HPLC-UV法同时测定赤血康脉胶囊中五种成分

本研究旨在建立HPLC-UV法同时测定赤血康脉胶囊中芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、β-蜕皮甾酮、阿魏酸和党参炔苷的含量。采用DiamonsilR C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.1%磷酸(梯度洗脱);流速为1.0 mL/min;柱温为35℃;检测波长为268 nm,进行分析。结果显示,5种化学成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9995);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%,平均加样回收率99.35%~101.59%,RSD 0.95%~2.69%。该含量测定方法简单可靠、重复性好,操作便捷,适用于同时测定赤血康脉胶囊中五种成分的含量。

HPLC-UV法测定舒肝和胃丸中α-香附酮和香附烯酮的含量

目的:建立舒肝和胃丸中α-香附酮和香附烯酮的高效液相色谱(HPLC-UV)含量测定法,为该制剂中醋香附含量的质量控制提供依据。方法:对舒肝和胃丸中α-香附酮和香附烯酮同时进行含量测定。采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇和水(65∶35),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长254 nm,柱温30℃,进样量5μL。结果:采用该方法得到的舒肝和胃丸色谱图中,α-香附酮和香附烯酮色谱峰与相邻色谱峰分离效果较好,满足含量测定的要求;指标性成分α-香附酮、香附烯酮分别在0.08036~0.80360μg、0.2112~2.1120μg范围内线性关系良好,相关系数均为1.000;平均加标回收率分别为102.0%(RSD:1.6%,n=6),102.4%(RSD:2.0%,n=6);稳定性(24 h)、重复性、精密度良好。结论:本研究建立的α-香附酮和香附烯酮HPLC-UV含量测定方法简单、快捷、准确,可为舒肝和胃丸中醋香附含量的控制提供依据。

基于HPLC-UV-QDa检测不同剂型中噻唑膦和吡虫啉

建立了高效液相色谱-紫外检测器-质谱(HPLC-UV-QDa)测定5种不同剂型产品中噻唑膦和吡虫啉含量的分析方法。样品以乙腈+水(0.05%甲酸)为流动相,采用C18色谱柱进行梯度洗脱,结合紫外和质谱串联检测器进行定性和定量分析。研究结果显示,在质量浓度0.05~50 mg/L,噻唑膦、吡虫啉的线性关系良好,R2分别为0.9992~0.9999和0.9991~0.9996。在0.5、50、500 mg/kg等3个添加水平下,噻唑膦、吡虫啉的平均回收率分别为90.2%~103.9%和94.7%~104.1%,相对标准偏差(RSD)分别为1.04%~6.69%和1.27%~5.88%。噻唑膦和吡虫啉在5种基质中无明显基质效应,检出限分别为0.005和0.01 mg/L,定量限分别为0.02和0.04 mg/kg。方法灵敏度高、稳定性好、准确度高,适用于不同剂型产品中噻唑膦和吡虫啉的分析。

黄连解毒汤各成分的HPLC-UV/MS定性与定量测定方法研究

目的建立可整体定性、多指标定量的黄连解毒汤的分析方法。方法使用HPLC-UV/MS方法,梯度洗脱黄连解毒汤样品及组方各药单煎样品,归属色谱峰来源,并对主要色谱峰进行定性、定量分析。采用Zorbax ExtendC18(150 mm×4.6 mm ID,5μm)色谱柱;流动相A为乙腈,B为水(含0.5%冰醋酸),流速1 mL.m in-1。紫外检测波长254 nm,正、负离子扫描获得质谱数据。结果归属了21个色谱峰的来源,发现两个可区分黄连、黄柏的特征峰,通过HPLC-UV/MS对其中11个主要色谱峰进行了指认,并以HPLC-UV对8种有对照品的成分进行含量评价。结论黄连解毒汤与组方各药单煎样品有较好相关性,建立的方法所测得液相色谱图特征性和专属性强,该方法结合含量测定为黄连解毒汤内在质量控制提供了更全面的信息。

HPLC-UV-ELSD法同时测定青蒿中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量

用HPLC-UV-ELSD法同时测定青蒿药材中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量。采用Nucleodur C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μmID）；以乙腈-0．1％乙酸水（50：50）为流动相；紫外检测波长209nm，蒸发光散射检测器漂移管温度50℃。结果显示，青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸能够达到很好分离。它们的线性范围分别为0．52．2．6μg，r=0.9994（n=5）；0．022～4．4μg，r=0．9999（n=5）；0．203～8．12μg，r=0．9998（n=5）。平均回收率分别为99．45％（RSD=2．3％，n=6）；102．37％（RSD=1．7％，n=6）；101．10％（RSD=0．79％，n=6）。本法简单、准确、快速，可同时测定青蒿药材中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量。

HPLC-UV法同时测定六味地黄制剂中丹皮酚与熊果酸

目的建立同时检测六味地黄丸制剂中熊果酸和丹皮酚的HPLC-UV方法。方法取市售不同厂家的六味地黄制剂,采取甲醇超声提取,以HPLC-UV法测定其产品中熊果酸和丹皮酚。实验采用kromasil C18(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以50%甲醇/乙腈(A)-0.1%磷酸(B)为流动相,梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min,检测波长215 nm。结果熊果酸和丹皮酚分别在2.40～37.5μg/mL和0.22～3.38μg/mL的质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程分别为Y=244.31X-390.32(R=0.990 3)和Y=2 217X-784.42(R=0.998 4)。结论该方法可以使样品中的熊果酸、丹皮酚与其他色谱峰有效分离,方法简便、准确,重复性好,结果可为评价不同厂家生产的六味地黄丸制剂一致性提供依据。

刺五加叶的HPLC-UV和ESI-MS指纹图谱研究

对12批不同来源的刺五加叶提取物进行指纹图谱研究,并利用ESI-MS指纹图谱鉴别刺五加叶与山楂叶。分别采用高效液相色谱(HPLC-UV)和电喷雾电离质谱(ESI-MS)测定12批不同来源的刺五加叶提取物,利用ESI-MS技术测定刺五加叶与山楂叶提取物,得到了分离度、精密度和重现性均较好的刺五加叶HPLC-UV及ESI-MS指纹图谱;同时,利用刺五加叶与山楂叶ESI-MS指纹图谱的差异,成功鉴别了二者,可为刺五加叶药材的质量控制提供参考。

HPLC-UV测定水中微量溴酸根的方法

针对水中微量溴酸盐的测定问题,建立了一种用苯酚为衍生试剂、用HPLC-UV检测的柱外衍生测定方法.本方法的检出限为0.82μg·L^-1,在溴酸根浓度为5-50μg·L^-1范围内具有良好的线性关系（R2=0.9986）.测定系列溴酸根浓度的相对偏差（RSD）均小于5%,样品加标平均回收率为99.8%-110.9%.

HPLC-UV双波长法同时测定玄参中5种主要成分的含量

目的建立HPLC-UV双波长法同时测定玄参中5种主要成分：哈帕俄苷、哈帕苷、桃叶珊瑚苷、梓醇和肉桂酸的含量。方法采用依利特Hypersil BDS色谱柱（4．6mm×200mm，5μm），流动相A为乙腈，B为0．05％H3PO1水溶液，梯度洗脱（O～7min，98．4％B；7～11min，98．4％～96％B；11～18min，96％B；18～29min，96％～78．4％B；29-60min，78．4％B），流速为0．8mL·min^-1，检测波长为210、278nm，柱温为35℃。结果梓醇、桃叶珊瑚苷、哈帕苷、肉桂酸、哈帕俄苷的线性范围分别为0．0223～0．9000、0．0170～0．6600、0．0440～1．760、0．0106～0．4240、0．0186～0．7440Mg，相关系数分别为0．9999、0．9994、0．9999、0．9999、0．9999。平均加样回收率（n=6）分别为：（99．1％±1．53％）、（98．2％±1．06％）、（99．1％±0．55％）、（98．7％±1．20％）、（99．0％±0．48％）。结论本方法简单、重复性好、结果准确可靠，既可为玄参饮片和玄参药材中环烯醚萜苷动态变化提供监测方法，也可为其质量控制提供参考方法。

HPLC-UV法测定黄芪干燥根中黄芪甲苷的含量

[目的]建立黄芪干根中HPLC-UV法测定黄芪甲苷的方法,同时比较蒙古黄芪、野生黄芪和膜荚黄芪3种不同来源样本的黄芪甲苷含量.[方法]采用HPLC-UV法,色谱柱为Kromasil C18柱（250 mm×4.6mm）,流动相为乙腈∶水（32∶68）,流速1.0 ml/min,检测波长203 nm.[结果]黄芪甲苷在0.05 ～0.50 mg/ml范围内线性关系良好（r=0.999）,平均回收率为98.216％（RSD=2.85％）;不同来源黄芪甲苷含量比较结果为野生＞膜荚≈蒙古.[结论]建立的HPLC-UV法测定黄芪甲苷含量相对稳定,方法简便,为今后黄芪干根中黄芪甲苷含量的测定提供了方法参考.

HPLC-UV法测定益母草和酒炙益母草中丁香酸和芦丁的含量

运用HPLC-UV法,采用依利特Hypersil ODS（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,检测波长254 nm,流速1.0 mL/min,柱温25℃,测定不同产地益母草（Leonurus heterophyllus）和酒炙益母草中芦丁和丁香酸含量.结果显示,芦丁和丁香酸进样量在0~10μg范围内与峰面积呈良好线性关系,河南栾川采收的益母草中芦丁和丁香酸含量最高;益母草经酒炙后,芦丁含量降低,丁香酸含量升高,证明了益母草酒炙后活血祛瘀、调经止痛作用增强的有效成分是丁香酸,而不是芦丁.

HPLC-UV检测病人胃粘膜活检组织中8-羟基脱氧鸟苷

采用HPLC-UV与反相C18柱,以50 mmol/L的KH2PO4（pH 5.5）-10%的甲醇（V/V）作为洗脱液,同步快速检测了21位健康人与90位病人胃粘膜活检组织中的脱氧鸟苷（deoxyguanosine,dG）和8-羟基脱氧鸟苷（8-Hydroxydeox-yguanosine,8-OHdG）的量。方法线性范围分别为3.0～400μg/mL、0.2～10μg/mL,检出限可分别达到1.0、0.1μg/mL（S/N=3）。实验发现病人胃粘膜活检组织中的8-OHdG量远远高于健康人,此结果在临床早期诊断相关疾病方面具有很高的应用价值。

HPLC-UV法测定五味子中5-羟甲基糠醛

目的建立五味子药材中5-羟甲基糠醛（5-HMF）的定量测定方法。方法采用HPLC-UV,Diamonsil C18（2）色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为甲醇-0.5%醋酸水（15∶85）;检测波长284 nm;体积流量1 m L/min;柱温30℃。结果 5-羟甲基糠醛在1.14~18.21μg/m L范围内线性关系良好,平均回收率为100.1%,RSD为1.0%。五味子鲜果和干燥种子中均未检出5-HMF,干燥果肉中5-HMF含有量较高,12批五味子中5-羟甲基糠醛的含有量范围为0.09~2.40 mg/g。结论五味子中的5-羟甲基糠醛主要是由五味子鲜果果肉在加热烘干过程中产生,不同批号的五味子中5-HMF的量差异较大。

HPLC-UV法测定人血浆中替考拉宁药物浓度的方法学研究及其临床应用

目的:建立测定人血浆中替考拉宁浓度的高效液相色谱-紫外检测(HPLC-UV)法,为临床个体化给药提供依据。方法:以哌拉西林钠为内标,将400μL血浆样本采用600μL乙腈沉淀蛋白后,再用二氯甲烷萃取,采用HPLC测定,色谱柱为kromasil柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为水(含0.01 mol·L-1磷酸二氢钾,用磷酸调pH至2.84)-乙腈(75∶25,v/v),流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,进样量20μL,检测波长为240 nm。结果:替考拉宁在3.12~100.00μg·mL-1范围内线性关系良好(R2=0.9999),定量下限为3.12μg·mL-1;日内、日间精密度的RSD为0.39%~8.54%,相对偏差为–7.19%~7.00%。血浆样品在经历3次冻融(–20℃到室温)循环、4℃放置6 d和冷冻(–40℃)放置21 d等条件下均稳定,处理后样品在自动进样器中(4℃)放置24 h均稳定(RSD<15%)。测定9例应用替考拉宁患者的血药浓度,仅有2例在有效血药浓度范围。结论:该法操作简便、灵敏、准确,适用于替考拉宁血药浓度的测定。

HPLC-UV-MS法同时测定痹祺胶囊中7个有效成分

目的建立高效液相色谱-紫外-串联质谱法同时测定痹祺胶囊(马钱子、川芎、甘草、丹参、白术、三七、党参等)中7个有效成分的方法。方法采用HPLC法,Zorbax-C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;进样5μL;DAD波长切换模式;柱温40℃。Finnigan电喷雾离子阱多级质谱仪,正/负离子检测模式;ESI喷雾电压±4.5 kV;鞘气(N2)压力为276 kPa;辅助气(N2)体积流量为3.3 L/min;毛细管温度350℃;毛细管电压±19 V;扫描范围m/z 100～850 amu。结果士的宁、马钱子碱、甘草苷、丹酚酸B、甘草酸、隐丹参酮和丹参酮IIA在相应的质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999 6;平均加样回收率(n=6)在90.25%～99.11%之间,RSD均小于2.91%。结论本方法简便快捷、精密度高、重复性好,适用于痹祺胶囊的质量控制。

HPLC-UV法测定大鼠血中[6]-姜酚的浓度

目的建立测定大鼠血浆中[6]-姜酚浓度的HPLC-UV法,为进一步研究[6]-姜酚的药代动力学提供可靠的方法。方法大鼠血浆样品以液-液萃取法提取后,采用HPLC-UV测定大鼠血浆中[6]-姜酚的浓度。HPLC条件:Hypersil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-水(45:55)为流动相,进样量:20μL,流速:1.0mL/min,紫外检测波长:280nm。结果[6]-姜酚线性范围为0.25～5.0μg/mL,最低检测限为0.1μg/mL,日内精密度RSD<5.5%,日间精密度RSD<6.8%。结论该测定方法具有灵敏、专一和快速的优点,可用于测定大鼠灌胃给药后[6]-姜酚的血浆浓度。

泽泻HPLC-UV指纹图谱研究

目的建立泽泻的HPLC-UV指纹图谱,为科学评价泽泻的质量提供依据。方法使用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);柱温为30℃;流速为1mL·min-1;检测波长为210nm;乙腈-水为流动相进行梯度洗脱。对11批泽泻进行指纹图谱相似度研究。结果建立了泽泻的HPLC-UV指纹图谱方法,精密度、重复性和稳定性均良好,指纹图谱指认了环氧泽泻烯和23-乙酰泽泻醇B色谱峰,11批泽泻的指纹图谱相似度均大于0.85。结论该方法简便、可靠、重复性好,可为泽泻的质量控制及评价提供科学依据。

HPLC-UV法同时测定麻黄中5种麻黄生物碱的含量

目的建立同时分离检测麻黄中麻黄碱(Ephedrine)、伪麻黄碱(Pseudoephedrine)、去甲麻黄碱(Norephedrine)、去甲伪麻黄碱(Norpseudoephedrine)和甲基麻黄碱(Methylephedrine)的含量测定方法。方法采用HPLC-UV法,色谱柱:苯基柱(Alltima Phenyl,250mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈(96∶4);流速:0.6 ml/min;检测波长:210 nm;柱温:25℃。结果 5种生物碱在13.5 min内即可达到完全分离,E在2.000 8～40.016 0μg/ml线性关系良好;PE在1.003 6～20.072 0μg/ml线性关系良好;NME在0.199 2～3.984 0μg/ml线性关系良好;NMP在0.200 0～4.00 0μg/ml线性关系良好;ME在0.200 4～4.008 0μg/ml线性关系良好。各生物碱的平均回收率均在92%～104%(RSD≤5.76%)。结论本方法可操作性强,简便快速,分离效果好,重现性好,可为麻黄及含麻黄的中西药制剂提供有效的检测手段。

HPLC-UV切换波长法同时测定复方甘草合剂中甘草苷、异甘草苷、甘草素和甘草酸

目的建立同时测定复方甘草合剂中甘草苷、异甘草苷、甘草素和甘草酸的含量的评价方法。方法 3批复方甘草合剂（批号：130112、130113、130201）。制备甘草苷、异甘草苷、甘草素和甘草酸混合对照品溶液、供试品溶液、阴性供试品溶液（复方甘草合剂缺甘草的阴性样品）。采用Venusil XBP-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,0.4%冰醋酸-甲醇梯度洗脱,体积流量为1.0 m L/min,运用HPLC-UV切换波长法检测3种溶液。结果甘草苷、异甘草苷、甘草素和甘草酸分别在44.20-1 326、8.92-267.6、13.68-410.4和148.40-4 452 ng范围内线性关系良好（r分别为0.999 2、0.999 1、0.999 2、0.999 6）,加样回收率分别为98.63%（RSD=1.12%）、99.13%（RSD=1.04%）、98.65%（RSD=1.06%）和99.10%（RSD=0.90%）。批号为130112的复方甘草合剂中甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸含量分别为67.22、17.00、24.82、2 881.93μg/m L,RSD分别为1.32%、0.87%、2.34%、2.17%;批号为130113的复方甘草合剂中甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸含量分别为68.59、16.99、23.74、2 798.72μg/m L,RSD分别为1.99%、1.33%、1.69%、1.86%;批号为130201的复方甘草合剂中甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸含量分别为67.91、15.98、24.16、2 824.55μg/m L,RSD分别为2.17%、2.21%、1.77%、0.97%。结论HPLC-UV切换波长法可用于同时测定复方甘草合剂中甘草苷、异甘草苷、甘草素和甘草酸的含量。

有机相阴离子交换固相萃取HPLC-UV法快速测定食品接触材料中4种尼泊金酯的特定迁移量

建立了有机相阴离子交换固相萃取/高效液相色谱紫外法(HPLC-UV)快速测定10%乙醇、3%乙酸、20%乙醇、50%乙醇和橄榄油食品模拟物中尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金异丙酯和尼泊金丙酯的特定迁移量(SM)。橄榄油食品模拟物样品采用有机相阴离子交换固相萃取法净化,水基食品模拟物样品经亲水性聚四氟乙烯针式过滤器过滤后直接进样。以甲醇和纯水为流动相,4种尼泊金酯在ZORBAX SB-Phenyl柱上等度洗脱,12.5 min内达到基线分离;紫外外标校准曲线法定量。4种尼泊金酯在0.5~100 mg/L范围内线性关系良好(r2≥0.999 8),在10、50、100 mg/kg 3个浓度水平下的加标回收率为97.9%~103%,相对标准偏差为0.02%~2.2%,在5种食品模拟物中的定量下限为0.1~0.5 mg/kg。结果表明,该方法的色谱分离和线性关系好,回收率和准确度高,满足欧盟(EU)NO 10/2011法规附表1中4种尼泊金酯SM的限量要求,并已应用于实际样品的检测。