新疆假龙胆不同部位中3种环烯醚萜类成分的含量比较研究

目的比较新疆假龙胆不同极性部位及不同部位中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的含量。方法新疆假龙胆全草乙醇提取物,依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,得到不同极性部位。采用HPLC法,以甲醇-4mL·L-1磷酸水溶液(19∶81)为流动相(流速1.0mL·min-1)同时测定新疆假龙胆不同极性部位及不同部位中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的含量。结果獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷质量浓度分别在4.04~129.54(r=0.999 4),3.96~126.73(r=0.999 3)和0.93~29.70mg·L-1(r=0.999 5)的范围内线性关系良好。3种化合物含量在正丁醇部位中最高,在乙酸乙酯和水部位中较少,在石油醚部位基本检测不到;3种化学成分含量在不同部位中存在明显差异,含量顺序为花>叶>根>茎。结论花、叶和根具有较高的药用价值,醇提物经萃取后,环烯醚萜类成分得到有效的富集;该方法专属性强、准确度高、重复性好,可用于比较新疆假龙胆药材不同极性部位及其不同部位活性成分的分布情况,为后续合理开发利用新疆假龙胆提供依据。

RP-HPLC法同时测定新疆假龙胆中5种活性成分含量

目的建立双波长反相高效液相色谱（RP-HPLC）法同时测定不同海拔新疆假龙胆中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、芒果苷和齐墩果酸含量的测定方法。方法采用Shimpack VP-ODS C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以甲醇（A）-0.02%磷酸水溶液（B）为流动相,梯度洗脱（0~20 min,25%A→40%A;20~22min,40%A→95%A;22~32 min,95%A;32~34 min,95%→25%A;34~50 min,25%A）,流速为1.0m L·min-1,柱温为25℃,254 nm检测獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、芒果苷,210 nm波长检测齐墩果酸。结果獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、芒果苷和齐墩果酸进样量分别在0.28~5.5μg（r=0.9994）,0.10~2.0μg（r=0.9998）,0.028~0.55μg（r=0.9997）,0.053~1.0μg（r=0.9999）,0.065~1.3μg（r=0.9993）范围内呈良好的线性关系;平均回收率（n=6）分别为100.4%、96.2%、95.6%、97.0%、98.2%;RSD分别为1.89%,1.46%,1.91%,1.57%,1.78%。结论该方法专属性强、准确度高、重现性好,适用于新疆假龙胆的质量控制。

新疆假龙胆的化学成分研究与含量测定

目的:对新疆假龙胆全草进行化学成分初步研究,并对分离得到酮类化类物进行定量分析。方法:采用75%乙醇回流法对新疆假龙胆全草进行提取,粗提物经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次梯度萃取制备不同极性部分,将石油醚部分和乙酸乙酯部分浸膏分别用硅胶柱层析和葡聚糖凝胶LH-20柱层析分离纯化,所得单体化合物经EI-MS、~1H-NMR、^(13)C-NMR等光谱法进行结构鉴定;建立高效液相测定方法测定新疆假龙胆中3个酮类化合物的含量。结果:从新疆假龙胆中分离得到6个化合物,分别为1,8-二羟基-3,5-二甲氧基酮(1)、1-羟基-3,5,8-三甲氧基酮(2)、1-羟基-3,5-二甲氧基酮(3)、木犀草素(4)、胡萝卜素(5)和β-谷甾醇(6);含量测定方法学结果表明1,8-二羟基-3,5-二甲氧基酮、1-羟基-3,5,8-三甲氧基酮和1-羟基-3,5-二甲氧基酮3个酮化合物分离度较好,分别在35.7~713.4、32~1280、34.3~686 ng时与峰面积呈良好的线性关系,精密度试验RSD分别为0.31%、0.27%、0.25%,稳定性实验的RSD分别为1.05%、1.33%、1.58%,重复性实验的RSD分别为2.48%、0.82%、2.63%,加样回收率分别为103.1%(RSD=1.25%)、100.02%(RSD=0.93%),95.10%(RSD=2.62%);1,8-二羟基-3,5-二甲氧基酮等3个化合物的含量范围分别为0.21%~0.28%、0.65%~0.77%、0.19%~0.15%。结论:新疆假龙胆含有黄酮类、酮类和甾醇类化合物;经方法学考察,本研究建立的高效液相测定方法适合新疆假龙胆中1,8-二羟基-3,5-二甲氧基酮等3个化合物的测定;新疆假龙胆中1,8-二羟基-3,5-二甲氧基酮等3个化合物的含量较高。

新疆假龙胆乙醇提取物不同极性萃取部位的急性毒性实验

目的探究新疆假龙胆乙醇提取物不同极性萃取部位的急性毒性,为临床安全用药提供依据。方法采用95%乙醇为提取溶剂,加热回流提取新疆假龙胆,合并提取液,浓缩。挥至无醇味加水混悬,混悬液依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,分别得到新疆假龙胆乙醇提取物不同极性萃取部位;采用最大给药量法进行急性毒性实验,ICR小鼠100只,雌雄各半,按体质量随机均分为5组,每组20只,空白对照组小鼠灌胃给予等容积蒸馏水,其余组分别给予最大浓度、最大体积的新疆假龙胆乙醇提取物、乙酸乙酯、正丁醇、水层萃取部位(21.20、16.00、40.00、40.00g/kg体质量)混悬液,按0.4mL/10g体质量灌胃1次/d,在14d内观察小鼠的毒性反应及体质量变化情况。结果新疆假龙胆乙醇提取物、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水层萃取部位的出膏率分别为24.4%、8.20%、4.92%、11.47%和19.67%。新疆假龙胆乙醇提取物、水萃取部位、正丁醇萃取部位、乙酸乙酯萃取部位组小鼠经口给药的最大给药量分别为86.88、203.35、348.73、325.20g生药/kg体质量。结论新疆假龙胆乙醇提取物及其不同极性萃取部位均安全无毒。

假龙胆总多酚含量测定及抗氧化活性研究

目的建立假龙胆总多酚含量的测定方法。方法采用可见分光光度法测定假龙胆中总多酚的含量,并建立清除羟基自由基和超氧阴离子自由基两种抗氧化模型对假龙胆抗氧化能力进行评价。结果以没食子酸作为测定总多酚含量的对照品,在浓度0.05~0.3 mg（r=0.9999）范围内呈良好的线性关系,结果表明,总多酚含量平均值为7.63 mg,假龙胆提取液具有良好的抗氧化能力。结论此方法操作简便,重现性良好、稳定,可作为假龙胆总多酚的检测方法,并可作为天然抗氧化剂资源进行开发研究。

蒙药材“特木日-地格达”的资源概况及有效成分对比研究

本文总结了不同种类蒙药材"特木日-地格达"的使用现状,首次对新疆产"特木日-地格达"药材新疆假龙胆做了详细的介绍。对不同种类蒙药材"特木日-地格达"中所含的药物有效成分龙胆苦苷、獐芽菜苦苷及芒果苷含量进行对比分析,初步客观的评价了新疆特有蒙药材新疆假龙胆的品质,这对进一步深入研究、质量控制和开发应用该蒙药材提供参考依据。

新疆假龙胆的保肝活性部位环烯醚萜苷提取纯化工艺研究

目的利用响应面法优化新疆假龙胆中保肝活性部位环烯醚萜苷的提取工艺,并优选大孔吸附树脂分离纯化新疆假龙胆中环烯醚萜苷的工艺条件。方法以新疆假龙胆中主要的3种环烯醚萜苷的提取率为考察指标,采用单因素实验结合Box-Behnken中心组合设计方法优化提取工艺,再通过考察静态和动态吸附、洗脱效果,筛选大孔吸附树脂分离纯化环烯醚萜苷的最佳工艺条件。结果新疆假龙胆环烯醚萜苷提取的最优条件为:乙醇体积分数为55%,提取时间为3.0 h,提取温度为50℃,料液比为1∶30,所得提取物环烯醚萜苷含量为52.67%(其中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的含量分别为32.47%,17.41%和2.79%)。选用NKA-9型大孔吸附树脂,树脂柱径高比为1∶5进行洗脱,上样液pH值为2,质量浓度为0.5 g·mL^(-1),上样量为10 mL,吸附2 h后的树脂柱先用5 BV蒸馏水洗脱,再分别用10 BV体积分数为10%和30%的乙醇以5 BV·h^(-1)的流速洗脱。结论该方法具有较好的分离纯化效果,环烯醚萜苷类成分含量可达到59.9%。该优选工艺操作简单、稳定可行,可显著提高新疆假龙胆中环烯醚萜苷的提取率。

库车山区新疆假龙胆适生地植物群落多样性及其环境解释

采用相关分析和RDA排序法分析了天山南坡中段库车山区新疆假龙胆适生地植物群落多样性特征及其环境影响因子。结果表明,在新疆假龙胆适生地植物群落的24个样地中,共记录到物种87种,隶属于20科54属;共有10种植物群落类型,其结构组成及物种多样性组成是不同的,分布较广的物种为菊科、禾本科、豆科和蔷薇科。各群落物种多样性指数中,Simpson指数最高,各样地间多样性指数测值变幅较大。群落物种多样性指数及种群数量特征与环境因子的相关性分析表明,群落物种Margalef丰富度指数显著受土壤全N、全P的影响;群落物种Simpson多样性指数显著受海拔、土壤总盐的影响;群落中新疆假龙胆的重要值及其种群数量受pH的显著影响;群落中新疆假龙胆种群高度显著受有效K、海拔和土壤总盐的影响。RDA分析表明,全N、全P、有效K、pH、海拔是影响群落物种多样性的主要环境因素。

巴音布鲁克新疆假龙胆适生地植物群落物种多样性及其环境解释

为研究新疆巴音布鲁克地区不同土壤层次环境因子对新疆假龙胆适生地植物群落物种多样性的影响,为新疆假龙胆物种多样性保护提供理论依据。采用野外样地调查的方法,在新疆假龙胆适生海拔范围内共设置了16个样地进行植物多样性统计分析,共调查到植物72种,隶属22科48属,以豆科和禾本科植物为主。根据样地内各物种重要值的大小将所有采样点的植物群落划分为5类。通过单因素方差分析和RDA分析,对植物群落多样性指数与土壤环境因子间的关系进行了分析,结果表明:物种多样性指数与土壤环境因子之间具有显著的相关关系,其中土壤全磷、全氮、总盐是影响物种多样性的主导因素。对植物群落多样性指数与土壤不同层次理化指标的进一步分析表明:影响植物群落物种多样性极显著的环境因子是0~20cm土层的全磷,其次分别是0~10cm土层的全钾和30~50cm土层的总盐和pH值。

新疆假龙胆调控TGF-β1/Smad通路抑制肝星状细胞活化的作用机制

目的:探讨新疆假龙胆提取物通过调控转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad通路发挥防治肝纤维化的具体作用机制。方法:采用TGF-β1(10 ng/mL)诱导LX-2细胞构建肝纤维化模型,对肝纤维化模型细胞给予不同浓度(100、200、300μg/mL)新疆假龙胆提取物,干预时间均为48 h,采用CCK8法检测干预后各组细胞的增殖抑制情况,流式细胞技术检测各组细胞的凋亡情况,荧光定量PCR和Western blot法检测各组Smad相关信号Smad3、Smad4、Smad7、TGF-β1 mRNA及蛋白表达。结果:与模型组比较,高、中浓度新疆假龙胆提取物可抑制TGF-β1诱导的LX-2细胞增殖与活化(P<0.05),上调细胞内Smad3、Smad4、TGF-β1 mRNA和蛋白表达(P<0.05),下调Smad7 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论:新疆假龙胆提取物对TGF-β1诱导的LX-2细胞具有抑制增殖和促进凋亡的作用,并通过良性调控TGF-β1/Smad通路,从而延缓肝纤维化进程。

RP-HPLC测定不同海拔新疆假龙胆中3种有效成分的含量

目的： 建立不同海拔蒙药新疆假龙胆中3种有效成分的RP-HPLC测定方法。方法： 采用ZORBAX SB-C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，流速1.0 mL·min-1，獐牙菜苦苷、龙胆苦苷的流动相为甲醇-水（20：80），芒果苷的流动相为甲醇-0.5%乙酸（25：75），检测波长分别为獐牙菜苦苷238 nm，龙胆苦苷270 nm，芒果苷254 nm，柱温25℃。结果： 实验所建立的测定方法简便准确，在1 900~3 035 m的不同海拔的新疆假龙胆中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷的含量变化范围分别是1.30%~2.48%，0.377%~0.508%，0.041%~0.071%。结论： 不同海拔的新疆假龙胆中3种有效成分含量随海拔高度增高均呈增加趋势。