AFP、GP73及GPC3检测在原发性肝癌诊断及预后评估中的价值

目的分析血清甲胎蛋白(AFP)、高尔基体糖蛋白73(GP73)及磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)检测在原发性肝癌诊断及预后评估中的价值。方法选取2021年5月至2022年5月郑州大学第一附属医院收治的原发性肝癌患者52例为研究对象,另外选取同期本院收治的肝硬化患者46例与健康体检者48名,分别设为肝硬化组与健康组。对比三组以及PHC组不同病理分期者AFP、GP73及GPC3水平;比较PHC不同预后者的一般资料及AFP、GP73及GPC3水平,采用多元Logistic回归分析影响PHC预后的危险因素,绘制ROC曲线分析血清AFP、GP73及GPC3单独检测及联合检测诊断PHC的效果。结果AFP、GP73、GPC3水平:PHC组>肝硬化组>健康组,差异具有统计学意义(P<0.05);PHC组不同病理分期者AFP、GP73、GPC3水平:Ⅳ期>Ⅲ期>Ⅱ期>Ⅰ期,差异具有统计学意义(P<0.05);预后良好组45例,预后不良组7例。两组性别、年龄、BMI指数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组凝血酶原、红细胞计数、载脂蛋白A1、GGT、AFP、GP73、GPC3水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05);经多元Logistic回归分析显示,凝血酶原、红细胞计数、载脂蛋白A1、GGT、AFP、GP73、GPC3水平上升是影响PHC患者预后不良的危险因素(P<0.05);AFP、GP73、GPC3联合检测诊断PHC的敏感度、特异度分别为0.956、0.857;AUC=0.950(95%CI:0.909~0.991),明显高于AFP、GP73、GPC3单独检测。结论血清AFP、GP73、GPC3三者联合在PHC诊断中具有较高的临床价值,可用于PHC的早期诊断,临床可通过检测上述指标血清水平来评估PHC患者的预后情况。

IL-7的诱导表达增强靶向GPC3 CAR-T细胞的增殖及体外抗肿瘤活性

目的:探讨IL-7的诱导表达对靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞(CAR-T细胞)的增殖和体外抗肿瘤活性的影响。方法:通过无缝克隆将GPC3 CAR序列片段插入GV400载体的Bam HⅠ/Eco RⅠ位置,构建第二代CAR慢病毒载体GPC3-BBZ及GPC3-BBZ-NFAT-IL-7,以293T细胞包装相应的慢病毒载体后,感染人T细胞制备CAR-T细胞。实验分为未转导T细胞(NT)组、GPC3-BBZ CAR-T细胞组、GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞组。采用流式细胞术检测各组CAR-T细胞中CAR的表达水平,qPCR法检测经GPC3蛋白激活的CAR-T细胞中IL-7 m RNA的表达水平,细胞计数法检测CAR-T细胞在GPC3抗原刺激下的增殖能力,ELISA检测CAR-T细胞在受到肿瘤细胞刺激后IL-7、IFN-γ和TNF-α的分泌水平。应用实时细胞分析(RTCA)技术检测CAR-T细胞对人肝癌Huh-7细胞的杀伤作用。结果:成功构建慢病毒载体GPC3-BBZ和GPC3-BBZ-NFAT-IL-7,制备出靶向GPC3的CAR-T细胞。经GPC3抗原激活后,GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞可有效表达IL-7 mRNA(P<0.01),其表现出更强的增殖能力(P<0.05)。与GPC3-BBZ CAR-T细胞相比,GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞与GPC3阳性靶细胞Huh-7细胞共培养后,分泌更高水平的IL-7、IFN-γ和TNF-α(P<0.01或P<0.001)。RTCA结果显示,GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞对GPC3阳性Huh-7细胞的杀伤活性显著高于GPC3-BBZ CAR-T细胞(P<0.05)。结论:成功制备可诱导表达IL-7的靶向GPC3的CAR-T细胞,IL-7的诱导表达增强靶向GPC3 CAR-T细胞的免疫活性,在体外展现出较强的肿瘤细胞杀伤能力。

GPC3蛋白结构的分析及其表达纯化

目的了解GPC3蛋白结构,构建GPC3蛋白的原核表达纯化系统,高效表达和纯化出GPC3蛋白。方法从GenBank中获取基因序列,通过Protparam、SOPMA、SWISS-MODEL等在线软件对GPC3蛋白(25-554 aa)的结构进行分析。从不同载体和菌株中筛选出相对优势的组合,优化其表达条件,并诱导表达TrxA-GPC3融合蛋白,通过包涵体的溶解和复性、亲和层析、标签切割和分子筛纯化等方法分离纯化出无TrxA标签的GPC3蛋白。结果GPC3蛋白的相对分子质量为60.26 kDa,等电点为5.76,不稳定系数为41.27,脂肪系数为83.66,平均亲水系数为-0.312,是不稳定的亲水性蛋白,其主要为α-螺旋和无规则卷曲结构,引入标签的TrxA-GPC3融合蛋白比GPC3蛋白更稳定。通过对比筛选出表达效率较高的BL21(DE3)-pET32a-GPC3工程菌,其在0.5%的葡萄糖浓度和0.1 mmol/L的IPTG浓度条件下,结合20℃的诱导温度及16 h的诱导时间,可显著提高蛋白表达量,通过亲和层析得到纯度90%以上的TrxA-GPC3融合蛋白,利用凝血酶将TrxA标签切除,最后通过分子筛纯化得到单一的GPC3蛋白。结论利用生物信息学分析了GPC3蛋白的理化性质和结构,并在原核系统中成功表达和纯化了GPC3蛋白,为高特异性抗体的制备或筛选以及结构-功能研究奠定了基础,同时也为其它蛋白的表达纯化提供科学的指导意义。

Arg-1、HepPar-1、GPC3和AFP检测在肝细胞癌诊断中的价值

目的观察Arg-1、HepPar-1、GPC3和AFP在肝细胞癌中的表达,探讨它们在肝细胞癌(HCC)诊断中的价值。方法应用免疫组化En Vision法检测49例HCC和45例癌旁良性肝组织中Arg-1、HepPar-1、GPC3和AFP的表达。结果 1Arg-1、HepPar-1、GPC3和AFP在HCC中的阳性率分别为75.5%、49%、69.4%和12.2%,在良性肝组织中的阳性率分别为86.7%、85.7%、0和4.1%,GPC3在HCC组织中的表达显著高于良性肝组织(P<0.01);Arg-1在HCC中的阳性率明显高于HepPar-1和AFP(P<0.01,P<0.05),而与GPC3无明显差异(P>0.05)。2Arg-1和HepPar-1阳性率随着肿瘤分化程度降低而降低,而GPC3和AFP阳性率则随着肿瘤分化程度降低而升高,均无统计学意义(P>0.05)。3 3个指标中,Arg-1是HCC最敏感的标记物,而GPC3是HCC最特异的标记物,Arg-1和/或GPC3对HCC具有较高的敏感性和特异性。结论 Arg-1是一种新的诊断肝细胞癌的标记物,GPC3是一种诊断HCC比较特异的标记物,Arg-1和/或GPC3检测对HCC的诊断具有较高的敏感性和特异性。对于低分化HCC,建议行Arg-1、HepPar-1、GPC3和AFP等抗体检测可提升诊断的准确性。

血清AFP、GP73、GPC3单独及联合检测对肝细胞癌的诊断价值

目的探讨血清中AFP、GP73、GPC3三种肿瘤标志物在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的诊断价值及联合检测的意义。方法检测了45例HCC患者、32例乙肝携带者和30例正常体检者血清中AFP、GP73、GPC3的含量并进行相关分析。结果 AFP、GP73、GPC3用于诊断HCC时的敏感度和特异度分别是57.8%和90.6%、80.0%和98.3%、31.1%和92.3%,ROC曲线下面积分别为0.874、0.963、0.507;AFP与GP73联合,AFP与GPC3联合,GP73与GPC3联合以及三种标志物联合时敏感度和特异度分别是93.9%和88.9%、73.3%和83.8%、84.4%和91.5%、95.6%和82.1%,ROC曲线下面积分别为0.976、0.821、0.963、0.976。结论联合检测血清中AFP和GP73对HCC的诊断具有重要价值,血清GPC3检测对HCC的诊断意义较小。

血清GPC3与AFP的检测对原发性肝癌诊断意义比较

目的检测原发性肝癌患者血清中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican-3,GPC3)和甲胎蛋白(AFP)水平,比较二者对肝癌的诊断价值,并探讨二者的相关性。方法对120例肝癌、32例肝硬化病人及25例正常人血清标本,通过ELISA法检测标本GPC3值,电化学发光法检测标本AFP值并对结果进行分析。结果 (1)肝癌组GPC3值为22.014±36.930ng/ml,与正常对照组及肝硬化组之间差异存在显著性(P<0.01)。(2)GPC3对肝癌诊断的敏感度及特异度分别为85.83%和50.00%;AFP对肝癌诊断的敏感度及特异度分别为83.33%和62.50%,GPC3与AFP之间差异没有显著性(P>0.05);二者联合检测敏感度及特异度分别为95.83%和46.88%,敏感度有所提高。(3)肝癌组GPC3与AFP之间无相关性(P>0.05)。结论 GPC3作为一种新的肿瘤标志物对肝癌诊断的敏感性较高,GPC3与AFP联合诊断更能提高肝癌的检出率,但二者之间并无相关性。

应用组织芯片技术检测GPC3蛋白在肝细胞癌及其他肿瘤中的表达

目的研究GPC3蛋白在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)及其他人类常见肿瘤组织中的表达。方法应用组织芯片及免疫组化技术检测36例HCC组织、33例HCC癌旁组织以及其他人类常见肿瘤组织及其癌旁组织中GPC3蛋白的表达。结果(1)GPC3蛋白在HCC、肺鳞癌、癌旁慢性浅表性胃炎组织中表达,而在胃癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌、胆管细胞癌组织中无表达;(2)36例HCC组织及33例HCC癌旁组织中GPC3蛋白的表达率分别为66.7%(24/36),3.0%(1/33),两者之间差异有显著性(P<0.001);(3)HCC组织中GPC3蛋白表达与患者年龄、性别、病理分级无相关性(P>0.05)。结论GPC3蛋白在HCC、肺鳞癌组织中表达,而在胃癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌中表达沉默,GPC3是一个值得期待的多种肿瘤特异性标志物。

肝癌分化程度与肝脏CT强化特点及CD34、p53、GPC3、CK19、Ki-67表达的关系

目的探讨不同分化程度的肝癌患者的计算机体层摄影(CT)增强特点及CD34、p53、GPC3、细胞角蛋白19(CK19)、Ki-67免疫组化指标的表达规律。方法回顾性分析40例肝癌患者的临床资料。统计患者的肝癌分化程度,比较不同分化程度肝癌患者的CK19、CD34、p53、GPC3、Ki-67表达情况;分析肝脏CT平扫+增强扫描的表现,肝组织的三期动脉CT值及病灶有无包膜、有无边界、是否均匀强化,淋巴结转移情况,肿瘤远处转移情况,TNM分期情况;比较不同甲胎蛋白水平的肿瘤分化程度。结果 40例肝癌患者低分化12例,中低分化4例,中分化20例,中高分化0例,高分化4例。12例低分化患者的CK19表达:-7例,+-1例,+4例;4例低中分化:-1例,+-2例,+1例;20例中分化:-18例,+2例;4例高分化:-3例,+1例。不同分化程度患者的CK19表达情况比较,差异有统计学意义(P﹤0.05)。Spearman相关性分析显示,肝癌的分化程度与Ki-67表达众数呈负相关(r=-0.344,P﹤0.05)。低分化、低中分化、中分化、高分化患者均匀强化的例数分别为0例、1例、4例、4例,不均匀强化的例数分别为12例、3例、16例、0例,两者比较,差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论 CK19阳性表达程度及病灶强化均匀情况可能与肝癌分化程度有关。

GPC3基因重组慢病毒载体的构建及其在肝癌细胞中的表达

目的构建含有GPC3的shRNA序列慢病毒表达载体并转染肝癌细胞,观察其转染效率及在肝癌细胞中的表达。方法应用重组DNA技术,将设计好的GPC3基因特异性siRNA序列构建至慢病毒表达载体pGLV3-GFP上,并应用脂质体法转染293T细胞,进行病毒包装及滴度测定。采用RT-PCR及Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测转染HepG2细胞后GPC3基因的表达情况。结果慢病毒载体构建成功,并测定滴度为1×108TU/mL,转染后,GPC3基因表达明显降低。结论成功构建GPC3基因的shRNA慢病毒载体,所介导的RNAi能有效抑制靶细胞中GPC3基因的表达。

GPC3在肝癌早期诊断及发病机制中的意义

一、肝细胞癌的流行病学 肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是全世界高发病率中的第5大癌症,是高致死率中的第3大癌症,是现代医学面临的难题之一。在我国及东南地区较常见,发病率约为欧美发达国家的5-10倍,

肝癌组织GPC3mRNA与AFPmRNA的表达

目的: 探讨肝细胞肝癌(HCC)中GPC3mRNA与AFPmRNA的表达以及二者单独和联合检测的诊断价值.方法: 半定量逆转录聚合酶链反应(RT PCR)分别检测HCC41例,其他肝肿瘤15例,健康人11例肝组织标本中两个基因的表达.结果: GPC3mRNA在HCC、癌旁、其他肿瘤、远离HCC与正常肝组织的相对表达量分别为78 9±35 5,30 6±21 6, 36 6±25 2, 23 8±15 5;而AFPmRNA的相对表达量依次为61 2±32 6, 31 5±23 6, 29 0±24 7,21 2±15 9;各基因在HCC与其他组织间表达差异显著(P<0 01).以各自远离癌灶与正常组织相对表达量的上限(x+1 96s)为界值,HCC中GPC3mRNA,AFPmRNA的高表达比率分别为80 5 %与63 4 %,而两者联合检测的比率达92 7 %.AFPmRNA与血清AFP水平和HCC分级有关,GPC3mRNA的表达与HCC的分级及侵袭性有关.HCC中两个指标相对表达量无显著相关性(r=-0 145,P=0 365).结论: GPC3mRNA可能是一个潜在的特异性HCC标记,与AFPmRNA联检可提高HCC筛查与诊断的比率.

老年丙肝相关肝癌组织中GS、GPC3蛋白和血清AFP联合检测的临床意义

目的:探讨血清AFP水平和组织中谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(glypican-3,GPC3)蛋白在老年丙肝相关肝硬化(HCV-related liver cirrhosis,HCV-Crri)和老年丙肝相关肝癌(HCV-related hepatocellular carcinoma,HCV-HCC)中的表达及其临床意义。方法:采用电化学发光分析和免疫组织化学检测40例老年丙肝相关肝硬化、32例老年丙肝相关肝癌材料和30例老年对照组血清AFP水平和组织中GS、GPC3蛋白的表达,分析评价老年丙肝相关肝癌及癌前病变中血清AFP水平和组织中GS、GPC3蛋白的表达及其与临床病理因素之间的关系。结果:老年HCV-Crri组和HCV-HCC组中血清AFP水平均高于正常对照组(P<0.05),而老年HCV-Crri组与HCV-HCC组之间血清AFP水平差异无统计学意义(P>0.05)。GS和GPC3蛋白在HCV-Crri组和HCV-HCC组中的阳性表达率分别为10.0%(4/40)、87.5%(28/32)和27.5%(11/40)、78.1%(25/32),HCV-HCC组均显著高于HCV-Crri组(P<0.05),而两者在对照组中均为阴性表达。HCV-HCC组中11例AFP阴性病例中GS和GPC3联合检测阳性率为72.7%(8/11),HCV-HCC组中GS蛋白的表达与GPC3蛋白的表达呈显著正相关(r=0.486,P=0.02)。HCV-HCC组中GPC3蛋白在肿瘤病理分级Ⅲ-Ⅳ级和TNM分期Ⅲ-Ⅳ期中的阳性表达率均显著高于Ⅰ-Ⅱ级和Ⅰ-Ⅱ期(P=0.03),而GS蛋白的表达与肿瘤病理分级和TNM分期无关。结论:GS、GPC3蛋白在老年丙肝相关肝癌组织中的高表达,与老年丙肝相关肝癌的发生、发展和转移有关,联合检测组织中GS和GPC3蛋白的表达有助于临床提高对老年丙肝相关肝癌的诊断率和科学评价预后,尤其在血清AFP水平呈阴性的老年丙肝相关肝癌患者中。

GPC3蛋白在肝细胞肝癌及肝内胆管细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨GPC3蛋白在肝细胞肝癌、肝内胆管细胞癌及结节性肝硬化组织中的表达差异及临床意义。方法对50例原发性肝细胞肝癌、20例肝内胆管细胞癌及22例结节性肝硬化组织采用免疫组织化学法进行GPC3蛋白表达情况检测,比较分析其在三者中的表达差异。结果 GPC3蛋白特异性表达于肝细胞肝癌,与其在肝内胆管细胞癌及结节样肝硬化组织中的表达相比,差异有统计学意义(均P<0.05)。GPC3蛋白的在肝细胞肝癌中表达与患者的性别、年龄、肝功能分级、是否合并肝硬化、肿瘤直径、肿瘤个数、血管侵犯、TNM分期、HBs Ag阳性等方面的差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 GPC3高表达于肝细胞肝癌组织中,可能参与肝癌的发生发展。

GPC3在肝细胞癌诊断及治疗方面的研究进展

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican-3,GPC3)是磷脂酰肌醇蛋白聚糖(glypicans)家族的一员。通过糖基化的磷脂酰肌醇锚定在细胞表面。GPC3突变导致Simpson-Golabi-Behmel综合症(SGBS)。GPC3在许多人类恶性肿瘤细胞及血清中表达,包括肝细胞癌(HCC)、黑色素瘤和卵巢透明细胞癌。GPC3是HCC的潜在生物标志物。GPC3与WNT形成复合体,激活经典信号通路,促进肝癌细胞的增殖。抗GPC3的单克隆抗体GC33正在进行I期临床试验评估。人源化的hGC33单独用药或者与索拉菲尼联合治疗晚期或转移期肝癌患者,目前正在进行I期临床试验。

gpc3/mxr7基因的原核表达及其多克隆抗体的制备

目的 :通过原核表达并纯化GPC3蛋白 ,免疫家兔获得抗 -GPC3多克隆抗体 ,为深入研究 gpc3/mxr7基因的功能及其临床应用奠定基础。方法 :将 gpc3/mxr7基因片段亚克隆至 pPROEXTMHTb原核表达载体 ,采用融合 6 -his的融合蛋白方法原核表达GPC3蛋白质 ,纯化蛋白后免疫家兔 ,鉴定并纯化出抗 -GPC3多克隆抗体。结果 :原核诱导表达出GPC3蛋白 ,免疫家兔后获得多克隆抗体 ,经鉴定为抗一GPC3特异性多克隆抗体 ,并能识别原核、真核表达的外源性及HepG2和Hu -h7细胞内源性GPC3蛋白。结论 :GPC3蛋白多克隆抗体能特异识别GPC3蛋白 ,可应用于gpc3/mxr7基因的功能研究 ,并为临床原发性肝癌的血清学早期诊断提供新的标记物。

依托咪酯通过下调LncRNA GPC3-AS1调控卵巢癌细胞CAOV3增殖及凋亡

目的:探讨依托咪酯对卵巢癌细胞CAOV3增殖、凋亡的影响及其对LncRNA GPC3-AS1的调控作用。方法:体外培养人卵巢癌细胞CAOV3,使用不同剂量的依托咪酯处理细胞,另外将si-NC、si-GPC3-AS1转染至CAOV3细胞,分别将pcDNA、pcDNA-GPC3-AS1转染至CAOV3细胞后加入依托咪酯处理细胞;采用MTT实验与平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;采用qRT-PCR检测GPC3-AS1的表达量;采用流式细胞术检测细胞凋亡能力;Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达量。结果:与对照组比较,依托咪酯中、高剂量组可明显降低细胞存活率、GPC3-AS1的表达水平及Bcl-2蛋白水平,减少克隆形成数,提高凋亡率及Bax蛋白水平(P<0.01);转染si-GPC3-AS1可明显降低细胞存活率、GPC3-AS1表达水平及Bcl-2蛋白水平,减少克隆形成数,提高凋亡率及Bax蛋白水平(P<0.05);转染pcDNA-GPC3-AS1可明显减弱依托咪酯对CAOV3细胞增殖及凋亡的作用(P<0.05)。结论:依托咪酯可能通过下调GPC3-AS1的表达而抑制卵巢癌细胞增殖及诱导细胞凋亡。

可溶性GPC3基因的克隆及酵母表达

目的克隆可溶性磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(soluble glypican-3,sGPC3)基因,并分泌表达重组蛋白。方法通过RT-PCR克隆sGPC3 cDNA,利用EcoRⅠ和XbaⅠ酶切位点,将sGPC3基因插入酵母表达载体pPICZαA中,构建真核表达质粒pPICZαA-sGPC3,以该表达质粒转染酵母菌株X-33,在含有Zeozin的YPD平板上进行筛选,然后对PCR鉴定为阳性的酵母重组子进行甲醇诱导表达,表达上清经SDSPAGE和Western blot检测。结果使用特异性引物进行RT-PCR,获得约1 600 bp左右与目的基因大小相符的条带,构建的真核表达质粒pPICZαA-sGPC3表达框正确无误,阳性酵母重组子x-33/pPICZαAsGPC3诱导表达上清在60 000处有与预期大小相符的蛋白条带,且该蛋白条带与抗6×His单克隆抗体孵育后呈现特异性反应。结论成功克隆了可溶性GPC3基因,并在毕赤酵母中获得分泌表达,为进一步研究sGPC3对肝细胞癌的作用及作用机制、开发一种生物治疗肝癌的新型药物奠定了基础。

GPC3、乙酰肝素酶等在慢性乙型肝炎和肝细胞癌中的表达

肝细胞癌（HCC）是最常见的恶性肿瘤之一。目前对其癌前病变及早期小肝癌的研究较少。本文应用免疫组化方法检测早期HCC组织中GPC3、乙酰肝素酶（Hpa）、b-FGF、CD34和Ki-67的表达,并与乙型肝炎后肝硬化、慢性乙型肝炎及正常肝组织进行对比,分析病理及临床意义。

GPC3与AFP在肝硬化异型增生结节及肝细胞癌中的表达及意义

目的观察GPC3、AFP在肝硬化高度异型增生结节及肝细胞癌中的表达,探讨其在肝细胞癌诊断及鉴别诊断中的作用及意义.方法应用免疫组织化学Envision法检测GPC3、AFP在肝硬化高度异型增生结节、肝细胞癌及正常肝组织中的表达.结果 GPC3在进展期HCC中的表达阳性率为86.36%(38/44),在高分化HCC中的表达阳性率为68.18%(15/22),在肝硬化伴高度异型增生结节中的表达阳性率为45%(9/20),在正常肝组织中无阳性表达(0/20).AFP在进展期HCC中的表达阳性率为47.72%(21/44),在高分化HCC中的表达阳性率为27.27%(6/22),在肝硬化伴高度异型增生结节中的表达阳性率为15%(3/20),在正常肝组织中无阳性表达(0/20).结论 GPC3是一个较敏感及特异的标记物,可以和AFP联合应用协助诊断肝细胞癌.

GPC3特异的siRNA筛选和对肝癌细胞增殖能力的影响

目的筛选特异靶向GPC3的siRNA和探讨GPC3在肝癌中的作用机制。方法设计靶向GPC3的siRNA,转染huh7细胞后荧光定量PCR检测其对GPC3表达的抑制效果;选用抑制效果明显的siRNA下调GPC3表达后,WesternBlot检测GPC3的蛋白表达水平,并用Edu检测方法对Huh7细胞的增殖能力进行检测。结果成功筛选出一条抑制效率达到74.87%的特异靶向GPC3的siRNA,其可以显著抑制GPC3的转录翻译;同时,Edu检测发现当GPC3表达下调后,Huh7细胞的增殖能力下降。结论 GPC3的表达有利于HCC的增殖,而有效靶向GPC3的siRNA可为更进一步的研究提供有利手段。