Gln与Ala-Gln对缓解LPS诱导动物免疫应激的研究进展

谷氨酰胺(glutamine,Gln)又称α-氨基戊酰胺酸、谷氨酸-5-酰胺,是一种非必需氨基酸,在机体中发挥重要作用,被认为是一种功能性氨基酸,通常以丙氨酰-谷氨酰胺(alanyl-glutamine,Ala-Gln)形式作为饲料的添加剂。Gln与Ala-Gln不仅能促进畜禽和水产动物生长,提高机体抗氧化、免疫能力,维持肠道健康,对缓解机体免疫应激也发挥着重要作用。文章通过探讨在饲料中添加Gln与Ala-Gln对动物的影响,阐述其缓解免疫应激的作用机理,为Gln、Ala-Gln作为饲料添加剂应用提供理论依据,同时为进一步研究缓解免疫应激的作用机制提供参考。

巴西固氮螺菌Yu62 glnB基因和glnZ基因的克隆和序列分析

gln B基因编码的 PII蛋白在巴西固氮螺菌的固氮过程中起着非常重要的调控作用 ,而 gln Z是与gln B高度同源的基因 ,其产物 Pz可能也在固氮调控中起作用。本研究用 PCR法克隆了巴西固氮螺菌 Yu6 2gln B基因和 gln Z基因。 DNA序列分析表明 gln B和 gln Z这 2个基因的编码区的长度都为 336 bp,编码 112个氨基酸。将巴西固氮螺菌 Yu6 2菌株与标准菌株 Sp7的 gln B基因和 gln Z基因分别进行比较 ,结果表明这 2个菌株的 gln B基因在编码区的核苷酸顺序完全相同 ,而 gln Z基因在长 336 bp的编码区内有 4个碱基发生变化 ,但改变后都是同义密码子 ,即编码的氨基酸并未改变。 gln B基因和 gln Z基因在核苷酸顺序上的同源性高达 73.2 % ,氨基酸顺序的同源性达 6 6 .7%

冠心病患者对氧磷酶基因192位Gln-Arg多态性的研究

目的 探讨冠心病 (CHD)患者血脂改变是否与对氧磷酶 (PON)基因 192位 Gln- Arg变异有关。方法 应用多聚酶链反应 (PCR)对成都地区汉族 118例冠心病患者及 12 8例正常对照者 PON基因酶切位点的限制性片段长度多态性 (RFL P)进行研究。血脂用酶法测定。结果 CHD患者和正常对照组 PON基因均以 QR基因型为主 ,其频率分别为 0 .5 78和 0 .5 2 5。正常对照组和 CHD组 PON基因 R等位基因频率分别为 0 .5 2和 0 .5 0 ,无显著差异 (P>0 .0 5 )。中国人 PON基因 R等位基因频率显著高于白种人及印度人 (P<0 .0 1) ,而低于日本人及中国台北人(P<0 .0 1) ,存在种族差异。结论 未发现 PON1基因 192位 Gln- Arg多态性与中国人

中国人Wilson病ATP7B基因Arg778Leu/Gln点突变与中医证型的相关性研究

目的 :探讨中国人Wilson病 (WD)ATP7B基因Arg778Leu/Gln点突变与中医证型的关系。方法 :应用PCR技术分别扩增 90例WD患者和 30名健康人ATP7B基因的第 8外显子 ,其PCR产物行限制性内切酶MspⅠ酶切分析。 90例WD患者进行中医辨证分型。结果 :90例WD患者有 34例Arg778Leu/Gln点突变 ;WD患者中医辨证分型属肝风内动者Arg778Leu/Gln点突变占 2 0例。 结论 :Arg778Leu/Gln点突变组患者的发病年龄迟于未见该点突变组的患者 。

GLN缓解中华鳖免疫应激反应机制的初步研究

本文探讨GLN缓解中华鳖(Trionyx sinensis)免疫应激反应的作用机制,为通过营养调控手段增强机体免疫保护作用,促进水生动物健康养殖提供依据。试验选择体重接近的健康中华鳖60只,随机分为3组,分别腹腔注射0.7%NaC l、500μg LPS/Kg BW、500μg LPS+100mg GLN/Kg BW。检测不同时段血浆COR、TNF-α、IL-1β、IL-6、IgM、IgG、IgA、LSZ、GSH、GSH-PX、MDA以及肝脏PRO、GSH、GSH-PX、MDA含量的变化。结果表明:注射LPS引起中华鳖产生了免疫应激反应,血浆中COR、TNF-α、IL-1β、IL-6、IgM、GSH-PX、MDA和肝脏组织PRO、GSH-PX、MDA含量在相应时段显著升高(p<0.05),而血浆和肝脏GSH含量显著降低(p<0.05);补充GLN不仅缓解了COR、TNF-α、IL-1β和IL-6等的上升趋势,而且使非特异性免疫抑制剂(MDA)水平降低。LPS作为免疫原可引起中华鳖产生免疫应激反应,补充GLN可以缓解免疫应激,对中华鳖具有免疫保护作用。

控制酶解玉米黄粉蛋白制备富含“条件必需氨基酸”——谷氨酰胺(Gln)活性肽营养液的研究(I)玉米黄粉蛋白水解用酶的筛选研究

研究了醇水体系中酶法水解玉米黄粉蛋白提取Gln活性肽的可行性 ,在 50 %乙醇 (或异丙醇 )水溶液中 ,2h内所筛选酶的活性消失 ,并且 2h内对玉米黄粉蛋白的水解度 (DH)仅有 3 %左右 ,醇浓度越高 ,活性降低越快 ,显然 ,除非对酶进行特殊的固定化处理 ,醇水体系中水解黄粉蛋白是不合适的。文章进而用水解度(DH)、氮溶解指数 (NSI)及Gln得率为指标 ,详细研究了水相中蛋白酶的水解情况 ,结果表明 ,多数酶对酰胺基具有水解作用 ,以中性蛋白酶为最 ,反应 6h ,脱酰胺率高达 4 0 .85% ,碱性蛋白酶和木瓜酶次之 ,复合酶A、风味酶和胃蛋白酶对酰胺基的水解作用较弱。

瘦素受体基因Gln223Arg多态性与2型糖尿病的关系

目的研究瘦素受体基因Gln223Arg多态性与2型糖尿病的关系。方法采用病例对照研究方法,随机抽取重庆市2所医院的糖尿病门诊和住院初诊患者及其他疾病和门诊健康体检者共336例,其中病例组(糖尿病患者)172例,对照组(非糖尿病者)164例,调查其糖尿病危险因素,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测其瘦素受体Gln223Arg基因多态性,分析其与2型糖尿病的关系。结果该人群AA、AG、GG的基因型分布频率分别为0.015、0.307和0.678,A和G等位基因频率分别为0.202和0.798,基因型频率分布符合H-W平衡(χ2=3.081,P=0.079)。病例组人群GG基因型的检出率(74.42%)高于对照组(60.98%),AA+AG型检出率(25.28%)低于对照组(39.02%),差异具有统计学意义(χ2=6.96,P=0.008);非条件Logistic回归分析提示高总胆固醇(TC)血症、低高密度脂蛋白(HDL-C)血症、腰臀比(WHR)、糖尿病家族史和LEPR基因Gln223Arg多态性与2型糖尿病发病有关。结论瘦素受体基因Gln223Arg多态性与2型糖尿病可能有关。

玉米Gln1-3 gDNA序列分离、基因结构、保守功能域与等位变异分析

谷氨酰胺合成酶家族是高等植物体内氨态氮同化酶,是植物体内氮利用与循环的核心构件。玉米Gln1-3基因编码叶肉细胞中的细胞质同工酶,与全株氮向籽粒蛋白质同化与氮利用效率及产量紧密相关。本研究以玉米自交系辽白371为材料,采用PCR与接头步移(walking)方法分离得到Gln1-3基因区域基因组DNA(gDNA)全长4571bp,起始密码子至终止密码子序列长3062bp。将该基因在GenBank注册,登录号为EU338535,并进行了详细注释。该基因由10个外显子、9个内含子组成,剪接方式主要为5′供位保守的GU与3′受位AG模式。编码的GS1蛋白由356个氨基酸组成,分子量39.2kD,等电点(pI)为5.202。保守功能域分析表明,氨基末端外显子2到外显子6为氨离子结合结构域,羧基末端外显子8与外显子9构成ATP酶结构域,在胞内行使催化功能。对50个玉米自交系Gln1-3基因重要分析区域进行了等位变异分析,鉴定出364个等位变异,其中313个为SNP变异,占86%。

“条件必需氨基酸——Gln”生理功能的研究进展及应用现状

Gln是一种“条件必需氨基酸” ,本文详细论述了Gln的研究背景 ,Gln的生理功能包括在免疫活性细胞、骨骼肌、胃肠道、肾脏、肝脏和大脑中的作用 。

对氧磷酶1基因Gln192Arg多态性与阿尔茨海默病的关联研究

目的探讨对氧磷酶1(paraoxonase-1, PON1)基因Gln192Arg多态性与汉族散发阿尔茨海默病(AD)的关系。方法以165例散发AD患者和174例年龄匹配老年人为对象进行病例-对照研究。用PCR-RFLP法检测PON1及载脂蛋白E(ApoE)基因多态并进行关联分析。结果AD组与对照组PON1 基因Gln192Arg多态性分布没有显著性差异。研究对象按ApoEε4携带状况分层后,各亚组之间基因多态性分布亦无显著性差异。结论PON1基因Gln192Arg多态性与中国汉族人群AD不存在关联。

玉米Gln1-4的gDNA序列、基因结构、保守功能域与等位变异

本研究旨在分离玉米谷氨酰胺合成酶(GS)家族重要成员Gln1-4 gDNA序列全长,分析基因结构、保守功能域与自然等位变异,为氮利用效率功能位点关联性分析奠定基础。利用PCR步移(walking)方法分离Gln1-4基因区域基因组DNA序列,用生物信息学方法分析基因结构与保守功能域,测序与序列比对法分析重要区域自然等位变异。结果表明,分离得到自交系Mo17 Gln1-4区域gDNA 3 724 bp,起始密码子至终止密码子序列长2 858 bp,登录到GenBank(登录号为EU369651),并注释。Gln1-4基因含10个外显子与9个内含子,18个剪接位点均为保守的5'供位GU与3′受位AG模式。编码的GS蛋白由356个氨基酸组成,分子量39.2 kD,等电点(pI)为5.202。氨基末端外显子2到外显子6为氨离子结合结构保守功能域;羧基末端外显子8与外显子9构成ATP酶活性保守功能域。Gln1-4与Gln1-3基因相比,在DNA序列、氨基酸序列、基因结构、保守功能域均很保守,氨基酸序列一致性达98.31%。52个玉米自交系的Gln1-4等位变异分析中,共鉴定出318个等位变异位点,其中242个SNP,45个Indels,占90%。该基因氮利用效率功能关联性分析区间应位于氨离子结合功能域与ATPase活性保守功能域中重要的变异位点,18个剪接位点。

乙体氯氰菊酯致小鼠脑组织Glu-Gln环路紊乱的实验研究

将健康成年小鼠按体重随机分成1个对照组及3个染毒组,每组10只,雌雄各半。染毒组小鼠以灌胃方式分别给予20、40、80 mg/kg剂量的乙体氯氰菊酯。以食用色拉油稀释受试物质,对照组给予等量色拉油。3 h后处死小鼠,采用分光光度法检测各组小鼠脑组织谷氨酰胺酶(PAG)和谷氨酰胺合成酶(GS)活性。结果80 mg/kg剂量组小鼠于染毒后2 h陆续出现明显的兴奋症状,其中2只雌鼠出现濒死状态;40 mg/kg剂量组个别小鼠于染毒后2 h出现轻微兴奋症状;20 mg/kg剂量组小鼠在整个受试期间未见异常。各组小鼠脑组织PAG活性随染毒剂量的增加而递增,GS活性随染毒剂量的增加而逐渐降低,其中80 mg/kg剂量组小鼠脑组织PAG活性明显高于对照组(P<0.01),80、40 mg/kg剂量组小鼠脑组织GS活性明显低于对照组(分别为P<0.001、P<0.01)。提示乙体氯氰菊酯使小鼠脑组织谷氨酰胺合成酶活性降低、谷氨酰胺酶活性升高。

中国人内源性高甘油三酯血症患者对氧磷酶基因192位Gln-Arg多态性的研究

目的 探讨内源性高甘油三酯血症 (HTG)患者血脂及载脂蛋白含量改变是否与对氧磷酶(PON)基因变异有关。方法 应用多聚酶链反应 (PCR)对 12 8例 HTG患者及 12 9例正常对照 PON基因酶切位点的限制性片段长度多态性 (RFL P)进行鉴定。血脂用酶法测定 ,血清 apo A 、A 、B10 0、C 、C 及 E用本校载脂蛋白研究室研制的 RID试剂盒测定。结果 HTG患者和正常对照组 PON基因均以 QR基因型为主 ,其频率分别为 0 .5 81和 0 .5 15。正常对照组和 HTG组 PON基因 R等位基因频率分别为 0 .5 2和 0 .5 6 ,两者无显著差异 (P>0 .0 5 )。正常对照组 PON基因具有 QQ基因型者其血清 apo A 水平较 RR基因型者显著为高 ,而 apo B水平则显著降低 (P<0 .0 5 ) ;HTG组具有 QQ基因型者其血清 apo A 及 A 水平则较 RR基因型者显著为低 (P<0 .0 5 ) ,而apo E水平则显著为高 (P<0 .0 5 )。结论 HTG患者血清 HDL- C及 apo A 的降低及 apo E的升高可能与 PON基因

PON 1192 Gln/Arg基因多态性与2型糖尿病并发冠心病风险的Meta分析

目的采用Meta分析法综合评价对氧磷脂酶1 192Gln/Arg(PON1 Q192R)基因多态性与2型糖尿病并发冠心病的相关性。方法截至2017年3月,在Pubmed、Embase、Web of Science、中国知网、万方等数据库可检索到的已发表论文,由两位评价者根据纳入排除标准独立筛选和评价文献质量。采用Rev Man5.3和Stata12.0软件进行Meta分析,计算合并比值比(odds ratio,OR)及其95%可信区间(confidence intervals,CI),并进行敏感度分析和发表偏倚评估。结果 9个病例-对照研究纳入本研究,包括1353例病例组(2型糖尿病并发冠心病组)和1360例对照组(单纯2型糖尿病组)。Meta分析结果显示,与单纯糖尿病组比较,5种基因模型均提示PON1Gln/Arg基因多态性和2型糖尿病并发冠心病显著相关[等位基因模型:R vs Q,OR=1.50,95%CI(1.23~1.83);纯合子基因模型:RR vs QQ,OR=2.28,95%CI(1.52~3.42);杂合子基因模型:QR vs QQ,OR=1.42,95%CI(1.18~1.71);显性基因模型:RR+RQ vs QQ,OR=1.59,95%CI(1.33~1.89);隐性基因模型:RR vs RQ+QQ,OR=1.74,95%CI(1.24~2.45)]。人口学的亚组分析提示,对氧磷脂酶1 192Gln/Arg基因多态性与2型糖尿病并发冠心病的相关性在亚洲和高加索人群中比较,差异无统计学意义。敏感度结果显示,合并的结果是稳定可靠的,漏斗图检测未发现发表偏倚。结论 PON1 192Gln/Arg基因多态性与2型糖尿病并发冠心病风险呈显著相关性,携带R等位基因的2型糖尿病人群相对于携带Q等位基因者,可能更易并发冠心病。

不同水平Gln对早期断奶犊牛免疫功能的影响

选用体质量和出生日期相近的12头中国荷斯坦犊牛,随机分为4组,(40±1)d一次性断奶。采用胃肠外营养(Total parenteral nutrition,TPN)颈静脉灌注丙氨酰谷氨酰胺(Ala-Gln)二肽的方式,研究了不同水平Gln对早期断奶犊牛免疫功能的影响。Ala-Gln灌注剂量为Ⅰ组(对照组,不灌注),Ⅱ组(低水平)0.33 g/(kg.d),Ⅲ组(高水平)1.34 g/(kg.d),Ⅳ组(中等水平)0.68 g/(kg.d),连续灌注7 d。结果表明:补充中等水平的Ala-Gln,可以有效地增加外周血CD2+和CD4+淋巴细胞的含量,使CD4+/CD8+比值增高,同时使血清IgA和IgG含量和空肠和回肠粘液S-IgA含量显著升高,从而增强了机体的免疫功能。

线粒体tRNA^(Gln)对中国汉族人原发性高血压发病的影响

目的检测线粒体tRNA^(Gln)在中国汉族原发性高血压患者中的突变情况,并对发生突变的患者临床特征进行分析,以观察线粒体tRNA^(Gln)突变与原发性高血压的关系,探讨原发性高血压病患者母系遗传的遗传标志和临床特点。方法采集并整理原发性高血压患者的一般资料、血常规、血生化及心脏彩色超声检查结果。分离白细胞并提取DNA,采用特异性的引物进行扩增,得到靶基因,将PCR产物纯化后测序,并将测序结果与剑桥序列进行对比分析。采用1:1病例对照分析的方法,对发生tRNA^(Gln)突变的原发性高血压患者和未发生tRNA^(Gln)突变的原发性高血压患者的一般资料、血生化、血常规和心脏超声结果进行对比分析。结果通过对990名原发性高血压患者线粒体DNA进行突变分析,发现33名患者在8个位点存在tRNA^(Gln)突变。突变发生频率最高的位点为A4386G,16名患者在该位点发生突变。与未发生tRNA突变的原发性高血压患者相比,发生tRNA^(Gln)突变的原发性高血压患者的平均发病时间显著提前,这种早发现象与体质量指数大小无关。tRNA^(Gln)突变对原发性高血压患者的血生化、血常规及心脏的结构和功能都产生显著的影响,不同的线粒体tRNA突变对它们的影响程度不同。多数发生tRNA突变的患者具有母系遗传史,并且符合线粒体遗传的特点。结论临床上部分原发性高血压患者出现母系遗传的特点,可能与线粒体tRNA^(Gln)突变有关。tRNA^(Gln)突变可能导致线粒体结构和功能的变化,从而影响血脂代谢、电解质平衡以及血细胞的稳态,并可能导致心脏结构和功能的异常,这或许与原发性高血压的发生发展有关。

瘦素受体基因Gln223Arg多态性与2型糖尿病合并慢性肾功衰竭关系

目的探讨瘦素受体基因Gln223Arg多态性与2型糖尿病合并慢性肾功衰竭关系。方法采用聚合酶链反应及限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)分别测定126例2型糖尿病、108例2型糖尿病合并慢性肾功衰竭和185例对照组样本的瘦素受体基因Gln223Arg的基因型,同时检测各组不同基因型样本的血清瘦素水平。结果 2型糖尿病合并慢性肾功衰竭组与正常对照组瘦素受体基因Gln223Arg基因型频率及等位基因频率比较差异有显著性(P<0.01)。糖尿病组与正常对照组瘦素受体基因Gln223Arg基因型及等位基因分布频率差异显著性(P<0.05)。2型糖尿病合并慢性肾功衰竭组中GG基因型与AA+AG基因型血清瘦素水平比较差异有显著性(P<0.05)。相同基因型样本的血清瘦素水平组间比较,任意两组比较均有差异(P<0.05)。结论瘦素受体基因Gln223Arg多态性与2型糖尿病合并慢性肾功衰竭相关。