The study of Gongshisong＇ s anti-fatigue active site sifting

Aim To investigate the influence of the Gongshisong extract of different extraction parts on mice sports fatigue index. Method The mice were randomly divided into blank group, model group, the Gongshisong extract group （petroleum ether, chloroform, ethyl acetate, n-butanol, the aqueous layer） and the positive control group. The mice in different groups were fed with corresponding Gongshisong extract liquid 2.5 g kg^-1 d^-1 once per day for consecutively 7 days. The blank group and model group were given 1% sodium carboxymethyl cellulose so- lution, the positive control group was administered with Rhodiola 0.59 g · kg^-1· d^-1 After the last administered each group of mice were determined of weihgt-loading swimming time, liver glycogen and muscle glycogen content, and urea nitrogen, lactic acid and creatine kinase in 90min mice after swimming content in blood. Result Com- pared with the blank group, the petroleum ether extract of Gongshisong could significantly prolong the swimming time of mice （P 〈 0.05）, enhancing the mice muscle glycogen reserves （P 〈 0.05）, and reduce the level of urea nitrogen and creatine kinase in mice after swimming （P 〈 0.05）. Butanol extraction liquid of Gongshisong can ob- viously prolong the swimming time of mice （P 〈 0.05）, increasing the reserves of glycogen in mice （P 〈 0.05）, decreasing the level of urea nitrogen in mice and blood lactate after swimming （P 〈 0.05 ）. Water extract of Gong- shisong could significantly prolong the swimming time of mice （P 〈 0.05） , increasing muscle glycogen storage （P 〈0.05）, reducing the level of blood lactic acid in mice after swimming （P 〈 0.05）. Ethyl acetate extract of Gongshisong could significantly prolong the swimming time of mice （P 〈 0.05） , and increase the reserves of glyco- gen in mice （P 〈0. 05）. Conclusion Comprehensive analysis, the petroleum ether, n-butanol and water site of Gongshisong is better anti fatigue active site.

公石松多糖的提取、结构表征及生物活性研究

以公石松为原料,通过水提醇沉法获得公石松多糖。利用高效凝胶渗透色谱、柱前衍生化HPLC法、紫外、红外光谱、刚果红实验等对公石松多糖的结构进行了表征,通过抗氧化实验评估公石松多糖的体外抗氧化活性,采用MTT法初步探讨了其对肝癌细胞HepG2、肝细胞LO2的抑制效果。结果表明,公石松多糖的相对分子量分布于50325~115144 Da,由甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,具有三螺旋结构。体外抗氧化活性测定显示,公石松多糖对DPPH、ABTS、羟基自由基表现出较强的清除能力。抗肿瘤实验表明,公石松多糖具有抑制HepG2增殖的能力。

药用经济植物公石松的资源调查及开发利用

在对漳州市场销售的公石松与同时排展出售的金线莲的识别特征比较研究基础上,从分类学角度综述了二者的分类地位关系.针对国内目前对公石松的研究报道不多的现状,对漳州市场销售的公石松药理功效、食疗方法、供货来源、市场分布、销售行情、人工栽培技术等进行了初步调查.结果表明:公石松是药食两用经济植物,从海南等地进货或从本地深山采集,仅在福建省漳州市等几个不多的区域拥有消费者市场,一般以鲜草销售,每公斤200元以上,人工栽培技术不成熟,提出运用生物技术进行无性繁殖、扩大人工种植面积、开发多种产品形式等建议,为公石松的后续开发指明方向.

闽南民间药公石松的生药鉴定

对具有闽南民间特色的草药公石松原植物进行鉴定,确认其来自兰科Orchidaceae血叶兰属植物血叶兰Ludisia discolor的全草,并对其生药性状、组织构造、粉末显微特征等进行观察描述,旨在为该药的正确鉴别应用,以及进一步研究开发提供参考。

公石松与金线莲中黄酮类化合物成分对比研究

采用反相高效液相色谱法以梯度洗脱对公石松、金线莲醇提成分进行分析,并与11种黄酮类化合物标准品(芦丁、水仙苷、槲皮素、山奈酚、异鼠李素、杜鹃黄素、黄芩素、异山奈素、鼠李素、鼠李柠檬素、山奈素)对比,结果表明:两者均含有芦丁、水仙苷、槲皮素,金线莲中含有山奈酚、异鼠李素,公石松中则不含。公石松中芦丁、水仙苷、槲皮素含量分别为0.059 mg·g^(-1)、2.004mg·g^(-1)、0.018 mg·g^(-1);金线莲中芦丁、水仙苷、槲皮素、山奈酚、异鼠李素含量分别为0.274 mg·g^(-1)、1.210 mg·g^(-1)、0.456 mg·g^(-1)、0.064 mg·g^(-1)、0.331 mg·g^(-1),公石松和金线莲中水仙苷的含量显著高于其他黄酮类成分的含量。与金线莲相比,公石松中有一保留时间为20.263 min的特有物质,含量为1.225 mg·g^(-1),结合元素分析和质谱分析,判断该化合物的分子量为786,分子式推测为C40H58N4O12。

公石松组培技术的建立

通过对公石松的组织培养条件进行研究,拟摸索出适宜其组培的产业化技术.试验结果显示:最适诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L;最适增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.3 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L;最适生根培养基为MS+IBA 0.4 mg/L+蔗糖25 g/L+活性炭1.5 g/L+蛋白胨2 g/L.该结果可为公石松产业化生产提供技术参考.

公石松抗运动性疲劳的活性部位筛选

目的:筛选公石松抗运动性疲劳的活性部位。方法:用80%乙醇提取制备公石松浸膏,用水分散后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,得各部位提取物。将70只小鼠随机分为空白对照(1%羧甲基纤维素钠,CMC-Na)组、阳性对照[大株红景天胶囊,590 mg/(kg·d)]组和公石松石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇提取物组及水层组(分别记为TS、TL、TY、TZ、TW组),公石松提取物组小鼠均按2.5 g(生药)/(kg·d)ig给药,连续7 d,测定小鼠负重游泳力竭时间。将70只小鼠按上述方法分组给药,测定小鼠体内肝糖原、肌糖原含量和肝脏系数。将80只小鼠除按上述方法分组给药外增设模型(1%CMC-Na溶液)组,不负重游泳90 min后测定小鼠血清中乳酸、肌酸激酶及尿素氮含量。结果:与空白对照组比较,TS、TY、TZ组小鼠负重游泳力竭时间延长,TY、TZ、TW组小鼠体内肝糖原含量增加,TS、TW组小鼠体内肌糖原含量增加,模型组小鼠血清中尿素氮、乳酸、肌酸激酶含量增加(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,TS、TY组小鼠血清中尿素氮含量减少,TZ组及TW组小鼠血清中乳酸含量减少,TS组小鼠血清中肌酸激酶含量减少(P<0.05或P<0.01)。结论:公石松的石油醚、正丁醇部位和水层具有较好的抗疲劳活性。

闽草药公石松转录组分析及黄酮类合成功能基因的挖掘

对福建闽南特色草药公石松(血叶兰)进行转录组测序,挖掘黄酮类化合物生物合成相关基因,为其药用价值开发提供依据。采用RNA-seq高通量测序技术对公石松的茎、叶进行转录组测序,使用Trinity软件对获得的Unigenes数据进行过滤组装,运用KEGG数据库对Unigenes进行注释,并通过Q-PCR对其结果进行验证和分析。共获得208113条Unigenes,平均长度为537 bp,将所有Unigenes与GO、Nr、Swiss-Prot、TrEMBL、CDD、KOG、Nt、Pfam、KEGG等9个数据库进行比对,发现有77578条Unigenes被注释到以上9个数据库中。同源性比对结果表明,公石松与油棕的同源序列最多,占总序列的12.16%;在GO和KOG数据库中,可将其分为3大类67小类和3大类25小类;比较不同部位(茎,叶)的转录组测序结果,发现差异基因主要富集在PI3K-Akt信号通路、氧化磷酸化、核糖体、吞噬体等代谢通路,并挖掘出与黄酮类生物合成相关基因25个,显著性差异的Unigenes有11个,在叶中表达高于茎。本研究通过高通量转录组测序,获得了大量的基因序列,为公石松分子生物学的研究奠定基础,并为进一步挖掘功能基因、调控活性成分的生物合成等提供科学依据。