鞘磷脂合成酶2通过Wnt/β-catenin通路调控卵巢癌TOV-21G细胞的恶性生物学行为

目的:探讨鞘磷脂合成酶2(SMS2)是否通过Wnt/β-catenin信号通路调控卵巢癌(OC)TOV-21G细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及其机制。方法:收集武汉市第三医院2022年7月至2023年5月间确诊的21例OC患者的癌及癌旁组织标本,免疫组化法检测OC组织SMS2表达水平。体外培养TOV-21G细胞,将细胞分为对照组、shRNA慢病毒阴性对照组(sh-NC组)、SMS2 shRNA慢病毒组(sh-SMS2组)、Wnt/β-catenin通路激活剂组LiCl(LiCl组)和sh-SMS2+LiCl组。Edu染色法、Transwell法、流式细胞术分别检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力及凋亡水平,WB法检测细胞中SMS2、Ki67、cyclin D1、BAX、c-caspase3、Bcl-2及Wnt/β-catenin通路蛋白(β-catenin、c-Myc、MMP-9)的表达。构建TOV-21G细胞裸鼠移植瘤模型,观察敲低SMS2对移植瘤生长和SMS2、β-catenin表达的影响。结果:与癌旁组织比较,OC组织中SMS2呈高表达(P<0.01)。转染sh-SMS2后,TOV-21G细胞中SMS2表达水平显著降低(P<0.05),细胞的增殖、迁移和侵袭能力及Bcl-2、β-catenin、c-Myc、MMP-9蛋白表达均显著降低(均P<0.05),细胞凋亡率、BAX、c-caspase3蛋白表达均显著升高(均P<0.05);LiCl处理能逆转敲低SMS2对TOV-21G细胞增殖、迁移和侵袭及Wnt/β-catenin通路的抑制作用(均P<0.05)。体内成瘤实验显示,敲低SMS2抑制裸鼠移植瘤的生长及SMS2、β-catenin蛋白的表达(均P<0.05)。结论:敲低SMS2表达通过Wnt/β-catenin信号通路抑制OC TOV-21G细胞的增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡,同时LiCl处理则能逆转敲低SMS2对TOV-21G细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。

DHA对人脑胶质瘤T98G细胞迁移和侵袭的影响机制

目的探究双氢青蒿素(DHA)对人脑胶质瘤T98G细胞迁移和侵袭的影响机制。方法体外培养人脑胶质瘤T98G细胞,将其分为对照组、低DHA组(10 mg/L DHA)、中DHA组(20 mg/L DHA)、高DHA组(40 mg/L DHA)、阳性药物组(50 mg/L 5-氟尿嘧啶)和抑制剂组(20 mg/L DHA+20μmol/L LY294002)。采用CCK-8、细胞黏附实验、Transwell小室及蛋白免疫印迹法分别对细胞增殖活力、黏附、迁移、侵袭能力及上皮间质转化(EMT)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶(Akt)通路相关蛋白的表达水平进行分析。结果随着细胞处理时间的递增,各组T98G细胞增殖活力呈递增趋势(P<0.05)。与对照组比较,其他各组T98G细胞增殖活力、黏附、迁移和侵袭能力、p-PI3K、p-Akt、p-ERK、N-cadherin、Vimentin和FN蛋白表达均显著降低(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05),且低、中、高DHA组呈剂量依赖性降低或升高(P<0.05)。与低、中DHA组比较,阳性药物组、抑制剂组细胞增殖活力、黏附、迁移和侵袭能力、p-PI3K、p-Akt、p-ERK、N-cadherin、Vimentin和FN蛋白显著降低(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论DHA抑制人脑胶质瘤T98G细胞的黏附、迁移、侵袭和EMT,其机制可能是通过抑制PI3K/Akt通路的信号转导发挥作用。

鲢、鳙、银鲫和团头鲂肠道G细胞定位与免疫组化研究

应用免疫组织化学ＡＢＣ法，用胃泌素抗血清对鲢、鳙、银鲫和团头鲂４种无胃养殖鱼肠道Ｇ细胞进行检查，结果４种鱼的肠粘膜中均有Ｇ细胞存在。Ｇ细胞集中分布在前历前段，主要位于肠褶的顶部和中部，在肠上皮和杯状细胞之间穿插，它们的形态多样。本文对４种鱼肠道Ｇ细胞的分布特点与哺乳动物、鸟类及其他无胃硬骨鱼类进行了比较，讨论了这４种鱼肠道Ｇ细胞的形态特征及其与功能的关系。

三种脾气虚证模型大鼠血清胃泌素及胃窦G细胞的比较研究

目的:对3种脾气虚证模型大鼠的血清胃泌素及胃窦部胃泌素分泌细胞(G细胞)进行比较研究。方法:动物随机分为4组,即对照组、大黄组、双因素组(大黄法、游泳力竭法复合)、三因素组(大黄法、游泳力竭法、饥饿法复合)。检测血清胃泌素,胃窦G细胞等指标。结果:双因素组、三因素组的上述指标与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),以三因素组为著(P<0.01)。结论:脾气虚证大鼠胃窦G细胞数量减少,释放胃泌素减少,血清胃泌素水平降低;三因素复合法制作脾气虚证动物模型效果似最优。

三参滋胃饮对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜G细胞和D细胞的作用

目的 :探讨三参滋胃饮对慢性萎缩性胃炎 (CAG)大鼠胃黏膜 G细胞和 D细胞的作用及其机制。方法 :采用综合法 (主动免疫、寒凉胆汁及热水灌胃等 )复制 CAG大鼠模型 ,应用大、小剂量三参滋胃饮及对照药物维酶素 (WMS)连续给药 5 0 d,观察给药前后各组胃黏膜病理改变、免疫组化染色后 G细胞及 D细胞的形态和数量变化。结果 :萎缩性胃炎模型鼠 G细胞和 D细胞数量明显减少 (P<0 .0 1 ) ,且两种细胞均有脱颗粒现象 ;G/D比值下降 ,表明在萎缩发生期间 G细胞下降速度较 D细胞快 ,即 G细胞对萎缩病变反映更为敏感。给药结束后三参滋胃饮组 G、D细胞数量均明显增多 ,最终使 G/D比值恢复至正常组水平 ,且与 WMS组比较差异有显著性(P<0 .0 5 )。大剂量组病理改变的恢复情况优于小剂量组。结论 :三参滋胃饮可能通过改善胃黏膜炎症反应促进腺体及内 (旁 )分泌细胞再生 ,通过改善胃肠激素对胃功能的调节作用而发挥治疗作用。

脾虚证与胃窦粘膜D和G细胞关系的实验研究

本研究采用ABC法,对大黄塑造的脾虚证大鼠的胃窦粘膜进行了免疫组织化学反应,分别显示胃窦粘膜的D和G细胞,并用医学图象分析系统,对D和G细胞的数目、细胞面积及细胞平均灰度值进行定量分析。结果表明,脾虚证大鼠与正常对照组大鼠相比,胃窦粘膜D和G细胞数均减少(P<0.01)、D细胞面积缩小(P<0.01),G细胞灰度值降低(P<0.01),G/D细胞数和面积比值均升高(P<0.05,P<0.01),用四君子汤治疗后的脾虚证大鼠与自然恢复组大鼠相比,G细胞面积增大(P<0.0(?)),细胞灰度值变低(P<0.05)。结果提示:胃窦粘膜D细胞分泌活动增加,G细胞分泌活动减弱,G/D细胞比例失调,可能是脾虚证的一个重要病理机制,而四君子汤的健脾益气功效,可能与其能增加G细胞合成胃泌素的能力有关。

实验性脾气虚大鼠血清胃泌素、胃窦G细胞的变化及黄芪建中汤的干预

[目的]探讨脾气虚证大鼠血清胃泌素(gastrin,GAS)、胃窦黏膜胃泌素分泌细胞(G)的变化及黄芪建中汤的干预作用。[方法]以三因素复合的方法复制脾气虚证大鼠模型,随后分别以黄芪建中汤低、中、高剂量对脾气虚大鼠进行复健,在干预后不同时间段,分别检测血清木糖浓度、血清肌酸磷酸激酶活性、血清GAS水平及胃窦G细胞等指标。[结果]随用药时间的延长,各用药组上述指标逐步恢复;中、高剂量组用药21天时,与同期模型组比较,差异有显著性(P<0.05或P<0.01);其中,高剂量组对G细胞数的改善作用,优于中剂量组(P<0.05)。[结论]脾气虚证胃窦G细胞数量减少,释放GAS减少,血清GAS水平降低;黄芪建中汤对脾气虚大鼠有可靠的治疗作用,中、高剂量均为有效用药浓度,尤以高剂量更为理想。

对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠壁细胞和G细胞的体视学研究

采用ＨＥ染色和免疫组化方法结合生物体视学技术，对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠在胃底腺的壁细胞和幽门部胃粘膜的Ｇ细胞进行立体计量研究。结果显示：糖尿病状态的早期，壁细胞和Ｇ细胞的体积均明显增大，数量却显著减少。根据正常情况下壁细胞和Ｇ细胞的细胞动力学变化、胃泌素的生物学作用和上述实验结果，认为大鼠胃底腺峡部的干细胞向壁细胞分化成熟的功能及Ｇ细胞的分裂增殖活动，在胰岛素缺乏的情况下受到一定程度的抑制，而这种功能的抑制是糖尿病状态下易出现胃粘膜萎缩、胃酸分泌减少和胃轻瘫的重要原因之一。

疏肝和胃丸对幽门结扎胃溃疡大鼠胃黏膜G细胞的调节作用

目的:观察疏肝和胃丸对胃溃疡大鼠G细胞的调节作用。方法:采用幽门结扎法复制大鼠胃溃疡模型,通过免疫组织化学观察胃黏膜G细胞的变化。结果:疏肝和胃丸组大鼠胃溃疡组织中G细胞数目明显减少,与模型组比较有显著性差异P<0.01。结论:疏肝和胃丸能促使胃溃疡组织中G细胞萎缩,从而减少胃酸、胃蛋白酶的分泌,达到治疗和预防溃疡病的作用。

胃窦部G细胞与消化性溃疡和胃癌关系的探讨

胃泌素是重要的胃肠激素之一,作用于胃壁细胞膜上的胃泌素受体,调整胃酸的分泌.胃酸和消化性溃疡的发生发展关系密切,但胃窦部G细胞和消化性溃疡及胃癌的关系众说不一.

慢性胃炎患者粘膜内EGF和TFF1的表达及G细胞的相关研究

目的 探讨EGF和TFF1在慢性胃炎患者胃窦粘膜内的表达及G细胞相关研究。方法 免疫细胞化学。结果 EGF和TFF1在慢性胃炎粘膜内的表达与正常对照组相比均有减弱或消失, 而且有显著性差异(P<0. 01)。在萎缩性胃炎的肠化区EGF和TFF1均为阴性, 但与其相邻的腺体内TFF1 仍为阳性反应。G细胞数目在Hp+ 和Hp 组之间无显著性差异, 与正常对照组比较亦无差异(P>0 .05); 但萎缩性胃炎的G细胞显著减少, 与正常对照组有差异(P<0. 01)。结论 慢性胃炎粘膜内的EGF和TFF1表达减弱或消失与Hp或其它致病原有关。肠化区内的TFF1 消失, 可能与细胞恶变有关。Hp+组患者的G细胞无增加。

3种方剂水煎液对实验性慢性胃炎大鼠血清胃泌素水平、G细胞密度及胃窦粘膜PGE＿2含量的影响

采用幽门弹簧插入法及去氧胆酸钠口服法复制大鼠实验性慢性胃炎病理模型，观察＂实痞通＂、＂甘平养胃＂及＂胃乐＂方对ＥＣＧ的影响，结果经３种方剂治疗后，ＥＣＧ血清胃泌素，Ｇ细胞密度及胃窦粘膜ＰＧＥ＿２含量均明显恢复近正常。

miR-9靶向调控跨膜蛋白16A基因对胶质瘤T98G细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨mi R-9和跨膜蛋白16A(transmembrane protein 16,TMEM16A)基因在胶质瘤T98G细胞中的表达,阐明mi R-9对TMEM16A基因的靶向作用及其对T98G细胞增殖和侵袭的影响。方法运用生物信息学方法对mi R-9和TMEM16A基因的靶向配对关系进行预测,采用荧光素酶报告系统鉴定;脂质体2000转染mi R-9模拟物及干扰RNA后,Real-time PCR检测mi R-9与TMEM16A m RNA在癌细胞中的表达,Western blot检测TMEM16A蛋白在癌细胞中的表达,平板克隆形成实验检测癌细胞的增殖情况以及Transwell小室检测癌细胞体外的侵袭性。结果生物信息学软件Target Scan和mi Randa显示mi R-9与TMEM16A基因靶向配对良好,荧光素酶报告系统鉴定发现mi R-9能够抑制TMEM16A m RNA表达。Real-time PCR和Western blot检测结果均表明过表达mi R-9能够降低TMEM16A m RNA和蛋白的表达。平板克隆形成实验和Transwell实验发现过表达mi R-9能够分别抑制T98G细胞的增殖和侵袭。结论 mi R-9通过负性调控胶质瘤T98G细胞中TMEM16A基因的表达抑制癌细胞的增殖和侵袭。

大叶茜草素抑制大鼠CFSC-2G细胞活化和胶原合成

目的:观察大叶茜草素(mollugin)对大鼠肝星状细胞系CFSC-2G活化和胶原合成的影响并探讨其分子机制。方法:小剂量(10μmol/L)过氧化氢(H_2O_2)诱导CFSC-2G细胞30 min后,再加入不同浓度(0、20、40、60和120μmol/L)的mollugin处理。MTT法检测细胞活力,real-time PCR和Western blot法分别检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、核因子κB(NF-κB)p65、Bcl-2、Bcl-x L、Bax以及肝星状细胞活化标志物α-平滑肌肌动蛋白和Ⅰ型胶原蛋白的mRNA和蛋白表达,并用Western blot法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的磷酸化水平。结果:低剂量H_2O_2可以诱导CFSC-2G细胞活化,mollugin明显促进p38 MAPK磷酸化,上调Nrf2和HO-1的mRNA和蛋白表达,下调NF-κB p65、Bcl-2和Bcl-x L的mRNA和蛋白表达,抑制H_2O_2诱导活化的CFSC-2G细胞活力和胶原合成(P<0.05)。结论:Mollugin可能通过上调Nrf2和HO-1并下调NF-κB p65和Bcl-2表达,抑制CFSC-2G细胞活化和胶原合成。

小鼠实验性胃溃疡自愈期间胃窦粘膜G细胞动力学的研究

用雄性昆明种小鼠45只,分实验溃疡组、盐水对照组和正常对照组。在溃疡组的第3、6、9和20d,腹腔注射秋水仙碱后取胃窦粘膜。用Sternberger免疫组织化学PAP法显示G细胞,苏木精复染细胞核。正常胃窦粘膜上皮和幽门腺细胞分裂指数为5.93±1.23(x±s,下同);G细胞百分数为2.76±0.45;G细胞分裂指数Ⅰ为0.85±0.18;G细胞分裂指数Ⅱ为0.02±0.01。溃汤组6、9和20d的胃窦粘膜上皮和幽门腺细胞分裂指数、G细胞百分数及G细胞分裂指数Ⅱ,分别比正常组及盐水对照组多,呈高度显著性差异;G细胞分裂指数Ⅰ在溃疡组9d与正常组相比、前者20d与盐水组相比均有显著性差异;溃疡组6d G细胞百分数最高,9dG细胞分裂象数较多。溃疡组3d和6d,G细胞在腺中的分布比正常组明显上移。本研究提示,在胃溃疡修复过程中,随时间推移,幽门腺中G细胞的数量、来源、分布与形状有动态改变。

溃疡病患者胃窦粘膜5-HT细胞和G细胞的变化

目的：观察消化性溃疡病患者胃窦粘膜幽门腺5-HT细胞和G细胞的变化。方法：采用免疫组织化学PAP双重染色法，在同一张切片上显示5-HT细胞和G细胞。结果：5-HT细胞多散在于胃窦粘膜的中下1/3，呈棕褐色，形态多样，常见有突起的细胞。G细胞呈带状分布于胃窦粘膜的中1/3，大多数G细胞为蓝色，可见少数细胞为蓝黄混合色，呈圆形或锥体形。5-HT细胞数和G细胞数在胃溃疡（Gu）组分别为：4.25±1.20，7.79±2.11；十二指肠溃疡（Du）组：5.48±1.74，9.34±1.87; 对照（Con）组：3.17±1.65，6.08±1.67。5-HT细胞数和G细胞数在Gu组和Du组都增加，以Du组增加最为明显，与对照组相比均有显著性差异（P<0.01）。结论：胃窦粘膜5-HT细胞和G细胞可能参与了消化性溃疡病的内分泌调节。

实验性狗溃疡病手术后G细胞密度及功能的变化研究

目的 研究实验性狗溃疡病手术后G细胞密度和功能的变化。方法 给成年杂种狗分别施行胃大部切除、胃空肠吻合术(DPG-BⅡ)或保留幽门括约肌胃段切除术(PPSG)或高选择性迷走神经切断术(HSV)。以中和滴定法测定胃酸;以放射免疫法测定血清胃泌素;用免疫组化方法检测G细胞数量和功能。结果 三种手术均能有效抑制胃酸分泌。DPG-BⅡ和PPSG术后血清胃泌素降低,而HSV术后血清胃泌素升高。三种手术后胃窦或残留胃窦、十二指肠和空肠的G细胞数密度增加、功能增强。结论 溃疡病术后G细胞呈代偿性增生和功能增强,胃泌素水平不随胃酸降低而相应降低。

胃窦部G细胞及其激素在消化性溃疡和胃窦癌的变化

本文应用ＡＢＣ酶标技术及放免方法测定了２３例不同类型慢性胃炎、３６例消化性溃疡，１７例胃窦癌及８例胎儿胃粘膜的胃窦部Ｇ细胞和血清胃泌素的变化，明确了胃窦部Ｇ细胞分布特点及不同疾病时Ｇ细胞及其激素的变化规律。

氯化钴诱导上皮间充质转化并增加胶质瘤T98G细胞侵袭能力的研究

目的研究氯化钴对胶质瘤T98G细胞上皮间充质转化(EMT)和侵袭能力的影响。方法用氯化钴处理胶质瘤T98G细胞,未处理组作为对照,Western blot检测各组细胞上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和间充质细胞波形蛋白(Vimentin)的表达,采用Transwell及Boyden方法检测各组迁移细胞数。结果氯化钴处理胶质瘤T98G细胞后发生了典型的EMT:E-cadherin表达明显降低(P<0.05或P<0.01),Vimentin表达明显升高(P<0.01);Transwell迁移实验显示迁移能力明显增强:穿过Transwell小室滤膜的细胞数由(29±5)个增加至(53±4)个(P=0.0397);Boyden结果显示:穿过小室细胞数由(26±3)个增加至(36±2)个(P=0.0402)。结论氯化钴能促进胶质瘤T98G细胞发生EMT,增强胶质瘤T98G细胞迁移能力。