中药三联疗法联合GnRH-a减量法防治保守性手术后卵巢子宫内膜异位症复发的临床研究

目的探究中药三联疗法联合促性腺素释放素药物(GnRH-a)减量法防治保守性手术后卵巢子宫内膜异位症复发的临床效果。方法选择2022年7月—2023年12月于南昌市洪都中医院就诊并经腹腔镜手术确诊的卵巢子宫内膜异位症患者100例,按随机数字表法分为参照组与研究组,各50例。参照组给予亮丙瑞林常规剂量治疗,研究组给予中药三联疗法联合亮丙瑞林减量法治疗,比较两组血清雌二醇(E_(2))、孕酮(P)、糖化抗原125(CA125)水平,抗子宫内膜抗体(EMAb)阳性率,视觉模拟量表(VAS)疼痛评分及治疗总有效率。结果研究组治疗总有效率为98.00%(49/50),高于参照组的84.00%(42/50)(P<0.05)。治疗后及停药6个月后,研究组VAS评分均低于参照组(P<0.05)。治疗后,研究组血清E_(2)、CA125水平及EMAb阳性率低于参照组,P含量高于参照组(P<0.05)。结论对于保守性手术后的卵巢子宫内膜异位症患者,采用中药三联疗法联合GnRH-a减量法治疗,可有效降低其病情复发率,改善痛经症状,远程疗效较理想。

GnRH脉冲治疗男性先天性低促性腺激素性性腺功能减退症的有效性和安全性分析

目的:探究GnRH脉冲治疗男性先天性低促性腺激素性性腺功能减退症(CHH)的有效性和安全性。方法:回顾性分析了2013年1月至2023年3月在我中心应用GnRH脉冲治疗的45例男性CHH患者。治疗方法:戈那瑞林7~15μg,脉冲/90 min。患者前3个月,每个月随访1次,之后每3~6个月随访1次。每次随访记录身高、体重、Tanner分期、阴茎长度及睾丸体积,测量卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及睾酮(T),并记录不良反应。按照WHO第5版的标准进行精液常规分析。结果:45例患者随访时间(19.1±4.3)个月,治疗后FSH、LH、T相比治疗前均明显提高。6例隐睾患者在整个随访期间(18.2±8.6)个月内,睾酮水平均未达到正常。治疗后,所有患者的生殖器官和第二性征均得以改善。73.3%(33/45)的患者精液中出现精子,精子浓度为(18.2±6.2)×10~6/ml,前向运动精子百分率为(19.7±6.5)%,精液量为(1.8±0.6)ml。目前,有8例患者自然生育,3例患者通过辅助生殖技术生育。8例患者出现轻至中度乳房发育,6例患者出现注射部位皮下硬结,3例患者出现过敏反应,表现为全身红疹或局部荨麻疹,未出现其他不良反应。结论:GnRH脉冲治疗是治疗男性CHH有效且安全的方法,但在实际诊疗过程中,应根据患者的实际情况选择恰当的治疗方法。

重组CRM_(197)-4GnRH去势疫苗抗原分子的原核表达及免疫效果评价

通过大肠杆菌表达系统对CRM_(197)-4GnRH重组去势疫苗抗原进行表达,采用不同种类佐剂制备疫苗,研究其对大鼠的免疫去势作用,为获得1种免疫效果好、有效期长、生产成本低的促性腺激素释放激素(GnRH)免疫去势基因工程疫苗提供借鉴。采用白喉毒素无毒突变体(CRM_(197))与4拷贝GnRH串联,将CRM_(197)-4GnRH基因与表达载体连接,并通过优化试验确定大肠杆菌的最优表达条件,用SDS-PAGE和Western blot鉴定目标蛋白的表达情况。将融合蛋白与不同佐剂乳化,制备成9种测试疫苗后分别免疫大鼠,测定血清中GnRH抗体滴度和睾酮浓度。结果显示,重组大肠杆菌的最优表达条件为诱导时间表达5 h,培养基为LB液体培养基,IPTG诱导浓度为0.5 mmol/L;通过SDS-PAGE和Western blot试验,表明目标融合蛋白已成功表达;动物试验结果表明,重组疫苗水包油包水佐剂组、重组疫苗油包水佐剂组、GnRH+Th抗原(辅助型T细胞抗原)表位(G1抗原)油包水佐剂组测试疫苗免疫大鼠较其他组GnRH抗体滴度显著升高、睾酮浓度显著下降(P<0.05),表明这3种疫苗具有良好的免疫去势作用。研究结果为GnRH免疫去势疫苗的研制奠定了基础。

探讨GnRH拮抗剂方案的标准剂量及早发LH峰后的剂量调整

促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)拮抗剂方案已被广泛应用于控制性促排卵(controlled ovarian hyperstimulation,COH)的体外受精(in vitro fertilization,IVF)周期中,作为GnRH激动剂方案的有效替代治疗方法,适用于各种卵巢反应的不孕女性患者。尽管拮抗剂促排卵方案的临床应用已得到广泛认可,但其中仍有较大的优化空间。因此,本文将重点探讨GnRH拮抗剂方案的优缺点、最佳标准用量的选择以及出现早发黄体生成素(luteinizing hormone,LH)峰后拮抗剂用量的调整策略等问题,旨在为该方案的应用提供更为合理和科学的建议。

GnRH激动剂在人工周期冻融胚胎移植黄体支持中作用的荟萃分析

目的:评价GnRH激动剂(GnRH-a)在人工周期冻融胚胎移植(AC-FET)黄体期支持(LPS)中的作用。方法:纳入PubMed、EMBASE和Cochrane数据库中符合纳入标准的研究。检索期限为建库至2023年10月31日。观察指标为种植率、HCG阳性率、临床妊娠率、持续妊娠率、活产率、流产率、宫外妊娠率、多胎妊娠率。采用RevMan5.4软件分析。结果:纳入9项随机对照试验(RCT),共2451例患者,其中GnRH-a LPS组1252例,常规LPS组1199例。黄体期给予GnRH-a可提高种植率(OR=1.29,95%CI为1.12~1.49,P=0.0005)、临床妊娠率(OR=1.32,95%CI为1.12~1.57,P=0.001)和多胎妊娠率(OR=1.82,95%CI为1.29~2.58,P=0.0007),同时降低流产率(OR=0.57,95%CI为0.41~0.79,P=0.0008)。两组的HCG阳性率、持续妊娠率、活产率、宫外妊娠率比较,差异均无统计学意义。结论:AC-FET黄体期添加GnRH-a可提高患者的种植率和临床妊娠率,提示GnRH-a可能是AC-FET黄体支持的新选择。然而,需开展多中心、大样本的RCT,以获得GnRH-a有效黄体支持的统一标准,进一步明确其LPS的安全性和有效性。

腹腔镜下病灶切除术联合GnRH-a对子宫内膜异位症患者生殖激素水平及Th1/Th2细胞平衡的影响

目的 探究腹腔镜下病灶切除术联合促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)对子宫内膜异位症患者生殖激素水平及辅助性T细胞1(Th1)与辅助性T细胞2(Th2)的比值(Th1/Th2)细胞平衡的影响。方法 选取2020年8月至2022年8月南阳市中心医院妇科的子宫内膜异位症患者148例,根据治疗方案分为观察组和对照组,各74例。两组均采用腔镜下病灶切除术,观察组联合GnRH-a治疗,对照组采用米非司酮片治疗,治疗6个月,比较两组患者的临床疗效、生殖激素水平、Th1/Th2细胞平衡及不良反应。结果 观察组的临床疗效为93.24%高于对照组临床疗效78.38%,差异有统计学意义(χ^(2)=6.715,P<0.05)。两组患者用药后血清卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)水平较术前均降低,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(t=7.941,7.858,13.353,P<0.05)。两组患者用药后的血清γ干扰素(IFN-γ)、IFN-γ/白细胞介素-4(IL-4)及白细胞介素-2(IL-2)、IL-2/白细胞介素-10(IL-10)水平较术前均升高,且观察组IFN-γ、IFN-γ/IL-4及IL-2、IL-2/IL-10水平均比对照组高,差异有统计学意义(t=14.283,14.283,11.745,45.061,P<0.05);IL-4、IL-10水平较术前均降低,且观察组IL-4、IL-10水平比对照组低,差异有统计学意义(t=12.495,15.085,P<0.05)。结论 腹腔镜下病灶切除术联合GnRH-a治疗子宫内膜异位症患者,可提高临床疗效,改善患者生殖激素水平和免疫功能。

促性腺激素释放激素(GnRH)疫苗在哺乳动物免疫去势中的研究进展

GnRH免疫阉割是控制动物性欲和生殖能力的一种手段,它可在不做手术的前提下达到“阉割”动物的目的,比手术阉割更安全便捷,是一种对动物福利友好的替代方案。近年来GnRH免疫去势疫苗研究发展迅速,本文阐述了GnRH免疫去势的机制,综述了GnRH疫苗在哺乳动物免疫去势中的研究进展,并进一步探讨了目前GnRH去势疫苗研发困境与发展前景,为GnRH疫苗的广泛开发、完善和推广应用提供参考。

GnRH类似物及其在动物繁殖上的应用

GnRH在动物繁殖调控中的中枢地位毋庸置疑,很多因素都是通过影响下丘脑GnRH的释放或垂体对GnRH的应答而发挥作用的。在兽医临床实践中,GnRH和它的类似物(GnRHa)广泛地用于由于治疗卵巢功能异常引起的不孕、刺激排卵和提高妊娠率。GnRHa和其他一些激素合用,可用于同期发情和胚胎移植。但持续给予GnRH可以导致垂体-卵巢轴的脱敏反应(desensitizing effect),并且具有抑制排卵和阻断发情周期的抗生育效应。因此,现在GnRH的拮抗剂也开始在临床中广泛地应用。很长一段时间,GnRH被认为是唯一可以调节促性腺激素的激素,然而,现在发现了很多能够与GnRH受体(GnRH receptor,GnRHR)结合的同源配体。在哺乳动物,至少已经发现了20种能与GnRHR结合的GnRH的变异体(GnRHs)。这些不同的GnRHs具有明显相同或不同的功能,这些都需要我们去深入地研究其繁殖功能和其他的生理功能,或许将来,这些GnRHs可以很好地在兽医临床实践中应用。本文对GnRH的类似物进行综述,以期为开发出有效且对动物安全的内源性GnRHs和外源性类似物GnRHa提供参考。

Exploration of standard dosage for GnRH antagonist protocol and dosage adjustments after premature luteinizing hormone surge

The gonadotropin-releasing hormone (GnRH) antagonist protocol has emerged as an efficacious alternative to the GnRH agonist protocol for controlled ovarian hyperstimulation (COH) during in vitro fertilization (IVF) cycles, and has been demonstrated applicability in infertile female patients with diverse ovarian responses. While the clinical implementation of the antagonist COH protocol has achieved widespread consensus, opportunities for refinement persist. Therefore, this review article focuses on the advantages and disadvantages of GnRH antagonist protocol, the selection of optimal standard doses, and the strategies for adjusting antagonist doses after the premature luteinizing hormone (LH) surge, aiming to provide more reasonable and scientific recommendations for the application of this scheme.

益经护巢汤联合GnRH-a治疗卵巢功能减退性不孕症的效果

目的:分析益经护巢汤联合促性腺激素释放激素激动剂(GnRH–a)治疗卵巢功能减退性不孕症的效果及对卵巢功能、妊娠结局的影响。方法:选取安顺市中医院于2020年1月至2022年11月收治的102例卵巢功能减退性不孕症患者为研究对象,根据治疗方法不同分为对照组(51例,给予GnRH–a治疗)与观察组(51例,给予益经护巢汤联合GnRH–a治疗),比较两组患者临床疗效、中医症状积分、卵巢功能、子宫内膜厚度、窦卵泡数、妊娠结局及不良反应。结果:观察组患者治疗总有效率高于对照组;治疗后,观察组患者主要症状、次要症状、伴随症状积分均低于对照组;观察组患者血清黄体生成素、卵泡刺激素、睾酮水平均低于对照组,雌二醇水平高于对照组;观察组患者子宫内膜厚度、窦卵泡数高于对照组;观察组患者的妊娠率高于对照组;观察组患者不良反应发生率低于对照组。以上差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:益经护巢汤联合GnRH–a治疗卵巢功能减退性不孕症可改善卵巢功能及妊娠结局,降低不良反应发生率。

腹腔镜手术联合GnRH-a治疗子宫内膜异位症近期疗效及预后复发影响因素分析

目的:分析腹腔镜手术联合促性腺激素释放激素类似物(Gonadotropin releasing hormone analogues,GnRH-a)治疗子宫内膜异位症(Endometriosis,EMS)近期疗效及预后复发情况.方法:回顾性收集2021年3月至2022年4月于本院就诊的EMS患者88例作为研究对象.按照治疗方案的不同将患者分为对照组(腹腔镜手术治疗,42例)和观察组(腹腔镜手术+GnRH-a治疗,46例).对比两组近期疗效、预后复发率以及影响观察组预后的因素.结果:观察组临床疗效高于对照组,复发率低于对照组(P<0.05).观察组中,经二元Logistic回归分析结果显示,发病年龄、美国生育学会(American fertility society,AFS)的EMS分期、术前痛经史、术前孕次、术前产次、宫腔操作既往史是观察组复发率的影响因素(P<0.05).结论:腹腔镜手术联合GnRH-a治疗EMS近期疗效理想,但仍存在一定复发率,发病年龄、AFS的EMS分期、术前痛经史、术前孕次、术前产次、宫腔操作既往史是影响其复发的因素,临床及时对此给予针对性干预有利于预后改善.

两种不同西曲瑞克在年轻不孕患者GnRH拮抗剂方案中的应用

目的比较年轻不孕患者在促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-ant)方案IVF-ET治疗周期中应用两种不同西曲瑞克对临床疗效的影响。方法回顾性分析徐州市妇幼保健院生殖医学科2022年3月至2023年6月收治的年龄<35岁且应用GnRH-ant方案助孕治疗的不孕患者的临床资料,共650个周期。根据使用GnRH-ant的不同种类分为国产西曲瑞克组(国产组,249个周期)和进口西曲瑞克组(进口组,401个周期),比较两组患者的基本资料、促排卵及胚胎实验室指标、临床妊娠结局。结果两组患者的年龄、不孕年限、体质量指数(BMI)、基础性激素及抗苗勒管激素(AMH)水平比较均无显著性差异(P>0.05)。国产组的可利用胚胎数、D3优胚数、D3优胚率、优质囊胚数和优质囊胚率均显著高于进口组(P<0.05);两组间促性腺激素(Gn)总量、Gn天数、扳机日LH、雌二醇(E_(2))及孕酮(P)水平、获卵数、MⅡ卵数、双原核(2PN)卵数、囊胚形成数、扳机日LH升高率、中重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率及注射后不良反应发生率比较均无显著性差异(P>0.05)。两组患者均未发生自发排卵。国产组共42个周期进行鲜胚移植,进口组共73个周期进行鲜胚移植,两组间鲜胚移植后HCG阳性率、胚胎种植率、临床妊娠率、多胎率、早期流产率及活产率比较均无显著性差异(P>0.05)。结论年轻患者采用GnRH-ant方案促排卵治疗时应用国产西曲瑞克和进口西曲瑞克可达到相似的抑制排卵效果,均可获得良好的临床妊娠结局,且使用国产西曲瑞克时可利用胚胎数和优质胚胎数更高。

输精后注射hCG、GnRH对奶牛受胎率的影响

为提高人工授精后荷斯坦奶牛头胎受胎率,研究肌注绒毛膜促性腺激素(hCG)和促性腺激素释放激素(GnRH)的最佳时间和浓度,持续跟踪8头奶牛在输精后30 d内血清中的孕酮浓度变化,每2 d检测1次,分析峰值出现时间;在每个峰值出现前1 d,分别对奶牛肌注1 000 IU hCG或100μg GnRH(n=30),并设置相应空白对照(n=30),分析各组受胎率;选择受胎率高的处理组奶牛,在授精后13 d分别注射1 000、2 000和3 000 IU的hCG(n=30),分析对应受胎率。结果显示:孕酮在授精后2、6和14 d出现3个峰值,分别是1 479、1 472和1 431 pmol/L。在授精后1、5、13 d,肌注GnRH组的受胎率分别是34.5%(10/29)、46.7%(14/30)、40.0%(12/30),对照组为39.3%(11/28),组间无显著性差异(P=0.836);肌注hCG组受胎率分别是21.4%(6/28)、37.9%(11/29)、58.6%(17/29),对照组为30%(9/30),其中授精后1 d与授精后13 d存在显著性差异(P<0.05)。授精后13 d,肌注hCG的1 000、2 000和3 000 IU梯度试验受胎率分别为50.0%(15/30)、56.7%(17/30)、80.0%(24/30),其中肌注1 000 IU与3 000 IU组存在显著性差异(P<0.05)。综上,授精后13 d肌注3 000 IU hCG能显著提高头胎奶牛受胎率。

补肾调肝汤联合GnRH-a治疗子宫内膜异位症的安全性及对围绝经期症状的影响

目的:评价补肾调肝汤联合促性腺激素释放激素激动剂(gonado-tropin-releasing hormone agonist,GnRH-a)治疗子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)的安全性及对围绝经期症状的影响。方法:回顾性分析包头市蒙医中医医院妇产科于2019年1月—2022年1月收治的306例EMT患者的临床资料,根据治疗方法不同分为对照组(采用醋酸曲普瑞林治疗)和联合组(补肾调肝汤+醋酸曲普瑞林治疗),各153例。统计比较两组治疗效果、疼痛程度、安全性及复发率。结果:联合组治疗总有效率为91.50%,显著高于对照组的81.70%(P<0.05)。两组治疗后慢性盆腔疼痛、痛经和性交痛的视觉模拟评分法(VAS)评分均较治疗前明显降低,联合组治疗后慢性盆腔疼痛、痛经和性交痛VAS评分均显著低于对照组(P<0.05)。联合组各项围绝经期症状发生率均显著低于对照组(P<0.05);两组其他不良反应发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。联合组复发率显著低于对照组(P<0.05)。结论:补肾调肝汤联合GnRH-a治疗EMT的效果肯定,可缓解患者的疼痛,以及减少围绝经期症状、不良反应发生率及复发率。

GnRH-α联合曼月乐治疗子宫腺肌症患者对血清复发相关指标的影响

目的分析联合开展GnRH-α(促性腺激素释放激素激动剂)和曼月乐治疗子宫腺肌症患者的效果。方法选取60例子宫腺肌症者为对象,随机数字法分组,即对照组(n=30)、观察组(n=30)。选择行曼月乐治疗对照组;观察组在对照组基础上,加用GnRH-α治疗后者,分析不同方法治疗后取得疗效。结果两组在接受治疗后,相较于对照组,观察组的子宫体积大小、痛经视觉模拟评分(VAS)以及月经失血(PBAC)评分水平均明显更低(P<0.05);血清VEGF、MMP-2MMP-9水平分析,对照组、观察组为对象,前者高于后者,差异有统计学意义(P<0.05);并发症率分析,对照组、观察组为对象,前者高于后者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于子宫腺肌症,GnRH-a联合曼月乐的治疗效果显著高于曼月乐治疗的效果,能够有效减小子宫体积,降低炎症因子水平,并且控制复发因素的最终效果更好,从而更快促进患者病情状况的恢复。

GnRH1基因多态性与奶牛繁殖、产奶和热应激反应性状的关联分析

为探究GnRH1基因多态性与奶牛繁殖性状、产奶性状和热应激抗性的关系,本研究基于70头中国荷斯坦公牛的DNA混池测序,对GnRH1基因全序列及上下游2000 bp进行SNP位点扫描,在外显子2上发现1处同义突变位点g.72735118A>G,采用竞争性等位基因特异性PCR(KASP)技术对1160头泌乳期健康荷斯坦牛进行SNP分型,并采用GLM模型对SNP位点g.72735118A>G与繁殖、产奶和热应激反应性状的育种值进行关联分析。群体遗传学分析显示,位点g.72735118A>G符合哈代-温伯格平衡,基因型AA、AG和GG的频率分别为0.48、0.44和0.08,最小等位基因频率为0.30,多态性信息含量为0.42。关联分析表明,位点g.72735118A>G与初产日龄、首次配种受胎率、产犊至首次配种间隔、青年牛和经产牛首末次配种间隔等繁殖性状极显著相关,与头胎产奶量、乳脂量和乳蛋白量等产奶性状极显著相关,同时与直肠温度极显著相关。位点g.72735118A>G的不同基因型中,GG型个体的头胎产奶性状和繁殖性状均表现更优,但抗热应激能力较差;然而,AA型个体的产奶性状和繁殖性状表现较差,但抗热应激能力更强。综上,GnRH1基因是中国荷斯坦牛繁殖性状的重要候选基因,同时在奶牛的乳腺发育和体温调节上发挥着重要作用,可根据育种目标将SNP位点g.72735118A>G作为分子遗传标记应用于中国荷斯坦牛的分子育种。

长效GnRH激动剂与GnRH拮抗剂促排卵方案在反复种植失败患者中的临床应用

目的 比较卵泡期长效促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂方案和GnRH拮抗剂方案应用于反复种植失败(RIF)患者的临床效果。方法 回顾性分析2017年6月至2020年3月在中山大学附属第六医院生殖医学中心行体外受精/卵胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)治疗的RIF患者的临床资料。根据促排卵方案进行分组,并通过倾向性评分1∶1匹配选择数据,最终纳入594例患者,长效激动剂组(采用长效GnRH激动剂方案促排卵)297例,拮抗剂组(采用GnRH拮抗剂方案促排卵)297例。比较两组患者的一般资料、促排卵及胚胎发育情况、鲜胚移植及冻融胚胎移植妊娠结局。结果 两组患者的年龄、不孕年限、基础激素水平等一般资料比较均无显著性差异(P>0.05)。拮抗剂组HCG日LH水平显著高于长效激动剂组(P<0.05),HCG日子宫内膜厚度、Gn总量、Gn天数、获卵数则显著低于长效激动剂组(P<0.05)。长效激动剂组新鲜周期的临床妊娠率、活产率显著高于拮抗剂组(P<0.05),两组患者冷冻周期的妊娠结局无显著性差异(P>0.05);但长效激动剂组的累计活产率显著高于拮抗剂组(P<0.05)。结论 卵泡期长效激动剂方案促排卵后行新鲜周期移植的助孕策略可以显著改善RIF患者的妊娠结局,值得优先考虑。

注射和口服GnRH对小黄鱼人工催产效果的评估

为评估促性腺激素释放激素(Gonadotrophin releasing hormone,GnRH)作为外源激素对小黄鱼(Larimichthys polyactis)的人工催产繁殖效果,以生理盐水注射组为对照,设计促黄体素释放激素(LHRH-A2,2.4μg/kg)注射组、促性腺激素释放激素(GnRH,75μg/kg)注射组、促性腺激素释放激素(6 mg/kg)口服组,通过繁殖生理学等方法比较其产卵情况、卵巢组织生理学变化和血清激素水平综合分析催产效果。结果显示,GnRH注射组在效应时间、产卵持续时间及受精率和孵化率与LHRH-A2注射组无显著差异,但总产卵量和上浮卵重显著升高(P<0.05);GnRH口服组总产卵量和上浮卵重则显著低于LHRH-A2注射组,但受精率和孵化率无显著差异。进一步通过组织生理学分析小黄鱼产卵过程,对照组卵巢发育以Ⅲ期卵巢为主,LHRH-A2注射组、GnRH注射和口服组均可诱导卵巢由Ⅲ期发育至Ⅴ期,促进卵母细胞由Ⅲ和Ⅳ时相发育成熟并排出体外。各实验组经催产激素处理后,血清中促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)和GnRH迅速上升,至产卵后期仍维持较高水平,各处理组的激素水平变化趋势一致。综上,注射GnRH可有效诱导小黄鱼产卵,且催产效果与注射LHRH-A2无显著差异;口服GnRH也可以诱导小黄鱼产卵,但产卵量和上浮卵重显著低于激素注射组,对其给药方法和剂量需要进一步优化。

鹌鹑GnRH-1基因多态性与蛋品质的关联分析

为探索促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)基因亚型GnRH-1基因与鹌鹑蛋品质的相关性,利用PCR扩增和DNA测序技术,检测GnRH-1基因在中国黄羽鹌鹑、北京白羽鹌鹑、朝鲜鹌鹑中的单核苷酸多态性(SNP)突变位点,并分析GnRH-1基因的多态性与鹌鹑蛋品质的关联性,以期获得鹌鹑蛋品质相关的分子标记,为蛋用鹌鹑新品系的培育提供参考。结果表明,GnRH-1基因在中国黄羽鹌鹑、北京白羽鹌鹑、朝鲜鹌鹑中检测到14个SNP突变位点,分别为C71T、C108T、C168T、C178T、A184G、C206T、A209C、C215T、A252G、A279T、C281T、C293G、C339T、C458T,除A209C和C281T在中国黄羽鹌鹑和北京白羽鹌鹑中只检测到2种基因型外,其他12个SNP位点在3个鹌鹑品种中均检测到3种基因型。关联分析表明,GnRH-1基因的C71T、C215T、A209C、A279G位点与鹌鹑的蛋黄高度和蛋黄指数有显著(P<0.05)相关性,A209C位点与鹌鹑的蛋黄宽度有显著(P<0.05)相关性,A279G位点与鹌鹑的蛋壳厚度有显著(P<0.05)相关性。综上所述,GnRH-1基因可以作为影响鹌鹑蛋品质的分子标记或候选基因。

主动免疫GnRH疫苗对公犬生殖功能的影响

为了探究促性腺激素释放激素(GnRH)疫苗对公犬生殖功能的影响,试验将GnRH基因克隆至原核表达载体中,转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用终浓度为1 mmol/L IPTG诱导蛋白表达,通过SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行蛋白鉴定,将鉴定正确的GnRH蛋白纯化后制备成抗原。选取6只2~4月龄健康公犬随机分成2组,每组3只,其中免疫组每只犬免疫GnRH蛋白1 mg,共免疫3次,每次间隔4周,分别于免疫前和一免、二免、三免后14天采血,通过ELISA检测血清GnRH抗体及睾酮水平,并于最后一次采血结束后制备睾丸组织切片,观察睾丸组织形态。结果表明:3次免疫后免疫组GnRH抗体水平均显著高于对照组(P<0.05),睾酮水平均显著低于对照组(P<0.05),免疫组睾丸相对较小,曲精小管中生精细胞数量较少,管径较细。说明主动免疫GnRH疫苗抑制了公犬的性腺发育和生殖器官的成熟。