海南地区家族性强直性脊柱炎与HLA-B27基因遗传学研究

目的了解海南地区家族性强直性脊柱炎(AS)发病情况和遗传方式,探讨该病与HLA-B27表现型和基因型关系。方法采用淋巴细胞毒试验检测HLA-B27表现型,用PCR-SSR检测HLA-B27基因型,并用流式细胞仪作室间比对,检测海南地区20例临床诊断为强直性脊柱炎的患者及其家族成员共158人的HLA-B27表现型和基因型。结果AS患者一级亲属中B27阳性率为52.7%,患病率为21.6%,与正常人患AS的概率比值为14.7:1。结论AS患者一级亲属风险远远高于正常人群,海南地区家族性强直性脊柱炎的数据与其它地区没有明显地区差异性。

HLA-B27基因检测的临床应用

目的 探讨HLA-B27基因检测的临床应用效果。方法 对100例临床送检疑似强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）病例（观察组）及30例经体检合格的献血员（对照组），采用聚合酶链反应-序列特异引物法（PCR-SSP）进行HLA-B27基因检测，并与流式细胞术检测结果比较。结果 在100例疑似AS病例中，应用PCR—SSP方法检出HLA-B27基因69例，未检出HLA-B27基因31例，30例献血员均未检出HLA-B27基因；用流式细胞术检测，得出与PCR-SSP法完全相同的结果。结论 HLA-B27检测PCR-SSP法和流式细胞术各有特点：PCR-SSP法具有结果准确、成本低、标本可长期保存，便于进行实验室间质量评价等特点；流式细胞术具有简便快捷、自动化程度高、结果判断客观性强等特点。

关于不同HLA-B27基因亚型强直性脊柱炎患者合并心血管疾病风险的探讨

目的比较不同HLA-B27基因亚型强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者合并心血管疾病风险,进而为临床的个体化精准预防和治疗提供依据。方法选取204例HLA-B27基因阳性AS患者(其中HLA-B2704型99例,HLA-B2705型90例,HLA-B2702型4例,杂合子型11例),以及97例健康体检者,利用Kruskal-Wallis H差异性分析不同基因亚型和健康组间超敏C反应蛋白(hs-CRP)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、脂蛋白a(Lp(a))、载脂蛋白A1(ApoA1)、载脂蛋白B(ApoB)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、同型半胱氨酸(Hcy)差异有无统计学意义。同时将所有HLA-B27基因阳性患者作为总体阳性组与健康对照组进行统计学分析,比较以上血清学指标差异有无统计学意义。结果与健康对照组相比,总体阳性组hs-CRP、Hcy、ApoB水平明显较高,ApoA1h和HDL-C水平明显较低,差异有统计学意义(P<0.05);与健康对照组相比,HLA-B2704阳性组hs-CRP、ApoB、Hcy水平明显较高,ApoA1、HDL-C水平明显较低;HLA-B2705阳性组hs-CRP、ApoA1、ApoB、Hcy水平明显较高,LDL-C水平明显较低,差异有统计学意义(P<0.05)。与HLA-B2704阳性组相比,HLA-B2705阳性组ApoA1、HDL-C水平明显较高,ApoB、LDL-C、Hcy水平明显较低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论从血液相关指标的对比中可以得出,HLA-B27阳性AS患者患心血管疾病的风险明显增高,其中HLA-B2704亚型患者较其他亚型有更高的心血管疾病风险。

HLA-B27基因在强直性脊椎炎中的临床应用

目的：为评价ＨＬＡＢ２７ 基因在强直性脊椎炎的临床诊断价值。方法：采用ＰＣＲＳＳＰ方法对１４１ 例风湿性病人，１６ 例强直性脊椎炎病人及４０ 例正常健康人ＨＬＡＢ２７ 基因检测， 并与血沉、影像学Ｘ 光片报告二项指标进行比较。结果：强直性脊椎炎病人组ＨＬＡＢ２７ 基因阳性率６８－８ ％ 与风湿性病人组ＨＬＡＢ２７ 基因阳性率１１－４％ 比较，Ｐ＜ ０－００５ ，有非常显著性差异；强直性脊椎炎病人Ｂ２７ 基因阳性率６８－８％ ，与血沉结果升高率８７－５ ％ 比较，Ｐ＞ ０－０５ ，无显著性差异；与Ｘ 光片结果阳性率２５－０％ 比较，０－０５ ＞ Ｐ＞ ０－０１ ，有显著性差异。结论：认为ＨＬＡＢ２７ 基因对强直性脊椎炎有一定早期诊断价值，并与血沉、Ｘ光片联合检测可提高诊断正确率。

HLA-B27基因荧光定量方法的确立与多种方法比较研究

目的在原研究的基础上,重新合成Taqman探针,建立一种新的强直性脊柱炎基因HLA-B27荧光定量PCR(FQ-PCR)方法,为临床治疗提供参考依据。方法 2012年1-11月收集的医院强直性脊柱炎282例,优化各种PCR条件,并与多种方法比较,检测强直性脊柱炎及相关的各类疾病,同期选择100名健康体检人群作为阴性对照,采用SYBR法和Taqman特异性探针荧光定量检测法。结果 FQ-PCR生成动力学有关的PCR扩增曲线由荧光信号强度周期数,HLA-B27的标准曲线是循环阈值之间线性关系(ct)和起始拷贝数;高度相关(0.999)揭示FQ-PCR的可靠性;确立的Taqman法有良好的线性和精度并与流式细胞和SYBR法比较,具有良好的相关性(P<0.05)。结论新确立的荧光定量PCR(Taqman)比其他方法更可靠准确,并有很好的应用价值。

实时荧光PCR技术检测HLA-B27基因的临床应用研究

目的探讨实时荧光PCR技术检测HLA-B27基因对于诊断强直性脊柱炎的临床应用价值。方法用实时荧光PCR技术对强直性脊柱炎疑似患者300例进行HLA-B27基因检测,并对阳性患者是否确诊为强直性脊柱炎进行追踪,统计其确诊率。结果 300例强直性脊柱炎疑似患者中,阳性135例,阳性率为45%,其中126例阳性患者确诊为强直性脊柱炎,确诊率为93.3%。结论实时荧光PCR技术应用于HLA-B27基因的检测具有较高的特异性和灵敏度,且操作简便、快速,对强直性脊柱炎的早期诊断和辅助诊断具有重要的临床应用价值。

鲁西南汉族HLA-B27基因亚型分布与强直性脊柱炎的关联研究

目的:调查鲁西南汉族人群中正常人和强直性脊柱炎(AS)患者的HLA-B*27基因亚型的频率分布状况,并分析HLA-B*27亚型与AS的相关性。方法:对826名正常人(对照组)、76例AS患者(AS组)采用特异性引物聚合酶链反应技术(PCR-SSP)进行HLA-B*27基因及亚型检测。结果:在正常组和AS组中,共检出了11种HLA-B*27亚型,2组均以B*2704和B*2705亚型为优势亚型,2亚型分别为38.8%和41.8%。2组间的B*2704和B*2705亚型的构成比差异无统计学意义。结论:HLA-B*2704和HLA-B*2705是鲁西南地区汉族人群AS的易感基因,与鲁西南地区汉族人群AS的发病呈强相关。

SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR快速检测HLA-B27方法学的建立

建立SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR法快速检测HLA—B27，拟确定该法的阳性参考区间。强直性脊柱炎患者42例、类风湿性关节炎患者53例及健康体检者80例分别应用PCR—SSP法和SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR法检测HLA—B27，并对两种方法进行比较。两种方法结果符合率为100％，初步拟定HLA—B27的阳性参考范围是：GAPDH的Ct在23．85-25．59，以99％百分位法建立HLA—B27阳性参考范围为CtB27〈21．54。SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR法快捷、灵敏，适合于临床开展。

强直性脊椎炎致病基因的多态性及中医治疗研究

目的 :探讨汉族人HLA -B2 7亚型基因结构特点 ,合成HLA -B2 7基因检测试剂 ;对HLA -B2 7基因阳性的强直性脊椎炎 (AS)患者进行中医治疗。方法 :采用聚合酶链式反应(PCR)顺序特异性引物法 (SSP)和核苷酸探针杂交技术 (SOPSH)。对 1 2 0例健康人和 46例AS患者的HLA -B2 7基因进行了分析。结果 :在汉族人群至少存在二种HLA -B2 7基因亚型 ,其中B 2 70 4分布频率最高占 5 0 % ,其次是B 2 70 5占 39.1 3% ,两者间分布频率无显著差异。制备的HLA -B2 7基因检测试剂 ,具有快速简便、准确性高和特异性强等优点 ;用中药“正清风痛宁”治疗AS ,按全国中西医结合会议制定的标准 ,有效率达 90 %以上。结论 :HLA-B2 7的B 2 70 4和B 2 70 5是AS的主要致病基因 ;DNA分型检测HLA -B2 7基因完全可以取代目前的血清学方法 ,具有很大的应用价值 ;

HLA-B27等位基因的相关性研究

HLA-B27基因在随机人群中阳性率约为3％-7％，而在强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）患者中则高达96％。由于AS与HLA-B27基因具有关联性，HLA—B27抗原或基因检测已经作为临床诊断AS的常规检测项目。

幼年型与成年型强直性脊柱炎HLA*B等位基因高分辨分型研究

目的 通过对幼年型强直性脊柱炎(JAS)和成年型强直性脊柱炎(AAS)患者HLA*B等位基因进行高分辨测序分型,了解HLA-B基因多态性与JAS是否有相关性。方法 收集2019年8月—2021年12月就诊于本院的符合JAS和AAS患者各50例,采用PCR-SBT法对HLA*B位点特异性扩增,再使用ABI 3100毛细管测序仪对外显子1正向测序,外显子2、3、4、5同时进行正反向测序,采用uTYPETMHLA测序分析软件处理测序结果。结果 JAS组中男41例,女9例,AAS组中男43例,女7例,两组男女性别比例差异无统计学意义(P=0.585);JAS组发病年龄(12.5±2.9)岁,显著低于AAS组的(29.7±6.8)岁(P<0.001)。JAS组检出HLA-B*27纯合子5例占10.0%,AAS组检出HLA-B*27纯合子4例占8.0%,JAS组中45例杂合子中B*27:04、B*27:05、B*27:15、B*27:86分别为34例、6例、3例、2例,AAS组46例杂合子中B*27:04、B*27:02分别为45例、1例;HLA-B*27阳性的JAS和AAS各检出15例HLA-B*40,高分辨分型中以B*40:01:02为主要亚型。结论 HLA-B*27纯合子与等位基因HLA-B*40对JAS的早发病并无直接相关性。HLA-B*27:04是JAS和AAS主要基因亚型,HLA-B*27:05:02:01、HLA-B*27:15,在JAS中多于AAS组,携带该等位基因的患者倾向于早发。

强直性脊椎炎病人HLA B27等位基因与HLA A、B 抗原关系分析

目的 调查强直性脊椎炎（ Ａ Ｓ） 病人中 Ｂ２７ 等位基因与其它 Ｈ Ｌ Ａ Ａ、 Ｂ 抗原之间的关系，为 Ａ Ｓ 与 Ｂ２７ 关联机理提供线索。方法 Ｈ Ｌ Ａ Ａ、 Ｂ 抗原分型采用 Ｎ Ｉ Ｈ 标准微量淋巴细胞毒方法， Ｂ２７ 等位基因的检测采用聚合酶链反应／ 顺序特异的寡核苷酸探针方法。对上海地区６８ 例 Ａ Ｓ 病人和３１８ 例正常对照进行调查。结果 Ａ Ｓ 病人根据其所检定的 Ｂ２７ 等位基因主要可分为 Ｂ２７０４和 Ｂ２７０５ 二大组， Ｈ Ｌ Ａ Ａ１１ 的频率在 Ｂ２７０４ Ａ Ｓ 组要比正常对照组显著增高（ Ｐ＝ ００００ ９８ ， Ｐｃ＜ ０ ．０１） ，在 Ｂ２７０５ Ａ Ｓ 组则比正常对照组稍低（ Ｐ＞ ０ ．０５） ， Ｂ２７０４ 与 Ｂ２７０５ Ａ Ｓ 组之间差异也有统计学意义（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。结论 上海地区携带 Ｂ２７０４ 的 Ａ Ｓ病人与 Ｈ Ｌ Ａ Ａ１１ 抗原相关，提示 Ｂ２７０４ 与 Ｂ２７０５ 在 Ａ Ｓ 发病中的具体作用可能有所差异，或 Ｂ２７０４ 与 Ａ１１ 之间存在连锁不平衡。

强直性脊柱炎131例误诊分析

强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）是一种慢性进行性疾病，主要侵犯骶髂关节、脊柱骨突、脊柱旁软组织及外周关节，并可伴发关节外表现。AS的病因未明，有家族聚集现象，与HLA—B27基因有密切关系，临床误诊误治率高，常有脊柱畸形和关节强直发生。我们就131例AS患者误诊情况进行了分析，以期能为临床早期诊断和治疗提供帮助。

强直性脊柱炎发病的遗传因素研究进展

强直性脊柱炎是以遗传因素占主导地位的疾病 ,由 B2 7和其他相关基因参与。本文就其在遗传因素上的病因综述了 HL A- B2 7与强直性脊柱炎的关联、家系研究、动物模型、全基因组扫描和其他相关基因方面的研究进展。

少儿强直性脊柱炎与幼儿类风湿性关节炎HLA-B27亚型的鉴别诊断

目的 探讨HLA B2 7等位基因亚型与少年强直性脊柱炎和幼年类风湿性关节炎的关联。方法 用PCR SSP方法对 74人HLA B2 7等位基因亚型进行研究 ,其中少年强直性脊柱炎 32例 ,幼年类风湿性关节炎 2 8例 ,5个家系中患者的父亲或母亲 5例 ,正常对照组 9例 ,并进行关联分析。结果 本组人群的HLA B2 7等位基因由HLA B 2 70 4、 2 70 5、 2 70 2、 2 70 74种亚型组成 ,其中少年强直性脊柱炎患者HLA B2 7等位基因亚型频率为B 2 70 45 6 .2 5 %、B 2 70 5 40 .6 3%、B 2 70 23 .13% ;幼年类风湿性关节炎HLA B2 7等位基因亚型频率为B 2 70 5 6 0 .7%、B 2 70 42 8.5 7%、B 2 70 2 3.5 7%及B 2 70 7为 7.14% ;少年强直性脊柱炎与幼年类风湿性关节炎结果比较 ,HLA B 2 70 4基因频率在少年强直性脊柱炎组高于幼年类风湿性关节炎组 (RR =3 .2 1,P <0 .0 5 )。结论 少年强直性脊柱炎与HLA B 2 70 4等位基因亚型关联。对HLA B2 7等位基因亚型的检测可成为少年强直性脊柱炎和幼年类风湿性关节炎鉴别诊断中一个有价值的实验指标。

血常规检查异常与强直性脊柱炎及白血病的关系

目的探讨血常规各项指标异常与强直性脊柱炎(AS)和慢性粒细胞白血病的关系。方法先行血常规检测,后结合临床症状对血常规异常者再行HLA-B27基因定性检测及融合基因bcr-abl定量检测。结果 51例患者行血常规检查,6例患者血常规各指标均在正常值参考范围,45例患者部分指标出现升高或降低现象;32例H LA-B27基因检测,6例为阳性。此外,13例融合基因bcr-abl检测,3例为阳性。结论血常规作为基础的检验项目之一,是许多慢性疾病发现及发展的重要跟踪线索,血常规联合H LA-B27基因检测共同诊断AS;血常规细胞指数异常者行融合基因bcr-abl荧光定量PC R检测,可以使患者在无自觉症状的早期发现疾病。