静态磁场通过激活FGFR1/JAK2/STAT3信号通路促进皮肤成纤维细胞的增殖活性和迁移表型

目的:通过体外实验探讨静态磁场(SMF)对皮肤成纤维细胞增殖活性和迁移表型的调控作用与潜在机制。方法:将人皮肤成纤维细胞(HSFs)分为5组,包括对照组、SMF组、SMF+阿魏酸组、SMF+芦可替尼组、SMF+Stattic组。对照组为正常培养的HSFs;SMF组的HSFs细胞暴露于1mT的SMF中。其余三组分别将FGFR1、JAK2、STAT3的抑制剂(3μmoL/L阿魏酸、3nmoL/L芦可替尼、20μmoL/L的Stattic)与HSFs一起预培养,并暴露于1mT的SMF中,所有组均处理24h。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析细胞的增殖活性。用ELISA试剂盒法检测人类B细胞淋巴瘤2相关X蛋白(BAX)的水平。用Western blot检测凋亡标志蛋白cleaved-caspase3及FGFR1、JAK2、STAT3、磷酸化的(p)-FGFR1、p-JAK2、p-STAT3的表达以及细胞迁移相关表型高迁移率组蛋白1(HMGB1)、波形蛋白(vimentin)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、MMP-2的表达。结果:与对照组比,SMF组的细胞增殖活性增加,BAX的水平减少,cleaved-caspase3的蛋白表达水平下调,p-FGFR1、p-JAK2、p-STAT3、HMGB1、vimentin、VEGFA、MMP-9、MMP-2的表达水平均显著上调(均P<0.05)。与SMF组比,SMF+阿魏酸组的细胞增殖活性降低,BAX的水平增加,cleaved-caspase3的蛋白表达水平上调,而p-FGFR1、p-JAK2、p-STAT3、HMGB1、vimentin、VEGFA、MMP-9、MMP-2的表达均显著下调(均P<0.05)。与SMF组比,SMF+芦可替尼组的细胞增殖活性降低,BAX的水平增加,cleaved-caspase3的蛋白表达水平上调,JAK2、p-JAK2、p-STAT3、HMGB1、vimentin、VEGFA、MMP-9、MMP-2的表达水平均显著下调(均P<0.05)。与SMF组比,SMF+Stattic组的细胞增殖活性降低,BAX的水平增加,cleaved-caspase3的蛋白表达水平上调,STAT3、p-STAT3、HMGB1、vimentin、VEGFA、MMP-9、MMP-2的表达水平均显著下调(均P<0.05)。结论:SMF通过激活FGFR1/JAK2/STAT3信号通路促进皮肤成纤维细胞的增殖活性和迁移表型。

FGFR1在骨骼发育、稳态维持和损伤修复中的作用研究进展

骨骼是全身最大的器官之一,其发育及稳态维持异常可引起多种骨骼疾病,如骨骼遗传病、骨退行性疾病(如骨质疏松症、骨性关节炎)和骨折等。成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)家族重要成员FGFR1在骨骼发育和稳态维持中发挥关键作用。FGFR1功能增强点突变可引起囟门早闭综合征等骨骼遗传病,同时也参与调节骨形成、骨吸收过程以及关节炎的发生。此外,FGFR1在骨损伤修复不同阶段的骨骼相关细胞中均有表达,提示其参与骨修复过程。笔者总结了FGFR1在骨骼发育、稳态维持及损伤修复中的作用和机制研究进展,为从干预FGFR1信号角度治疗骨骼相关疾病提供借鉴。

FGFR1抑制剂在实体瘤治疗中的安全性与有效性的临床试验研究Meta分析

目的:系统性评价临床试验研究报道中FGFR1抑制剂在实体瘤治疗中的安全性和有效性。方法:检索PubMed、Embase、CochraneLibrary、Clinicaltrials、维普、中国知网、万方数据库,筛选FGFR1抑制剂在实体瘤患者治疗中的临床试验报道,用CMA3.7软件进行Meta分析。结果:最终纳入12篇关于FGFR1抑制剂的临床试验研究报道,包括BGJ398、lucitanib、pazopanib、ARQ087、AZD4547、ASP5878、Infigratinib、rogaratinib和dovitinib共9种FGFR1抑制剂,共计700例实体瘤患者,均为单臂研究。Meta分析结果显示FGFR1抑制剂应用后引起的所有级别的总的不良反应率为96.7%。常见的有:①血液系统改变:血小板减少(6.0%)、贫血(8.7%)、白细胞减少(3.6%);②非血液系统改变:腹泻(39.3%)、转氨酶升高(31.7%)、恶心(31.4%)。严重的不良反应(AE)(≥3级)发生率为47.3%。常见的有:①血液系统改变:血小板减少(1.6%)、贫血(1.0%)、白细胞减少(0.9%);②非血液系统改变:高血压(14.0%)、转氨酶异常(9.1%)、乏力(4.6%)。单药治疗后疾病完全缓解率(CR)为5.9%、部分缓解率(PR)为8.9%;疾病稳定(SD)39.7%;疾病进展(PD)的发生率45.5%,总体疾病控制率达到为54.5%。结论:FGFR1抑制剂使用后产生的副作用可耐受和调控。临床试验研究证实FGFR1抑制剂对部分实体瘤的治疗有一定疗效,期待进一步增加临床试验研究,通过改变给药剂量或/和考虑联合用药以提高其疗效。

磷酸化FGFR1^(Y654)在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨磷酸化FGFR1^(Y654)(p-FGFR1^(Y654))的表达与食管鳞状细胞癌患者临床病理特征之间的关系及其预后价值。方法 收集西部战区总医院2017年1月至2020年7月间进行食管鳞状细胞癌手术切除的肿瘤组织标本103例及正常组织58例,采用免疫组化法检测组织中p-FGFR1^(Y654)的表达情况,并分析其与临床病理参数和预后的相关性。结果 p-FGFR1^(Y654)在食管鳞状细胞癌组织中的表达显著高于正常组织(P<0.01)。p-FGFR1^(Y654)的表达水平与总生存期(overall survival,OS)密切相关(P<0.05),与患者年龄、性别、肿瘤分期、肿瘤长径等无关。多因素COX回归分析表明N分期是影响患者无复发生存时间(recurrence free survival,RFS)的独立预后因素。生存分析显示,p-FGFR1^(Y654)低表达组患者的RFS明显优于高表达组(P=0.032,95%CI:1.08~4.65),且p-FGFR1^(Y654)低表达组患者OS也明显优于高表达组(P=0.004,95%CI:2.14~11.51)。结论 p-FGFR1^(Y654)在食管鳞状细胞癌组织中高表达,且与患者不良预后相关,p-FGFR1^(Y654)可能成为食管鳞状细胞癌的潜在治疗靶点。

不同FGFR1突变与先天性低促性腺激素性性腺功能减退症的相关性

目的通过对成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)基因突变的先天性低促性腺激素性性腺功能减退症(CHH)患者多个基因进行筛查,寻找是否同时存在其他基因突变,共同导致疾病发生。方法对15例FGFR1突变CHH患者的突变来源进行验证。对其他CHH相关基因进行筛查。通过生信分析,评价这些突变基因的致病性。结果1)9例患者FGFR1突变来源于生殖表型正常的父/母(遗传突变组)。2)遗传突变组中有6例患者存在其他致病性突变,分别是PROKR2(W178S)、FGF8(T121N)、HS6ST1(P242L)、SEMA3A(R734W)、LZTR1(Q10Rfs15)和FGFR1复合杂合突变。这些突变和FGFR1突变可能一起协同作用导致CHH发生。3)6例FGFR1自发突变(自发突变组)患者中,未发现存在其他CHH相关基因致病性突变。结论来自生殖表型正常父/母的FGFR1突变,存在另一个CHH相关基因突变协同打击才导致CHH。本研究扩展了对双基因突变导致CHH的发病机制认识。

FGFR1新发突变所致男性卡尔曼综合征1例并文献复习

卡尔曼综合征(Kallmann syndrome,KS)又称性幼稚嗅觉丧失综合征,是指因下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)神经元功能受损,GnRH合成、分泌不足,导致脑垂体分泌的卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)分泌减少,造成性腺功能减退,同时合并嗅觉减退或缺失的综合征。

FGFR1基因耳发育功能及突变致聋机制研究进展

成纤维细胞生长因子受体1(Fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)作为一种生长因子受体,具有酪氨酸激酶活性,通过激活多条下游信号通路参与体内多种组织器官生长发育。FGFR1的致病突变或缺失会引起内耳Corti器毛细胞和支持细胞缺失、I型螺旋神经节神经元(SGN)缺失、神经嵴细胞(NCC)迁移咽弓异常、耳部骨软骨发育异常等,导致不同类型耳聋。本文就FGFR1基因及其蛋白结构功能、FGFR1与耳部发育关系、FGFR1相关综合征性耳聋三部分做一综述,以期为临床相关耳聋的早期针对性干预提供理论依据。

成熟成骨细胞中敲除基因fgfr1小鼠的制备

目的制备在成熟成骨细胞中敲除基因fgfr1的特定细胞阶段性基因敲除小鼠。方法从美国NIH引进SPF级fgfr1条件性基因敲除(fgfr1flox/flox)小鼠,进行饲养、繁殖和PCR鉴定;fgfr1flox/flox小鼠与在成熟成骨细胞表达Cre重组酶的OC-Cre小鼠交配,获得在成熟成骨细胞中敲除一个基因拷贝的杂合子小鼠;杂合子小鼠之间交配,或者杂合子小鼠与fgfr1flox/flox小鼠交配,可以获得在成熟成骨细胞中敲除fgfr1基因的小鼠fgfr1△/△/OC-CreTG/+。结果成功制备在成熟成骨细胞中敲除fgfr1的细胞特异性敲除小鼠。结论成功引进fgfr1flox/flox小鼠,应用合理的基因条件性敲除繁殖策略,获得在成熟成骨细胞中敲除fgfr1的基因敲除小鼠。

bFGF mRNA、bFGF及FGFR1与神经胶质瘤细胞恶性行为的相关性

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)、成纤维细胞生长因子受体1(fibro-blastgrowthfactorreceptor1,FGFR1)及bFGFmRNA三者与肿瘤细胞(神经胶质瘤细胞)恶性行为的相关性。方法:设计、合成bFGF反义寡核苷酸,转染SWO-38神经胶质瘤细胞,用原位杂交、免疫组化及图像分析、间接ELISA、细胞增殖MTT法、细胞集落形成等方法,分别检测转染前后bFGF、FGFR1、bFGFmRNA表达的改变,观察不同剂量bFGF反义寡核苷酸转染后细胞生长、集落形成的变化。结果:大部分细胞bFGFmRNA和细胞生长可被bFGF反义寡核苷酸抑制,细胞生长的抑制呈浓度依赖性,最高抑制率可达到48%,其抑制作用可被外源性bFGF完全逆转;反义寡核苷酸处理组大部分细胞表达的FGFR1减少、细胞分泌的bFGF明显减少,集落形成抑制率达35%;外源性bFGF的逆转作用为8%。正义组和阴性对照组均无以上的明显改变。结论:揭示了反义寡核苷酸可特异性抑制bFGFmRNA和肿瘤细胞的bFGF合成表达,但不能拮抗外源性bFGF结合bFG-FR的生物学作用;FGFR1随肿瘤细胞SWO-38中bFGF表达水平的降低而下调。

靶向bFGF与FGFR1Ⅲc结合位点的单克隆抗体制备及其生物学活性研究

目的针对碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)与成纤维生长因子受体1c(FGFR1Ⅲc)的结合位点,制备鼠抗人b FGF单克隆抗体并研究其生物学活性。方法用重组表达的人b FGF免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾脏常规融合制备杂交瘤细胞,通过间接和竞争ELISA筛选出与FGFR1Ⅲc有共同结合位点的抗b FGF单抗。制备小鼠腹水并利用Protein G亲和柱纯化腹水单抗,SDSPAGE鉴定纯化产物;间接ELISA测定单抗亚类、亲和常数,竞争ELISA测定抗体IC50;Western blot和免疫荧光对单抗的生物学活性初步鉴定;CCK-8法检测单抗对肺癌细胞株LL/2的增殖抑制活性。结果筛选出了2株稳定表达b FGF抗体的细胞株Mab E12和Mab D9,竞争ELISA测得其IC50分别为1.564和1.96μg/ml,免疫球蛋白分类两者均为Ig G1,间接ELISA测得Mab E12的亲和常数为5.66×108L/mol;Western blot和免疫荧光表明该抗体能与LL/2细胞内天然合成的b FGF相结合,并对其增殖产生了较明显的抑制作用。结论成功建立了1株能特异性识别b FGF-FGFR1Ⅲc合位点的单抗,能有效的中和b FGF对肺癌细胞株LL/2促增殖作用,为研究肿瘤治疗途径奠定了基础。

大鼠液压冲击脑损伤后bFGF及其受体FGFR1的表达

目的观察脑损伤后碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体FGFR1的表达及其时序性变化,探讨脑损伤的分子机制及法医学脑损伤时间推断。方法用免疫组织化学技术观察大鼠侧位中度液压冲击脑损伤后bFGF及FGFR1蛋白在伤后不同时间(30min,1,3,6,12h,1,3,7d)的表达情况,以正常大鼠及手术大鼠作为对照。结果正常对照组和手术对照组大鼠脑组织内有低水平的bFGF和FGFR1表达。脑冲击伤后6h,大脑皮层和脑干bFGF和FGFR1蛋白表达开始显著增加,1～3d达高峰,7d时已有所下降;海马冲击后3h即开始增加,1d达峰值,此后逐渐下降,7d时恢复正常。结论脑损伤可诱导bFGF/FGFR1的表达,提示机体对脑损伤存在自身保护机制,其表达的时序性改变可望用于法医学脑损伤时间推断。

FGF21及其受体FGFR1和FGFR2在小鼠毛囊第1生长周期的表达

旨在通过对FGF21、受体FGFR1和FGFR2在小鼠毛囊第1生长周期中的定位和表达情况的研究,以探索FGF21、受体FGFR1和FGFR2在毛囊发育过程中的作用。选取1、3、5、8、12、17、21和23日龄小鼠背部皮肤,采用免疫组织化学技术,实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹技术检测FGF21、FGFR1和FGFR2 mRNA及蛋白表达。结果显示:在小鼠毛囊第1生长周期中,FGF21主要表达于毛囊毛乳头、毛基质、内外根鞘以及毛囊周围的结缔组织中;FGFR1在毛囊各部均有表达,且在退化期(12～17日龄)和静止期(18～21日龄)主要表达于内外根鞘中;FGFR2广泛表达于毛囊各部。1、3、5、8、12、17日龄FGF 21 mRNA表达量极显著低于23日龄(P<0.01),21日龄的表达量低于23日龄,差异不显著(P>0.05);1～5日龄和23日龄FGF21蛋白表达量较高。1、3、5、8、12、21、23日龄FGFR1 mRNA表达量极显著低于17日龄(P<0.01);FGFR1蛋白表达量从12日龄开始上升,在17日龄时达到最高,之后又呈下降趋势。1、5、8、12、21和23日龄FGFR2 mRNA表达量极显著低于17日龄(P<0.01),在3日龄的表达量低于17日龄,差异不显著(P>0.05);FGFR2蛋白在1～17日龄都有较高表达。综上表明,在第1个毛囊生长周期中,FGF21对参与毛囊形成的成纤维细胞的增殖和分化具有重要作用,诱导毛囊由生长期进入退化期。FGFR1对内外根鞘细胞的增殖、分化有着明显作用,诱导毛囊由退化期进入静止期。FGFR2对毛囊内细胞增殖、分化具有重要作用,诱导毛囊由生长期和退化期进入静止期。

辛伐他汀对大鼠血管平滑肌细胞增殖及FGFR1与p21ras表达的干预作用

目的:观察辛伐他汀对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中FGFR1、p21ras蛋白表达的影响。方法:体外培养大鼠VSMC,建立VSMC增殖模型,应用不同浓度的辛伐他汀干预,MTT法测定细胞增殖活力;免疫印迹法检测FGFR1与p21ras蛋白的表达。结果:与对照组比较,辛伐他汀各浓度组细胞增殖活力均显著降低(P<0.05);与对照组(FGFR1208.07±10.70,p21ras202.43±12.36)相比,低剂量组(FGFR1181.47±7.43,p21ras182.00±8.98)的FGFR1、p21ras表达差异无显著性(P>0.05),中剂量组(FGFR1144.90±9.03,p21ras147.03±9.13)、高剂量组(FGFR1104.43±8.08,p21ras100.3±8.37)的表达均较明显降低(P<0.05),中、高剂量组FGFR1、p21ras表达较低剂量组均显著降低(P<0.05),高剂量组表达又较中剂量组显著降低(P<0.05),呈剂量依赖性。结论:辛伐他汀能抑制VSMC增殖,该作用是通过抑制FGFR1、p21ras蛋白表达实现的,这可能是辛伐他汀治疗动脉粥样硬化、再狭窄及高血压等心血管疾病的重要机制之一。

FGFR1和IGF1R在肺鳞癌中的表达及其临床意义

目的探讨成纤维生长因子受体1(FGFR1)、胰岛素样生长因子受体1(IGF1R)在肺鳞癌组织中的表达及两者的临床意义。方法采用免疫组化法检测260例肺鳞癌术后患者的癌组织及40例癌旁正常组织中FGFR1、IGF1R的表达,分析两者表达与临床病理特征及预后的关系。采用Kaplan-Meier法进行生存分析,用Cox回归模型分析影响肺鳞癌预后的独立因素。结果 FGFR1、IGF1R在肺鳞癌组织中的阳性表达率分别为51.92%(135/260)、55.4%(144/260),均明显高于癌旁正常组织的32.5%(13/40)、30.0%(12/40),差异均有统计学意义(P<0.05)。FGFR1在肺鳞癌组织中的表达与吸烟、淋巴结转移有关,IGF1R表达仅与淋巴结转移有关(P<0.005)。FGFR1、IGF1R蛋白阳性表达者的中位OS分别为38.21个月、38.48个月,均低于阴性表达者的42.55个月、42.51个月(P>0.05)。Cox多因素分析显示,FGFR1、IGF1R表达及淋巴结转移为肺鳞癌患者术后的独立预后因子。结论 FGFR1、IGF1R均参与了肺鳞癌的发生、发展,并且二者均为肺鳞癌的不良预后指标,并有望成为分子靶向治疗的新靶点。

miR-195在宫腔粘连组织中的表达及其与TGF-β1/Smads、FGF2/FGFR1/ERK通路的关系

目的:探讨miR-195在宫腔粘连(IUA)组织中的表达及其与TGF-β1/Smads、FGF2/FGFR1/ERK通路的关系。方法:选取2017年9月~2019年2月在本院接受宫腔镜治疗的IUA患者118例作为IUA组,同期在本院进行宫腔镜下诊刮的功能失调性子宫出血患者80例作为对照组。比较两组宫腔镜所得组织中miR-195及转化生长因子-β1(TGF-β1)/信号传导蛋白(Smads)、成纤维细胞生长因子(FGF2)/成纤维细胞生长因子受体(FGFR1)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路相关分子表达量的差异,采用Pearson检验评估IUA患者宫腔粘连组织中miR-195表达量与TGF-β1/Smads、FGF2/FGFR1/ERK通路的相关性。结果:IUA组中miR-195的表达量高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。IUA组中TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA的表达量均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);IUA组中FGF2、FGFR1、ERKmRNA的表达量高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Pearson检验发现,IUA组中miR-195表达量与TGF-β1/Smads通路相关分子TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA的表达量呈正相关,与FGF2/FGFR1/ERK通路相关分子FGF2、FGFR1、ERK mRNA的表达量呈正相关(P<0.05)。结论:miR-195在IUA病灶组织中高表达,可能通过激活TGF-β1/Smads、FGF2/FGFR1/ERK信号通路促进病情进展。

加减地黄饮子对局灶性脑缺血大鼠脑组织bFGF和FGFR1表达的影响

目的:研究加减地黄饮子对局灶性脑缺血大鼠脑组织bFGF和FGFR1表达的影响。方法:采用栓线法制作大鼠局灶性脑缺血损伤模型(MCAO)[1]。120只Wistar大鼠随机分成6组:空白组、假损伤组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、西药对照组,每组20只。均连续灌胃7天后,实施手术。结果:空白组、假损伤组bFGF和FGFR1呈弱阳性(+)表达,模型组、对照组和中药高剂量组呈阳性表达(++),但对照组和中药高剂量组bFGF和FGFR1表达更强,中药低剂量组呈强阳性(+++)表达。结论:说明加减地黄饮子低剂量可以明显增强缺血脑组织Bfgfey FGFR1的表达,从而保护神经组织并促进其功能修复。

肺鳞癌FGFR1表达与临床病理特征及预后的相关性分析

目的:探讨肺鳞癌成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)蛋白表达与临床病理特征及预后的相关性。方法:收集南京医科大学第一附属医院2011—2013年临床病理资料完整的肺鳞癌标本149例,制作石蜡组织芯片,采用免疫组织化学MaxVision法检测肿瘤细胞FGFR1、bFGF、PTEN蛋白表达水平,并通过电话和门诊对患者进行术后随访。结果:①肿瘤细胞FGFR1阳性率为51.7%(77/149),其表达与吸烟史(P=0.019)、淋巴结转移(P<0.001)及分化程度(P<0.001)相关;bFGF阳性率为61.7%(92/149),其表达与淋巴结转移、T分期相关(P<0.05);PTEN阴性表达率为57.0%(85/149),其表达缺失仅与分化程度相关(P<0.05)。FGFR1表达与b FGF表达、PTEN表达缺失存在相关性(P<0.05)。②单因素生存分析显示,肿瘤细胞FGFR1、bFGF阳性与无复发生存期(relapse free survival,RFS)和总生存期(overall survival,OS)均呈显著相关(P<0.05);PTEN表达缺失与预后无明显相关性。③Cox多因素生存分析显示,FGFR1表达情况是肺鳞癌患者RFS和OS的独立预后因子(P<0.05)。结论:肺鳞癌FGFR1阳性表达与肿瘤低分化、有淋巴结转移及吸烟史显著相关,且与bFGF表达及PTEN表达缺失显著相关,肿瘤细胞FGFR1阳性提示患者生存期较短,是肺鳞癌患者的独立预后因素。

FGFR1在乳腺浸润性小叶癌中的表达及其与脉管生成的关系

目的:探讨成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR1)在乳腺浸润性小叶癌中的表达情况和对血管及淋巴管生成的影响。方法:采用免疫组织化学染色检测FGFR1在45例乳腺浸润性小叶癌、40例乳腺浸润性导管癌中的表达,同时采用CD34和D2-40双标免疫组织化学染色分别标记血管和淋巴管,检测乳腺浸润性小叶癌的微血管密度和微淋巴管密度。结果:乳腺浸润性小叶癌的RGRR1表达阳性率比乳腺浸润性导管癌高,其染色强度也比乳腺浸润性导管癌强,差异均具有统计学意义(P<0.05);FGFR1在乳腺浸润性小叶癌中的阳性表达与微血管密度相关(P<0.05),而与微淋巴管密度无关(P>0.05)。结论:初步推测FGFR1的过表达与乳腺浸润性小叶癌的发生有关,FGFR1的过表达能促进癌组织中的血管生成。

胶质瘤中FGFR1OP和PTEN的表达及其临床意义

目的探讨FGFR1OP和PTEN在胶质瘤中的表达情况及其临床意义。方法选取54例胶质瘤患者的手术切除标本,采用链霉菌抗生物素过氧化酶(SP)免疫组化法检测FGFR1OP和PTEN的表达。结果FGFR1OP和PTEN在胶质瘤中的阳性表达率分别为66.7%和48.1%。FGFR1OP在高度恶性胶质瘤(Ⅲ～Ⅳ级)中的OD值为(0.131±0.010),在低度恶性胶质瘤(Ⅰ～Ⅱ级)中的OD值为(0.118±0.010),两者间差异有统计学意义(t=-5.497,P=0.000)。PTEN在高度恶性胶质瘤(Ⅲ～Ⅳ级)中的OD值为(0.113±0.008),在低度恶性胶质瘤(Ⅰ～Ⅱ级)中的OD值为(0.135±0.016),两者间差异有统计学意义(t=0.239,P=0.026)。FGFR1OP和PTEN在表达强度上未见明显的相关性(r=0.245,P=0.327)。结论FGFR1OP的高表达与PTEN的低表达可能参与胶质瘤的生长分化和进展。

小鼠真核表达质粒pcDNA3.1(+)-FGFR1的构建及表达

目的:通过基因重组技术构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-FGFR1,并检测其在CHO细胞中的表达。方法:通过PCR扩增FGFR1的全段基因cDNA,应用基因工程技术将扩增的基因片段插入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,经限制内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,用脂质体包裹转染CHO细胞,Western blot检测FGFR1目的蛋白的表达。结果:经酶切和测序鉴定证实本实验构建的重组表达质粒正确,该质粒在体外转染CHO细胞后可表达FGFR1目的蛋白。结论:成功构建的pcDNA3.1(+)-FGFR1重组质粒能在体外表达FGFR1目的蛋白。