Lanostane Triterpenoids from Fruiting Bodies of Ganoderma leucocontextum

Six new lanostane-type triterpenoids,namely leucocontextins S-X(1-6),together with twelve known compounds,were isolated from the fruiting bodies of Ganoderma leucocontextum.Their structures were established by MS and NMR data.

硒对云南白灵芝生长、品质及DNA甲基化特征的影响

采用田间覆土栽培试验,设置6个Se浓度(0、50、100、200、300、400μg/g)处理,分别记为CK、Se50、Se100、Se200、Se300、Se400,研究外源硒对云南白灵芝生长发育、重金属积累、生物活性成分含量及其DNA甲基化特征的影响。结果表明,与CK相比,外源Se对子实体柄长和菌盖大小(横径、纵径)无显著影响,但能显著降低菌盖厚度;随着Se施用水平提高,菌丝生长速率和子实体硒含量均呈先增后降的趋势,生物量呈先降后增再降的趋势。子实体重金属含量(As、Cd、Pb、Hg)随Se浓度增加呈持续降低趋势,线性分析也表明,重金属含量与Se施用浓度均呈显著负相关。施Se增加了子实体多糖、粗蛋白、黄酮及总氨基酸含量,其中,多糖、黄酮含量在Se400处理下最高,总氨基酸、粗蛋白含量分别在Se200、Se300处理下最高。HPLC测定分析表明,与CK相比,Se300提高了灵芝酸A、灵芝酸DM、灵芝酸F及灵芝酮三醇为主的三萜酸组分,其总三萜酸含量较其他处理提高2.93%~25.54%。敏感扩增多态性分析(MSAP)结果显示,Se300较CK、Se400相比具有较高的未甲基化位点比例和较低的甲基化位点比例。综上,施用外源硒可促进早期菌丝生长,提高子实体生物量累积,改善子实体重金属安全性能和生物活性成分品质,改变DNA甲基化比例,且以300μg/g施用浓度的整体效果最佳,其子实体产量较对照显著提高11.36%。

基于高产胞外粗多糖的白灵芝发酵茶培养基配方优化

为探究白灵芝在液体茶基质上分泌胞外粗多糖的最佳营养条件及其影响因素,本研究在单因素实验的基础上,通过正交试验和方差分析,优化了该菇在茶培养基上胞外粗多糖形成的营养条件,并采用相关性与通径分析,探究了其液体培养特性与胞外粗多糖分泌的关系。结果表明,在马铃薯50 g/L、葡萄糖40 g/L、红土3 g/L、普洱茶20 g/L、茶粉颗粒大小0.075 mm的茶培养基上,白灵芝的胞外粗多糖产量最高(1.49±0.33 g/L)且受各营养条件的影响顺序为葡萄糖>茶叶种类>红土>马铃薯>茶粉颗粒大小。此外,该菇胞外粗多糖的分泌受发酵液可溶性固形物、菌球数量的影响显著,其中前者对其间接影响最大,后者对其直接作用与综合作用最大。总之,茶培养基的营养条件(种类、浓度、颗粒大小等)与白灵芝的液体培养特性对其胞外粗多糖的分泌影响较大且存在交互作用,上述结果可为该菇多糖的提取及功能性食品的开发提供理论参考。

白肉灵芝‘云灵3号’选育

在云南省内收集野生子实体,经过鉴定和组织分离获得白肉灵芝(Ganoderma leucocontextum)菌株,以菌株L4439作为对照,通过初筛、复筛、区别性鉴定、中试和多年多点示范栽培选育菌株。结果表明:选育的菌株L4968菌丝生长速度较快,子实体呈红褐色、漆样高光泽,同心环纹和放射状纵脊明显,菌盖长度为(15.08±0.12)cm,菌盖宽度为(12.23±0.09)cm,菌肉厚度为(0.81±0.02)cm,菌柄长度为(7.25±0.10)cm,菌柄直径为(2.75±0.07)cm,每袋子实体鲜重为(84.98±1.41)g,生物学效率为(15.45±0.26)%,栽培周期为(85.00±0.82)d,出菇整齐,栽培性状稳定,栽培产量较高,该菌株适宜在云南及周边地区进行设施化和林下仿生栽培。2023年,菌株L4968通过云南省种子管理站云南省非主要农作物品种鉴定,品种名称为‘云灵3号’。

白肉灵芝通过抑制Axin2/β-catenin信号通路减轻小鼠急性肾损伤

目的:探究白肉灵芝提取物(Ganoderma leucocontextum extract,GLE)对顺铂诱导的小鼠急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)及脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的细胞炎症的作用及其机制。方法:8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、AKI组、低剂量(100 mg/kg)GLE组、高剂量(300 mg/kg)GLE组和槲皮素(100 mg/kg)阳性对照组,每组6只。腹腔注射20 mg/kg顺铂溶液建立小鼠AKI模型,给予GLE干预3 d,检测小鼠血清肌酐(serum creatinine,SCr)和血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平;HE和PAS染色观察肾脏病理情况;免疫组化检测各组β-连环蛋白(β-catenin)及Axin2蛋白的表达;Western blot和RT-qPCR检测各组白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、β-catenin及Axin2的表达。2 mg/L LPS刺激TCMK1细胞模拟细胞炎症损伤,GLE(0.2、0.4、0.6和0.8 g/L)处理24 h,检测各组IL-1β、IL-6、β-catenin及Axin2蛋白的表达,并进一步过表达Axin2正向验证上述指标的变化情况。结果:(1)高剂量GLE干预可显著降低小鼠SCr(P<0.01)和BUN(P<0.05)水平;(2)AKI组小鼠出现肾小管扩张和肾小管上皮细胞坏死、空泡化等病理表现,GLE干预后肾脏损害有所改善;(3)免疫组化显示AKI组小鼠肾脏Axin2和β-catenin蛋白表达增加,GLE干预可降低其表达;(4)体内外Western blot和RT-qPCR结果显示GLE干预可显著抑制IL-1β、IL-6、Axin2及β-catenin蛋白表达和mRNA水平(P<0.05);(5)细胞过表达Axin2后,GLE对IL-1β、IL-6、Axin2及β-catenin的下调作用被拮抗,IL-1β、IL-6、Axin2及β-catenin蛋白表达均显著上调(P<0.01)。结论:白肉灵芝可通过抑制Axin2/β-catenin信号通路保护顺铂诱导的小鼠肾损伤,缓解AKI小鼠和LPS所致细胞的炎症反应。

白肉灵芝水提物促进PC-12细胞分化作用研究

评价白肉灵芝促进PC-12细胞分化效果,并探索作用机制。采用体外培养未分化PC-12细胞,观察其在白肉灵芝水提物诱导下突起生长情况,结合免疫荧光染色计算分化率,通过加入细胞分化作用中关键节点特异性抑制剂探索作用机制。在设定范围内,白肉灵芝水提物处理组分化细胞明显多于对照组,且浓度为200μg/m L时效果最佳,分化比例8.73±0.91%。添加TrkA、MEK/ERK1/2和PI3K/Akt的抑制剂,能显著降低白肉灵芝水提物处理组分化细胞数目。白肉灵芝水提物通过增强TrkA、MEK/ERK1/2和PI3K/Akt通路能有效促进PC-12细胞分化,具有神经保护功能。

白肉灵芝子实体和菌丝体活性成分的比较

对四川和西藏栽培的白肉灵芝(Ganoderma leucocontextum)子实体(编号分别为GLFS、GLFT)及液体发酵菌丝体(编号为GLM)中多糖、三萜、糖醇、核苷含量及多糖分子量分布特征进行比较。结果表明:GLFS和GLFT中多糖含量相对较低,分别为0.87%和0.79%,GLM多糖含量相对较高,为1.54%,子实体和菌丝体多糖的分子量分布有差异,子实体含有重均分子量为9X 10^(5)~2X 10^(6)的多糖组分;白肉灵芝子实体和菌丝体中均含有阿拉伯糖醇和甘露醇,其中GLFS的阿拉伯糖醇含量较高,为71.91μg.mg^(-1),菌丝体中还含有少量赤藓糖醇;GLFS和GLFT中核苷种类相同,但GLFS中尿苷、腺嘌呤、鸟苷含量显著高于GLFT的,菌丝体GLM中核苷种类少于子实体的,但其中胞苷、鸟苷、腺苷的含量显著高于子实体的;子实体中三萜种类丰富,检测出10种已知三萜,含量为25.9~116.1μg.g^(1),菌丝体中三萜种类较少,仅检测出灵芝酮三醇和灵芝醇A两种已知三萜,含量分别为217.5和121.3μg.g^(-1)。

白肉灵芝水提物对H_2O_2诱导PC12细胞凋亡的保护作用

目的对采自四川省凉山州会东县的白肉灵芝进行种属鉴定及抗氧化功效评价。方法基于样本的ITS序列完成系统发育分析,采用H_2O_2处理PC12细胞建模,MTT法检测细胞存活率,验证白肉灵芝水提物对PC12细胞的保护作用。结果样本与白肉灵芝Ganoderma leucocontextum同属于一个分支,相似度98%。样本水提物能显著提高H_2O_2处理后的PC12细胞的存活率并降低Caspase-3活性。结论样本鉴定为白肉灵芝Ganoderma leucocontextum,对H_2O_2诱导的PC12细胞凋亡有保护作用,其机制可能与抑制细胞凋亡线粒体途径中Caspase-3的表达有关。

两株西藏白肉灵芝菌株特性初探

对西藏林芝地区的白肉灵芝(Ganoderma leucocontextum)菌株G-122和G-241进行鉴别分析,并对其栽培性状、有效成分含量和提取物功能等方面进行研究。基于形态学特性和ITS分析,2个菌株均鉴定为白肉灵芝。二者菌丝对峙培养产生明显拮抗线,菌丝体生物量差异显著(G-241高于G-122),子实体颜色不同(G-241和G-122分别为红褐色和黄褐色),G-241子实体单菇重高于G-122;有效成分含量差异也较大,G-122粗多糖含量高而G-241总三萜含量高;菌株G-122、G-241醇提物对乳腺癌MT-1细胞IC_(50)值分别为265.2和225.6μg/mL。实验结果表明菌株G-122和G-241为不同菌株。

西藏白肉灵芝段木栽培技术

白肉灵芝(Ganoderma leucocontextum)是原产于川藏高原地区特有的野生灵芝,富含多糖、三萜等生物活性成分。近年来被鉴定为灵芝属的新种,市场需求急剧上升,人工栽培逐渐兴起。详细介绍白肉灵芝段木栽培技术以及采后烘干保存等技术要点,为白肉灵芝栽培提供技术支撑。

白肉灵芝水提物对衰老大鼠皮肤的作用研究

为研究白肉灵芝水提物(Ganoderma leucocontextum aqueous extracts,GLAE)对D-半乳糖致衰大鼠皮肤的影响,用D-半乳糖构建衰老大鼠模型,同时分别给予不同剂量的(0、50、100和200 mg/kg)的GLAE处理,利用生物显微技术观察皮肤组织结构的变化,ELISA法检测Ⅰ、Ⅱ型胶原蛋白含量,彗星电泳检测细胞DNA损伤,定量PCR检测基因MAP3K5、TGF-β1和PLOD2的表达水平。结果显示与模型组比较,GLAE干预后,大鼠皮肤病理改变明显减轻;皮肤细胞DNA损伤程度显著降低,Ⅰ、Ⅱ型胶原蛋白含量显著升高;基因MAP3K5、TGF-β1表达上调,基因PLOD2的表达下调。GLAE可增加胶原蛋白含量、抑制皮肤细胞DNA损伤、调节MAP3K5、TGF-β1和PLOD2基因的表达而发挥延缓皮肤衰老的作用。

白肉灵芝土传病原微生物的分离与鉴定

【目的】作物连作障碍与土壤微生物密切相关,分离与鉴定土传病原微生物,为解决白肉灵芝段木埋土栽培的连作障碍提供理论依据。【方法】针对大棚内段木埋土栽培的白肉灵芝,分别采集连作0年、1年、3年、5年不同栽培年限的覆土,以稀释平板法调查土壤可培养微生物类群的变化,分离白肉灵芝连作土中优势微生物;采用平板对峙试验筛选白肉灵芝连作障碍潜在的土传病原菌,结合形态、生理等微宏观特征与分子生物学技术鉴定各菌株,并进行物种分类。【结果】随着白肉灵芝连作年限的增加,覆土中可培养微生物的数量和种群发生变化,细菌、放线菌的数量下降趋势明显,真菌数量逐年增加,三大主要微生物种群中细菌占比从25.21%增加至95.29%,真菌占比从0.69%逐年增加至4.71%,放线菌占比则下降;连作土中分离到14个优势微生物,NJ聚类结果将其分为两大类群,结合DNA序列比对与形态分类结果,最终鉴定5个真菌菌株和9个细菌菌株;平板对峙培养试验结果显示,真菌N7及细菌N11、N9、N12、N13、N14共6个菌株对白肉灵芝菌丝生长的抑菌率高达80%以上。【结论】白肉灵芝的连作栽培显著影响了覆土层的土壤微生物区系,不同栽培年限其三大主要微生物种群差异显著;微生物种群中的芽孢杆菌属(Bacillus)、篮状菌属(Talaromyces)、红球菌属(Rhodococcus)和部分链霉菌属(Streptomyces)菌株可能是白肉灵芝段木埋土栽培连作障碍中潜在的土传病原菌。

白肉灵芝水提物对神经元损伤的保护作用及其机制

【目的】探讨白肉灵芝水提物(Ganoderma leucocontextum aqueous extracts,GLAE)对脂多糖(LPS)所致神经元损伤的保护作用及机制.【方法】将50只健康大鼠分成对照组、模型组、GLAE低剂量组、GLAE中剂量组和GLAE高剂量组,用LPS建立大鼠大脑皮层神经元炎症损伤模型,给予不同剂量的(0、50、100、200 mg/kg)的GLAE干预,ELISA法检测大脑额叶皮层肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1(interleukin-1β,IL-1β)、脑源性神经生长因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)和β-神经生长因子(β-nerve growth factor,β-NGF)含量,Western-blot和PCR法检测大脑额叶皮层原肌球蛋白受体激酶B(tropomyosin receptor kinase B,TrkB)、原肌球蛋白受体激酶A(tropomyosin receptor kinase A,TrkA)、BDNF、NGF蛋白及mRNA表达,免疫组织化学法检测大脑额叶皮层NGF蛋白的表达.【结果】与模型组比较,GLAE干预后,大脑额叶皮层TNF-α和IL-1β的含量显著降低(P<0.01,P<0.05),BDNF和β-NGF的含量显著增高(P<0.01,P<0.05),TrkB、TrkA、BDNF、NGF蛋白及mRNA的表达水平显著上升(P<0.01,P<0.05).【结论】GLAE对LPS所致的神经元损伤有一定的保护作用,其机制可能与抑制炎症因子水平、促进大脑皮层神经元生长有关.

白肉灵芝水提物改善衰老大鼠认知功能的作用

目的 探讨白肉灵芝水提物(GLAE)改善衰老大鼠认知功能的作用及机制。方法 将50只健康大鼠分成对照组、模型组、GLAE低剂量组、GLAE中剂量组和GLAE高剂量组,用D-半乳糖构建衰老SD大鼠模型,同时分别给予不同剂量的(0、50、100和200 mg/kg)GLAE处理,采用新物体认知和跳台实验方法检测大鼠认知功能的改变,甲苯胺蓝、吉姆萨和HE染色进行病理学观察,彗星电泳检测大脑细胞DNA的损伤,ELISA、Western blotting和Real-time PCR法检测大脑组织蛋白激酶A(PKA)/环磷酸腺苷(cAMP)反应元件结合蛋白(CREB)信号通路相关因子表达。结果 与模型组比较,GLAE干预后,大鼠认知功能衰退及大脑皮层病理变化有显著改善,大脑细胞DNA损伤程度显著降低(P<0.05),大脑组织cAMP、脑源性神经生长因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)含量显著增高(P<0.01,P<0.05),PKA、BDNF、NGF和CREB mRNA及PKA、BDNF、NGF和CREB蛋白的表达水平显著上升(P<0.01,P<0.05)。结论 GLAE可改善衰老大鼠的认知功能,其机制可能与其激活大脑PKA/CREB信号通路,增加神经营养因子含量,抑制大脑细胞DNA损伤有关。

白肉灵芝水提物对脑缺血大鼠海马神经元的保护作用

试验旨在探讨白肉灵芝水提物(Ganoderma leucocontextum aqueous extracts,GLAE)对脑缺血后海马神经元的保护作用及机制。将50只健康大鼠分为对照组、模型组、GLAE低(0.05 mg/(g·BW))、中(0.1 mg/(g·BW))、高(0.2 mg/(g·BW))剂量组。利用双侧颈总动脉夹闭法建立大鼠脑缺血模型,GLAE组灌胃不同剂量的GLAE干预,对照组和模型组灌胃同体积的生理盐水,连续2周。用跳台试验方法检测记忆获得、记忆巩固和记忆再现障碍大鼠的学习记忆能力,HE染色观察大鼠海马组织的病理形态的变化,比色法检测海马组织一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性和一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,Western blotting和实时荧光定量PCR法分别检测海马组织生长相关蛋白-43(growth associated protein-43,GAP-43)和脑源性神经生长因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的水平。结果显示,与对照组相比,模型组大鼠跳台试验的逃避潜伏期显著缩短、电击次数显著增加(P<0.05);海马神经元细胞出现明显核固缩、排列松散紊乱等退行性改变,细胞数量显著减少(P<0.05);海马组织NOS活性和NO含量均显著降低(P<0.05);大鼠海马组织GAP-43蛋白表达量显著升高(P<0.05);海马组织BDNF mRNA表达量显著下调(P<0.05)。与模型组相比,GLAE干预后,大鼠逃避潜伏期均显著延长、电击次数均显著减少(P<0.05);GLAE高剂量组大鼠CA1区和齿状回锥体神经元细胞形态明显改善,神经元数量显著增加(P<0.05);GLAE低剂量组对NOS活性影响不明显(P>0.05),显著增加NO含量(P<0.05),GLAE中、高剂量组NOS活性和NO含量均显著升高(P<0.05);GLAE低、中、高剂量组海马组织GAP-43蛋白表达量均显著增加(P<0.05);GLAE低、中、高剂量组海马组织BDNF mRNA表达量均显著增加(P<0.05)。以上结果表明,GLAE可通过提高NOS活性和NO水平、促进海马神经发生和功能恢复对脑缺血后海马神经元损伤有一定的保护作用,从而改善大鼠认知功能,0.2 mg/g GLAE效果最好。

白肉灵芝子实体中影响三萜变化的因素分析

采用分光光度法和超高效液相色谱法相结合,探讨不同栽培地、不同生长期和不同剂量水杨酸处理的白肉灵芝(Ganoderma leucocontextum)子实体中三萜含量和种类的变化。结果表明:不同栽培地会影响白肉灵芝子实体中三萜的含量和种类,其中,在西藏拉萨市曲水县栽培的子实体中三萜含量较高;从原基期到喷孢后期,子实体中三萜含量逐渐升高,但种类无显著变化;不同剂量的水杨酸喷施处理对子实体中三萜的种类和含量无显著影响,在100μmol·L^(-1)剂量下,有可能会增加白肉灵芝子实体中甾醇的含量。

基于Keap1/Nrf2/HO-1信号通路和氧化应激效应研究白肉灵芝多糖对小鼠运动性疲劳的保护作用

目的:研究白肉灵芝多糖对高强度训练小鼠的抗疲劳作用机制。方法:小鼠随机分为空白对照组、模型对照组和白肉灵芝多糖低、中、高3个处理组,通过跑台训练建立小鼠运动性疲劳模型,处理组按照多糖浓度10、50、100 mg/mL分别连续给予多糖灌胃,其他组灌胃相同剂量的无菌生理盐水,连续训练4周后进行小鼠爬杆实验,记录小鼠爬杆时间,并测定小鼠体内睾酮(TTS)、皮质酮(CTC)、血尿素氮(BUN)、血乳酸(BLA)、肝糖原(HG)、肌糖原(MG)、丙二醛(MDA)含量和过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物歧化酶(GSH-Px)等活力,同时Western blot检测小鼠骨骼肌中Keap-1、Nrf2、HO-1的蛋白表达量。结果:低、中、高多糖处理组小鼠爬杆时间显著提高(P <0.05),同时小鼠血清中TTS含量逐渐升高,CTC含量则逐渐下降,HG和MG的含量逐渐升高;另外多糖低、中、高剂量组小鼠血清和肝组织中MDA含量均显著降低(P <0.05),CAT、SOD、GSH-Px酶活性均显著提高(P <0.05)。与空白对照组相比,模型组中Keap1的蛋白表达水平显著升高(P <0.05),并下调了Nrf2和HO-1的蛋白表达,与模型组相比白肉灵芝多糖低、中、高多糖处理组的Keap1蛋白表达水平依次下降,Nrf2和HO-1的蛋白表达水平则依次升高。结论:白肉灵芝多糖对小鼠运动性疲劳的保护作用可能是与提高小鼠骨骼肌细胞抗氧化作用及影响Keap1/Nrf2/HO-1信号通路有关。

西藏白肉灵芝三萜高效液相检测分析及含量测定

通过高效液相检测分析了西藏拉萨国家农业科技示范园区2017—2020年日光温室栽培的白肉灵芝不同形式样品的三萜含量。图谱比对结果表明,孢子粉、液体发酵培养均不如子实体栽培三萜含量高,组分丰富,连作障碍影响三萜含量,水杨酸蕾期喷施对三萜含量有影响,其中喷施浓度为100μmol/L时较高,组分差异不大。传统灵芝三萜相对含量最丰富,说明水杨酸诱导三萜生物合成有一定作用,只能刺激部分白肉灵芝特有三萜组分形成。

白肉灵芝水提物对脑缺血后大脑神经元损伤的保护作用

目的:探讨白肉灵芝水提物(Ganoderma leucocontextum aqueous extracts, GLAE)对脑缺血后大脑神经元的保护作用.方法:利用双侧颈总动脉夹闭法建立大鼠脑缺血模型,给予不同剂量(50、100和200 mg/kg)的GLAE干预,用Western blot和PCR法分别检测大脑组织B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,BCL2)蛋白和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)mRNA表达的水平,免疫组织化学法检测大脑组织磷酸化糖原合酶激酶3β(phospho-glycogen synthase kinase 3β,p-GSK-3β)蛋白的表达.结果:与对照组相比,模型组大鼠大脑组织BCL2蛋白表达水平极显著降低(P<0.01),大脑组织P-GSK-3β蛋白表示水平极显著增加(P<0.01),大脑组织bFGF mRNA表达量有所升高,但无统计学差异(P>0.05).与模型组比较,GLAE干预后,大鼠大脑组织BCL2蛋白和bFGF mRNA表达水平呈剂量依赖性地显著增高(P<0.01、P<0.05),p-GSK-3β蛋白表达水平呈剂量依赖性地显著降低(P<0.01、P<0.05).结论:GLAE对脑缺血后大脑神经元损伤有一定的保护作用,能促进脑神经修复和再生,其机制可能与上调大脑组织BCL2蛋白和bFGF mRNA表达及下调p-GSK-3β蛋白表达有关.

白肉灵芝人工栽培及活性成分研究进展

白肉灵芝(Ganoderma leucocontextum)是我国西南地区灵芝属的一个重要种类,因其菌肉洁白,活性成分多糖和三萜含量较高,是高品质的灵芝种类,市场开发前景广阔。通过对白肉灵芝生物学特性、栽培技术和活性功能成分等研究进行综述,以期对白肉灵芝人工栽培技术和药用价值开发研究提供参考。