FABP4沉默通过调节PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路对妊娠糖尿病大鼠内质网应激和胰岛素抵抗的影响

目的:探讨脂肪酸结合蛋白4(FABP4)沉默通过调节蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/真核细胞启动因子2α(eIF2α)/转录因子4(ATF4)/C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路对妊娠糖尿病(GDM)大鼠内质网应激(ERS)和胰岛素抵抗(IR)的影响。方法:腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立GDM大鼠模型。通过尾静脉注射FABP4 siRNA质粒(si-FABP4)、阴性对照质粒(NC)和PERK激活剂(CCT020312),将大鼠随机分为Normal组、GDM组、GDM+NC组、GDM+si-FABP4组、GDM+si-FABP4+CCT020312组。检测胰腺组织中FABP4含量、血脂水平、炎症标志物水平和氧化应激标志物水平,检测胰腺组织中PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路相关蛋白表达。HTR-8/SVneo细胞分为5组:对照(Control)组、高糖(HG)组、HG+NC组、HG+si-FABP4组、HG+si-FABP4+CCT020312组,24 h后检测细胞中FABP4及PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路相关蛋白表达。结果:与Normal组相比,GDM组大鼠血清和胰腺组织中FABP4水平显著上调(P<0.05)。FABP4沉默显著降低了FBG和IR,并伴有血脂、CRP、TNF-α、IL-6及MDA水平降低和SOD、CAT水平升高(P<0.05)。此外,FABP4沉默减轻了胰腺和胎盘组织损伤。而CCT020312上调PERK、eIF2α磷酸化水平和ATF4、CHOP蛋白表达后,FABP4沉默对GDM大鼠IR、炎症、氧化应激以及胰腺和胎盘损伤的抑制作用均被逆转(P<0.05)。FABP4在HG诱导的HTR-8/SVneo细胞中上调表达,沉默FABP4可抑制PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路蛋白表达,CCT020312则逆转这种变化(P<0.05)。结论:FABP4沉默通过抑制炎症和氧化应激,改善GDM大鼠的IR和ERS,其机制与抑制PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路有关。

血清Fetuin-A联合FABP4预测2型糖尿病患者肾病发病风险的价值

目的探讨血清血清胎球蛋白A(Fetuin-A)联合脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4,FABP4)预测2型糖尿病患者糖尿病肾病发病风险的价值。方法选取2021年8月至2023年7月西安工会医院收治的2型糖尿病患者107例,男55例,女52例,年龄(61.69±9.05)岁。根据尿白蛋白/肌酐比值将患者分为正常白蛋白尿组48例、微量白蛋白尿组39例、大量白蛋白尿组20例。选择50例健康体检者作为健康对照组,男26例,女24例,年龄(60.87±8.24)岁。比较各组基本资料、FABP4、Fetuin-A、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、脂联素水平和血脂血糖相关指标水平。采用方差分析、LSD-t检验、χ^(2)检验。结果正常白蛋白尿组、微量白蛋白尿组和大量白蛋白尿组患者体质量指数(body mass index,BMI)分别为(24.35±3.04)kg/m^(2)、(25.06±3.12)kg/m^(2)、(24.88±2.83)kg/m^(2),均高于健康对照组的(22.48±2.83)kg/m^(2)(均P<0.05);正常白蛋白尿组、微量白蛋白尿组和大量白蛋白尿组患者血清FABP4水平分别为(7.92±1.76)μg/L、(8.46±1.98)μg/L、(9.23±2.05)μg/L,Fetuin-A水平分别为(330.67±44.32)mg/L、(385.38±49.15)mg/L、(413.10±56.28)mg/L,CRP水平分别为(4.77±1.34)mg/L、(5.83±1.96)mg/L、(6.59±2.17)mg/L,均高于健康对照组的(6.77±1.32)μg/L、(224.56±31.93)mg/L、(2.36±1.11)mg/L(均P<0.05),脂联素水平分别为(7.56±2.31)mg/L、(5.21±2.09)mg/L、(4.33±1.95)mg/L,低于健康对照组的(11.12±2.43)mg/L(均P<0.05);正常白蛋白尿组、微量白蛋白尿组和大量白蛋白尿组患者空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)分别为(8.23±2.79)mmol/L、(8.48±3.18)mmol/L、(8.51±3.26)mmol/L,糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,type A1C,HbA1c)分别为(8.79±1.35)%、(8.96±1.47)%、(9.04±1.52)%,低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)分别为(3.35±0.71)mmol/L、(3.26±0.72)mmol/L、(3.51±0.77)mmol/L,总胆固醇(total cholesterol,TC)分别为(5.15±0.97)mmol/L、(5.08±0.95)mmol/L、(5.18±0.97)mmol/L,三酰甘油(triacylglycerol,TG)水平分别为(1.69±0.73)mmol/L、(1.82±0.85)mmol/L、(1.84±0.79)mmol/L,均高于健康对照组的(4.52±0.67)mmol/L、(5.18±1.03)%、(2.28±0.57)mmol/L、(4.52±0.85)mmol/L、(1.24±0.42)mmol/L(均P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平分别为(1.12±0.47)mmol/L、(1.15±0.50)mmol/L、(1.17±0.48)mmol/L,低于健康对照组的(1.36±0.28)mmol/L(P=0.030);正常白蛋白尿组、微量白蛋白尿组和大量白蛋白尿组患者餐后2 h血糖差异无统计学意义(P>0.05);2型糖尿病患者肾病发病风险随着血清Fetuin-A、FABP4水平升高而增加(均P<0.05);血清Fetuin-A联合FABP4预测2型糖尿病患者肾病发病风险的曲线下面积(AUC)为0.873(95%CI 0.782~0.963,P<0.001),灵敏度85.17%,特异度84.44%。结论血清Fetuin-A联合FABP4预测2型糖尿病患者肾病发病风险有较高的特异度和灵敏度,具有一定预测价值。

干扰FABP4基因对绵羊子宫内膜上皮细胞脂质积累及迁移的影响

研究旨在探究脂肪酸结合蛋白4(FABP4)基因对绵羊子宫内膜上皮细胞脂质积累及迁移的影响。设计3条FABP4干扰片段,将片段与pGBplv-U6-mcherry-puro连接构建干扰载体,以空载质粒为对照(NC组),3条干扰重组质粒分别为FABP4-shRNA1、FABP4-shRNA2、FABP4-shRNA3,对重组质粒进行酶切鉴定。质粒转染后RT-qPCR鉴定干扰效率,Western Blot对载体干扰效果进行进一步验证。将载体转染至体外培养的子宫内膜上皮细胞中,BODIPY法检测脂滴聚集情况,使用试剂盒检测细胞中甘油三酯含量,RT-qPCR检测脂代谢及增殖迁移相关基因,细胞划痕试验检测细胞迁移情况。结果显示:所有载体均可有效干扰FABP4基因的表达,其中FABP4-shRNA2载体干扰效果最好。在干扰子宫内膜上皮细胞FABP4基因表达后,与NC组相比,细胞中脂滴聚集能力下降,甘油三酯含量降低,细胞脂质代谢和增殖迁移相关基因mRNA表达下降,划痕愈合速度降低;降低子宫内膜上皮细胞FABP4基因表达后,细胞脂质积累水平及细胞迁移能力下降。研究表明,FABP4基因可能对绵羊妊娠和胚胎正常发育具有重要作用,值得在育种实践中进行更深入研究。

术前血清FOXO1、FABP4水平与非肌层浸润性膀胱癌患者经尿道膀胱肿瘤切除术后灌注治疗疗效的相关性分析

目的:探讨术前血清叉头框蛋白O1(Fork head box protein O1,FoxO1)和脂肪酸转运蛋白4(fatty acid-binding protein 4,FABP4)与非肌层浸润性膀胱癌(Non-muscle invasive bladder cancer,NMIBC)患者灌注治疗疗效的关系。方法:选取2021年1月至2022年10月期间本院收治的68例NMIBC患者作为研究对象。所有患者进行经尿道膀胱肿瘤切除术(Transurethral resection of bladder tumor,TURBT)治疗,患者术后给予表柔比星膀胱灌注。随访12 m,根据最终的病理结果,将患者分为复发组和未复发组。检测对比两组术前血清FOXO1水平和FABP4水平。分析术前血清FABP4水平与TURBT术后膀胱灌注疗效的相关性及诊断价值。结果:68例患者TURBT术后给予表柔比星膀胱灌注,复发率22.1%。复发组术前血清FOXO1水平与未复发组无明显差异(P>0.05);复发组术前血清FABP4水平显著高于未复发组(P<0.05)。以术前血清FABP4水平预测TURBT术后给予表柔比星膀胱灌注治疗后复发的AUC=0.7052。结论:术前血清高FABP4水平提示TURBT术后给予表柔比星膀胱灌注治疗易复发,其用来预测表柔比星膀胱灌注治疗效果有较高价值。

荷斯坦奶牛FABP4基因结构与功能分析

旨在深入了解荷斯坦奶牛脂肪酸结合蛋白4(FABP4)的分子功能,及其在不同组织中的表达规律。以荷斯坦奶牛的乳腺组织为cDNA模板,通过PCR扩增荷斯坦奶牛FABP4基因的编码区序列(Coding sequence, CDS),并进行生物信息学分析;利用qRT-PCR技术检测了FABP4基因在小肠、肝脏、乳腺、心脏、子宫、肾脏及卵巢组织中的mRNA相对表达水平。结果表明,荷斯坦奶牛FABP4基因编码区序列长399 bp,编码133个氨基酸,蛋白质二级结构以β-折叠为主。FABP4蛋白为稳定亲水性蛋白,无跨膜结构和信号肽剪切位点。通过氨基酸同源性分析发现,牛FABP4与绵羊和山羊之间的亲缘关系最近;核质定位表明,FABP4基因可能在细胞质中发挥重要功能。利用STRING对FABP4进行蛋白互作分析发现,与FABP3、PPARG、LIPE等脂质相关蛋白密切相关。qRT-PCR结果显示,FABP4在泌乳中期奶牛的各组织中均有表达,但在奶牛乳腺组织中表达量最高,显著高于其他组织(P<0.05)。本研究为后续深入研究荷斯坦奶牛中FABP4的生物学功能及乳脂调控机制提供了重要的理论依据。

FABP4在胃腺癌患者血清中的表达及其临床意义

目的:探讨脂肪型脂肪酸结合蛋白4(FABP4)在胃腺癌患者血清中的表达及临床意义。方法:选取本院诊断及治疗的37例胃腺癌患者作为研究组,并选取健康体检人员74例作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组人群血清中FABP4的表达。分析血清中FABP4的表达与胃腺癌患者临床病理参数的关系,以及FABP4表达在诊断和预测胃腺癌预后中的作用。结果:胃腺癌患者血清中的FABP4相对表达量明显低于健康对照组(P<0.05)。肿瘤直径≤3 cm患者FABP4表达水平高于肿瘤直径>3 cm患者(P<0.05)。TNMⅢ+Ⅳ期患者血清FABP4水平显著低于Ⅰ+Ⅱ期患者(P<0.05)。淋巴结转移阳性的患者血清FABP4水平低于淋巴结转移阴性患者(P<0.05)。FABP4诊断胃腺癌ROC曲线下面积(AUC)为0.703(P=0.001),灵敏度和特异度分别为73.0%和62.2%,界值为16.21;FABP4诊断胃腺癌淋巴结转移的ROC曲线下面积(AUC)为0.738(P=0.014),灵敏度和特异度分别为95.0%和52.9%,界值为16.37。结论:FABP4在胃腺癌患者血清中低表达,并且低表达FABP4与胃腺癌患者不良预后密切相关,可作为胃腺癌的新型生物标志物和诊断靶标。

FABP4基因在3个贵州地方鸡种中多态性研究

为系统筛查贵州地方鸡FABP4基因多态性。该试验以3个贵州地方鸡种(高脚鸡、百宜黑鸡和乌蒙凤鸡)为研究对象,构建品种DNA池,PCR扩增FABP4基因所有外显子及部分内显子区域,采用直接测序结合生物信息技术检测FABP4基因多态性。结果显示,在3个贵州地方鸡资源群体中共发现C51T和T1751C 2个SNPs位点,其中C51T位于第一外显子区,属于同义突变位点;等位基因频率估算发现,C51T位点在3个地方鸡种中多态丰度较高,T1751C位点在群体中多态丰度低;生物信息学得出,C51T位点突变后,鸡FABP4基因mRNA二级结构发生变化,自由能提升,稳定性降低。该试验成功挖掘出贵州地方鸡FABP4基因外显子及部分内含子区域变异位点,以期为贵州地方鸡分子标记开发利用提供参考。

FABP4基因在阿勒泰羊尾脂沉积与代谢模型中的表达变化规律

FABP4(Fatty acid binding protein 4)参与细胞内脂肪酸的转运和脂肪酸代谢,是当前研究动物脂肪沉积与代谢的热门候选基因。为了研究FABP4基因在绵羊尾脂沉积与代谢中的作用,文章采用生物信息学方法分析了FABP4氨基酸序列在各物种中的保守性;利用半定量RT-PCR方法检测了该基因在阿勒泰羊主要组织中的表达;采用饥饿法成功建立了模拟阿勒泰羊尾脂沉积与代谢的动物模型,利用q PCR和i TRAQ(isobaric tags for relative and absolute quantitation)技术同时验证FABP4基因m RNA和蛋白在阿勒泰羊非饥饿组与饥饿组尾脂中的表达变化。序列分析结果表明,绵羊FABP4氨基酸序列在物种间高度保守,提示FABP4基因可能由于其重要的生物功能而在进化中表现出其物种的保守性。组织表达谱结果显示,FABP4 m RNA在阿勒泰羊肠脂与尾脂中均高丰度表达,暗示FABP4基因可能在脂肪中行驶着重要的生理生化功能。q PCR与i TRAQ结果显示,FABP4 m RNA与蛋白在两种极端条件下尾脂中的表达差异均不显著(P>0.05),表明FABP4基因可能不是绵羊尾脂沉积与代谢两种极端差异表型的决定基因。以上研究结果为进一步研究FABP4基因在绵羊尾脂中的生物功能奠定了基础。

日粮能量和蛋白水平对滩羊脂肪组织PPARγ和FABP4 mRNA表达的影响

旨在研究日粮能量和蛋白水平对滩羊脂肪组织中PPARγ和FABP4mRNA表达的影响。选择健康、体重相近的滩羊112只,公母各半,随机分4组,每组4个重复,每个重复7只羊。参考肉羊饲养标准NY/T（816-2004）,根据生长阶段（22-28、29-35、36-40kg）以目标增重设计标准日粮,每阶段设置0.84×标准（I组）、0.96×标准（II组）、1.08×标准（III组）和1.20×标准（IV组）4个营养水平日粮,分别饲喂4组试验滩羊。于每阶段末每个重复屠宰1只试验羊,取尾部脂肪、肾周脂肪和皮下脂肪组织,通过实时荧光定量PCR检测PPARγ和FABP4mRNA表达水平。结果表明,尾部脂肪组织,在22-28和36-40kg阶段末,II组PPARγ和FABP4mRNA表达量显著高于其他组（P〈0.05）;在29-35kg阶段末,II组FABP4mRNA表达量显著高于其他组（P〈0.05）,且IV组mRNA表达量显著低于其他组（P〈0.05）。肾周脂肪组织,在3个不同阶段末,II组PPARγmRNA表达量显著高于其他组（P〈0.05）,且IV组mRNA表达量显著低于III组（P〈0.05）。在22-28kg阶段末,II组和III组FABP4mRNA表达量显著高于其他组（P〈0.05）;在29-35kg阶段末,II组FABP4mRNA表达量显著高于IV组（P〈0.05）;在36-40kg阶段,I组和II组FABP4mRNA表达量显著高于其他组（P〈0.05）。皮下脂肪组织,在3个阶段末,各组PPARγ和FABP4mRNA表达无显著差异（P〉0.05）。结果表明,日粮能量和蛋白水平对滩羊深层脂肪组织（肾周脂肪）中PPARγ和FABP4mRNA表达的影响大于浅层脂肪组织（皮下脂肪）,对尾部脂肪组织中PPARγ和FABP4mRNA的表达有影响。

秦川牛FABP4基因重组腺病毒载体的构建与鉴定

【目的】旨在通过构建秦川牛FABP4基因的重组腺病毒载体,为在细胞水平研究FABP4基因的功能和作用机制做准备。【方法】根据GenBank收录的牛FABP4基因mRNA序列设计引物,PCR扩增并克隆测序。将目的基因连接到穿梭载体pAdTrack-CMV上并用PmeⅠ线性化后,转化含有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的E.coli BJ5183感受态细胞进行同源重组,得到重组质粒pAd-FABP4,并用PacⅠ酶切鉴定。将经过PacⅠ线性化的pAd-FABP4转染HEK 293A细胞进行病毒包装和扩增,TCID50法测定病毒滴度。【结果】经测序鉴定本次克隆的FABP4序列与GenBank收录的一致。酶切鉴定、绿色荧光观察、PCR及测序检测均证明,重组腺病毒载体构建成功并获得重组腺病毒AD-FABP4,病毒滴度为1.58×109PFU.mL-1。【结论】成功构建了秦川牛FABP4基因重组腺病毒载体并获得高滴度的重组腺病毒。

FABP4转基因牛的分子生物学鉴定

[目的]对前期获得的3头转基因牛进行分子生物学评价,包括转基因阳性鉴定、基因及蛋白表达水平的检测,旨在进一步为转基因牛的安全评价提供一些科学依据。[方法]根据Gen Bank上公布的牛FABP4基因(Gen Bank登录号:NM_174314)m RNA序列,利用兼并密码子对现有FABP4基因进行突变,并构建了p EGFP-C1-FABP4真核表达载体、通过细胞转染、体细胞核移植、胚胎移植技术获得3头转基因牛;分别采集了1号转基因牛不同组织样,2、3号转基因牛与野生型个体8、10、12、14月龄的血液样本,利用RT-PCR技术对所获转基因个体的阳性与否进行了鉴定;同时利用荧光定量PCR技术检测了1号转基因牛不同组织中外源性FABP4基因的表达情况,并分析了2、3号转基因牛在8—14月龄之间,外源性FABP4基因、内源性FABP4基因的变化趋势,并通过叠加转基因牛外源与内源性FABP4基因的表达量,分析了转基因牛和非转基因牛FABP4基因的整体表达水平差异;通过Western blotting技术分析了3头转基因牛外源性FABP4基因的蛋白表达水平。[结果]1对所获得的3头转基因牛RT-PCR检测发现,3头转基因个体各样本均在205 bp处产生条带,而妊娠母牛及阴性对照在205 bp处均未有条带出现,初步表明3头转基因牛均为转基因阳性。2实时定量PCR检测表明,1号转基因牛的外源性FABP4基因在多数组织均有较高表达,其中脂肪组织表达量最高、肾脏和背最长肌次之,肺部的相对表达量极低。3号转基因牛外源性FABP4基因的表达水平高于2号转基因牛,且2、3号转基因牛外源性FABP4基因的表达水平随月龄变化均呈现先上升后下降趋势;在内源性FABP4基因表达水平检测中发现,外源性FABP4基因的转入抑制了转基因牛体内内源性FABP4基因的表达,且随月龄变化转基因牛体内内源性FABP4基因表达水平均呈现上升趋势;野生型牛内源性FABP4基因的表达水平随着月龄变化逐步下降,而转基因牛体内内源性FABP4基因的表达量均低于野生型牛;通过对2、3号转基因牛外源与内源性FABP4基因相对表达量的叠加分析发现,转基因牛FABP4基因整体表达量较野生型大幅升高。3蛋白表达检测结果与m RNA检测结果基本一致,外源性FABP4基因在1号转基因牛除肺部外的各个组织均检测到外源FABP4基因的蛋白表达,其中背最长肌表达量最高;3号转基因牛蛋白表达水平高于2号转基因牛。[结论]获得的3头牛均为FABP4阳性转基因牛,且外源性FABP4基因在体内能够正常表达,转基因牛FABP4表达量较野生型大幅升高,同时外源性FABP4基因的转入抑制了内源性FABP4基因的表达。

慢病毒介导稳定表达FABP4的小尾寒羊成纤维细胞系的构建

构建1株能够稳定表达FABP4的小尾寒羊成纤维细胞系,用于小尾寒羊未来的品种保护、开发与利用,首先利用组织块培养法制备了小尾寒羊原代成纤维细胞,然后利用全基因合成法克隆了绵羊FABP4基因,并构建了过表达FABP4的慢病毒载体。经过包装后,使用获得的慢病毒感染小尾寒羊原代成纤维细胞,并通过嘌呤霉素筛选稳定转染细胞,最后应用Western Blot鉴定FABP4蛋白的过表达水平。结果表明,经过传代2~3次后,得到纯度较高的小尾寒羊原代成纤维细胞。滴度测定表明,当在96孔板中添加病毒原液量为10^(-4)μL时,观测不到荧光。当添加量为10^(-3)μL,能够观测到荧光,说明获得慢病毒的滴度为1×10~6TU/m L以上。利用制备的慢病毒感染小尾寒羊原代成纤维细胞,并经过嘌呤霉素筛选后,在荧光显微镜下所有细胞均能观察到绿色荧光。应用Western Blot分析发现,在对照组几乎检测不到FABP4蛋白的表达,而在病毒感染组则能够清晰的观察到FABP4蛋白的表达,说明成功制备了稳定表达FABP4的小尾寒羊成纤维细胞系。

血清VEGF、FABP4在妊娠期糖尿病早期肾损害诊断中的价值

目的:探讨血清血管内皮生长因子(VEGF)和脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)在妊娠期糖尿病(GDM)早期肾损害的诊断价值。方法:选择63例GDM患者为观察组,42例正常孕妇为对照组,以尿白蛋白排泄率(UAER)为标准,将观察组分为正常蛋白尿组(16例,UAER<20μg/min),微量白蛋白尿组(23例,20μg/min<UAER<200μg/min),大量蛋白尿组(24例,UAER>200μg/min),检测各组血清VEGF、FABP4,受试者工作特征曲线(ROC)分析VEGF、FABP4诊断GDM早期肾损害的效能。结果:血清VEGF、FABP4水平大量蛋白尿组>微量蛋白尿组>正常蛋白尿组(P<0.05)。VEGF、FABP4阳性检出率微量蛋白尿组>正常蛋白尿组(P<0.05)。VEGF、FABP4及联合诊断GDM早期肾损害的灵敏度、特异度、准确度、曲线下面积(AUC)分别为72.4%、72.3%、79.4%、0.617(95%CI0.729～0.931);79.4%、72.8%、81.8%、0.729(95%CI 0.617～0.872);89.4%、82.8%、83.8%、0.894(95%CI 0.829～0.941)。结论:GDM患者肾损害时早期外周血清VEGF、FABP4可出现显著增高,VEGF、FABP4检测有助于诊断GDM早期肾损伤,为临床诊治提供参考依据。

牛fabp3和fabp4基因真核表达载体的构建及在小鼠成肌细胞中的表达

【目的】分别构建牛fabp3和fabp4基因真核表达载体,并观察载体转染小鼠成肌细胞后基因的表达以及对内源fabp3和fabp4基因表达的影响,检测肉质性状形成相关基因在转基因细胞中的表达及对内源功能基因的影响。【方法】以pDsRED质粒为骨架载体,分别将人肌红蛋白启动子与目的基因相连、CMV启动子与红色荧光蛋白报告基因相连构建肌肉特异性表达fabp3基因的载体pDsHF3和表达fabp4基因的载体pDsHF4;用脂质体瞬时转染小鼠成肌细胞,72 h后用2%孕马血清诱导成肌细胞向肌管的分化;利用real-time PCR技术检测转染前后成肌细胞中外源牛fabp3和fabp4基因和内源小鼠fabp3和fabp4基因的表达量。【结果】与对照组相比,小鼠成肌细胞分别转染pDsHF3和pDsHF4表达载体,24 h后外源牛fabp3和fabp4基因均获得高水平的表达,48 h后有所回落;而内源小鼠fabp3和fabp4基因在成肌细胞和诱导分化的肌管细胞中的表达均受到不同程度的影响。【结论】构建的真核表达载体能在成肌细胞中高效表达,外源牛fabp3或fabp4基因的转入能够影响小鼠成肌细胞及肌管中内源fabp3和fabp4基因的表达。

孕妇血清FABP4 PTEN及新生儿脐血中FABP4在妊娠期糖尿病患者中的表达

目的探讨孕妇血清、新生儿脐血中FABP4与血清PTEN在妊娠期糖尿病患者中的表达。方法选取2014年1月至12月保定市妇幼保健院收治的妊娠期糖尿病孕妇30例为妊娠期糖尿病(GDM)组,选取同期正常妊娠孕妇30例对照组。临产前检测两组孕妇血清PTEN、FABP4及其两组新生儿脐血中FABP4的水平,空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)、三酰甘油(TG)、总胆固醇水平;计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(HOMA-ISI),分析比较两组对象上述指标,采用Pearson相关分析法分析PTEN、FABP4、HOMA-IR、新生儿体质量、孕妇血脂水平、孕前BMI相关性。结果 GDM组孕妇临产前BMI、TG、FBG、FINS、HOMA-IR、HOMA-ISI、FABP4、PTEN、新生儿体质量与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。血清PTEN与血清FABP4、HOMA-IR存在正相关(P<0.05),血清FABP4与HOMA-IR存在正相关(P<0.05)。GDM组孕妇血清及新生儿脐血FABP4与新生儿体质量呈正相关(P<0.05)。结论 FABP4、PTEN参与妊娠期糖尿病的发展,在孕期产生胰岛素抵抗过程中发挥了重要的作用。

日粮营养水平对22～40kg滩羊不同脂肪组织中FABP4 mRNA表达影响的研究

为了探讨营养水平对22~40kg滩羊不同脂肪组织中FABP4mRNA表达的影响,为滩羊脂肪代谢的营养调控研究提供基础数据,本试验选择年龄、体重相近的健康滩羊112只,公母各半,随机分为4组,每组4个重复,每个重复7只羊。并参考肉羊饲养标准NY/T（816-2004）,根据生长阶段（22~28kg,29~35kg,36~40kg）,以目标增重设计标准日粮,每阶段设置4个营养水平,日粮能量和蛋白质水平分别为0.84×标准（Ⅰ组）、0.96×标准（Ⅱ组）、1.08×标准（Ⅲ组）和1.20×标准（Ⅳ组）,分别饲喂4组试验滩羊。于每阶段末每个重复屠宰1只试验羊,取尾部脂肪、肾周脂肪和皮下脂肪组织,通过实时荧光定量PCR检测FABP4mRNA表达水平。结果表明：（1）尾部脂肪和皮下脂肪FABP4mRNA的表达量随体重增加呈上升趋势;（2）Ⅰ组中,三个生长阶段滩羊肾周脂肪FABP4mRNA的表达量均显著高于尾部脂肪（P〈0.05）,皮下脂肪FABP4mRNA的表达量在第一阶段和第三阶段显著高于尾部脂肪（P〈0.05）;（3）Ⅱ组中,随着体重增加,尾部脂肪FABP4mRNA的表达量增速较快;（4）Ⅲ组中,随着体重增加,滩羊肾周脂肪FABP4mRNA的表达量增速较慢;（5）Ⅳ组中,第二阶段滩羊皮下脂肪FABP4mRNA的表达量显著高于尾部脂肪和肾周脂肪（P〈0.05）。因此,滩羊首先保证肾周脂肪沉积,且受营养水平影响较小,营养充足（或过剩）有利于增加皮下和尾部脂肪的沉积。

孕早期血清FABP4水平与妊娠期糖尿病和早产风险的关系研究

目的:探讨孕早期血清脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)水平与妊娠期糖尿病(GDM)发展和早产风险之间的关系,为预测GDM及早产发生风险提供依据。方法:选取2021年1~8月在保定市第二医院产科进行常规产检及分娩的601例孕产妇作为研究对象。采用酶联免疫吸附法检测孕早期(<孕13周)血清FABP4水平。相关性分析采用Spearman相关系数法。采用二元Logistic回归模型分析孕早期血清FABP4水平与患者妊娠期糖尿病及早产风险的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估孕早期血清FABP4水平对妊娠期糖尿病及早产风险的预测价值。结果:GDM组血清FABP4水平均高于非GDM组(P<0.05);早产组血清FABP4水平也高于足月组(P<0.05)。经Spearman法分析,血清FABP4水平和Fins(r_(s)=0.115,P=0.005)、C-反应蛋白(CRP)(r_(s)=0.179,P<0.001)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)(r_(s)=-0.113,P=0.006)呈弱相关关系。校正可能的干扰因素后,多因素分析显示,孕早期血清FABP4水平是妊娠期糖尿病和早产的危险因素(P<0.05)。血清FABP4水平对妊娠期糖尿病和早产风险的ROC曲线下面积分别为0.778(95%CI:0.740~0.815)、0.721(95%CI:0.681~0.761)。结论:孕早期血清FABP4水平对预测GDM及早产发生风险具有一定应用价值,可作为重要的生物标志物。

新诊断肥胖2型糖尿病患者血清FABP4及ANGPTL3水平与胰岛素抵抗的相关性研究

目的探讨新诊断肥胖2型糖尿病(T2DM)患者血清FABP4和ANGPTL3水平的变化及其与胰岛素抵抗(IR)和相关代谢指标的关系。方法选择来自佳木斯大学第一附属医院的新诊断为T2DM患者,分为糖尿病非肥胖组(T2DM-NW)(25例)、糖尿病肥胖组(T2DM-OB)(25例),随机选择于佳木斯大学附属第一医院健康体检者,分为正常体质量组(NGT-NW)(20例)和肥胖组(NGT-OB)(20例),用ELISA检测血清FABP4及ANGPTL3水平。结果T2DM-OB组的臀围(HC),空腹胰岛素(Fins),HOMA-IR,FABP4和ANGPTL3水平高于T2DM-NW组、NGT-OB、NGT-NW,差异均有统计学意义(P<0.05);T2DM-NW组空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胆固醇(TC)、HOMA-IR高于NGT-NW组、NGT-OB组,差异有统计学意义(P<0.05);NGT-OB组体质量、体质量指数(BMI)、FPG、FIns、HOMA-IR、FABP4、ANGPTL3高于NGT-NW组(P<0.05);Pearson与Spearman相关性分析提示FABP4与体质量、BMI、腰臀比(WHR)、FPG、FIns、HbA1c、甘油三酯(TG),TC和HOMA-IR、HOMA-β有相关性(P<0.05);ANGPTL3与WHR、FPG、FIns、HbA1c、TG、TC、HOMA-IR、HOMA-β有相关性;血清FABP4与ANGPTL3呈正相关(P<0.05)。结论新诊断T2DM患者血清FABP4和ANGPTL3水平升高;FABP4与ANGPTL3呈正相关;FABP4及ANGPTL3与HOMA-IR呈正相关,提示这两种因素可能在T2DM和胰岛素抵抗的发生中起作用。

含人FABP4基因启动子荧光素酶报告质粒的构建及鉴定

目的构建含有人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)基因启动子荧光素酶报告基因质粒pGL3-Basic-FABP4-promoter,为脂类代谢相关药物研究提供基础。方法根据已知人的FABP4基因启动子序列设计引物,以人DNA为模板,用PCR法扩增出人FABP4基因启动子的DNA大片段。经过限制性内切酶KpnI和XhoI双酶切后插入到pGL3-Basic载体中;测序鉴定;然后将这些重组质粒瞬时转染到K293细胞中,并在24 h后检测其荧光素酶活性。结果构建的含荧光素酶基因的质粒,经酶切及测序鉴定结果显示FABP4启动子插入的位置和序列正确。转染细胞后检测其荧光显示:重组pGL3质粒转录活性较pGL3-Basic质粒明显增强(P<0.001)。结论成功构建了pGL3-Basic-FABP4-promoter质粒,为进一步研究FABP4基因的表达调控提供了工具和基础。

版纳微型猪近交系FABP4基因编码区序列扩增及生物信息学分析

以GenBank中登载的普通猪FABP4基因为参考序列,设计特异性引物,采用RT-PCR技术从版纳微型猪近交系卵巢组织中扩增FABP4基因的编码区序列,经直接测序后采用生物信息学软件对编码区序列和蛋白质结构进行生物信息学分析和结构预测.结果表明:版纳微型猪近交系(BMI)FABP4基因编码区序列长399bp,编码132个氨基酸;BMI FABP4基因同普通猪比对同源性为100%,未发现碱基突变;生物信息学分析表明不同物种FABP4基因编码区核苷酸序列与氨基酸序列具有较高的保守性;蛋白结构预测显示,FABP4蛋白空间结构为由2个α螺旋和10个反向平行的β折叠围成的桶状结构.