龟羚帕安丸对帕金森病大鼠血清NSE、Cys-C、5-HT、5-HIAA及NE水平的影响

目的观察龟羚帕安丸对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠血清神经元特异性烯醇化酶(Neuron-specific enolase,NSE)、胱抑素C(Cystatin C,Cys-C)、5-羟色胺(5-Hydroxytryptamine,5-HT)、5-羟基吲哚乙酸(5-Hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA)及去甲肾上腺素(Norepinephrine,NE)水平的影响。方法采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)立体定向注射法制作PD大鼠模型,造模成功的PD大鼠随机分为模型组,西药组,中药高、中、低剂量组,中西药合用组,每组15只,另设假手术组15只。模型组及假手术组给予等容积生理盐水灌胃,其余组给予相应药物灌胃,连续给药28 d。大鼠腹主动脉取血,用酶联免疫吸附测定法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组大鼠血清NSE、Cys-C、5-HT、5-HIAA及NE的水平。结果模型组大鼠血清NSE及Cys-C水平均明显升高,血清5-HT、5-HIAA及NE水平均明显降低;中药各剂量组、中西药合用组、西药组血清NSE及Cys-C水平均明显降低,5-HT、5-HIAA及NE水平均明显升高。结论龟羚帕安丸具有明显神经保护作用,作用机制与降低NSE及Cys-C水平,增加5-HT、5-HIAA及NE水平,降低脑实质损伤、神经炎症损伤及提高单胺类神经递质有关。

基于“脑肠轴理论”探讨龟羚帕安丸对PD大鼠纹状体DA及血清CCK、VIP水平影响的研究

目的:基于“脑肠轴理论”探讨龟羚帕安丸对PD大鼠纹状体裂解液多巴胺(Dopamine,DA)、血清胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)及血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)水平的影响。方法:采用6-羟基多巴胺注射法制作PD大鼠模型,随机分为模型组、西药组、中药高、中、低剂量组,每组15只,另设15只假手术组。模型组及假手术组给予等容积生理盐水灌胃,其余组给予相应药物灌胃,连续给药4周。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测纹状体裂解液DA及血清CCK、VIP水平。结果:模型组大鼠纹状体DA、血清CCK及VIP水平显著降低;中药各剂量组、西药组大鼠纹状体DA、血清CCK及VIP水平明显均增加(P<0.01)。结论:龟羚帕安丸具有明显神经保护作用,作用机制与激活脑肠轴、增加血清CCK及VIP水平、增加中脑黑质纹状体DA的水平、发挥改善肠道功能作用有关。

龟羚帕安丸对帕金森病大鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-α、Hcy、UA及APN水平的影响

目的观察龟羚帕安丸对帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、尿酸(uric acid,UA)及脂联素(adiponectin,APN)水平的影响。方法PD大鼠模型采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)注射法制作,造模成功的PD大鼠随机分为模型组,西药组,中药高、中、低剂量组,中西药合用组,每组15只,另设15只假手术组。模型组及假手术组给予等容积生理盐水灌胃,其余组给予相应药物灌胃,连续给药4周。大鼠腹主动脉取血,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清IL-6、IL-1β、TNF-α、Hcy、UA及APN水平。结果模型组大鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-α及Hcy水平均明显升高,UA、APN水平均明显降低;假手术组、中药各剂量组、中西药合用组、西药组血清IL-6、IL-1β、TNF-α及Hcy水平均明显降低,UA、APN水平均明显升高。结论龟羚帕安丸具有明显神经保护作用,作用机制与降低IL-6、IL-1β、TNF-α及Hcy水平,增加UA、APN水平,发挥抗炎、抗氧化应激作用有关。

龟羚帕安丸对帕金森病大鼠转录因子EB介导自噬调控机制的研究

目的:研究龟羚帕安丸治疗帕金森病(PD)对转录因子EB(TFEB)表达的影响及其机制。方法:将PD大鼠模型随机分为模型组、西药组、中西药组、中药低、中、高剂量组,每组15只,另取15只正常大鼠作为假手术组。模型组及假手术组给予等容积生理盐水,其余组给予相应药物灌胃,各组均连续给药4周。PD大鼠处死后,将中脑黑质组织剥离出来,运用蛋白质印迹法(Western Blotting)检测TFEB、微管相关膜蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、泛素结合蛋白P62(P62)、酪氨酸羟化酶(TH)、α-突触核蛋白(α-syn)的表达量。结果:与假手术组比较,模型组、西药组、中西药组、中药各剂量组黑质内TFEB、LC3Ⅱ、TH蛋白表达显著降低(P<0.01),P62、α-syn表达显著增高(P<0.01);与模型组比较,西药组、中西药组、中药各剂量组黑质内TFEB、LC3Ⅱ、TH蛋白表达显著增高(P<0.01),P62、α-syn表达显著降低(P<0.01)。结论:龟羚帕安丸可通过TFEB激活自噬-溶酶体系统,增强神经细胞自噬活性,增加LC3Ⅱ、TH表达,促进α-syn、P62降解及清除,发挥神经保护作用。

龟羚帕安丸对PD大鼠中脑黑质Caspase-3、SYN表达及行为学的影响

目的:观察龟羚帕安丸对帕金森病(PD)大鼠病理学、行为学及中脑黑质突触核蛋白(SYN)、Caspase-3表达的影响。方法:采用6-OHDA注射法建立PD大鼠模型,造模成功大鼠随机分为模型组、美多芭组、龟羚帕安丸大、中、小剂量组(4、2、1 g·kg^(-1)),同时设立假手术组,假手术组、模型组给予等容积生理盐水,连续灌胃给药4周。观察各组大鼠旋转行为、中脑黑质细胞病理学及Caspase-3、SYN表达情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经细胞变性坏死明显增多,旋转圈数多,SYN、Caspase-3表达明显升高(P<0.01);各用药组大鼠旋转圈数显著低于模型组,SYN、Caspase-3表达显著低于模型组(均P<0.01)。结论:龟羚帕安丸可以改善帕金森病模型大鼠病理改变及行为学,下调Caspase-3、SYN表达可能是其治疗帕金森病的机制之一。

龟羚帕安丸对帕金森病大鼠中脑黑质病理、Beclin1、P62及LC3Ⅱ影响的研究

目的观察龟羚帕安丸对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠模型中脑黑质神经细胞病理及自噬相关蛋白Beclin1、P62、LC3Ⅱ表达的影响。方法采用6-羟基多巴(6-OHDA)注射法建立PD大鼠模型,造模成功大鼠随机分为模型对照组、美多芭组、龟羚帕安丸高、中、低剂量组及假手术对照组,每组10只。对照组、模型组给予等容积生理盐水,其余组给予相应药物灌胃,连续给药30 d。观察各组大鼠中脑黑质病理改变;免疫组化法检测大鼠中脑黑质Beclin1、P62及LC3Ⅱ蛋白的表达变化情况。结果模型组神经元细胞出现较为明显的损伤;模型组中脑黑质Beclin1及LC3Ⅱ表达降低,P62表达明显升高;各治疗组大鼠神经元损伤情况较模型组有所改善,中脑黑质Beclin1及LC3Ⅱ表达明显升高,P62表达明显降低。结论龟羚帕安丸可明显改善神经细胞损伤,作用机制与提高Beclin1及LC3Ⅱ表达,降低P62的蓄积,疏通自噬-溶酶体降解途径,提高细胞自噬活性,改善细胞自身稳态有关。

复方归苓片提取物对反复缺血再灌注诱导脑损伤的保护作用

目的：考察中药复方归苓片（茯苓、白术、当归,FDB）提取物对缺血再灌注诱导小鼠脑损伤的保护作用。方法：小鼠预先ig给予FBD CO2超临界萃取物（FBD-CO2,37.5 mg.kg-1）、水提物（FBD-H2O,150 mg.kg-1）与总提物（FBD,187.5 mg.kg-1）,bid×3.5 d,应用双侧颈总动脉反复夹闭10 min与再灌注24 h诱导小鼠神经炎症与脑损伤,2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色法检测脑梗死,伊文思蓝法检查血脑屏障（BBB）通透性,分类计数血液白细胞,比色法测定脑组织髓过氧化物酶（MPO）活性、前列腺素E2（PGE2）与一氧化氮（NO）水平。结果：FBD与FBD-CO2/H2O均可显著抑制BBB通透性升高（P〈0.05）,并显著保持血液白细胞数量（P〈0.05-0.001）,抑制脑组织MPO活性（P〈0.01-0.001）,防止中性粒细胞中枢浸润;其中,FBD与FBD-CO2可显著减少脑梗死面积（P〈0.05）,降低脑组织PGE2与NO水平（P〈0.05-0.001）。结论：FBD具有抗炎与神经保护作用,其抗炎与神经保护机制可能与FBD-CO2抑制中性粒白细胞中枢浸润,减少炎症介质PGE2与NO生成有关。

龟羚帕安丸治疗帕金森病30例

目的:观察龟羚帕安丸对帕金森病的临床疗效。方法:60例帕金森病患者随机分为对照组、治疗组各30例,两组均服用美多芭片,治疗组在对照组基础上加服龟羚帕安丸,疗程均为3个月,两组治疗前后进行UPDRS评分,采用尼莫地平法进行疗效评定,比较两组临床疗效。结果:治疗组明显进步7例,进步10例,稍有进步9例,无效4例,恶化0例,总有效率为86.66%;对照组明显进步3例,进步7例,稍有进步9例,无效10例,恶化1例,总有效率为63.33%。结论:龟羚帕安丸可明显改善帕金森病患者的症状,有明显提高西药疗效的作用,并可减少西药用量,减轻毒副作用,延缓病情发展。

龟羚帕安丸对PD大鼠中脑黑质IL-1β、iNOS、IL-6、IFN-γ表达的影响

目的观察龟羚帕安丸对帕金森病(PD)大鼠中脑黑质IL-1β、IL-6、i NOS、IFN-γ表达的影响。方法采用6-OHDA注射法建立PD大鼠模型,造模成功大鼠随机分为模型组,美多芭组(10mg·kg-1),龟羚帕安丸高、中、低剂量组(4,2,1g·kg-1),同时设立假手术组。假手术组、模型组给予等容积生理盐水,其他组予相应药物,连续灌胃给药30天。免疫组织化学法检测中脑黑质IL-1β、IL-6、i NOS、IFN-γ蛋白表达。结果龟羚帕安丸能明显抑制炎症因子IL-1β、IL-6、i NOS、IFN-γ表达。结论龟羚帕安丸通过降低IL-1β、IL-6、i NOS、IFN-γ表达,通过抗炎作用,对多巴胺能神经元产生保护作用,可能是龟羚帕安丸治疗PD的作用机制之一。

龟羚帕安丸对帕金森病大鼠模型中脑黑质细胞Nestin蛋白,Nestin mRNA及DAT蛋白的影响

目的:观察龟羚帕安丸对帕金森病(PD)大鼠黑质细胞巢蛋白(Nestin),多巴胺转运体(DAT)及Nestin mRNA表达的影响。方法:大鼠黑质致密部注射6-羟基多巴胺(6-OHDA),后大鼠ip阿扑吗啡(APO)诱导旋转建立PD大鼠模型。PD大鼠随机分为模型组,多巴丝肼组,龟羚帕安丸高、中、低剂量组,同时设立假手术组,模型组。假手术组每日ig同等容积的生理盐水;多巴丝肼组ig多巴丝肼混悬液(10 mg·kg^(-1)·d^(-1));龟羚帕安丸高、中、低剂量组ig龟羚帕安丸混悬液(4,2,1 g·kg^(-1)·d^(-1)),连续30 d。免疫组化法检测各组大鼠中脑黑质Nestin,DAT蛋白表达,原位杂交法检测各组大鼠中脑黑质Nestin mRNA的表达。结果:模型组黑质细胞Nestin,DAT蛋白,Nestin mRNA表达均显著低于假手术组(P<0.01);各治疗组Nestin蛋白,Nestin mRNA,DAT蛋白表达均显著高于模型组(P<0.01)。结论:龟羚帕安丸治疗帕金森病的作用机制可能与上调Nestin,DAT表达,促进神经的修复和再生,增加多巴胺(DA)含量有关。

龟羚帕安丸对帕金森病模型大鼠神经干细胞移植后行为学及血清5-羟色胺、多巴胺、去甲肾上腺素的影响

目的探讨龟羚帕安丸联合神经干细胞(NSCs)移植治疗帕金森病(PD)的可能作用机制。方法采用6-羟基多巴(6-OHDA)腹腔注射法建立PD大鼠模型,造模成功大鼠随机分为空白对照组、移植对照组、美多芭组和龟羚帕安丸高、中、低剂量组各10只。空白对照组给予5μl PBS移植,其余各组给予5μl NSCs悬液移植。同时中药低、中、高剂量组分别给予龟羚帕安丸0.9、1.8、3.6 g/(kg·d)灌胃,美多芭组给予美多芭溶液50 mg/(kg·d)灌胃,移植对照组和空白对照组给予等容积生理盐水灌胃。每日2次,连续4周。于移植前(0周)和灌胃4周后观察各组大鼠旋转圈数并计算大鼠旋转圈数差值比(K值),检测灌胃4周时各组大鼠血清5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)含量。结果空白对照组大鼠4周时旋转圈数及K值明显高于其他各组(P<0.01);中药各剂量组4周时大鼠旋转圈数及K值明显低于移植对照组及美多芭组(P<0.05或P<0.01);中药中剂量组4周时大鼠旋转圈数较中药高剂量组低,K值低于中药低、高剂量组(P<0.01)。与空白对照组比较,其余各组大鼠血清5-HT、DA、NE水平均显著升高(P<0.01)。中药中、低剂量组血清5-HT、DA、NE均显著高于美多芭组(P<0.01);中药中剂量组血清5-HT、DA、NE高于中药低、高剂量组(P<0.05或P<0.01)。结论龟羚帕安丸可明显改善PD大鼠行为学症状,其机制可能与升高血清5-HT、DA、NE水平有关,以中剂量效果最好。