基于生信分析探索FOSL1对肝癌索拉非尼治疗抵抗的影响

目的:探究FOS样抗原1(FOS-like antigen 1,FOSL1)在肝癌组织中的表达及其对索拉非尼治疗抵抗的影响。方法:从公共数据库中获取数据进行WGCNA分析,对获取的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)进行GO功能富集和KEGG通路富集分析。选取血管生成通路差异表达基因,采用STRING数据库建立PPI网络,使用MCODE插件提取排名前7位的关键基因。在人类蛋白质图谱网站对这7个关键基因在肝癌血管内皮细胞表达情况进行筛选。采用Western blot法检测人微血管内皮细胞-1(human microvascular endothelial cells-1,HMEC-1)及肝癌血管内皮细胞(tumor-derived endothelial cells,TEC)中FOSL1的表达,CCK-8法检测HMEC-1及TEC细胞对索拉非尼敏感性,免疫组化检测肿瘤组织及正常肝组织中FOSL1表达。结果:GO功能富集分析图和KEGG通路富集分析图显示“索拉非尼抵抗”和“索拉非尼不抵抗”患者DEGs主要富集在管腔形成和血管生成等通路,KEGG通路主要富集在Wnt信号通路和VEGF信号通路。WGCNA分析得到关键模块,通过对关键模块基因筛选,最终得到JUND、JUNB、IL17RC、IL17RA、IL17F、IL1B、FOSL17个关键基因,其中FOSL1在血管生成中发挥重要作用。通过人类蛋白质图谱网站,发现FOSL1在肝脏各类细胞中表达,但在内皮细胞中表达较高。Western blot检测显示,FOSL1在TEC细胞中的表达水平明显高于HMEC-1细胞。免疫组化染色发现,肿瘤组织中FOSL1高表达,正常肝组织中FOSL1表达水平较低。CCK-8法检测显示,HMEC-1细胞对索拉非尼较敏感,而TEC细胞对索拉非尼不敏感。结论:FOSL1在肝癌血管内皮细胞中高表达,可能与促进血管内皮细胞增殖及索拉非尼治疗抵抗相关。

电针大鼠“四白”穴和胃扩张传入信息在孤束核的汇聚——c-fos表达的研究

目的:探讨电针足阳明经“四白”穴和胃扩张刺激诱导大鼠孤束核(NTS)的原癌基因c -fos表达及意义。方法:将SD大鼠随机分为4组:电针“四白”穴组、电针“四白”穴旁开0 .5cm组、胃扩张模型组和空白对照组。采用免疫组织化学方法观察c- fos在孤束核的表达。结果:电针“四白”穴组和胃扩张模型组孤束核内Fos样免疫反应(FLI)阳性神经元均主要分布于内侧亚核,以延髓的中尾段分布较多;电针“四白”穴组在内侧亚核内FLI神经元数目与胃扩张模型组比较无明显差异(P >0 .0 5 ) ,与“四白”穴旁开组比较,差异有非常显著性意义(P <0 .0 1 )。结论:电针“四白”穴和胃扩张刺激的感觉传入可能在孤束核发生汇聚、整合,是针刺“四白”穴调节胃功能的中枢途径之一。

艾灸对偏头痛大鼠血清5-HT、ET-1与脑干c-fos、c-jun蛋白表达的影响

目的观察艾灸风池穴对偏头痛大鼠血清5-羟色胺(5-HT)、内皮素-1(ET-1)水平及脑干组织中癌基因fos(c-fos)、癌基因jun(c-jun)表达的影响,探讨艾灸治疗偏头痛的可能机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸治疗组和艾灸预防+治疗组,每组10只。除空白组外,其余组大鼠均采用颈背部皮下注射硝酸甘油方法制备偏头痛模型。艾灸预防+治疗组于造模前7 d(连续7 d)及造模后30 min艾灸双侧风池穴,每日1次,每次30 min;艾灸治疗组于造模后30 min艾灸双侧风池穴1次,持续30 min。记录大鼠造模前及造模后0~30 min、60~90 min、90~120 min的挠头次数;测量造模前、造模结束后、造模后60 min大鼠头面部机械痛阈值;造模结束4 h后,采用酶联免疫吸附法测定血清5-HT和ET-1水平,Western blot法检测脑干组织中c-fos和c-jun蛋白表达情况。结果模型组大鼠造模后0~30 min、60~90 min、90~120 min的挠头次数均明显高于空白组(P均<0.05),艾灸治疗组、艾灸预防+治疗组大鼠造模后60~90 min、90~120 min的挠头次数均明显少于模型组(P均<0.05)。造模结束后,模型组、艾灸治疗组、艾灸预防+治疗组大鼠头面部机械痛阈值均明显低于空白组(P均<0.05);造模后60 min,艾灸治疗组、艾灸预防+治疗组大鼠头面部机械痛阈值均明显高于模型组(P均<0.05),艾灸治疗组与艾灸预防+治疗组比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组大鼠血清5-HT水平明显低于空白组(P<0.05),血清ET-1水平及脑干组织中c-fos、c-jun蛋白相对表达量均明显高于空白组(P均<0.05);艾灸治疗组、艾灸预防+治疗组大鼠血清5-HT水平均明显高于模型组(P均<0.05),血清ET-1水平及脑干组织中c-fos、c-jun蛋白相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05);艾灸预防+治疗组大鼠血清ET-1水平及脑干组织中c-fos、c-jun蛋白相对表达量均明显低于艾灸治疗组(P均<0.05)。结论艾灸风池穴可明显缓解大鼠偏头痛,且早期介入效果更显著,其机制可能与调节血管舒缩相关的血管活性物质表达和下调c-fos、c-jun蛋白表达而抑制三叉神经血管系统激活有关。

曲马多对坐骨神经痛大鼠脊髓c-jun、c-fos表达及星形胶质细胞活化的影响

目的 探究曲马多对坐骨神经痛大鼠脊髓组织中Jun原癌基因蛋白(c-jun)、fos原癌基因蛋白(c-fos)表达及对星形胶质细胞活化的影响。方法 采用腰椎间孔外口植入髓核法建立SD大鼠坐骨神经痛模型,随机分为模型组、曲马多低(10 mg/kg)、中(20 mg/kg)、高(30 mg/kg)剂量组、阳性对照组(吲哚美辛,7.5 mg/kg),每组10只,另设置假手术组10只(自体髓核不植入神经部位),于造模后3 d开始给药,1次/d。给药14 d后,观察大鼠一般行为活动;检测机械缩足痛敏阈值(PWT)及热辐射刺激缩爪反应潜伏期(PWL);酶联免疫吸附法(ELISA)检测疼痛标志物前列腺素(PG)E2、P物质(SP)水平;苏木素-伊红(HE)染色检测脊髓病理形态变化;免疫组化法检测脊髓星形胶质细胞活化标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达;Western印迹法检测脊髓c-fos、c-jun、活化蛋白(AP)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、一氧化氮合酶(iNOS)和环氧化酶(COX)-2表达。结果 与假手术组相比,模型组大鼠活动量降低并出现易激惹行为,神经纤维紊乱及坏死严重,PWT、PWL显著降低(P<0.05),血清PGE2、SP水平、脊髓GFAP、TNF-α、IL-1β、c-fos、c-jun、AP-1、iNOS、COX-2表达水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,曲马多各剂量组大鼠易激惹行为减少,神经纤维病理损伤减轻,PWT、PWL显著升高(P<0.05),血清PGE2、SP水平、脊髓组织GFAP、TNF-α、IL-1β、c-fos、c-jun、AP-1、iNOS、COX-2表达水平均显著降低(P<0.05);阳性对照组与曲马多高剂量组的上述各项指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 曲马多可通过抑制c-jun/c-fos通路激活,抑制星形胶质细胞活化,缓解坐骨神经痛模型大鼠神经炎症损伤及疼痛症状。

间充质干细胞培养中分化现象及c-fos表达研究

目的观察不同的培养基对间充质干细胞(MSC)体外自发分化的影响及c鄄fos的表达情况。方法以密度梯度离心法从SD大鼠骨髓中培养MSC,分别以L鄄DMEM、RPMI鄄1640与MSCGM作为培养基,观察对MSC在体外培养扩增的影响,流式细胞仪鉴定MSC,以免疫组化方法检测原癌基因c鄄fos的蛋白表达情况。结果MSCGM培养的MSC体外基本维持较均一的梭形,并能保持6代以上较少分化,而用L鄄DMEM和RPMI鄄1640培养,原代MSC形态基本较好,两代后开始大量分化。大部分MSC表达FOS蛋白。结论专用培养基对MSC体外培养中保持未分化状态很关键。FOS可能是MSC的增殖与分泌作用的胞内信号之一。

17β-雌二醇对肾上腺素诱导的心肌细胞肥大及原癌基因c-fos表达的影响

目的利用体外培养的乳鼠心肌细胞,观察17β雌二醇(17βestradiol)对肾上腺素(phenylephrine)诱导的心肌细胞肥大及其原癌基因cfos蛋白表达的影响。方法以培养的乳鼠心肌细胞为模型并分组给药后,用计算机图像分析软件测量心肌细胞表面积,免疫细胞化学方法检测心肌细胞原癌基因cfos的蛋白表达。结果17β雌二醇明显抑制肾上腺素诱导的心肌细胞表面积增大,同时减弱肥大心肌细胞原癌基因cfos的蛋白表达。结论17β雌二醇可抑制肾上腺素诱导的心肌细胞肥大,其作用机制可能和抑制原癌基因cfos的蛋白表达有关。

后肢去负荷大鼠前扣带回皮质神经元Fos表达的时间模式

目的:研究模拟失重模型动物前扣带回皮质(anterior cingulated cortex,ACC)神经元激活状况及其变化的时间模式。方法:将SD大鼠随机分成4组。所有动物采用吊尾、头低位方式使后肢去负荷(hind-limb unloading,HU)方式模拟失重生理。第一、二组分别经HU处理1 d和4 d。第三、四组动物分别经过HU 1 d和4 d,并进行双轴旋转运动刺激2 h。然后,动物灌流固定、取脑、切片(厚度25μm),采用常规免疫组织化学染色技术卵白素-生物素复合物(ABC)法对ACC内神经元Fos蛋白进行免疫反应,3,3′-二氨基联苯胺四盐酸盐水合物(DAB)为呈色剂。统计分析Fos阳性神经元数量变化。结果:(1)1-d HU组、4-d HU和1-d HU-旋转组和4-d HU-旋转组动物ACC内Fos阳性神经元数目分别是344.98±90.620、389.111±133.774、486.47±182.152和464.444±286.881。(2)HU处理1 d到4 d ACC神经激活数目有增加趋势,旋转刺激后ACC内神经元也有被激活趋势,但统计分析显示各组间无统计学差异。结论:HU处理使ACC内神经元有被激活趋势,但随HU处理时间的延长,ACC神经元活动对HU刺激产生适应。

正常生活状态下的大鼠脑中 FOS的基础表达

用免疫组织化学 ABC方法普查了正常生活状态下大鼠全脑内 FOS的基础表达。结果显示在正常生活状态下大鼠脑中有广泛而恒定的 FOS表达 ,出现于许多核团 ,如 :孤束核的连合核、内侧亚核 ,脑桥核 ,臂旁外侧核及 KF核 ,下丘 ,丘脑室旁核 ,下丘脑乳头体上核、视交叉上核以及中央杏仁核 ,新皮质等处。另外 ,在外侧网状核 ,三叉神经脊束核尾侧亚核 ,A1区 ,舌下神经前置核 ,小脑皮质颗粒层 ,中央灰质腹外侧部 ,腹侧被盖区 ,顶盖前区 ,下丘脑后区 ,外侧膝状体腹侧核 ,外侧缰核 ,尾壳核 ,屏状核 ,视上核 ,隔外侧核 ,扣带回皮质和嗅结节等处也有恒定的 FOS表达。面部皮下注射甲醛后 ,在部分脑区如三叉神经脊束核尾侧亚核 、 层及下丘脑室旁核等处 FOS表达增多 ,而脑内大部分核团 FOS表达模式未变。本文作者推测 ,这些正常生活状态下的 FOS表达可能与机体的基础代谢以及内脏、躯体功能活动 ,外界刺激如光线、声音等感觉传入活动有关。在分析实验刺激引起的 F

曲马多对切口痛诱发大鼠脊髓背角神经元c-fos基因和血液IL-6表达的抑制作用

目的:在大鼠切口痛模型中研究腹腔注射曲马多对脊髓c-fos蛋白表达和血液IL-6含量的影响。方法:雄性SD大鼠48只,随机分为6组,每组8只,分别为假手术组、切口痛组、术前3个浓度曲马多预处理组(剂量分别为1 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg)和术后曲马多治疗组(剂量为10mg/kg)。按Brennan法制成大鼠切口痛模型,以von Frey细丝法(机械性痛觉过敏)、热辐射法(热痛觉过敏)和累积疼痛评分法观察疼痛的行为学变化。手术后2 h取脊髓,并以免疫组织化学检测脊髓c-fos表达(Fos蛋白,以FLI阳性神经元表示),ELISA法测定血清IL-6含量。结果:与假手术组比较,在术后2 h时切口痛组大鼠的von Frey纤毛刺激缩爪阈值明显降低(P<0.01),热刺激缩爪潜伏期明显缩短(P<0.01),累积疼痛评分明显升高(P<0.01);与切口痛组比较,曲马多预处理10 mg/kg和20 mg/kg组大鼠的von Frey纤毛刺激缩爪阚值均明显增加(P<0.01),热刺激缩爪潜伏期均明显延长(P<0.01),累积疼痛评分均明显降低(P<0.01),此效应呈剂量依赖性;PT10组大鼠的行为学改变与T10组相似。切口痛组FLI细胞主要分布在~层,曲马多预处理10 mg/kg和20 mg/kg组FLI细胞与切口痛组相比减少。与假手术组比较,切口痛组大鼠脊髓c-fos表达和血液IL-6含量明显增加(P<0.01);与切口痛组比较,曲马多预处理10 mg/kg和20 mg/kg组能使脊髓c-fos表达和血液IL-6含量明显降低(P<0.01),此效应呈剂量依赖性,而术后曲马多治疗组这种抑制作用弱于曲马多预处理10 mg/kg组(P<0.05)。与切口痛组比较,曲马多预处理1 mg/kg组的痛阈和脊髓c-fos表达以及血液IL-6含量差异无显著性意义(P>0.05)。结论:曲马多能对疼痛引起的脊髓灰质背角FLI阳性神经元增多和血液IL-6含量增加的效应产生剂量依赖性的抑制作用,曲马多预处理效果更强;脊髓灰质背角~层可能是曲马多产生痛觉调制的主要部位。在大鼠切口痛模型中,曲马多的抗伤害作用可能与抑制脊髓c-fos的表达和减少血液IL-6含量有关。

剥夺性弱视猫外侧膝状体c-fos基因及Fos蛋白表达

为研究生后关键期内,正常猫及剥夺性弱视猫外侧膝状体神经元功能形态的变化规律,对正常视发育敏感期的幼猫行左眼睑缝合术,造成剥夺性弱视模型,采用Nissl染色法及电镜观察正常猫及剥夺性弱视猫外侧膝状体神经元的形态改变,并用免疫组化和原位杂交技术检测Fos蛋白及cfos基因的表达情况。结果显示:(1)剥夺猫剥夺层外侧膝状体神经元的截面积比非剥夺层及正常猫的明显变小,差异有显著性(P<0.05);(2)超微结构显示:剥夺性弱视猫的剥夺层出现大量变性的细胞,剥夺4周时最为显著;(3)正常猫外侧膝状体神经元Fos蛋白和cfos原位杂交的阳性细胞数及OD值随着时间的延长而降低。同龄猫剥夺层外侧膝状体Fos蛋白和cfos原位杂交阳性细胞数及OD值较正常猫减少(P<0.05)。结果提示:猫视觉的可塑性敏感期为生后4周到8周。剥夺性弱视猫外侧膝状体剥夺层及非剥夺层神经元形态及功能与正常猫相比较均发生改变。Fos法可以成为衡量弱视猫外侧膝状体兴奋性状态与形态学定位相结合的实验方法,但必须注意神经可塑性对其的影响。

参麦注射液对缺血性脑损伤大鼠海马c-fos基因表达的影响(英文)

背景:c-fos基因为神经元细胞最常见的基因,其表达情况可作为受损神经细胞活性和反映性的标志物之一。目的:从分子水平探讨缺血性脑损伤大鼠海马c-fos基因表达情况和参麦注射液的保护作用。设计:随机对照实验。单位:泸州医学院组织学与胚胎学教研室。材料:实验于2002-01/03在泸州医学院组织学与胚胎学实验室完成。选择雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照组、缺血组和治疗组,每组10只。方法:缺血组和治疗组大鼠夹闭双侧颈总动脉30min后再灌注1h,建立缺血性脑损伤模型;治疗组在缺血30min前腹腔注射参麦注射液2mL/kg(由红参、麦冬等中药组成);缺血组不给药;对照组做假手术,不夹闭颈总动脉,也不给药。取大鼠脑海马组织制备石蜡切片,每只大鼠取1张切片,每组共随机统计100个神经元胞核。根据神经元胞核着色情况观察各组大鼠海马神经元c-fos基因的表达(+++为着色深,呈深棕色。++为着色较深,呈棕色者。+为着色较浅,呈浅棕色者。-为未着色)。主要观察指标:各组大鼠海马神经元c-fos表达。结果:30只大鼠全部进入结果分析。缺血组大鼠海马内神经元c-fos基因的表达明显多于对照组犤+++:24,7个/视野,P<0.05犦,而治疗组明显少于缺血组犤+++:13,24个/视野,P<0.05犦。结论:参麦注射液可减少缺血性脑损伤大鼠海马神经元c-fos基因的表达,具有对缺血性脑损伤组织神经细胞的保护作用。

实验性海水淹溺肺水肿兔肺上皮组织中c-fos基因表达水平的图像定量分析

目的：了解海水淹溺肺水肿（ＰＥＳＷＤ）的病理生理变化与ｃｆｏｓ基因表达水平之间的关系。方法：向兔肺内灌入海水，诱发ＰＥＳＷＤ，用原位杂交和免疫组化方法测定肺组织中ｃｆｏｓｍＲＮＡ及Ｆｏｓ蛋白的含量。结果：ＰＥＳＷＤ兔肺上皮组织中ｃｆｏｓｍＲＮＡ〔（３２５．４６±１４５．１８）〕μｍ２及Ｆｏｓ蛋白〔（１２３．９３±２６．８７）μｍ２〕的含量均显著高于对照组〔分别为（１５５．９３±４０．２１）μｍ２和（５９．７６±２４．５０）μｍ２〕。表明在ＰＥＳＷＤ时ｃｆｏｓ基因转录及翻译水平表达均高于对照组。结论：海水淹溺可引起ｃｆｏｓ基因表达水平增强，并进一步导致ＰＥＳＷＤ的其他变化。

c-Fos和FosB/△FosB蛋白在精神分裂症模型小鼠脑内表达的差异

为了观察MK-801引发的精神分裂症模型小鼠脑内c-Fos和FosB/△FosB表达的差异,本实验选用雄性昆明小鼠,随机分为溶剂对照组、MK-801组(建立精神分裂症动物模型),采用免疫组化的方法检测模型动物脑内c-Fos和FosB/△FosB的表达,同时用免疫荧光双标对c-Fos和FosB/△FosB阳性的细胞进行定性分析。结果显示:精神分裂症动物模型组c-Fos蛋白的表达明显较FosB/△FosB广泛,几乎遍布全脑,而FosB/△FosB主要集中于前脑;在丘脑中线核群、板内核群、前核群和腹侧核群及脑桥核主要为c-Fos的表达,FosB/△FosB表达极少;在伏隔核、嗅结节、尾壳核、齿状回等核团主要为FosB/△FosB的表达,c-Fos表达极少。上述结果表明,c-Fos和FosB/△FosB的表达虽有重叠之处,但显示出明显的区域和强度的差异,且FosB/△FosB高度表达的区域与已知的精神分裂症相关脑区吻合,因此FosB/△FosB可能更适用于精神分裂症发病机制的研究。

哮喘大鼠肺内SP阳性纤维的变化和Fos蛋白表达的形态学研究

为探讨P物质(SP)和Fos蛋白与哮喘发病的关系,本实验采用免疫组织化学方法及计算机图像分析技术对正常对照大鼠和哮喘大鼠肺内SP免疫阳性纤维的分布变化及Fos蛋白的表达情况进行了研究。结果显示:(1)正常对照组大鼠肺组织内可观察到SP阳性纤维分布于支气管至终末细支气管和肺血管壁内,但呼吸性细支气管和肺泡壁内少见SP阳性纤维。哮喘组大鼠肺内SP阳性纤维的数量及分布均发生了明显变化,从肺内支气管到终末细支气管均有较密集的SP阳性纤维呈束走行;且呼吸性细支气管和肺泡壁内也出现了SP阳性纤维。哮喘组大鼠肺内SP阳性纤维的数量明显高于正常对照组大鼠(P<0.05)。(2)正常对照组大鼠的肺内几乎不表达c-fos基因,但在哮喘组大鼠肺内可观察到许多Fos阳性细胞,这些细胞主要为炎性细胞和平滑肌细胞。以上结果表明,肺内SP阳性纤维增生及c-fos基因表达与哮喘发病密切相关。

彩色多普勒超声对胎鼠大脑Fos蛋白表达影响的实验研究

目的 探讨诊断用彩色多普勒超声对胎鼠中枢神经系统的影响。方法 利用彩超照射孕 18天大鼠子宫体表投影区 ,滑行照射 30min ,间隔不同时间留取胎鼠脑组织标本 ,分为照射后即刻、30min、2h、4h、8h及 2 4h共 6组及各自的对照组。应用免疫组化方法检测Fos蛋白的表达及出现的时间顺序。结果 ①照射后即刻及 30min组仅见极少量着色浅淡的Fos阳性细胞 ,照射后 2h出现密集分布的深染Fos阳性细胞 ,照射后 4h及 8h阳性细胞数逐渐下降 ,而照射后 2 4h再次出现Fos蛋白高表达。②对照组各时间点均未见着色的Fos阳性细胞。结论 诊断用的彩超照射孕鼠 30min ,可激活胎鼠脑组织c fos基因 ,并诱导其转录和表达 ,其高表达时间出现于照射后 2h及 2 4h。

红藻氨酸致大鼠脊髓损伤过程中c-fos mRNA 和 Fos的表达变化

为探讨即早反应基因（ｉｍｍｅｄｉａｔｅｅａｒｌｙｇｅｎｅｓ，ＩＥＧｓ）在神经损伤过程中的变化规律，用原位分子杂交和ＰＡＰ免疫组织化学方法观察了大鼠脊髓内注射红藻氨酸（ｋａｉｎｉｃａｃｉｄ，ＫＡ）后１ｈ至１４ｄ的不同时间点，Ｌ１～３脊髓腹、背角神经元中ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ和Ｆｏｓ免疫阳性信号的变化。结果表明，ＫＡ致脊髓损伤后２～８ｈ脊髓腹角运动神经元中ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ的表达和Ｆｏｓ免疫组织化学阳性反应明显增强，１２ｈ恢复至正常水平，伤后３ｄ又明显增强；而脊髓背角神经元内仅在伤后２～６ｈ明显增加。提示ＫＡ对脊髓神经元的选择性毒性作用；运动神经元ｃ－ｆｏｓ表达的再次增强与ＫＡ所致神经元的不可逆变性有关，亦可看作是神经元损伤后死亡的先兆之一。

趾部切口疼痛对大鼠中脑导水管周围灰质c-fos表达的影响

目的:研究趾部切口疼痛刺激对大鼠中脑导水管周围灰质c-fos表达的影响。方法:2004-02/07在华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学实验室完成。选择健康雄性SD大鼠12只,随机分为2组,每组6只:模型组大鼠在吸入异氟烷麻醉下按Brennan法建立大鼠趾部切口疼痛模型,对照组大鼠吸入相同时间的异氟烷,但不作手术切口。术后1h内观察动物累积疼痛评分的改变。术后2h,每组取大鼠3只麻醉,经左心室插管灌注固定后取中脑;另外3只大鼠快速断头处死,分离中脑,匀浆提取总蛋白。分别用免疫组化和免疫印迹法观察大鼠中脑导水管周围灰质内c-fos表达的变化。结果:12只大鼠均进入结果分析。①模型组大鼠的累积疼痛评分明显高于对照组大鼠的累积疼痛评分(19.6±2.3)分和(2.4±0.7)分(t=1.35,P<0.01)。②模型组大鼠中脑导水管周围灰质内可见c-fos的大量表达,Fos阳性神经元主要集中在大鼠中脑导水管周围灰质腹外侧区,其次为腹中间区、背外侧区和背中间区,各区与对照组相比差异显著(P<0.05或0.01)。③免疫印迹结果显示模型组大鼠中脑导水管周围灰质内Fos蛋白呈高表达。结论:采用免疫组化和免疫印迹两种方法,在翻译水平上检测c-fos基因的表达,证实大鼠趾部切口疼痛可引起中脑导水管周围灰质内Fos蛋白的表达,且大鼠在术后出现疼?

经颅磁刺激后脑梗死大鼠学习记忆与海马c-Fos的表达

目的:研究经颅磁刺激对脑梗死后大鼠学习记忆功能和脑海马区c-Fos表达的影响。方法:实验于2004-09/12在华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科实验室完成。48只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、经颅磁刺激组,每组16只。模型组和经颅磁刺激组大鼠采用线栓法制作一侧大脑中动脉闭塞的脑梗死模型。经颅磁刺激组在制模后第2天给予每天2次、每次30个脉冲的经颅磁刺激治疗,疗程4周。每组中的8只大鼠分别于4周后检测Y-迷宫中的学习记忆成绩和梗死侧海马c-Fos的表达。结果:经颅磁刺激组大鼠学习记忆功能明显改善(学习尝试次数:18.36±4.87;记忆再现次数:6.05±1.34),与模型组比较(学习尝试次数:26.40±5.45;记忆再现次数:3.72±1.18),差异均有显著性意义(t=3.65,3.28;P均<0.01);经颅磁刺激组大鼠海马各区c-Fos阳性表达细胞数显著增加(CA1:28.55±3.62,CA2:25.27±3.09,CA3:27.65±3.53,齿状回:34.92±6.56),与模型组比较(CA1:9.42±1.28,CA2:7.58±1.18,CA3:8.63±1.24,齿状回:11.36±2.04),差异均有显著性意义(t=17.22,19.32,17.57,11.87;P均<0.01)。结论:应用转基因技术获得的c-fos基因突变的小鼠,表现出明显的空间学习记忆障碍,提示c-fos等即早基因的激活可能是学习记忆形成的必要条件。经颅磁刺激?

胰岛素对局灶性脑缺血再灌注大鼠c-fos和bcl-2基因表达的影响

目的 探讨胰岛素对脑缺血再灌注损伤的中枢保护机制。方法 参照 Zea L onga线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型 ,采用免疫组化法检测同一剂量胰岛素 ( 2 IU / kg)对缺血再灌注不同时限点脑组织 FOS和 BCL - 2蛋白的表达。结果 与假手术对照组和未用药组相比 ,胰岛素能显著上调缺血侧大脑皮层及基底节区FOS和 BCL - 2蛋白的表达 ( P<0 .0 0 1)。结论 胰岛素能促进缺血再灌注脑组织 FOS和 BCL - 2蛋白的表达 ,这可能是其中枢保护机制之一。

全脑缺血再灌注小鼠额叶和海马c-fos基因的表达

目的:探讨c-fos基因表达在全脑缺血再灌注后不同时间的变化规律。方法:实验动物全部采用由白求恩医科大学实验动物中心提供的雄性昆明小鼠,6～7周龄,体质量25～28g。①动物分组:第1批:40只小鼠随机分为假手术组5只,脑缺血再灌注组35只,根据再灌注不同时间提取标本,分别为术后1h,1d,3d,7d,2周,4周,6周,每个时间点5只。第2批:40只小鼠用于反转录-聚合酶链反应,分组同上。②模型制备及检测方法:制备全脑缺血再灌注损伤模型,假手术组不阻断颈总动脉亦不放血。采用卒中指数对各组小鼠神经病学症状进行评价。于小鼠双侧颈总动脉阻断再灌注后1h,1d,3d,7d,2周,4周,6周取小鼠额叶皮质、海马区脑组织采用免疫组织化学染色、反转录-聚合酶链反应技术,对c-fos基因表达变化进行检测。结果:80只小鼠均进入结果分析,无脱落。①免疫组化检测c-fos基因表达产物Fos蛋白结果:假手术组Fos蛋白有较弱表达,免疫组化染色假手术组未见Fos蛋白阳性神经元;再灌注1h在额叶皮质与海马区即可见Fos蛋白表达升高,与假手术组差异显著,再灌注1dFos蛋白表达达最高峰,并持续至2周(P<0.01),以后随时间延长逐渐下降,到6周达假手术组水平。②反转录聚合酶链反应检测c-fos表达结果:假手术组海马区有少量c-fosmRNA表达。再灌注1hc-fosmRNA转录水平显著升高,与假手术组差异有显著性意义(P<0.01),至5周时仍呈现较高转录水平(P<0.05),随后下降,至4周时达假手术组水平。结论:全脑缺血再灌注可诱导中枢神经系统c-fos基因的持续表达。