G蛋白β_3基因多态性与人类疾病

人类G蛋白 β3 亚单位基因 (GNB3)外显子 10第 82 5位点的一个多态性C→T与高血压、肥胖症、2型糖尿病以及双极情感障碍和抑郁症等均表现出极大的相关性。 82 5T等位基因携带者 (CT +TT)特别是TT纯合子患高血压及其并发症、超重或肥胖、2型糖尿病以及双极情感障碍和抑郁症等的危险性较CC纯合子显著增高。但这几种疾病 (特别是前三者 )是否由共同的病理生理机制发生还是因其中某一种占主导地位而诱发疾病目前尚不清楚。

知母、黄芪活性成分对M_2受体与G蛋白偶联的影响

目的探讨知母活性成分 ZMS、黄芪活性成分 HQ 和两者联合应用对 M_2受体和 G 蛋白偶联的影响。方法以转染 M_2受体的 CHOm2细胞为模型,用~3H-N-甲基东莨菪碱(NMS)结合法测定 M_2受体的密度,用不被 GTP 酶水解的^(35)S-γ位硫代 GTP(GTPγS)在 M 受体激动剂氨甲酰胆碱作用下与 G 蛋白进行不可逆结合,测定结合部分的放射性,以反映 M_2受体与 Gα蛋白的偶联活性。分别测定加入 ZMS 及 HQ(10^(-5)mol/L)对偶联的影响,并以加入等体积二甲基亚砜(DMSO)为对照。以偶联活性被 M_2受体密度除,所得的商反映偶联效率。结果 ZMS 和 HQ 在浓度为10^(-5)mol/L 时都能提高 M_2受体密度和 M_2受体与 G 蛋白的偶联活性。HQ 能提高偶联效率,ZMS 无此作用,两者联合应用时偶联效率的提高更显著(偶联效率依次为1.102,1.011,1.324)。结论 ZMS 和 HQ 增强M_2受体和 G 蛋白偶联活性的机制不同,前者主要提高 M_2受体密度,从而使 G 蛋白的偶联量增加,后者则除提高 M_2受体密度外还提高偶联效率。两者联合应用时偶联效率的提高更显著。

小GTP结合蛋白TC10在面神经损伤后的表达变化

目的 :探讨大鼠面神经切断后小 GTP结合蛋白 TC10 m RNA在面神经核中的表达变化。方法 :利用逆转录 PCR分析方法及甲苯胺蓝染色 ,观察正常以及面神经切断后 6、12、18、2 4h大鼠面神经核中 TC10m RNA的变化和细胞浆、核的体积变化。结果 :在正常面神经核中可见 TC10的微弱表达 ,面神经切断后 6 h即开始增加 ,术后 2 4h达到最大值。结论 :TC10可能在面神经损伤后的信号转导、细胞结构的变化中具有重要的意义。面神经损伤能促进神经元的信号转导 ,从而促进细胞转录水平的增加和结构的变化。

Giα2和Giα3蛋白在心脏缺血预处理中的作用

目的：研究离体大鼠心脏缺血预处理对Ｇ蛋白的影响。方法：免疫印迹法测定心肌细胞膜Ｇｉα２、Ｇｉα３和Ｇｓα含量；放射免疫法测定腺苷酸环化酶活性。结果：与对照组相比，缺血再灌注组心功能受到明显损伤，缺血预处理组心功能显著恢复。各组心脏Ｇｓα含量无明显变化；缺血再灌注组Ｇｉα含量明显升高，腺苷酸环化酶活性降低；缺血预处理组与缺血再灌注组相比Ｇｉα２和Ｇｉα３含量分别下降４１．３％和３４．５％，腺苷酸环化酶活性升高。结论：缺血再灌注可引起腺苷酸环化酶信号转导系统功能障碍，缺血预处理可明显减轻缺血再灌注损伤，使细胞膜信号转导功能恢复。

Rho蛋白与肿瘤

Rho蛋白(RhoGTP酶)家族与肿瘤关系密切,在其调节子和效应子作用下,影响肿瘤的发生、生长、侵袭和转移。因此Rho蛋白和它们的效应子可能是有效的抗肿瘤靶点,针对这些靶点可以研究有效的药物或基因治疗物质,干涉Rho蛋白的功能,促进肿瘤临床治疗的发展。

长期摄入不同剂量乙醇对大鼠骨骼肌G11α表达及胰岛素抵抗的影响

目的:观察G蛋白家族中G11α和Gqα mRNA在乙醇诱导下对大鼠骨骼肌胰岛素抵抗的作用.方法:①实验于2003-09/2005-03在山东省立医院中心实验室完成.选用雄性Wistar健康成年大鼠40只.随机将大鼠分为4组,对照组、大剂量饮酒组、中剂量饮酒组、小剂量饮酒组,每组10只.对照组:胃管灌注蒸馏水5.0 g/(kg·d),1次/d;大、中、小剂量饮酒组:胃管灌注乙醇量5.0,2.5,0.5g/(kg·d),1次/d,每组均喂养5个月.②采用强生血糖仪测定空腹血糖和糖负荷后2 h血糖.③采用液体闪烁计数仪分别测量基础状态下、胰岛素刺激后的组织非特异吸收的2-D-3H葡萄糖量.基础状态葡萄糖摄取=单位重量基础状态肌肉计数-单位重量煮沸变性肌肉计数;胰岛素刺激后葡萄糖摄取=单位重量胰岛素刺激后肌肉计数-单位重量基础状态肌肉计数.④采用反转录聚合酶链反应法测定G11α和GqαmRNA水平.采用蛋白质印迹实验测定G11α和Gqα蛋白水平.⑤各组间比较采用单因素方差分析.结果:大鼠40只均进入结果分析.①各饮酒组大鼠空腹血糖和糖负荷后2 h血糖与对照组相近.②大、中剂量饮酒组大鼠基础状态骨骼肌糖摄取量与对照组比较,分别下降29%,72%(P＜0.05);胰岛素刺激后,分别下降27%,61%(P＜0.05);小剂量饮酒组大鼠无明显变化.③大、中、小剂量饮酒组大鼠骨骼肌G11α mRNA表达与对照组比较,分别下降57%,42%,38%(P＜0.05～0.01);Gqα mRNA表达无明显变化.④大鼠长期摄入乙醇后骨骼肌G11α和Gqα蛋白水平变化与mRNA水平变化趋势一致.结论:①乙醇喂养5个月后,大鼠机体水平上没有表现出明显的糖代谢紊乱.②摄入乙醇剂量为5.0 g/(kg·d)和2.5 g/(kg·d)5个月后,大鼠骨骼肌产生明显的胰岛素抵抗.③长期摄入乙醇可影响大鼠骨骼肌G11α表达,并呈剂量依赖性.④各饮酒组大鼠骨骼肌Gq α mRNA表达及其蛋白水平变化不明显.

激活Gs蛋白对胆红素诱导的大鼠小脑颗粒神经元凋亡影响的研究

目的 研究激活Gs蛋白对胆红素诱导的小脑颗粒神经元凋亡的影响及作用机制。方法 采用原代培养的新生大鼠小脑颗粒神经元 ,用霍乱毒素 (CT)激活Gs蛋白 ,用二乙酸荧光素(FDA)染色及四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法测定胆红素诱导的小脑神经元存活率 ,12 5I放射免疫法测定细胞内环磷酸腺苷 (cAMP) ,Fura 2 /AM荧光比值成像技术测定细胞内钙浓度 ([Ca2 +]i)。结果 CT诱导细胞内cAMP升高并呈剂量依赖性地保护胆红素诱导的小脑颗粒神经元凋亡。当加入腺苷环化酶(AC)刺激剂 (Forskolin)及cAMP类似物 (8 溴 环磷酸腺苷 )后 ,虽导致细胞内cAMP升高 ,但不能阻断或减弱胆红素诱导的神经元凋亡。另发现胆红素浓度依赖性触发细胞内钙升高 ,而CT可降低胆红素导致的细胞内钙的升高。结论 Gs蛋白可能参与了小脑颗粒神经元凋亡的调控 。

1997年《MeSH》新主题词及其使用规则

1997年版《MeSH》新增主题词350个,款目词(见参照词)560个。主题词的不断增加说明了生物医学的发展、研究的深入,因此,主题词的专指程度越来越高。从学科分布来看主要是遗传学、免疫学、生物化学、细胞生物学、病毒学等学科。在临床方面,口腔医学和感染性疾病的主题词增加较多。在中医学方面,除了已有的针灸、阴阳等主题词外,1997年新增了主题词:气(中医),说明中医理论已走向世界。

肾上腺素在心肌细胞肥大中的作用

目的 :探讨肾上腺素在心肌细胞肥大中的作用。方法 :在培养新生大鼠心肌细胞上 ,通过测量心肌细胞 [3 H]-Leu的掺入量来判断心肌细胞肥大。结果 :肾上腺素能明显增加心肌细胞 [3 H]-Leu的掺入量 ,酚妥拉明、心得安、百日咳毒素 (PTX)和蛋白激酶C(PKC)抑制剂 (calphostinC)均可抑制肾上腺素诱导的心肌细胞 [3 H]-Leu掺入量增加。结论 :肾上腺素诱导的心肌细胞肥大反应与激动肾上腺能受体 (α受体和 β受体 )有关。

衰老大鼠主动脉及其平滑肌细胞G蛋白信使核糖核酸的变化

目的衰老引起的血管功能减退与Ｇ蛋白有关，本实验研究２４月龄大鼠主动脉及平滑肌细胞（ＳＭＣ）中Ｇ蛋白α亚基的信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）变化。方法用Ｇｓα、Ｇｉ２α、Ｇｉ３α和Ｇｏα的ｃＤＮＡ探针按Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和ｄｏｔｂｌｏｔ法对６和２４月龄大鼠主动脉和主动脉ＳＭＣ相应的Ｇ蛋白α亚基ｍＲ－ＮＡ进行定量分析。结果Ｇｏα在主动脉及其ＳＭＣ中均为２条带（３．５和３．８ｋｂ），Ｇｉ３α和Ｇｓα在二者中各为１条带（３．２和１．８ｋｂ），但Ｇｉ２α主动脉有２．１ｋｂ的强带和１．７ｋｂ的弱带，而ＳＭＣ只有２．１ｋｂ的１条带。主动脉中各Ｇα均无显著变化，而ＳＭＣ中Ｇｏα、ＧｓαｍＲＮＡ轻度升高，Ｇｉ２α显著升高（Ｐ＜０．０５）。结论主动脉ＳＭＣ中Ｇ蛋白α亚基的ｍＲＮＡ表达是有变化的，其趋势与主动脉基本一致，但变化更明显一些。

IFNγ影响肝星状细胞α_1(Ⅰ)mRNA表达信号的传递途径

目的 :探明G蛋白在γ -干扰素诱导抑制胶原基因表达中发挥的作用 .方法 :通过活化的G蛋白及细胞内主要信号传递途径确定IFNγ诱导肝星状细胞 (HSC)α1(Ⅰ )mR NA表达的影响 .结果 :与对照比较IFNγ显著降低HSCα1(Ⅰ )胶原mRNA水平 (5 6 .7± 0 .3) % (P <0 .0 1) ;百日咳毒素 (PTX)可阻断IFNγ对α1(Ⅰ )mRNA水平的抑制作用 ,当为 10 μg·L-1时 ,α1(Ⅰ )mRNA水平提高到 (12 1± 16 ) %(P <0 .0 1) ,但对阻断cAMP或PKA没有抑制作用 .结论 :IFNγ抑制HSCα1(Ⅰ )胶原mRNA表达受PTX敏感的G蛋白调节 .

心脏β-AR信号转导系统的变化及其在SIRS时的临床意义

本文从分子水平上探讨全身炎症反应综合征时心脏舒缩功能障碍，心肌细胞膜β肾上腺素能受体及其信号转导系统中β受体、Ｇ蛋白、腺苷酸环化酶的变化及其可能机制，提出全身炎症反应综合征时保护该系统、防止β受体下调、从基因水平上调控Ｇ蛋白及其开发作用于Ｇ蛋白的药物防治心肌受损的可能性。