夜香树95%乙醇提取物对小鼠肝癌细胞株H_(22)增殖的抑制作用

目的观察夜香树(CN)95%乙醇提取物对小鼠肝癌细胞株H_(22)增殖的抑制作用。方法采用MTT法检测5%、10%和20%浓度的CN 95%乙醇提取物含药血清对小鼠肝癌细胞株H_(22)细胞增殖的抑制作用,并进一步采用集落形成法检测20%浓度的CN 95%乙醇提取物含药血清对H_(22)细胞集落形成能力的影响,将CN 95%乙醇提取物按照低、中、高剂量(175、350、700 mg/kg)灌胃荷瘤小鼠,观测其对小鼠瘤质量的抑制率。结果 10%和20%浓度的CN 95%乙醇提取物含药血清较空白血清对小鼠肝癌细胞株H_(22)细胞增殖的抑制作用强(P<0.05或<0.01),其中20%的含药血清对细胞的抑制率为31.93%。加入20%浓度的CN 95%乙醇提取物含药血清较空白血清的H_(22)细胞的集落形成率低(P<0.01),加入含药血清的细胞集落形成率为45.78%。中高剂量CN 95%乙醇提取物对荷瘤小鼠有一定抑制肿瘤生长作用,抑制率分别为22.39%和31.19%。结论 CN 95%乙醇提取物可抑制H_(22)细胞增殖。

小鼠肝癌H_(22)克隆细胞株H2D8与其原瘤株武汉H_(22)的基本特性比较研究

用细胞克隆的方法获得武汉大学典型培养物保藏中心保存的小鼠肝癌H2 2 瘤株 (武汉H2 2 )的克隆细胞株H2D8。比较武汉H2 2 及H2D8对血清的依赖性、致瘤性、病理特征和对环磷酰胺 (CTX)的敏感性。结果发现H2D8细胞株对血清的依赖性 ,和对小鼠致瘤性及肿瘤病理学特性与武汉H2 2 细胞无明显差异 ;H2D8细胞对CTX治疗的敏感性更高。说明H2D8克隆株在体外培养、致瘤性和病理特征方面能保持原瘤株的细胞特性 ;

不同浓度H22肝癌细胞株对C57BL/6J小鼠原位肝癌造模差异的影响

目的:使用H22肝癌细胞株建立C57BL/6J小鼠原位肝癌模型,比较不同浓度H22肝癌细胞悬液对C57BL/6J小鼠原位肝癌造模成瘤率、肿瘤病理学特征及其体重变化情况的影响。方法:将66只C57BL/6J小鼠随机分为4个组,分别对应1×10~6、1×10~8、1×10^(10)、1×10^(12)4个细胞浓度。在无菌条件下,将不同浓度的H22肝癌细胞悬液注入60只C57BL/6J小鼠的肝左叶。从注射之日起,连续21 d测量小鼠体重,于第21 d时脱颈椎处死,测肝脏的重量,并行肝脏外观及病理组织学观察。结果:1×10~6、1×10^(10)、1×10^(12)组成瘤率40%(6/15),1×10~8组为27%(4/15)。病理检查证实为肝细胞性肝癌。结论:不同浓度H22肝癌细胞株对成瘤影响差异不明显,造模中可根据实际情况自行选择。

反应停对小鼠肝癌细胞H22移植瘤生长的影响

背景与目的:反应停因具有抗血管生成作用而可能对某些肿瘤有治疗作用。本研究旨在通过观察反应停对小鼠H22移植瘤生长的影响,探讨反应停的作用机制。方法:BALB/c小鼠皮下接种H22细胞,分别从接种当天(第一给药组)和第4天(第二给药组)开始每天腹腔注射反应停50mg/kg,每天测肿瘤直径,第12天处死动物,称瘤重。对移植瘤组织,用抗CD31单抗做免疫组化染色,测定微血管密度;流式细胞术分析CD31表达以及凋亡率;逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-ploymerasechainreaction,RT-PCR)检测血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)mRNA的表达。结果:第一给药组的瘤重为(2.27±0.33)g,小于对照组的(2.70±0.61)g,但差异没有统计学意义(P>0.05),抑瘤率为15.93%;第二给药组的瘤重为(3.32±0.47)g,小于对照组的(3.42±0.60)g,差异也无统计学意义(P>0.05),抑瘤率为2.92%。第一给药组移植瘤组织中微血管计数和CD31表达分别为(48.4±12.90)和(5.59±0.75),与对照组(81.2±26.91)和(7.04±0.50)比较均显著降低(P<0.05);第二给药组微血管计数和CD31表达分别为(46.4±9.71)和(7.29±0.48),与对照组的(74.0±32.69)和(6.80±0.68)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。两给药组移植瘤组织细胞凋亡指数分别为(17.

白藜芦醇对小鼠肝癌细胞H_(22)的抑制作用

目的 :研究白藜芦醇对体外培养的小鼠肝癌细胞 H2 2 生长的影响。方法 :应用MTT法、流式细胞仪来分析白藜芦醇对 H2 2 细胞生长的影响及细胞周期的变化。结果 :白藜芦醇对 H2 2 细胞的增殖具有抑制作用 ,IC5 0为 6.1 2 mg/L ,流式细胞术证实 ,白藜芦醇能引起 H2 2 细胞 S期阻滞。结论 :白藜芦醇通过改变 H2 2 细胞的细胞周期分布来抑制其生长。

沙冬青提取物(JA1)对小鼠肝癌H_(22)细胞体外增殖和皮下移植生长的抑制

采用噻唑蓝(MTT)还原法测定梯度浓度的沙冬青提取物(JA1)对体外培养小鼠肝癌细胞株H22增殖的影响;同时对皮下移植肿瘤H22小鼠灌服不同剂量的JA1以检测抑瘤率,进一步采用流式细胞术、光镜和透射电子显微镜技术,检测和观察JA1对小鼠移植性肿瘤H22的诱导凋亡作用。结果显示,JA1可显著抑制体外培养小鼠肝癌H22细胞的增殖,并且这种抑制存在浓度和时间关系。同时,JA1对小鼠皮下移植性肿瘤H22也有明显的抑制作用。流式细胞分析表明,JA1灌胃试验组瘤组织细胞DNA直方图上见有明显的凋亡峰;在光镜和电镜下,JA1灌胃试验组也见有明显的瘤细胞凋亡,表明JA1对体内、外H22细胞的增殖抑制是以诱导凋亡为基础的。

化徵丸抗小鼠H22肝癌的效应及对淋巴细胞转化率的影响

目的:研究化丸对H2 2肝癌小鼠的抑瘤作用及免疫功能的影响,探讨中药化丸抑瘤作用的机制。方法:以接种H2 2细胞的昆明种小鼠为模型,随机分组,观察各组小鼠实体瘤病理组织变化,淋巴细胞转化率、存活时间、并测量瘤量、脾重、胸腺重,肿瘤最大直径和横径,计算抑瘤率。结果:化丸各组小鼠瘤重、脾重与盐水对照组相比差异均有显著性意义(P <0 . 0 1) ,随着化丸剂量的增加,小鼠瘤重逐渐降低,脾重随之增加。加高浓度剂量组抑瘤率可达74 .3 7%。化丸对H2 2小鼠淋巴细胞转化率与环磷酰胺组、盐水对照组相比均为P <0 . 0 1,差异有显著性意义。结论:化丸对H2 2肝癌小鼠的实体瘤具有较强抑瘤作用,并能显著提高机体免疫力,延长存活时间。

益气解毒方对体外培养小鼠肝癌H22细胞生长的抑制作用

目的 MTT法观察益气解毒中药复方含药血清对小鼠肝癌H22细胞生长的抑制作用。方法大鼠灌胃制备益气解毒复方中药含药血清,作用于体外培养的小鼠肝癌H22细胞,采用MTT法观察益气解毒中药复方含药血清对细胞生长的抑制作用。结果高剂量血清组与对照血清组之间的吸光度差异有显著统计学意义(P<0.001),随着作用时间的延长,其吸光度逐渐降低,抑制率逐渐增高。结论益气解毒中药复方含药血清对小鼠肝癌H22细胞生长具有较好的抑制作用。

复方龙葵糖浆诱导小鼠H_(22)肝癌细胞凋亡作用机制研究

探讨复方龙葵糖浆对小鼠H22肝癌细胞的作用及其机制。用腋下皮下注射H22肝癌细胞造成小鼠腋下皮下肿瘤移植模型。观察复方龙葵糖浆诱导小鼠H22肝癌细胞凋亡以及对小鼠肝癌细胞P53、bc1-2基因表达的影响。结果证实复方龙葵糖菜对b1c一2、P53的表达分别有明显的抑制和促进作用,具有诱导小鼠H22肝癌细胞的凋亡的功效。

扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌细胞H22凋亡的影响

目的研究中药复方扶正抑瘤颗粒药物血清对小鼠肝癌H22细胞凋亡的影响。方法扶正抑瘤颗粒含药血清温育体外培养的小鼠肝癌H22细胞,利用光镜、电镜、流式细胞仪、原位末端标记(TUNEL)等方法观察其诱导小鼠肝癌H22细胞的凋亡作用。结果扶正抑瘤颗粒含药血清可明显诱导小鼠肝癌H22细胞凋亡,随着培养时间的延长和用药剂量的增加,细胞凋亡率随之增加,与空白对照组比较P<0.01或0.05。结论扶正抑瘤颗粒药物血清可诱导肝癌H22细胞凋亡。

蟾蜍毒素对H22荷瘤小鼠肝癌细胞Mg^(2+)-ATP酶、葡萄糖-6-磷酸酶活性的影响

目的探讨醇溶性蟾蜍毒素对H22荷瘤小鼠肝癌细胞Mg2+-ATP酶(Mg2+-ATPase)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性的影响。方法用乙醇溶解蟾蜍分泌物原浆,采用减压蒸馏等方法进一步部分分离纯化,获得醇溶性的蟾蜍毒素混合物(EET),将其作用于H22荷瘤小鼠模型,计算肿瘤抑制率,应用酶化学染色法观察H22肝癌细胞酶活性的变化。结果蟾蜍毒素组和氟尿嘧啶组的肿瘤抑制率分别是32.0%和34.4%,与正常对照组比较差异显著(P<0.05),Mg2+-ATPase、G-6-Pase反应颗粒变小,数量减少,密度变低,提示酶活性明显下降。结论蟾蜍毒素可降低H22荷瘤小鼠肝癌细胞质膜标志酶Mg2+-ATPase及内质网标志酶G-6-Pase的活性,抑制肿瘤细胞的生长。

含硒桥联环糊精诱导体外培养H22小鼠肝癌细胞凋亡的作用

目的:研究含硒桥联环糊精(2-SeCD)对体外培养H22小鼠肝癌细胞凋亡的促进作用,探讨2-SeCD的抗肿瘤活性。方法:体外培养的H22细胞分别加入80、160、320和640μmol.L-12-SeCD作为实验组,并设阴性对照组。倒置相差显微镜观察细胞形态的变化;MTT法检测细胞生长抑制率,计算中效抑制浓度(IC50);流式细胞术(FCM)检测细胞周期和凋亡。结果:320和640μmol.L-12-SeCD组细胞生长抑制率分别为(25.90±2.13)%和(49.40±3.66)%,与对照组比较差异有显著性(P<0.01),2-SeCD 48 h的IC50为611.29μmol.L-1;320和640μmol.L-12-SeCD组凋亡率分别为5.52%和12.47%,2-SeCD可使细胞阻滞于G0/G1期。结论:2-SeCD可抑制H22细胞增殖并促进其凋亡,2-SeCD对肝癌具有潜在的治疗价值。

中药仙鹤复方水提取物对S180肉瘤和H22肝癌细胞在小鼠体内的抗肿瘤作用研究

目的观察中药仙鹤复方水提取物对移植型鼠源S180肉瘤和H22肝癌细胞在荷瘤动物体内抗肿瘤作用。方法昆明种受试小鼠,接种S180肉瘤和H22肝癌细胞后随机分为空白对照组、阳性对照组及中药仙鹤复方水提取物高、中、低3个剂量组。观察中药仙鹤复方水提取物对肿瘤的抑制作用及动物体质量、免疫器官重量的影响。结果中药仙鹤复方水提取物对鼠源移植型S180肉瘤细胞和H22肝癌细胞在荷瘤小鼠体内的增殖均有明显的抑制作用;且对两种荷瘤小鼠的免疫器官脾脏及胸腺均有显著性的保护作用影响。结论中药仙鹤复方水提取物在动物体内具有较好的抑瘤作用,且对荷瘤小鼠免疫器官有保护作用,具备减毒的功效。

小鼠肝癌细胞H22对淋巴内皮细胞flt-4、c-fos、PCNA表达的影响

目的 :初步探讨有自发淋巴转移特性的肝癌细胞对淋巴内皮细胞增殖的影响。方法 :弗氏不完全佐剂诱导Balb/c小鼠腹腔良性淋巴管瘤 ,分离瘤体消化法体外培养淋巴内皮细胞 ;H2 2细胞接种Balb/c小鼠腹腔 ,收集腹水制成H2 2条件培养液 ,观察其对淋巴内皮细胞生长和表达flt 4、c fos、PCNA的影响。结果 :小鼠淋巴管瘤来源的淋巴内皮细胞可成单层贴壁培养 ,在内皮细胞完全培养液和H2 2条件培养液作用下可增殖达到或接近铺满状态 ,并阳性表达flt 4、c fos、PCNA ,普通培养液不能支持细胞生长 ,flt 4等染色为阴性。结论 :淋巴内皮细胞增殖可能是癌细胞淋巴路转移的必要条件。

扶正抑瘤颗粒含药血清对小鼠肝癌H_(22)细胞p53和Caspases-3蛋白表达的影响

目的 :检测扶正抑瘤颗粒 (FYK)含药血清诱导小鼠肝癌H2 2 细胞凋亡过程中对其野生型p5 3和caspases 3蛋白表达的影响。方法 :选用小鼠肝癌H2 2 细胞作为实验的细胞株 ,应用血清药理学方法制备FYK低、中、高剂量实验组含药血清和对照组天仙胶囊含药血清 ,用上述含药血清与H2 2 细胞在体外共同孵育 2 4h、 4 8h、 72h后 ,应用MTT法检测细胞生长抑制率 ,TUNEL法检测细胞凋亡 ,用免疫细胞化学技术检测H2 2 细胞野生型p5 3和caspases 3蛋白表达水平。结果 :FYK含药血清可诱导H2 2 细胞凋亡 ,处理 4 8h和 72h凋亡率明显高于对照组 (P <0 0 5 ) ,并有大量野生型p5 3和caspases 3蛋白表达 ,天仙胶囊含药血清处理后caspases - 3蛋白表达上调 ,而野生型p5 3蛋白表达水平没有增强。结论 :FYK含药血清在诱导H2 2 细胞发生凋亡过程中野生型p5 3和caspases 3蛋白表达水平均增强 ,这可能是其抗肿瘤作用的分子机制之一 ,而天仙胶囊含药血清仅上调caspases 3蛋白表达 ,二者诱导细胞凋亡的机制有所不同。

芪灵益肝煎对小鼠H_(22)肝癌细胞CDK4表达的影响

目的:观察芪灵益肝煎对小鼠肝癌的抑制作用及其对CDK4表达的影响,以明确其对细胞周期调控的影响。方法:将腹水型H22细胞株接种于小鼠右前腋窝皮下,造成实体瘤模型,将30只小鼠随机分为3组,芪灵益肝煎组、灵芝煎剂组和盐水对照组,每组10只。从荷瘤次日起,芪灵益肝煎组、灵芝煎剂组分别以芪灵益肝煎、灵芝煎剂0.4 mL(约含生药0.4 g)灌胃,盐水对照组以0.9%生理盐水0.4 mL灌胃,连续给药20 d后取瘤称重,计算抑瘤率,采用免疫组化技术检测CDK4的表达。结果:芪灵益肝煎、灵芝煎剂对小鼠H22肝癌细胞的生长均有明显的抑制作用,抑瘤率分别为36.33%、24.18%,与盐水对照组比较有显著性差异(P<0.05),且芪灵益肝煎抑瘤作用优于灵芝煎剂;CDK4在3组均呈阳性表达,芪灵益肝煎组CDK4表达减弱,与盐水对照组比较有显著性差异(P<0.05),灵芝煎剂组CDK4表达无明显变化,与盐水对照组比较无显著性差异(P>0.05),芪灵益肝煎组与灵芝煎剂组比较CDK4表达有显著性差异(P<0.05)。结论:芪灵益肝煎对小鼠H22肝癌细胞的增殖具有明显的抑制作用,其作用机制可能与降低肝癌细胞内CDK4的表达有关。

不同单位保存的小鼠肝癌H_(22)细胞特性比较研究

目的 对不同单位保存的小鼠肝癌H2 2 细胞株的细胞特性进行比较研究。方法 从三个单位引进小鼠肝癌H2 2 瘤株 ,KM小鼠腹腔传代 ,然后进行染色体、DNA含量、细胞大小比较分析。结果 中国医学科学院药物研究所(北京H2 2 )、山东省医学科学院药物研究所 (山东H2 2 )和武汉大学典型培养物保藏中心 (武汉H2 2 )三个单位H2 2 瘤株的染色体均数分别为 (30 3± 8 9)条、 (33 0± 8 9)条、 (35 6± 10 1)条 ,方差分析表明不同单位瘤株间差异均有显著性 (P <0 0 1) ;直方图分析显示主流染色体范围分别为 2 7～ 2 9、 30～ 32、 33～ 35。武汉H2 2 瘤株细胞面积、长径、短径与北京H2 2 、山东H2 2 比较差异均有显著性。流式细胞术DNA含量分析表明北京H2 2 DNA含量最少 ,武汉H2 2 DNA含量最多 ,统计学分析表明不同单位瘤株间差异均有显著性 ;DNA指数结果表明武汉H2 2 为非整倍体肿瘤 ,北京H2 2 、山东H2 2 为近二倍体肿瘤。结论 不同单位保种和使用的H2 2 瘤株的细胞特性已存在显著差异。

蟾蜍毒素对H22荷瘤小鼠肝癌细胞凋亡的影响

[目的]探讨醇溶性蟾蜍毒素对H22荷瘤小鼠肝癌细胞凋亡的影响。[方法]用乙醇溶解蟾蜍分泌物原浆,采用减压蒸馏等方法进一步部分分离纯化,获得醇溶性的蟾蜍毒素混合物(EET),将其作用于H22荷瘤小鼠模型,计算肿瘤抑制率,应用光、电镜法观察H22肝癌细胞凋亡的变化。[结果]蟾蜍毒素组和氟脲嘧啶组的肿瘤抑制率分别是25.6%和30.8%(P<0.05),与对照组比较,肿瘤团块较小,细胞体积较小,异型性不明显,病理性核分裂较少,间质血管较少,坏死现象较轻。电镜下可见凋亡小体形成。[结论]蟾蜍毒素可通过诱导H22荷瘤小鼠肝癌细胞凋亡来达到抗肿瘤的作用。

小鼠肝癌H22细胞克隆株的RAPD分析

目的应用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术检测小鼠肝癌H22细胞克隆株的遗传变异。方法用47条引物对小鼠肝癌H22细胞的4个克隆株H22-H8D8,H22-H2G4,H22-H2E10,H22-H2C4基因组DNA进行RAPD分析。结果47条引物均能扩增出明显的条带,条带数多为4~10条,片段大小在200~2000 bp之间。其中4条引物的扩增条带具有多态性,表现为带的有无、移动和强弱差异。结论RAPD技术可以用来检测小鼠肝癌H22细胞克隆株基因组之间的差异。