桂附地黄丸干预阳虚体质的血浆代谢组学

目的评价桂附地黄丸干预阳虚体质的临床疗效和探讨桂附地黄丸干预阳虚体质的疗效机制。方法纳入健康和亚健康人群阳虚体质62例,以排除疾病对体质的影响,将阳虚体质随机分成两组,每组31例,对照组给予生活方式指导,试验组在生活方式指导的基础上给予桂附地黄丸干预1个月,评价研究对象的阳虚体质评分;应用核磁共振(NMR)技术方法对阳虚体质干预前后血浆进行代谢组学分析,采用多元统计分析方法寻找阳虚体质干预前后血浆内源性差异代谢产物。结果试验组干预1个月后阳虚体质转化分较对照组显著下降(P<0.05);代谢组学结果表明生活方式干预后可提高阳虚体质血液中乳酸、缬氨酸、脯氨酸、3-羟基丁酸、精氨酸的含量。在生活方式指导的基础上给予桂附地黄丸干预除了提高阳虚体质血液中乳酸、缬氨酸、脯氨酸、3-羟基丁酸、精氨酸含量外,还可提高丙氨酸、谷氨酰胺、α-葡萄糖、异亮氨酸、甜菜碱和丙二醇的含量。结论桂附地黄丸改善阳虚体质状态的作用机制可能与其提高丙氨酸、谷氨酰胺、α-葡萄糖、异亮氨酸、甜菜碱和丙二醇的含量,改善能量代谢紊乱,增加机体产能有关。

一种评价多波长中药色谱指纹图谱新方法-均谱法

目的建立一种评价多波长中药色谱指纹图谱的新方法-均谱法（MFM）,以桂附地黄丸（Guifu Dihuang Wan,GFDHW）平行五波长（PFW）高效液相色谱（HPLC）指纹图谱的均谱为基础,依据系统指纹定量法（SQFM）鉴定桂附地黄丸整体质量。方法采用反相RP-HPLC法,以丹皮酚（POL）为参照物峰,于210、230、246、265、280 nm紫外波长下检测,分别确定了54、58、47、47和44个共有指纹峰,用S1~S3和S5~S9等8批样品的HPLC指纹图谱生成对照指纹图谱,建立GFDHW的PFW-HPLC指纹图谱,并评价12批样品的质量。将同一样品的5个波长下HPLC指纹图谱的信号加和后求平均值作为该样品的均谱,用S1~S3和S5~S9等8批样品HPLC均谱按平均值法生成对照指纹均谱来综合评价12批样品均谱。结果 12批样品用MFM鉴定的结果与用PFW结合SQFM所鉴定的结果一致。结论 MFM能最大限度保留指纹峰,实现化学指纹信息最大化,同时能有效改善指纹信号质量,是HPLC-DAD三维指纹图谱的简化代表,因此可作为综合定量鉴定中药质量的有效、可靠和简便方法。

六味地黄丸及其类方血中移行成分的比较研究

目的:首次进行六味地黄丸及其类方知柏地黄丸和桂附地黄丸的血中移行成分的比较研究,试图从体内直接作用物质的角度初步阐明地黄丸类方的配伍规律。方法:利用RP-HPLC建立六味地黄丸及其类方给药后的大鼠血清色谱指纹图,比较分析,确定各复方的血中移行成分;进而通过单味药样品的对照,鉴定出衍生方与主方的差异血中移行成分及生药来源。结果:六味地黄丸及类方出现了14个共有血中移行成分,另外,知柏地黄丸产生了5个血中移行成分,桂附地黄丸产生了2个特有血中移行成分。结论:血中移行成分的数目与状态从体内直接作用物质的层面上反映了六味地黄丸及其类方功效上的异同,提示从经典方剂及其类方的体内成分入手进行深入研究,将是阐明复方配伍规律的有效途径。

桂附地黄丸的毛细管电泳指纹图谱研究

目的建立了桂附地黄丸(Guifu Dihuang Wan,GFDHW)毛细管区带电泳指纹图谱(capillary electropeore-sis fingerprint,CEFP),为其质量控制提供依据。方法以50 mmol.L-1硼砂为背景电解质(BGE)溶液,采用未涂层石英毛细管(75 cm×75μm,有效长度75 cm),以色谱指纹图谱分离量指数RF为目标函数优化试验条件,紫外检测波长230 nm,运行电压12 kV。结果以没食子酸(GA)峰为参照物峰,确定18个共有指纹峰,建立了GFDHW-CEFP。通过对12批样品聚类分析确定用其中10批生成对照CEFP(RCEFP),以此RCEFP为标准用系统指纹定量法鉴别12批桂附地黄丸质量。鉴定出7批质量合格,2批含量明显偏低,3批含量明显偏高,且分布比例不合格。结论所建立的毛细管电泳指纹图谱具有较好的精密度和重现性,为全面控制和评价桂附地黄丸的质量提供了一种新的方法。

用双标定量指纹法定桂附地黄丸平行五波长高效液相色谱对照指纹图谱标准

目的用双标定量指纹法研究桂附地黄丸(Guifu Dihuang Wan,GFDHW)对照指纹图谱(RFP)来实现指纹图谱标准的复原。方法采用HPLC等吸收双波长法测定了桂附地黄丸中没食子酸、5-羟甲基糠醛、芍药苷、马钱苷和丹皮酚含量。在210、230、246、265和280nm 5个特征检测波长处建立GFDHW平行五波长指纹谱;以没食子酸和丹皮酚为双参照物峰,采用双标定量指纹法恢复GFDHW-RFP。结果以GFDHW中5组分含量测定结果和平行五波长指纹谱鉴定结果分别聚类分析比较不同厂家产品质量差异,结果以后者更为准确可靠。建立了GFDHW双标定量指纹法技术标准。结论基于多指标定量分析和平行五波长高效液相指纹谱的双标定量指纹法能够确定RFP的标准制剂和实现实时随行定量检测GFDHW指纹图谱,这是GFDHW现代化的有效新方法。

桂附地黄丸中多糖指纹图谱的建立

目的以桂附地黄丸中多糖为研究对象,初步探索中药多糖质量控制的新方法。方法对桂附地黄丸多糖部位进行控制条件下的部分水解,HPLC检测水解产物,得到指纹图谱。以中药指纹图谱评价软件和Microsoft Excel 2002图表处理图谱信息。结果在不同来源共10个批号的桂附地黄丸多糖部位指纹图谱中,8个批号的峰面积相似度>0.99,2个批号相似性分别为0.92和0.94。结论初步确定可采用"多糖水解-HPLC指纹图谱"的方法对桂附地黄丸中的多糖进行质量控制。

桂附地黄丸改善自然衰老小鼠肠道脂质吸收功能减退的研究

目的 探究桂附地黄丸对衰老小鼠肠道脂质吸收功能减退的改善作用及可能的作用机制。方法 将26只SPF级雄性11月龄雄性C57BL/6J小鼠饲养至21月龄,随后分为衰老模型组(Model组)和桂附地黄丸给药组(GFDHW,1.17 g·kg^(-1)),给药组小鼠采用饲料给药的方法,持续给药3个月,给药期间自由饮水,Model组小鼠给予正常饲料饲养,期间自由饮水,记录各组小鼠每周的体质量变化,于24月龄时进行处理取材;9只SPF级雄性8月龄雄性C57BL/6J小鼠作为青年对照组(Con组),适应性饲养1周后进行处理取材。取材处理前,各组小鼠禁食24h,禁食结束后各组小鼠灌胃0.2 mL橄榄油,取材处理前30 min,各组小鼠灌胃0.2 mL半固体营养液。小肠推进运动实验检测小鼠小肠运动能力;生化试剂盒检测各组小鼠血清甘油三酯(triacylglycerol,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)和低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)的含量;透射电镜观察各组肠上皮细胞中脂滴数量变化;钙钴法碱性磷酸酶染色检测各组肠道碱性磷酸酶(intestinal alkaline phosphatase,IAP)活性;苏木素-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色观察各组肠上皮形态;免疫组织化学法检测各组小鼠小肠Olfm4、Lgr5、PCNA、Notch1、Hes1以及Villin的表达;免疫印记法(Western blot)检测各组小鼠小肠脂质吸收相关分子蛋白表达水平。结果 与Con组小鼠相比,Model组小鼠体质量下降较快,小肠运动能力下降,血清TG、TC、LDL含量增加,肠上皮细胞中脂滴数量增多,GFDHW组小鼠较衰老小鼠小肠运动能力有所提升,血清TG、TC、LDL含量降低,肠上皮细胞中脂滴数量减少;HE染色Model组小鼠小肠绒毛排列紊乱、断裂,绒毛长度缩短,隐窝深度降低,隐窝数量减少,与衰老小鼠相比,GFDHW组小鼠小肠绒毛排列整齐、连续,绒毛长度增加,隐窝深度升高,隐窝数量增多;免疫组化结果显示,与Con组小鼠相比,Model组小鼠小肠Olfm4、PCNA、Notch1、Hes1、Villin蛋白表达降低,与衰老小鼠相比,GFDHW组小鼠上述指标蛋白水平升高;Western blot结果显示,与Con组小鼠相比,Model组小鼠小肠CD36、FATP4、SR-BI、ACAT2、FABP1和MTTP蛋白表达下降,与衰老小鼠相比GFDHW组小鼠上述指标蛋白水平升高。结论 GFDHW通过提高Notch1表达促使肠干细胞向吸收细胞分化以及提高脂质吸收途径中相关分子蛋白表达水平,从而改善衰老小鼠小肠脂质吸收功能。

桂附地黄丸加减对冠心病PCI术后患者生活质量的影响及用药安全性评价

目的:探讨桂附地黄丸加减(温肾活血方)对冠心病患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后生活质量的影响及该方的用药安全性。方法:选取2017年6月至2018年5月重庆市中医院心内科门诊及住院部PCI术后患者147例,采取随机单双号的方法分为治疗组和对照组,对照组采取基础治疗(西医药物),治疗组在对照组的基础上加用桂附地黄丸加减,疗程均为4周。记录比较两组患者治疗前后的明尼苏达心力衰竭生活质量调查表总评分,6 min步行距离,西雅图心绞痛量表得分,中医证候评分,心功能评价,并观察不良反应,评价PCI术后患者的生活质量及其用药安全性。结果:与本组治疗前和对照组治疗后比较,治疗组患者明尼苏达心功能质量表评分显著降低(P<0.01),6 min步行距离显著增长(P<0.01),西雅图心绞痛量表评分显著提高(P<0.01),中医证候评分显著降低(P<0.01),左心室射血分数(LVEF)和舒张早期/舒张晚期最大血流速度(E/A)明显提高(P<0.05)。结论:在常规西医药物治疗的基础上,服用温肾活血方能有效改善PCI术后患者体力、情绪、中医症状、减轻心绞痛程度,增强心功能且无不良反应,可以达到改善术后患者生活质量的目的,值得推广。

桂附地黄丸与金匮肾气丸临床应用探讨

桂附地黄丸和金匮肾气丸均为温补肾阳之经典方剂,临床应用极为广泛,但目前市场上由于此二药生产厂家不同,命名混乱,常被混淆,文章对北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂生产的桂附地黄丸和金匮肾气丸进行对比,从文献方解、辨证要点、适应病症、应用体会、注意事项5个方面对此二药进行初步探讨,以期对临床正确使用有所裨益。

市售桂附地黄丸质量的高效液相指纹图谱法评价

目的为市售桂附地黄丸的质量控制和评价提供依据。方法建立桂附地黄丸的HPLC指纹图谱,在此基础上评价市售桂附地黄丸的质量异同。结果大部分厂家生产的桂附地黄丸质量一致性较好,也有部分存在一定差异。结论所建立的桂附地黄丸HPLC指纹图谱以及不同的数据处理方法,可以为桂附地黄丸的质量控制和评价提供参考。