细胞48 h后,晚期凋亡率分别(17.34±0.01)%,(25.45±0.01)%和(43.67±0.03)%(P<0.05)。Z-VAD-FMK可明显抑制星形孢菌素诱导的细胞死亡。F21 10和30 mg.L-1组的增殖抑制率分别为(18.42±0.09)%和(42.77±0.01)%,而F21 10,30 mg.L-1+Z-VAD-FMK组的增殖抑制率分别为(16.46±0.01)%和(44.01±0.01)%,与相应的F21组相比无统计学差异。结论 F21在体外对HepG-2细胞具有显著的抑制作用,其作用机制并非通过激活胱天蛋白酶途径而诱导肿瘤细胞的凋亡。

响应面法优化降胆固醇马红球菌F21-1的发酵培养基

采用响应面方法,对能够高效降解胆固醇的马红球菌F21-1的发酵培养基进行优化。在前期比较试验已筛选出碳源、氮源及表面活性剂最佳组合的基础上,通过Box-Behnken设计法对这3个因素进行响应面分析,以胆固醇降解率为响应值作响应面和等高线图。结果表明,马红球菌F21-1降解胆固醇发酵培养基添加物最佳成分配比为:胆固醇为1.49 g/L,蛋白胨为7.91 g/L,Tween-80为2.82 mL/L。培养基成分优化后,马红球菌F21-1菌株胆固醇降解率(87.80%)提高了22.53%。

粉尘螨过敏原Derf21的生物信息学分析

目的运用生物信息学方法对粉尘螨过敏原Derf21特征进行分析。方法采用dUStalW2进行同源性分析、MEGA5工具包构建系统进化树、ProtParamTools预测其理化性质、KinasePhos软件预测磷酸化位点。采用PSIPRED预测其二级结构、SWISS-MODEL预测其三级结构。用DNAStar对Derf21的B细胞抗原表位进行预测。利用网络服务器IEDB内相关软件、Preprod、SYFPEITHI、NetMHCII2.2Server和NetMHCIIpan3.0Sever对Derf21蛋白T细胞抗原表位进行预测。结果粉尘螨基因组测序发现本实验室克隆的Derf21基因与Gen-Rank上公布的屋尘螨DerP21(GenBank:ABC73706.1)同源性为71%。系统进化树结果显示：粉尘螨与屋尘螨、棉兰皱皮螨、害嗜鳞螨亲缘关系比较近。磷酸化位点预测显示：Derf21含有1个丝氨酸激酶、1个苏氨酸激酶及1个酪氨酸激酶。二级结构及三级结构预测结果显示Derf21的结构主要以a螺旋为主。B细胞抗原表位预测得到5个肽序列（23.28、39.46、55.71、91.99、127.133)。丁细胞抗原表位预测得到4个肽序列（8.17、72.80、83.91和118.126)。结论对粉尘螨过敏原Derf21的分子特征进行预测，为进一步研究尘螨过敏原的结构成分及其理化性质奠定理论基础。

江山白菇F21品系菇根的生化特性分析

以金属含量、氨基酸组成、差异表达蛋白以及抗氧化酶活性为指标对江山白菇F_(21)品系菇根的生化组成进行了分析。结果表明:与菇身相比,菇根中粗脂肪、铁、磷以及必需氨基酸中的亮氨酸和赖氨酸含量较低,而灰分、砷、钙和镁元素含量较高;通过菇根与菇身的比较蛋白质组学分析,共鉴定出9种差异表达蛋白,涉及双组分信号转导系统、乙酰辅酶A代谢、蛋白质合成、乙醛酸及二羧酸代谢、氮代谢多个生物学过程,同时菇根中的菇毒素含量显著低于菇身;货架期菇根中的抗氧化酶活性较低。

高效除藻真菌云芝F21a遗传转化体系的建立

以蓝藻高效降解菌云芝F21a(Trametes versicolor)为出发菌株,对其原生质体的制备、再生条件及限制性内切酶介导的遗传转化进行研究。结果表明:在PDA培养基上,28℃培养4 d的菌丝最适于原生质体制备;0.6 mol/L KCl为最适等渗条件;30℃混合酶液(2%cellulase+2%snailase+2%lywallzyme)酶解4 h,原生质体产量达到2.375×107个/m L,此时再生率达0.74%。采用限制性内切酶介导技术可将质粒p AN7-1导入云芝F21a的原生质体,在含有150μg/m L潮霉素的RM培养基中能够获得再生菌株,PCR验证初步表明该质粒已经转入云芝F21a原生质体。连续传代转接显示,阳性转基因菌株外源基因可以稳定表达,本结果为研究真菌高效消除蓝藻的分子机制奠定基础。

3110009F21Rik基因在小鼠胚胎发育中的表达研究

目的：探讨小鼠胚胎发育过程中3110009F21Rik基因的时空特异性表达模式,为后续功能研究奠定基础。方法：对E15.5小鼠胚胎脑组织进行印记分析,检测基因的印记表达状态;应用全胚胎和组织原位杂交技术检测3110009F21Rik基因在E9.5~E15.5小鼠胚胎中的特异性时空表达模式。结果：印记分析显示3110009F21Rik基因在E15.5脑组织中为父母本等位基因双表达;原位杂交结果显示3110009F21Rik基因在E9.5~E15.5脑组织中持续表达,在E9.5~E11.5主要脏器中未检测到,但自E12.5开始在主要脏器中持续表达,随着发育进程进行,目的基因在胚胎骨骼中的相对表达水平逐步升高,至E15.5阶段大部分骨骼中都检测到目的基因表达。结论：3110009F21Rik基因在脑组织中的持续表达和表达模式的动态变化提示其可能参与胚胎发育过程中大脑神经网络的构建,其在软骨原基和软骨中的相对表达逐渐增强表明其可能参与了小鼠胚胎过程中骨的发育和形成及软骨分化。

金针菇F21的特性及栽培技术

F21金针菇属白菇类群,我所1987年从日本引进。几年来,通过小区试验和大面积栽培实践,生物效率可达120%以上,其经济效益高于黄色类群的金针菇,菇农乐于种植。(一)形态特征菌丝白色、粗壮、浓密,粉孢子较少。

白色金针菇F21-2母种出菇试验

对2010年底分离金针菇F21-2的各试管菌株,以上一年度保存的菌株为对照,进行出菇试验。以菌丝长势、生长量、菌袋污染率、出菇整齐度、子实体性状、产量等为指标,筛选出优质菌株,供下一年度的菌种生产及栽培使用,并提出了出菇试验一些改进方法。

浅谈F21V领域的检索策略

本文针对F21V领域专利申请的特点进行了较为详细的介绍,对该领域的检索策略进行总结,并结合专利审查过程中的实际案例对检索过程中的策略方法进行分析说明,希望有助于快速提升审查员对该领域的检索效率和审查效率。

高产白色金针菇新品种F21-2的特征特性及栽培技术

新江山白菇F21-2,系以浙江省江山市规模栽培的江山白菇F21-1为育种亲本材料,选择农艺性状、产量等表现型好的江山白菇子实体为组织分离对象,进行逐年的系统选育、定向筛选,选育出的白色金针菇新品种。该品种环境适应能力强,菌丝更耐高温,且种性稳定,是一个高产、优质、抗逆性强的白色金针菇新品种。在栽培技术方面取得了以下突破：一是在早白菇菌丝培育期,改直立培养为转面贴地降温培养,提高了成品率;二是在第一潮菇子实体生长管理阶段,改向菇体直接喷水为沿袋壁补水,提高鲜菇品质,延长货架期;三是在转潮管理中,改直接加水浸泡为倒袋吸湿催蕾,提高了单产。

金针菇F21-2品种生物特性及栽培技术

从2004年开始,笔者以江山白菇F21为亲本材料,经过逐年的系统选育、定向选择,育成了高产、优质、抗逆性强的白色金针菇新品种——江山白菇F21-2,并成为浙江省金针菇常规栽培的当家品种。根据该品种的生物学特性,进一步研究推广其大棚栽培的＂三改＂新技术。即在高温季节菌丝培育中,改菌袋正向直立培养为转面贴地培养,成品率提高2%-3％；在首潮菇管理阶段，

白色金针菇F21-2特征特性及优质高产栽培技术

白色金针菇F21-2是以浙江省江山市规模栽培的江山白菇(F21-1)为育种亲本材料,选择农艺性状、产量等表现较好的江山白菇子实体为组织分离对象,进行逐年的系统选育、定向筛选,选育出的白色金针菇新品种。该品种适应能力强,菌丝更耐高温,且种性稳定,是一个高产、优质、抗逆性强的白色金针菇新品种。并在栽培技术方面取得三项突破,单产大幅提高。

2013年辽宁灯塔M5.1地震地磁异常变化特征

采用地磁谐波振幅比方法和地磁总强度F21相关法对2013年1月23日辽宁灯塔M5.1地震震中周边的铁岭台、营口台、通化台及朝阳台2008年1月至2015年12月的地磁数据进行了计算分析。并利用震中周边16个台站的地磁Z分量数据进行了大区域地磁低点位移异常扫描,分析震前可能出现的短期地震地磁异常。通过不同方法总结了在显著地震发震前出现的中期至短期的不同地磁异常特征,结果显示:4个地磁台站地磁谐波振幅比结果部分周期在发震前2~4 a开始出现下降变化,在转为上升过程中或者上升至高值后发震;地磁总强度F21相关法在地震前有明显的下降异常变化特征;区域地磁低点位移法在震前13天显示了极为明显的分界现象。

新鲜和盐渍F_(21)金针菇的主要成分测定

[目的]研究新鲜和盐渍F21金针菇主要成分的含量。[方法]选取F21金针菇的新鲜和盐渍品,用凯氏定氮法、索氏脂肪提取法等方法对其蛋白质、脂肪、多糖和磷元素进行了测定。[结果]F21金针菇新鲜干品和盐渍品的蛋白质的含量分别为21.63%、15.04%,脂肪含量分别为4.70%、7.94%,多糖含量分别为33.70%、45.28%,总磷含量分别为0.2837%、0.1591%。F21金针菇新鲜干品的蛋白质和磷元素含量均高于其盐渍品,分别高出30.46%、43.91%,而脂肪和多糖的含量则低于其盐渍品,分别减少68.93%、34.36%。[结论]盐渍金针菇是金针菇生产加工的有效途径。

应用于家蚕F2代分离群体的两种连锁作图方法的作图效果比较

构建精细的家蚕分子连锁图谱需要合适的作图方法。应用Mapmaker/EXP3.0和F2lnkgsilk两种作图方法,对家蚕F2代91个个体为分离群体的300个AFLP标记和69个个体为分离群体的470个RAPD标记数据进行了比较分析。用F2lnkgsilk作图方法分析得到的分群数与Mapmaker/EXP3.0作图方法相比有所增加,而总的图距却显著增加,平均图距也有较大的增加,但产生的二联体数基本相同。就单个连锁群而言,两种作图分析方法的连锁标记及其数目80%以上相同,但是标记间的排列顺序70%以上有差异;用F2lnkgsilk作图方法分析得到的单个连锁群的总图距和平均图距也相应增大。

ATCA机箱中业务板电源的监测与控制

对ATCA机箱中业务板电源监测与控制进行研究,采用Lattice公司的电源监控芯片ispPAC-POWR1220AT8来控制其电源状态,并通过管理次级电源模块控制板上各个电压。结合Renesas公司的HD64F2167V微处理器,处理收集到的业务板各个电源状态,通过双冗余的IPMB总线反馈给机箱管理控制器。通过以太网接口可远程监测业务板上各路电压状态。实验结果表明:该系统对电源的监控具有较高的可靠性。

金针菇新品种菌株选育及应用

以江山白菇(F21)为育种亲本材料,经系统选育,育成高产、优质、抗逆性强的白色金针菇新品种—江山白菇(F21-2),菌丝生长温度3℃～33℃,原基分化温度4℃～24℃,子实体正常生长温度5℃～22℃,比同类品种高2℃。新菌株平均单产0.51 kg.袋-1,生物学效率136%,种性稳定,现已成为浙江省金针菇常规栽培的当家品种。

超低功耗TV红外线控制收发器方案设计

使用MSP430F2xx系列芯片设计一种低功耗、低成本的IR红外远程控制收发器。详细介绍收发器完整的中断驱动。在静态模式下,消耗电流为0.1μA。软件设计中,在MSP430F21x1芯片上实现标准的红外控制协议RC5。该软件可以很方便地移植到其他的MSP430系列微处理器中。文中给出了系统软件设计流程图和硬件设计图。

一株高产纤维素酶菌株的分离及鉴定

为了获得高产纤维素酶菌株,提高纤维素资源的开发利用率,将蝗虫肠道内的微生物进行分离,经羧甲基纤维素钠培养基初筛,刚果红鉴别培养基和七叶苷培养基复筛后,获得一株高产纤维素酶的野生菌株F21。经酶活性鉴定,该菌株F21具有较高的滤纸酶活性、羧甲基纤维素酶活性和β-葡萄糖苷酶活性。滤纸酶活性在发酵培养第3 d时达峰值0.212 IU/mL;羧甲基纤维素酶活性在发酵培养第4 d时达峰值1.593 IU/mL;β-葡萄糖苷酶酶活性在发酵培养第6 d时达峰值39.069 IU/mL。结合菌株的生长形态特征和分子生物学鉴定,确定菌株F21为烟管菌。