LncRNA FEZF1-AS1通过调控EZH2对肺间质细胞增殖、迁移及侵袭的作用

目的研究长链非编码RNA FEZ家族锌指1-反义RNA 1(lncRNA FEZF1-AS1)调控zeste同源物增强子2(EZH2)对肺间质细胞增殖、迁移、侵袭能力及上皮细胞-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法将人肺腺癌细胞系A549分为对照组(control)和模型组[model,用转化生长因子β1(TGF-β1)20 ng/mL作用48 h,诱导成为肺间质细胞]。用Western blot检测细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(vimentin)的蛋白表达。RT-qPCR检测细胞中lncRNA FEZF1-AS1和EZH2基因表达。转染组细胞分为转染si NC组、si lncRNA FEZF1-AS1+OE vector组和si lncRNA FEZF1-AS1+OE EZH2组。CCK-8法检测细胞增殖、细胞划痕检测细胞迁移、Transwell小室法检测细胞侵袭;用Western blot检测细胞中E-cadherin、N-cadherin、vimentin及EZH2的蛋白表达,用RNA免疫沉淀(RIP)测定FEZF1-AS1与EZH2的直接结合作用。结果与对照组比较,模型组E-cadherin的蛋白表达水平减少(P<0.05);N-cadherin及vimentin的蛋白表达水平升高(P<0.05);与对照组比较,模型组lncRNA FEZF1-AS1与EZH2基因的表达水平明显升高(P<0.05);与si NC组相比,si lncRNA FEZF1-AS1+OE vector组细胞增殖、迁移、侵袭能力降低,E-cadherin蛋白表达升高,N-cadherin、vimentin、EZH2蛋白表达降低(P<0.05);与si lncRNA FEZF1-AS1+OE vector组比较,si lncRNA FEZF1-AS1+OE EZHZ组细胞增殖、侵袭、迁移能力升高,E-cadherin蛋白表达降低,N-cadherin、vimentin、EZH2蛋白表达升高(P<0.05);RIP实验进一步证实了lncRNA FEZF1-AS1与EZH2具有结合作用。结论LncRNA FEZF1-AS1通过调控EZH2促进肺间质细胞增殖、侵袭、转移和EMT过程。

LncRNA FEZF1-AS1靶向调控miR-200c-3p对人肺成纤维细胞生物学行为的影响

目的探讨FEZ家族锌指1-反义RNA1(LncRNA FEZF1-AS1)靶向调控miR-200c-3p对人肺成纤维细胞HLF生物学行为的影响。方法采用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导HLF向肌成纤维细胞转化,分为空白对照组(Blank组)和造模组(HLF+TGF-β1组),另根据转染质粒不同将细胞分为Blank组、TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组和TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1组。采用Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和波形蛋白(Vimentin)蛋白的表达。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LncRNA FEZF1-AS1和miR-200c-3p的表达。采用CCK-8法检测细胞增殖,细胞划痕实验检测迁移能力,Transwell实验检测侵袭能力;采用双萤光素酶实验检测FEZF1-AS1与miR-200c-3p的靶向作用关系。结果与Blank组比较,HLF+TGF-β1组α-SMA、CollagenⅠ、Vimentin蛋白表达及LncRNA FEZF1-AS1表达水平升高,miR-200c-3p表达水平降低(P<0.05);与TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组比较,TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1组细胞增殖、迁移、侵袭能力下降,LncRNA FEZF1-AS1表达及α-SMA、CollagenⅠ、Vimentin蛋白表达水平降低,miR-200c-3p表达水平升高(P<0.05);FEZF1-AS1与miR-200c-3p基因序列上存在结合位点。结论LncRNA FEZF1-AS1通过抑制miR-200c-3p促进特发性肺间质纤维化的发生、发展。

Fez家族锌指蛋白1反义RNA1在宫颈癌组织中表达及与患者临床特征及预后的相关性

目的观察长链非编码RNA(LncRNA)Fez家族锌指蛋白1反义RNA1(FEZF1-AS1)在宫颈癌组织中表达,及其与患者临床病理特征及预后的相关性。方法取100例宫颈癌患者的宫颈癌组织及相应的癌旁正常组织,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测FEZF1-AS1 mRNA的相对表达量,并分析其与患者临床特征的相关性;原位杂交染色法检测FEZF1-AS1蛋白的阳性表达率,本分析其与患者3年预后的关系。结果宫颈癌组织中FEZF1-AS1的相对表达量和FEZF1-AS1阳性表达率均明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.01)。低分化、有淋巴结转移的宫颈癌患者宫颈癌组织中PEZF1-AS1 mRNA的相对表达量均明显高于中高分化、无淋巴结转移的宫颈癌患者,差异均有统计学意义(P<0.01)。Spearman相关分析结果显示,FEZF1-AS1的表达与分化程度与呈负相关(P<0.05),与淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。宫颈癌组织FEZF1-AS1阳性表达的宫颈癌患者的3年总生存率为68.42%,低于FEZF1-AS1阴性表达患者的90.32%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论宫颈癌组织中的表达上调,与分化程度、淋巴结转移情况相关,且可能与宫颈癌患者的预后有关。

长链非编码RNA FEZF1-AS1在喉癌中的表达及意义

目的探究长链非编码RNA FEZ家族锌指1反义RNA1(Lnc RNA FEZF1-AS1)在喉癌中的表达及临床意义.方法选取术前未经治疗的喉癌患者78例组织标本作为研究对象,同期取喉癌旁黏膜组织78例作为对照组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测FEZF1-AS1表达水平;分析FEZF1-AS1表达水平与喉癌患者临床病理特征及喉癌患者近3年生存情况;COX回归分析喉癌患者预后的危险因素.结果与喉癌旁黏膜组织相比,喉癌组织FEZF1-AS1表达水平较高(P<0.05);FEZF1-AS1表达水平与性别、年龄、喉癌原发部位、病理学分级无关(P>0.05),与临床分期、T分级、淋巴结转移有关(P<0.05);生存分析发现,FEZF1-AS1高表达喉癌患者中位生存时间为13.60个月,显著短于FEZF1-AS1低表达患者中位生存时间(23.44个月),差异有统计学意义(P<0.05);COX回归分析结果,有淋巴结转移、FEZF1-AS1高表达是喉癌患者不良预后的独立危险因素(HR=1.589,95%CI为1.362~1.854;HR=2.375,95%CI为1.367~4.127,P<0.05).结论FEZF1-AS1在喉癌组织中高表达,是喉癌患者预后不良危险因素,可能成为喉癌患者预后不良的生物监测指标.

T细胞受体γ位点反义RNA 1、人抗原R、三元基序家族蛋白21、缺氧诱导因子-1α在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨T细胞受体γ位点反义RNA 1(TRG-AS1)、人抗原R(HuR)、三元基序家族蛋白21(TRIM21)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法收集103例结直肠癌患者的结直肠癌组织和癌旁组织,采用免疫组织化学染色法检测HuR、TRIM21、HIF-1α表达情况,采用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测TRG-AS1相对表达量。比较结直肠癌组织和癌旁组织中TRG-AS1、HuR、TRIM21、HIF-1α的表达情况,分析TRG-AS1、HuR、TRIM21、HIF-1α表达情况与结直肠癌患者临床特征和预后的关系。结果结直肠癌组织中TRG-AS1相对表达量及HuR、HIF-1α阳性率均明显高于癌旁组织,TRIM21阳性率明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同分化程度、淋巴结转移情况、血管侵犯情况结直肠癌患者结直肠癌组织中TRG-AS1相对表达量比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。不同浸润深度、TNM分期、淋巴结转移情况结直肠癌患者结直肠癌组织中HuR、TRIM21、HIF-1α阳性率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。至随访结束,TRG-AS1低表达患者的累积生存率为55.6%,高于TRG-AS1高表达患者的31.5%(P﹤0.05);HuR阴性患者的累积生存率为56.9%,高于HuR阳性患者的37.0%(P﹤0.05);TRIM21阴性患者的累积生存率为22.4%,低于TRIM21阳性患者的59.0%(P﹤0.05);HIF-1α阴性患者的累积生存率为72.0%,高于HIF-1α阳性患者的36.6%(P﹤0.05)。结论结直肠癌组织中TRG-AS1、HIF-1α及HuR表达均升高,TRIM21表达降低,TRG-AS1、HuR、TRIM21、HIF-1α表达情况与结直肠癌侵袭、转移及患者预后密切相关,对评估结直肠癌患者病情及预后具有一定的临床价值。

lncRNA FEZF1-AS1和IGF2BP1在肝癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)Fez家族锌指蛋白1反义RNA1(FEZF1-AS1)和胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)在肝癌组织中的表达及临床意义。方法:收集行手术治疗的60例原发性肝癌病人的肝癌组织和癌旁组织标本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测肝癌组织、癌旁组织中lncRNA FEZF1-AS1、IGF2BP1 mRNA表达水平;免疫组织化学染色法检测肝癌组织、癌旁组织中IGF2BP1蛋白表达水平;分析肝癌组织lncRNA FEZF1-AS1、IGF2BP1表达水平与临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存分析肝癌组织lncRNA FEZF1-AS1、IGF2BP1表达与肝癌病人生存率的关系;Pearson分析肝癌组织lncRNA FEZF1-AS1与IGF2BP1 mRNA表达水平相关性。结果:肝癌组织中lncRNA FEZF1-AS1、IGF2BP1 mRNA表达水平及IGF2BP1蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.01);肝癌组织中lncRNA FEZF1-AS1与IGF2BP1 mRNA表达水平呈正相关(r=0.602,P<0.01);不同年龄、性别、肿瘤大小、有无肝硬化、乙肝抗原阴阳性水平间lncRNA FEZF1-AS1、IGF2BP1表达差异无统计学意义(P>0.05),临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、低中分化程度和有淋巴结转移的病人lncRNA FEZF1-AS1和IGF2BP1表达水平较高(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,lncRNA FEZF1-AS1高表达组病人3年累积生存率显著低于lncRNA FEZF1-AS1低表达组(31.45%vs 61.40%,P<0.01),IGF2BP1阳性表达组病人3年累积生存率显著低于IGF2BP1阴性表达组(31.18%vs 58.25%,P<0.01)。结论:肝癌组织中lncRNA FEZF1-AS1、IGF2BP1高表达,且二者表达与肝癌病人病理特征和预后有关,可能作为肝癌病人潜在的预后标志物。

LncRNA ZEB2-AS1调控miR-574-3p/ZEB1轴对卵巢癌细胞迁移及侵袭的影响

目的探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)锌指E盒结合同源盒蛋白2反义RNA(LncRNA ZEB2-AS)1对卵巢癌细胞迁移、侵袭的影响及可能的作用机制。方法体外培养人卵巢癌细胞(SKOV3、SW626、A2780)和正常人卵巢上皮细胞(HOSEpiC),实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中ZEB2-AS1、miR-574-3p和锌指E盒结合蛋白(ZEB)1的水平。取对数生长期的SW626细胞,分为对照组、pcDNA3.1-NC组、pcDNA3.1-ZEB2-AS1组、si-NC组、si-ZEB2-AS1组、si-ZEB2-AS1+inhibitor-NC组、si-ZEB2-AS1+miR-574-3p inhibitor组。qRT-PCR检测细胞中ZEB2-AS1、miR-574-3p表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;Western印迹检测细胞ZEB1和迁移、侵袭相关蛋白的表达;双荧光素酶报告基因检测验证ZEB1与miR-574-3p的靶向关系。结果与正常人卵巢上皮细胞HOSEpiC相比,人卵巢癌SKOV3、SW626、A2780细胞中ZEB2-AS1、ZEB1水平明显升高,miR-574-3p水平明显降低(P<0.05),且SW626细胞中ZEB2-AS1表达水平最高。转染后,与对照组相比,pcDNA3.1-ZEB2-AS1组细胞增殖、迁移和侵袭能力及ZEB1、N-钙黏蛋白(cadherin)、波形蛋白(VIM)、基质金属蛋白酶(MMP)-9表达明显升高,E-cadherin表达明显降低(P<0.05);si-ZEB2-AS1组细胞增殖、迁移和侵袭能力及ZEB1、N-cadherin、VIM、MMP-9表达明显降低,E-cadherin表达明显增加(P<0.05)。与si-ZEB2-AS1组相比,si-ZEB2-AS1+miR-574-3p inhibitor组细胞增殖、迁移和侵袭能力及ZEB1、N-cadherin、VIM、MMP-9表达明显升高,E-cadherin表达明显降低(P<0.05)。双荧光素酶结果显示,高表达miR-574-3p可明显抑制ZEB1 WT的荧光素酶活性(P<0.05)。结论在卵巢癌中,LncRNA ZEB2-AS1过表达可能通过下调miR-574-3p,上调ZEB1的表达,进而诱导上皮-间质转化(EMT),促进卵巢癌细胞的迁移与侵袭。

敲减FEZF1-AS1通过阻断JAK2/STAT3通路抑制食管鳞状细胞癌细胞的侵袭和迁移

目的探讨长链非编码RNA Fez家族锌指蛋白1反义核糖核酸1(FEZF1-AS1)与食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞侵袭、迁移以及与Janus激酶2/信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路的关系。方法用实时定量PCR检测ESCC的癌组织和ESCC细胞系中FEZF1-AS1的表达;构建敲减FEZF1-AS1的慢病毒表达载体,敲减KYSE150、KYSE510细胞的FEZF1-AS1后,流式细胞术检测细胞周期的变化,集落形成实验检测细胞增殖能力,TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力,TranswellTM迁移和划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot法检测JAK2和磷酸化的STAT3(p-STAT3)蛋白水平。结果在ESCC的癌组织FEZF1-AS1高表达;与正常食管鳞状上皮细胞相比,KYSE150、KYSE510细胞FEZF1-AS1表达高;敲减FEZF1-AS1表达后,ESCC癌细胞的细胞周期和增殖无明显变化,但明显抑制细胞的侵袭和迁移,且JAK2蛋白水平降低,p-STAT3蛋白水平增加。结论敲减FEZF1-AS1阻断JAK2/STAT3通路抑制ESCC细胞的侵袭和迁移。

LncRNA FAM83H-AS1调控miR-136-5p/HOXC10轴对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)序列相似性家族83成员H反义RNA 1(lncRNA FAM83H-AS1)调控微小RNA-136-5p(miR-136-5p)/同源异型盒基因10(HOX10)轴对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养人胶质瘤细胞U87,对U87细胞转染质粒,并将细胞分为对照组、si-NC组、si-FAM83H-AS1组、miR-NC组、miR-136-5p mimics组、si-FAM83H-AS+NC inhibitor组、si-FAM83H-AS+miR-136-5p inhibitor组、miR-136-5p mimics+HOXC10 NC组、miR-136-5p mimics+HOXC10组。检测胶质瘤组织与细胞U87中FAM83H-AS1、miR-136-5p、HOXC10的表达。细胞计数盒8(CCK-8)法检测U87细胞增殖;流式细胞仪检测U87细胞凋亡;蛋白免疫印迹(WB)法检测U87细胞中HOXC10、Cyclin D1、Bcl-2、Bax蛋白的表达;双荧光素酶报告系统分析miR-136-5p与FAM83H-AS1、HOXC10的靶向关系。结果胶质瘤组织中FAM83H-AS1表达水平显著升高,miR-136-5p表达水平降低(P<0.05);沉默FAM83H-AS1表达或过表达miR-136-5p,U87细胞凋亡率、Bax蛋白表达显著升高,细胞存活率、HOXC10 mRNA、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05);双荧光素酶报告基因显示,miR-136-5p与FAM83H-AS1、HOXC10均有靶向关系;抑制miR-136-5p表达可逆转沉默FAM83H-AS1表达对U87细胞增殖的抑制作用,HOXC10过表达可逆转过表达miR-136-5p对U87细胞增殖的抑制作用。结论FAM83H-AS1通过调控miR-136-5p/HOXC10轴促进胶质瘤细胞增殖,抑制细胞凋亡。

结肠癌患者组织中NCAPD2、Lnc RNA NR2F1-AS1、Nup107表达及其与预后的关系

目的探究结肠癌患者组织中染色体凝缩蛋白复合物I的亚基D2(NCAPD2)、Lnc RNA核受体亚家族2F组成员1-反义RNA1(Lnc RNA NR2F1-AS1)、核孔蛋白107(Nup107)的表达及其与患者预后的关系。方法选择2017年6月至2019年6月在广州中医药大学第一附属医院及暨南大学附属广州市红十字会医院进行根治性切除术的60例结肠癌患者作为研究对象,术中采集患者的结肠癌组织标本和距离结肠癌组织>2 cm的癌旁正常组织标本。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法测定结肠癌组织和癌旁组织的Lnc RNA NR2F1-AS1表达水平,采用免疫组化SP法测定结肠癌组织和癌旁组织的NCAPD2和Nup107表达情况。比较结肠癌组织和癌旁组织的Lnc RNA NR2F1-AS1、NCAPD2、Nup107表达情况,同时比较Lnc RNA NR2F1-AS1、NCAPD2、Nup107不同表达患者的临床资料。采用COX回归模型分析Lnc RNA NR2F1-AS1、NCAPD2、Nup107表达对结肠癌患者预后的影响,采用Kaplan-Meier法绘制结肠癌患者的生存曲线,分析Lnc RNA NR2F1-AS1、NCAPD2、Nup107表达情况与结肠癌患者预后的相关性。结果结肠癌组织的Lnc RNA NR2F1-AS1相对表达量为1.09±0.28,明显低于癌旁组织的0.69±0.09,结肠癌组织的Lnc RNA NR2F1-AS1高表达率、NCAPD2阳性率和Nup107高表达率分别为55.00%、61.67%和70.00%,明显高于癌旁组织的26.67%、30.00%和31.67%,差异均有统计学意义(P<0.05);Lnc RNA NR2F1-AS1高表达和低表达患者、NCAPD2阳性患者和阴性患者、Nup107高表达患者和低表达患者在肿瘤分化程度、浸润程度、淋巴结转移和远端转移方面比较,差异均有统计学意义(P<0.05);COX回归分析结果显示,Lnc RNA NR2F1-AS1、NCAPD2和Nup107表达均是结肠癌患者预后的影响因素(P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,Lnc RNA NR2F1-AS1高表达、NCAPD2阳性和Nup107高表达患者的中位生存期分别低于Lnc RNA NR2F1-AS1低表达、NCAPD2阴性和Nup107低表达患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论Lnc RNA NR2F1-AS1、NCAPD2、Nup107的表达与结肠癌患者的肿瘤分化程度、浸润程度、淋巴结转移和远端转移等临床病理特征有关,三者可能共同参与了结肠癌的发生、发展,对患者的预后造成一定影响。

胃癌组织lncRNA MAFG-AS1、miR-143-3p表达变化及其临床意义

目的观察胃癌组织长链非编码RNA(lncRNA)碱性亮氨酸拉链家族转录因子V-Maf鸟类肌筋膜纤维肉瘤癌基因同源物G-反义核糖核酸1(MAFG-AS1)、微小RNA-143-3p(miR-143-3p)表达变化,并探讨二者表达与患者临床病理特征和预后的关系。方法选择胃癌患者105例,取手术切除的胃癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用RT-qPCR技术检测lncRNA MAFG-AS1、miR-143-3p表达。收集胃癌患者临床病理资料和术后随访资料,分析胃癌组织lncRNA MAFG-AS1、miR-143-3p表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果胃癌组织lncRNA MAFG-AS1相对表达量高于癌旁正常组织,miR-143-3p相对表达量低于癌旁正常组织(P均<0.05)。胃癌组织lncRNA MAFG-AS1、miR-143-3p表达与肿瘤组织分化程度、浸润深度、pTNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与性别、年龄、肿瘤直径无关(P均>0.05)。胃癌组织lncRNA MAFG-AS1表达与miR-143-3p表达呈负相关关系(r=-0.699,P<0.05)。以lncRNA MAFG-AS1、miR-143-3p相对表达量的均数为临界值,将患者分为lncRNA MAFG-AS1高表达者55例与lncRNA MAFG-AS1低表达者50例、miR-143-3p高表达者48例与miR-143-3p低表达者57例。lncRNA MAFG-AS1高表达者3年总生存率低于lncRNA MAFG-AS1低表达者,miR-143-3p高表达者3年总生存率高于miR-143-3p低表达者(χ^(2)分别为4.783、5.383,P均<0.05)。结论胃癌组织lncRNA MAFG-AS1表达上调、miR-143-3p表达下调,二者表达变化与胃癌恶性生物学行为和患者预后不良有关。

FEZF1-AS1在子宫内膜癌中的表达及其与患者临床特征的相关性

目的探讨FEZ家族锌指1反义RNA 1(FEZF1-AS1)在子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)中的表达及其与临床病理的相关性。方法选取2010年1月~2018年1月安康市人民医院收治的172例EC患者为研究对象,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)分别检测患者的EC组织和癌旁正常组织中FEZF1-AS1的相对表达量,并且分析FEZF1-AS1表达水平与EC患者临床特征之间的关系。结果FEZF1-AS1在EC组织中的相对表达量显著高于癌旁正常组织(P=0.007),其表达水平与EC患者家族肿瘤史(χ^2=6.891,P=0.016)、病理分级(χ^2=7.142,P=0.028)、肿瘤分期(χ^2=10.426,P=0.002)、T分期(χ^2=8.248,P=0.007)和M分期(χ^2=10.405,P=0.002)显著相关。结论FEZF1-AS1在EC中高表达,且其与患者的家族肿瘤史、病理分级和肿瘤分期等相关。

LncRNA NR2F1-AS1在结肠癌组织中的表达及其与预后的相关性

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)核受体亚家族2F组成员1-反义RNA 1(NR2F1-AS1)在结肠癌患者中的表达水平及其与预后的相关性。方法:选取本院2015年07月至2017年02月诊治的93例结肠癌患者的癌组织及对应癌旁正常组织进行研究。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测结肠癌组织及对应癌旁正常组织LncRNA NR2F1-AS1表达水平;分析癌组织LncRNA NR2F1-AS1表达水平与结肠癌患者临床病理特征的相关性;采用Kaplan-Meier曲线法分析结肠癌患者癌组织中LncRNA NR2F1-AS1表达水平与结肠癌患者预后的相关性;采用COX回归分析结肠癌预后的影响因素。结果:结肠癌组织LncRNA NR2F1-AS1表达水平明显低于癌旁正常组织(P<0.05);结肠癌患者癌组织LncRNA NR2F1-AS1表达水平与结肠癌患者TNM分期、淋巴结转移、浸润深度、分化程度相关(P<0.05),而与结肠癌患者性别、年龄、肿瘤大小、位置无关(P>0.05);结肠癌患者LncRNA NR2F1-AS1低表达组术后36个月总生存率(OS)、无病生存率(DFS)明显低于LncRNA NR2F1-AS1高表达组OS、DFS(P<0.05);COX回归分析显示,TNM分期、淋巴结转移是影响结肠癌患者预后的独立危险因素(P<0.05),LncRNA NR2F1-AS1是影响结肠癌患者预后的独立保护因素(P<0.05)。结论:LncRNA NR2F1-AS1在结肠癌患者癌组织中表达水平明显降低,且低水平LncRNA NR2F1-AS1与结肠癌患者不良预后密切相关,有利于判定结肠癌患者预后情况。

人类癌症中长链非编码RNA FEZ家族锌指1反义RNA 1作用机制研究进展

越来越多的证据表明,长非编码RNA在肿瘤发生发展中起着关键作用。FEZ家族锌指1反义RNA 1(FEZF1-AS1)是一种与肿瘤密切相关的长非编码RNA,对多种类型的恶性肿瘤产生致病作用,并与肿瘤患者的预后不良及化疗耐药性有关。因此,FEZF1-AS1有可能成为一种新型的癌症临床诊断和预后生物标志物,为肿瘤治疗提供新的分子靶点。本研究利用中国知网和PubMed数据库,在中国知网中以“FEZF1-AS1”“癌症或肿瘤”为关键词,在PubMed中以“FEZF1-AS1”“cancer or tumor”为关键词,分别检索2012-01-01-2023-12-01相关文献。纳入标准:(1)FEZF1-AS1与癌症诊断与治疗;(2)FEZF1-AS1与癌症的发生发展;(3)FEZF1-AS1与癌症的耐药性。剔除标准:重复,及其发表时间较早的综述文章。最终纳入分析文献65篇。研究发现,FEZF1-AS1不仅可以通过海绵化miRNA、引发染色质表观遗传、与蛋白质相互作用、调节信号通路、与mRNA形成双链等5种机制,在胰腺癌、结直肠癌、肝癌、非小细胞肺癌、胃癌、胶质母细胞瘤、宫颈癌、卵巢癌、口腔鳞状细胞癌、喉鳞状细胞癌、视网膜母细胞瘤、骨髓瘤、骨肉瘤、乳腺癌、鼻咽癌、前列腺癌和膀胱癌等17种肿瘤的发生发展中起致病作用,而且与癌症的化疗耐药密切相关。提示FEZF1-AS1具有极好的潜力,有可能成为癌症早期诊断、治疗和改善人类癌症整体预后的重要分子标志物。

肺癌组织中lncRNA ZFAS1和hsa-miR-372-3p的表达与患者恶性特征及预后的关系

目的探究肺癌组织中长链非编码RNA锌指结构反义转录本1(lncRNA ZFAS1)、hsa-miR-372-3p表达水平及与患者恶性特征及预后的关系。方法选取2015年3月至2016年10月在石家庄市人民医院诊治的82例肺癌患者。RT-qPCR检测肿瘤组织和癌旁组织ZFAS1和miR-372-3p的表达,分析ZFAS1、miR-372-3p水平与肺癌患者恶性特征的关系;Pearson分析肿瘤组织中ZFAS1和miR-372-3p的关系;用Kaplan-Meier分析ZFAS1、miR-372-3p水平与肺癌患者预后生存期的关系;COX回归分析对肺癌患者预后产生影响的因素。结果与癌旁组织相比,肿瘤组织中ZFAS1、miR-372-3p表达水平均显著升高(P<0.05)。肿瘤组织ZFAS1、miR-372-3p表达水平与TNM分期、浸润胸膜、是否发生淋巴结转移、肿瘤分化程度有关(P<0.05)。肿瘤组织中ZFAS1和miR-372-3p表达水平呈显著正相关(r=0.477,P<0.001)。ZFAS1和miR-372-3p高表达组患者5年内生存率均明显低于低表达组(P<0.05)。TNM分期、淋巴结转移、ZFAS1、miR-372-3p是肺癌患者发生不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论肿瘤组织中ZFAS1、miR-372-3p呈异常高表达,其高水平与肺癌患者恶性特征及预后不良有关,是肺癌患者预后不良的独立危险因素。

LncRNA ZFAS1作为ceRNA吸附miR-541-3p调控胃癌侵袭转移

目的:本研究旨在探讨长链非编码RNA锌指蛋白反义链1(ZFAS1)作为ceRNA吸附miR-541-3p对胃癌侵袭转移的影响。方法:qRT-PCR对癌旁组织、胃癌组织以及人胃黏膜上皮细胞株、胃癌细胞株中ZFAS1和miR-541-3p的表达进行检测。验证ZFAS1和miR-541-3p的之间的靶向关系。取ZFAS1表达最高的细胞用于后续试验并转染miR-541-3p inhibitor、ZFAS1-shRNA等。MTT检测细胞增殖,Western blot检测侵袭转移相关因子的表达,Transwell测定细胞侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:癌组织中ZFAS1表达增多而miR-541-3p表达减少,ZFAS1能够靶向抑制miR-541的表达(均P<0.05)。抑制ZFAS1表达能够抑制胃癌细胞增殖、侵袭以及侵袭转移相关因子的表达,诱导细胞凋亡,而敲除miR-541-3p后效果则相反(均P<0.05)。ZFAS1-shRNA对胃癌细胞的作用能够被miR-541-3p inhibitor挽救。结论:ZFAS1能够作为ceRNA吸附miR-541-3p,从而抑制胃癌细胞增殖和侵袭转移,促进细胞凋亡。

SLC8A1-AS1靶向调控微小RNA-182-3p及对口腔鳞癌细胞迁移和侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA溶质运载蛋白家族8成员A1反义RNA 1(SLC8A1-AS1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移和侵袭中的生物学作用及其与微小RNA-182-3p(miR-182-3p)的靶向调控关系。方法采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测OSCC组织和细胞(CAL-27、SCC-4、SCC-9和Tca8113)的SLC8A1-AS1和miR-182-3p水平。双荧光素酶报告实验鉴定SLC8A1-AS1和miR-182-3p的相互作用。将Tca8113细胞分为4组:对照组(空白对照)、SLC8A1-AS1过表达组(转染pcDNA3.1-SLC8A1-AS1+miR-182-3p阴性对照NC)、miR-182-3p过表达组(转染SLC8A1-AS1阴性对照pcDNA3.1+miR-182-3p模拟物mimics)和共过表达组(转染pcDNA3.1-SLC8A1-AS1+miR-182-3p mimics)。利用MTT法、划痕实验和Transwell小室实验检测SLC8A1-AS1和miR-182-3p对Tca8113细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果与癌旁组织相比,OSCC组织的SLC8A1-AS1水平下调,而miR-182-3p水平上调(P<0.05);与正常人口腔角质上皮细胞NHOK相比,OSCC细胞的SLC8A1-AS1水平下调,而miR-182-3p水平上调(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果显示,miR-182-3p mimics降低了野生型SLC8A1-AS1的荧光素酶活性(P<0.05),而不影响突变型SLC8A1-AS1的荧光素酶活性(P>0.05)。与对照组相比,SLC8A1-AS1过表达组的Tca8113细胞活力降低至1.454±0.103、划痕愈合率降低至(17.416±1.645)%及穿膜细胞数量减少至(119.877±6.469)个,而miR-182-3p过表达组的Tca8113细胞活力增强至2.879±0.126、划痕愈合率升高至(73.929±7.488)%及穿膜细胞数量增多至(391.243±23.819)个,且与SLC8A1-AS1过表达组相比,共过表达组Tca8113细胞活力增强至2.228±0.109、划痕愈合率升高至(32.924±4.114)%及穿膜细胞数量增多至(234.356±38.766)个,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。结论SLC8A1-AS1通过靶向miR-182-3p在OSCC中发挥抑癌作用,SLC8A1-AS1/miR-182-3p轴可作为OSCC治疗的新靶点。

长链非编码RNAFEZ家族锌指1反义RNA1在人胃癌组织的表达及临床意义

目的探讨长链非编码RNA FEZ家族锌指1反义RNA1（FEZF1-AS1）在人胃癌组织中表达及临床意义。方法收集39例胃癌及其配对正常胃黏膜组织，采用荧光实时定量聚合酶链反应（PCR）方法检测组织中FEZF1-AS1表达水平，分析其表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径、组织分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、血管浸润、神经浸润、肝转移数目及肝转移发生时间等临床病理因素关系，并作统计学处理。结果在39例胃癌组织中FEZF1-AS1阳性率为93.08% （36/39），而正常胃组织FEZF1-AS1阳性率为2.56% （1/39），χ2=62.986，P=0.040，差异有统计学意义。FEZF1-AS1表达量与患者性别（χ2=1.224，P=0.345）、年龄（χ2=2.377，P=0.395）、肿瘤位置（χ2=3.029，P=0.405）、组织分化程度（χ2=0.883，P=0.557）、神经浸润（χ2=0.522，P=0.470）无明显相关相关，但与原发灶直径（χ2=4.672，P=0.031）、肿瘤浸润深度（χ2=9.120，P=0.010）、淋巴结转移（χ2=8.176，P=0.014）、血管浸润（χ2=14.857，P=0.004）、肝转移数目（χ2=12.594，P=0.006）、术后肝转移发生时间早晚（χ2=7.419，P=0.038）均显著相关。结论FEZF1-AS1可能是胃癌异时性肝转移重要靶点之一。

长链非编码RNA Fez家族锌指蛋白1反义RNA1对肝癌细胞生物学功能的影响

目的探讨长链非编码RNA Fez家族锌指蛋白1反义RNA1(lncRNA FEZF1-AS1)的表达对肝癌细胞生物学功能的影响。方法以sh-FEZF1-AS1和OE-FEZF1-AS1转染肝癌SMMC771和BEL-7402细胞,采用实时荧光定量PCR法检测下调或上调lncRNA FEZF1-AS1后肝癌细胞中lncRNA FEZF1-AS1的表达变化。以细胞计数盒8(CCK-8)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。采用Transwell法和划痕实验检测lncRNA FEZF1-AS1对肝癌细胞侵袭和迁移能力的影响,采用Western blot法检测肝癌细胞内黏附分子的表达水平。裸鼠移植瘤实验验证lncRNA FEZF1-AS1对肝癌生长的影响。结果lncRNA FEZF1-AS1在肝癌细胞中的下调或上调表达能够抑制或促进肝癌细胞的增殖。CCK-8法检测结果显示,sh-FEZF1-AS1转染组SMMC7721和BEL-7402细胞的增殖能力明显减弱。第5天时,SMMC7721和BEL-7402细胞的增殖活性分别为(35.43±4.06)%和(34.68±3.97)%,与sh-NC组[分别为(52.21±8.46)%和(53.76±7.64)%]比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。OE-FEZF1-AS1转染组SMMC7721和BEL-7402细胞的增殖能力明显升高。第5天时,SMMC7721和BEL-7402细胞的增殖活性分别为(83.49±6.92)%和(80.31±3.13)%,与OE-NC组[分别为(53.03±8.84)%和(55.11±7.09)%]比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,sh-FEZF1-AS1转染组SMMC7721细胞的凋亡率为(13.02±1.38)%,明显高于sh-NC组[(5.57±1.46)%, P<0.05]。sh-FEZF1-AS1转染组BEL-7402细胞的凋亡率为(11.88±1.29)%,明显高于sh-NC组[(8.06±1.42)%,P<0.05]。OE-FEZF1-AS1转染组SMMC7721细胞的凋亡率为(3.01±0.39)%,明显低于OE-NC组[(6.68±0.96)%,P<0.05]。OE-FEZF1-AS1转染组BEL-7402细胞的凋亡率为(3.22±0.43)%,明显低于OE-NC组(6.63±0.45)%,P<0.05]。在肝癌细胞内下调或上调lncRNA FEZF1-AS1的表达能够减弱或增强肝癌细胞的迁移和侵袭能力。抑制或增强lncRNA FEZF1-AS1的表达水平可抑制或增强肝癌细胞中黏附分子的表达。经过30 d同等条件喂养后,对切除的裸鼠移植瘤进行测量,sh-FEZF1-AS1组和sh-NC组SMMC7721细胞移植瘤的肿瘤体积分别为(0.26±0.03)cm3和(0.63±0.06)cm3,差异有统计学意义(P<0.05);sh-FEZF1-AS1组和sh-NC组BEL-7402细胞移植瘤的肿瘤体积分别为(0.31±0.02)cm3和(0.72±0.08)cm3,差异有统计学意义(P<0.05)。结论lncRNA FEZF1-AS1可促进肝癌细胞的生长、迁移和侵袭。

长链非编码RNA ZFAS1在非小细胞肺癌患者组织中表达及作用

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中锌指结构反义转录本1(zinc finger antisense 1,ZFAS1)表达水平,探讨ZFAS1在NSCLC进展中的生物学作用。方法实时荧光定量RT-PCR检测ZFAS1在NSCLC患者癌组织和癌旁组织中的表达水平。RNA干扰ZFAS1在A549细胞中表达,细胞计数和克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式分析检测细胞周期和细胞凋亡,Transwell迁移和基质胶侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量RT-PCR检测Cyclin D1、Bcl2、N-cadherin、ZEB1、Slug和Twist基因表达水平变化。结果 ZFAS1在NSCLC患者癌组织中的平均表达水平[0.01(0.002,0.054)]较癌旁组织[0.002(0.001,0.012)]明显升高(Z=-2.638,P<0.01)。ZFAS1基因敲减后,A549细胞增殖能力明显减弱(P<0.01);A549细胞周期G1期比例升高,S期比例下降(P<0.01);A549细胞凋亡比例明显增加(P<0.01);A549细胞迁移和侵袭能力明显下降(P均<0.01);A549细胞中Cyclin D1、Bcl2、N-cadherin、ZEB1、Slug和Twist基因表达水平均降低(P均<0.05)。结论 ZFAS1在NSCLC患者癌组织中呈高表达。ZFAS1基因敲减诱导细胞周期阻滞、凋亡和抑制上皮-间质转变(EMT),减弱NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭能力。