Evaluation of the role of H pylori infection in pathogenesis of gastric cancer by immunoblot assay

AIM： To elucidate the different serological reactions to H pylori using the immunoblotting technique for further understanding of its pathogenic role in gastric cancer. METHODS： A total of 54 patients were divided into two groups after upper gastrointestinal endoscopy： normal control group （25 patients） and gastric cancer group （29 patients）. Both groups were further divided into Hpylori （＋） and H pylori （-） subgroups based on the results of CLO test, Giemsa staining and culture. Sera were further analyzed with the immunoblotting technique （HelicoBIot 2.0, Genelabs Diagnostics, Singapore）. RESULTS： The positive rate of the immunoblotting test was as high as 88.9% in the H pylori （-） gastric cancer group and only 14.3% in the H pylori （-） normal control group with a statistically significant difference. CONCLUSION： The prevalence of H pylori infection is higher in gastric cancer patients than in the normal controls, suggesting that H pylori may play a role in the pathogenesis of gastric cancer.

胃癌组织中KAI1/CD82、p27和p53的表达水平及其临床意义

目的研究胃癌组织中KAI1/CD82、p27、p53蛋白的表达水平及其临床意义。方法收集中南大学湘雅医学院附属海口医院胃肠外科2020年6月至2021年6月期间接受胃癌切除术治疗的43例胃癌患者标本,将标本分为43例胃癌组、43例配对的癌旁组(距癌2 cm)和43例配对的正常组(距癌5 cm以上),运用免疫印迹(Western blot)方法检测并比较三组组织中的KAI1/CD82、p27、p53蛋白表达水平,分析胃癌组织中KAI1/CD82、p27、p53的表达水平与临床病理参数的关系,采用Pearson相关分析法分析其与胃癌的临床病理特征的关系。结果胃癌组中的KAI1/CD82、p27、p53蛋白表达水平明显低于癌旁组和正常组,且癌旁组明显低于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05);KAI1/CD82、p27、p53蛋白的阳性表达率与肿瘤组织的分化程度、临床分期和淋巴结是否转移有关(P<0.05),而与年龄、性别无关(P>0.05);经Pearson相关分析结果显示,胃癌组织中KAI1/CD82与p27蛋白和p53蛋白的表达均呈正相关(r=0.586、0.426,P<0.05)。结论胃癌组织中的KAI1/CD82、p27、p53蛋白表达水平明显降低,联合检测KAI1/CD82、p27、p53可能成为胃癌诊断及预后评估的新的分子标记物。

多重磁条码液相芯片系统在抗核抗体谱检测中的应用价值

目的探讨多重磁条码液相芯片系统在抗核抗体谱检测中的应用价值。方法选取2023年10—12月深圳市第二人民医院风湿免疫科收治并被确诊为系统性自身免疫性疾病(AID)的98例患者作为AID组,另选同期进行体检且排除AID的90例健康者为对照组。分别使用多重磁条码液相芯片系统与免疫印迹法来检测两组患者血清样本中的抗核抗体和抗核抗体谱15项。比较不同检测系统的检测阳性率,并分析敏感度以及特异性等关键指标,进行严格的一致性评价。结果两种方法对AID组患者的抗核抗体阳性检出率均高于对照组(P<0.05),对抗ds-DNA抗体检测的阳性率差异具有统计学意义(P<0.05),对其余14种观测指标的检测阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。多重磁条码液相芯片系统与金标准检测对抗Scl-70抗体检测的高度一致(Kappa≥0.75),对抗P0抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗CENP-B抗体、抗AMA-M2抗体、抗PCNA抗体、抗R0-52抗体、抗Histone抗体、抗Jo-1抗体检测的中度一致(0.75>Kappa≥0.40),对抗ds-DNA抗体、抗U1-snRNP抗体、抗PM-Scl抗体检测的一般一致(Kappa<0.40)。结论多重磁条码液相芯片系统与免疫印迹法检测自身抗体的总体符合率较高,但是对血清抗ds-DNA抗体的一致性不理想。对于一致性不理想的抗体,需要结合其他实验室指标、影像学检查及临床进行综合判断。

丙型肝炎病毒抗体化学发光免疫分析法≥95%阳性预测值最佳吸光度/临界值建立方法学和重要性探讨

目的确定丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)抗体阳性预测值≥95%的最佳吸光度/临界值(signal-to-cutoff,S/CO),确定首都医科大学附属北京地坛医院实验室医学决定水平,为探索不同系统丙型肝炎病毒抗体检测试剂95%阳性置信区间建立方法学。方法收集2021年7月至2022年2月门诊及住院患者进行化学发光免疫分析法(chemiluminescence analysis,CLIA)初筛检测同时进行HCV RNA检测的血浆样本共282例,其中抗体初筛有反应性(S/CO≥1)样本252例,阴性样本30例,进行重组免疫印记试验(recombinant immunoblot assay,RIBA)并查阅其HCV RNA检测结果,通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线得到预测本实验室阳性预测值≥95%时HCV感染的抗体S/CO值。结果初筛为阴性的30例样本双重确证试验结果均为阴性;排除16例HCV感染史不明确的样本,丙型肝炎病毒抗体S/CO≥1的236例样本经双重确证试验得到真阳性样本188例,阴性样本48例,经ROC曲线分析,本实验室阳性预测值≥95%时,本实验室抗体S/CO值为7.83,灵敏度为93.09%,特异度为95.83%,曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.98(P<0.0001)。结论为临床提供本实验室阳性预测值≥95%时HCV感染抗体的S/CO值以协助临床诊疗。

荨麻疹患者过敏原及其心肌酶谱联合检测的临床研究

目的探究荨麻疹患者过敏原与心肌酶谱的关系,明确荨麻疹患者的心肌损害情况。方法选择本院皮肤科荨麻疹患者244例作为研究对象,同时选择本院健康体检者及幼儿入托查体者共225例作为对照,采用免疫印迹法进行过敏原检测,采用速率法进行心肌酶谱检测。结果244例荨麻疹患者中过敏原阳性率为69.7%,心肌酶谱升高率为31.1%。在过敏原阳性等级中,1~4级心肌酶谱升高率分别为27.3%、40.0%、53.8%、70.0%,5级以上升高率为100%。对照组225例中,过敏原阳性仅4例,并且分级都在1级以下;心肌酶谱升高率为7.1%,仅AST、CK轻度升高,禁酒或适当休息后正常。荨麻疹患者心肌酶谱中AST、CK、CK-MB较对照组升高不明显,差异无统计学意义(P>0.05),LDH、HBDH明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论荨麻疹患者心肌酶谱升高率随过敏原等级升高而递增,LDH和HBDH数值升高明显,这说明荨麻疹患者过敏原等级越高,对心肌的损害程度越高。通过对过敏原与心肌酶谱的联合检测,为临床诊治提供实验室依据,意义重大。

拉萨市735例过敏原特异性IgE检测结果分析

目的分析西藏自治区拉萨市过敏原种类分布特点及规律,为过敏性疾病的预防、临床诊断与治疗提供依据。方法应用免疫印迹法检测在西藏自治区人民医院就诊的735例患者血清中吸入性及食入性过敏原特异性IgE,按照性别、年龄、民族、季节分组统计过敏原检测结果阳性率,从而分析过敏原流行特点和分布规律。结果735例受检患者中有403例患者过敏原特异性IgE检测结果阳性,阳性率为54.83%,吸入性过敏原检测结果阳性率排名前四名分别为:艾蒿(21.22%)、猫毛(13.61%)、柳树/杨树/榆树(11.84%)、屋尘螨/粉尘螨(11.56%),食入性过敏原阳性率前四名分别为:鸡蛋白(9.25%)、牛奶(8.30%)、黄豆(6.80%)、牛肉(6.53%)。分组统计显示吸入性过敏原检测结果阳性率(9.06%)高于食入性过敏原检测结果阳性率(5.26%),差异有统计学意义(P<0.05)。阳性等级大部分主要以+、++为主,+++主要以艾蒿、猫毛为主较易发生高度过敏反应。不同过敏原在不同性别、民族、年龄、季节分组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论拉萨市吸入性过敏原阳性高于食入性过敏原,吸入性主要以艾蒿、猫毛为主,食入性主要以鸡蛋白和牛奶为主,夏季更易出现因吸入性过敏原引起的过敏反应。

Clinical value of chemiluminescence method for detection of antinuclear antibody profiles

BACKGROUND Antinuclear antibodies(ANAs)are crucial in diagnosing autoimmune diseases,mainly systemic lupus erythematosus(SLE).This study aimed to compare the performance of chemiluminescence assay(CLIA)and line immunoassay(LIA)in detecting ANAs in patients with autoimmune diseases,evaluate their diagnostic accuracy for SLE,and develop a novel diagnostic model using CLIA-detected antibodies for SLE.Specimens from patients with autoimmune diseases and physical examination specimens were collected to parallel detect specific antibodies.Individual antibodies'diagnostic performance and a model combining multiple antibodies were assessed.The findings provide valuable insights into improving the diagnosis of SLE through innovative approaches.AIM To compare the performance of CLIA and LIA in detecting ANAs in patients with autoimmune diseases,assess their accuracy for SLE,and develop a novel diagnostic model using CLIA-detected antibodies for SLE.METHODS Specimens have been obtained from 270 patients with clinically diagnosed autoimmune disorders,as well as 130 physical examination specimens.After that,parallel detection of anti-double-stranded DNA(dsDNA)antibody,anti-histone(Histone)antibody,anti-nucleosome(Nuc)antibody,anti-Smith(Sm)antibody,anti-ribosomal P protein(Rib-P)antibody,anti-sicca syndrome A(Ro60)antibody,anti-sicca syndrome A(Ro52)antibody,anti-sicca syndrome(SSB)antibody,anticentromere protein B(Cenp-B)antibody,anti-DNA topoisomerase 1(Scl-70)antibody,anti-histidyl tRNA synthetase(Jo-1)antibody,and anti-mitochondrial M2(AMA-M2)antibody was performed using CLIA and LIA.The detection rates,compliance rates,and diagnostic performance for SLE were compared between the two methodologies,followed by developing a novel diagnostic model for SLE.RESULTS CLIA and LIA exhibited essentially comparable detection rates for anti-dsDNA antibody,anti-Histone antibody,anti-Nuc antibody,anti-Sm antibody,anti-Rib-P antibody,anti-Ro60 antibody,anti-Ro52 antibody,anti-SSB antibody,anti-Cenp-B antibody,anti-DNAScl-70 antibody,anti-Jo-1 antibody and anti-AMA-M2 antibody(P>0.05).The two methods displayed identical results for the detection of anti-dsDNA antibody,anti-Histone antibody,anti-Nuc antibody,anti-Sm antibody,anti-Ro60 antibody,anti-Ro52 antibody,anti-SSB antibody,anti-Cenp-B antibody,anti-Scl-70 antibody,and anti-AMA-M2 antibody(Kappa>0.7,P<0.05),but showed a moderate agreement for the detection of anti-Rib-P antibody and anti-Jo-1 antibody(Kappa=0.671 and 0.665;P<0.05).In addition,the diagnostic performance of these antibodies detected by both methods was similar for SLE.The diagnostic model's area under the curve values,sensitivity,and specificity,including an anti-dsDNA antibody and an anti-Ro60 antibody detected by CLIA,were 0.997,0.962,and 0.978,respectively.These values were higher than the diagnostic performance of individual antibodies.CONCLUSION CLIA and LIA demonstrated excellent overall consistency in detecting ANA profiles.A diagnostic model based on CLIA-detected antibodies can successfully contribute to developing a novel technique for detecting SLE.

变性梅毒重组抗原免疫印迹技术的建立及其在鉴别梅毒血清学假阳性实验的应用

目的为了评估临床梅毒抗体筛查中出现假阳性实验结果的真实性,建立了变性梅毒重组抗原免疫印迹技术,并应用于对临床非高危人群梅毒抗体筛查阳性血清进行验证确认,分析出现假阳性的可能性。方法采用梅毒TP47,TP45,TP17和TP15重组抗原,将变性后的抗原与非变性的抗原配对包被在硝酸纤维膜载体上,建立梅毒免疫印迹抗体谱检测方法。收集临床经电化学发光免疫分析仪及配套试剂检测的梅毒螺旋体抗体假阳性的非性病高危人群门诊和住院患者血清样本56例、临床确认梅毒患者血清样本25例和健康体检人员样本30例进行方法学验证。并用该方法对1例特殊的“梅毒患者”进行了鉴别。结果根据建立的变性与非变性抗原配对梅毒免疫印迹抗体谱检测结果判定模式,56例临床梅毒螺旋体抗体筛查假阳性样本,对四种变性重组抗原均不发生反应,无阳性条带。但是对二种以上非变性抗原发生弱阳性反应,出现阳性条带;25例梅毒患者对照样本,对四种非变性和变性重组抗原均有反应,出现强阳性条带;30例健康体检人员样本,对四种非变性和变性重组抗原均无反应。梅毒螺旋体特异性抗体阳性特殊“梅毒患者”血清样本,对四种变性重组抗原均为阴性反应,但对四种非变性重组抗原出现阳性反应。患者样本经血清免疫固定电泳分析,结合临床资料诊断为IgGλ型单克隆免疫球蛋白血症。结论变性梅毒重组抗原免疫印迹抗体谱检测,可有效鉴别临床梅毒抗体假阳性样本。但是,对于梅毒患者的确认一定要将检验结果结合患者的流行病学史、临床表现等进行诊断。

胶质母细胞瘤FGFR3-TACC3融合基因介导丙酮酸激酶M2入核促进DNA损伤修复基础研究

目的探讨胶质母细胞瘤FGFR3-TACC3(F3-T3)融合基因介导丙酮酸激酶M2(PKM2)入核激活DNA损伤修复致替莫唑胺(TMZ)耐药的作用机制。方法慢病毒转染构建稳定表达F3-T3融合基因和空载体的胶质母细胞瘤细胞系U87MG和U251MG,构建稳定表达F3-T3融合基因的胶质母细胞瘤裸鼠模型,小动物活体成像系统观察荷瘤鼠肿瘤荧光信号强度;采用生物信息学分析基因芯片转录组数据分析F3-T3融合基因的生物学功能,并分析肿瘤基因组学图谱计划(TCGA)数据库中胶质瘤患者生存期与PKM2基因表达的关系;瞬时转染小干扰RNA(siRNA)敲低PKM2基因表达;CCK-8细胞增殖实验观察经梯度浓度替莫唑胺处理后、转染siRNA后、替莫唑胺联合PKM2抑制剂Compound 3k处理后U87MG和U251MG细胞增殖活性;提取核质蛋白并观察经替莫唑胺处理后总蛋白提取物、胞质提取物和胞核提取物PKM2蛋白表达情况;Western blotting法检测稳定表达F3-T3融合基因的U87MG和U251MG细胞PKM2蛋白相对表达量、磷酸化组蛋白H2AX(p-H2AX)相对表达量、siRNA敲低PKM2基因p-H2AX相对表达量。结果(1)CCK-8细胞增殖实验显示,经替莫唑胺640、320、160、80、40μmol/L处理后F3-T3转染组的U87MG细胞存活率均高于空载体转染组(P=0.000,0.000,0.000,0.004,0.010),经替莫唑胺640、320、160、80、40、20、5μmol/L处理后F3-T3转染组的U251MG细胞存活率亦均高于空载体转染组(P=0.000,0.000,0.000,0.000,0.002,0.001,0.002);然而,经替莫唑胺640、320、160、80、40、20、10、5和2.50μmol/L处理后si-PKM2-1009转染组的U87MG细胞存活率均低于F3-T3转染组(P=0.000,0.000,0.000,0.012,0.006,0.030,0.000,0.007,0.025),经替莫唑胺640、320、160、80、40、20、5μmol/L处理后si-PKM2-1377转染组U251MG细胞存活率亦低于F3-T3转染组(P=0.000,0.000,0.002,0.000,0.002,0.048,0.042);经替莫唑胺640、320、160、80、40、20μmol/L处理后TMZ+Compound 3k组U87MG细胞存活率低于TMZ组(P=0.000,0.000,0.000,0.000,0.001,0.002),经高浓度(640、320、160、80、40μmol/L)替莫唑胺处理后TMZ+Compound 3k组U251MG细胞存活率亦低于TMZ组(P=0.000,0.000,0.000,0.000,0.003),而经低浓度(10、5、2.50μmol/L)替莫唑胺处理后TMZ+Compound 3k组U251MG细胞存活率高于TMZ组(P=0.000,0.000,0.006)。(2)胶质母细胞瘤动物模型显示,荷瘤鼠存在替莫唑胺耐药。(3)生物信息学分析,F3-T3融合蛋白的生物学功能显著富集于DNA修复通路(P=0.000)。TCGA数据库中胶质瘤患者PKM2基因高表达组生存率和总生存期均低于低表达组(P<0.05)。(4)Western blotting法显示,经替莫唑胺处理48 h再更换培养基后24、36和48 h,F3-T3转染组U87MG(P=0.000,0.000,0.004)和U251MG(P=0.000,0.007,0.005)细胞p-H2AX蛋白相对表达量均低于空载体转染组;经替莫唑胺处理后F3-T3转染组U87MG和U251MG细胞均可见明显的PKM2入核,而空载体转染组细胞均未见这一现象;si-PKM2-1009和si-PKM2-1377分别敲低U87MG(P=0.000,0.001,0.006)和U251MG(P=0.000,0.000,0.000)细胞PKM2基因表达的效果最显著。结论F3-T3融合基因可促进PKM2入核,激活DNA损伤修复相关通路,进而介导胶质母细胞瘤对替莫唑胺耐药,不同细胞株对替莫唑胺的耐药浓度不一致,PKM2抑制剂可逆转这种耐药。

流式荧光免疫技术检测抗核抗体谱的性能与临床应用评价

目的分析流式荧光免疫技术(FFIA)检测自身抗体谱的结果及评价其在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的应用价值。方法用流式荧光免疫法和免疫印迹法同时检测219例自身免疫病患者(包括92例SLE患者和127例非SLE的其他自身免疫病患者)、231例其他疾病患者、50例健康体检者血清的特异性自身抗体(抗nRNP、Sm、SS-A、SS-B、Jo-1、Scl-70、rRNP、PCNA、Nucleosome、Histone、CenP-B、M2、dsDNA),计算两种方法的阴阳符合率,并采用Kappa检验评估结果一致性;采用受试者工作特征曲线(ROC)比较各抗体在系统性红斑狼疮诊断中的应用价值。结果FFIA与免疫印迹法检测各项自身抗体总符合率在87%至98%之间,Kappa值在0.179至0.854之间,其中抗CenP-B抗体一致性最好(Kappa值=0.854),抗His抗体一致性最差(Kappa值=0.179)。在219例自身免疫病例组数据中,根据试剂盒给定的阳性结果判断标准得到的免疫印记法灵敏度(62.0%)高于流式荧光(44.6%),而特异性略低于后者,分别为89.8%和94.4%,但二者诊断符合率基本一致且较好,分别为80.3%和77.3%。在用流式荧光免疫法检测各抗体用于SLE诊断的效能比较中,绘制ROC曲线结果显示抗dsDNA抗体对SLE诊断价值最高,AUC为0.768,其最佳cut-off值为10.94IU/mL,此时对SLE和非SLE自身免疫性疾病判断的灵敏度为65.2%,特异性87.4%,总符合率为78.1%,其他各项在最佳cut-off值时,抗Sm抗体的特异性(92.1%)最高,但灵敏度(28.3%)较差,抗CenP-B抗体的特异性(16.5%)最差,但灵敏度(100%)最高。结论FFIA检测抗核抗体谱与免疫印迹技术相比,一致性尚可,阴性符合率较阳性符合率更高,总符合率较好。FFIA检测抗dsDNA抗体、抗rRNP抗体、抗nRNP抗体、抗Nucl抗体和抗Sm抗体用于SLE诊断效能较好,且FFIA可实现自动化、大规模化、高效化检测。实验室在日常工作中可结合自身工作量、临床需求等选择适合本实验室流程的方法学。

儿童皮肤和气道过敏性疾病的过敏原分布

目的分析0~14岁儿童皮肤和气道过敏性疾病的过敏原分布情况。方法选取2017年1月至2021年12月就诊于清华大学附属垂杨柳医院,诊断为皮肤或气道过敏性疾病,应用免疫印迹法检测血清过敏原特异性IgE(sIgE)抗体的0~14岁患儿的病史资料,回顾性分析过敏原的构成和在2种疾病的分布差异。结果共纳入180例,皮肤和气道过敏性疾病分别为95例、85例。皮肤过敏性疾病过敏原总阳性率48.4%;吸入性过敏原阳性率36.8%,前3位是尘螨组合(屋尘螨/粉尘螨)(14.7%)、艾蒿(13.7%)、猫毛(12.6%);食物过敏原阳性率22.1%,前3位是淡水鱼组合(鲑鱼/鲈鱼/鲤鱼)(30.0%)、蛋清(8.4%)、海鱼组合(鳕鱼/龙虾/扇贝)(5.3%)。气道过敏性疾病过敏原总阳性率72.9%;吸入性过敏原阳性率61.2%,前3位是艾蒿(31.8%)、猫毛(27.1%)、树组合(柳树/杨树/榆树)(20.0%);食物过敏原阳性率30.6%,前3位是淡水鱼组合(鲑鱼/鲈鱼/鲤鱼)(30.8%)、蛋清(16.5%)、牛奶(11.8%)。皮肤和气道过敏性疾病在多种吸入性过敏原sIgE抗体阳性率的比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论多种过敏原与皮肤和气道过敏性疾病有关,不同疾病过敏原分布不同。过敏原sIgE抗体检测可为过敏性疾病的早期诊断和精准治疗提供实验室依据。

湖州地区儿童过敏原检测分析和临床意义

目的 通过对湖州地区过敏性疾病的患儿过敏原总IgE、特异性IgE和食物IgG4抗体联合检测,分析其分布情况和发展规律,为本地区儿童过敏性疾病诊断和治疗提供参考.方法 采用胶体金法检测2,678例0~6岁儿童过敏原总IgE,同时采用免疫印迹法检测特异性IgE和食物IgG4抗体.结果 完成过敏原检测的2,678例儿童中,总IgE抗体阳性率为51.60%,特异性IgE抗体阳性率为42.46%,吸入性过敏原SIgE阳性率为31.13%,以户尘螨为主;食物性过敏原SIgE阳性率为57.87%,其中鸡蛋白和牛奶占32.48%.随着年龄的增长和活动范围的扩大以总IgE和吸入性过敏原阳性率逐渐增加,而食入性过敏原阳性率逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05).食物IgG4抗体的阳性率为38.50%,其中以鸡蛋和牛奶为主.结论 吸入性和食入性过敏原是导致儿童过敏性疾病的重要因素,通过对血总IgE、特异性IgE和食物IgG4抗体联合检测,更好了解患儿的过敏状况,对防治儿童过敏性疾病提供参考.

E-选择素在胚胎着床过程中小鼠子宫内膜的表达规律

目的:研究E-selectin在胚胎着床及早期分化中的作用。方法:用RT-PCR、Immunoblot、Western bolt法检测小鼠 胚胎着床前后蜕膜组织E-seleetin的表达。结果:E-选择素在孕4天的小鼠子宫内膜中的表达出现升高,第5天达到峰值,随后 妊娠第6、第7天E-selectin蛋白的表达则逐渐下降至正常水平。结论:提示E-选择素可能参与了胚胎着床过程。

3种检测方法在原发性胆汁性胆管炎相关自身抗体谱中的检测性能评价

目的探讨3种检测方法在原发性胆汁性胆管炎(PBC)相关自身抗体谱检测中的应用价值。方法分别收集56例PBC确诊患者及15名体检健康人群血清样本,采用磁微粒化学发光法(国产)、流式荧光发光法(国产)和免疫印迹法(进口)检测抗线粒体M2亚型抗体(AMA-M2)、抗三联体抗体(M2-3E/BPO)、抗多核点抗体(SP100)、跨膜糖蛋白210 kd抗体(gp 210),统计分析3种试剂的检测性能,及2种国产试剂与进口试剂的一致性。结果3种检测方法各检测项都具有很高的特异度和阳性预测值>90%,PBC相关自身抗体中SP100和gp120的敏感度、准确度、阴性预测值<70%;流式荧光发光法M2-3E/BPO和磁微粒化学发光法AMA-M2敏感度、准确度、阴性预测值高于同一方法的SP100和gp210,差异有统计学意义(P<0.05)。磁微粒化学发光法与免疫印迹法AMA-M2阴性符合率43%(6/14),Kappa值=0.486,敏感度75%(42/56)、88%(49/56)与特异度93%(14/15)、100%(15/15),差异无统计学意义(χ^(2)=0.297,0.017,P>0.05),且磁微粒化学发光法AMA-M2检测项曲线下面积为0.930;2种国产试剂与进口试剂各检测项阳性符合率、阴性符合率和总符合率均≥80%,kappa值均>0.6。结论2种国产试剂与进口试剂具有较高的一致性,还具备检测时长短、自动化程度高、价格较低等优势,应用前景广阔。

免疫印迹法检测过敏原用于过敏性皮肤病诊断的价值

目的探究免疫印迹法检测过敏原用于过敏性皮肤病诊断的价值。方法选择2020年1月至2022年10月来永新县皮肤病防治所就诊的过敏性皮肤病患者120例,入院后均进行免疫印迹法检测,记录吸入性过敏原及食入性过敏原特异度IgE抗体阳性率,并分析不同性别及不同季节的过敏原特异度IgE抗体阳性率情况。结果本研究中吸入性过敏原排名前三的是:尘螨组合(屋尘螨/粉尘螨)31.7%、树花粉(柳树/杨树/榆树)19.2%、猫毛皮屑17.5%;食入性过敏原排名前三的是:牛奶20.0%,鸡蛋白16.7%,鱼虾蟹15.0%;男性与女性患者的尘螨组合(屋尘螨/粉尘螨)、树花粉(柳树/杨树/榆树)、艾蒿的阳性率比较,差异有统计学意义(χ^(2)=5.393、6.009、5.428,P=0.020、0.014、0.020),而两者在猫毛皮屑、狗毛皮屑、普通豚草、蟑螂、真菌混合组及食入性过敏原阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同季节的尘螨组合(屋尘螨/粉尘螨)、艾蒿阳性率比较,差异有统计学意义(χ^(2)=11.130、8.750,P=0.011、0.033),而不同季节的树花粉(柳树/杨树/榆树)、猫毛皮屑、狗毛皮屑、普通豚草、蟑螂、真菌混合组及食入性过敏原阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论免疫印迹法检测可准确查找过敏原,可为过敏性皮肤病的诊断及治疗提供依据,同时不同性别、季节患者的过敏原阳性率存在一定差异,可为患者在日常生活中避免接触相关过敏原提供参考。

A Comparative Study on Detection of the Expression of Alternative Oxidase in Tobacco Callus with the Monoclonal Antibody Against Alternative Oxidase and Antibody Against-Synthetic Polypeptide Antibody

从经过不同温度处理的烟草 (NicotianarusticaL .)愈伤组织中提取并纯化线粒体蛋白 ,分别与交替氧化酶的单克隆抗体和抗合成多肽抗体进行免疫杂交。结果表明 :交替氧化酶的含量随温度的下降而显著上升 ;单克隆抗体的特异性较高于抗合成多肽抗体 ,但后者与交替氧化酶同样有良好的亲和性。因此 ,用合成多肽方法制备的抗体可以用于交替氧化酶的研究中。

免疫印迹法检测过敏性疾病患者血清中IgE抗体的临床应用分析

目的:分析郑州地区不同季节过敏原检测人群差异及过敏原分布差异,探讨免疫印迹法检测IgE抗体应用价值,为过敏性疾病的检测和诊治提供有价值的参考依据.方法:免疫印迹法检测郑州地区914例患者血清中19种过敏原特异性IgE抗体,对不同季节的患者性别、年龄及过敏原分布进行统计学分析.结果:914例患者中,男性598例(春193例/夏103例/秋174例/冬128例),女性316例(春103例/夏51例/秋79例/冬83例),不同季节过敏原患者男女数量构成差异无统计学意义(P>0.05).不同季节患者年龄段构成差异有统计学意义(P<0.05),青年患者人数居多.免疫印迹法检测结果显示:过敏原阳性共607例,阳性率66.41%;过敏原阳性前5位分别为尘螨组合(11.82%)、艾蒿(11.16%)、鸡蛋白(5.36%)、树组合(4.48%)、牛奶(4.38%).多种过敏原在不同季节分布差异有统计学意义(P<0.05).结论:郑州地区春、秋季节过敏性疾病人群增多,主要由吸入性过敏原引起.本研究探讨过敏性疾病患者的IgE抗体分布特征,免疫印迹法过敏原血清学检测简便快捷,可为过敏性疾病的诊断、预防和治疗提供可靠临床依据.

蛋白质免疫印迹技术的实验研究

阐述了蛋白质免疫印迹（western blotting）技术在蛋白质研究中的重要意义,论述了蛋白质印迹技术的原理和实验方法,从实验技术的几个主要方面对方法进行了分析和讨论,并对蛋白质免疫印迹技术进行了经验性的论述。

人血清高密度脂蛋白亚类免疫印迹检测法

为了检测血清高密度脂蛋白各亚类，采用琼脂糖及梯度聚丙烯酰胺凝胶双向电泳、免疫印迹试验和斑点扫描分析建立了血清高密度脂蛋白亚类的检测方法。高密度脂蛋白各亚类含量重复性试验的板间变异系数为４ ．９ ％ ～１１ ．１ ％ ，正常人血清测得的高密度脂蛋白２ｂ 、２ａ、３ａ、３ｂ 、３ｃ 亚类含量分别为３０ ．８４ ％ ±６ ．９５ ％ 、２１ ．６０ ％ ±３ ．８８ ％ 、２０ ．２８ ％ ±３ ．６９ ％ 、１３ ．５４ ％ ±２ ．０３ ％ 及７ ．０５ ％ ±１ ．７５ ％ ，前β１ 高密度脂蛋白和前β２ 高密度脂蛋白含量分别为６ ．６７ ％ ±１ ．２２ ％ 及４ ．５２ ％ ±１ ．１２ ％ 。结果表明所建立的方法可直接以血清为样品，同时准确检测α及前β高密度脂蛋白各亚类的组成及含量。

虾类和蟹类的过敏原组分分析

目的:分析虾类和蟹类的过敏原组分。方法:聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot分析虾类和蟹类的主要过敏原组分。结果:不同种类的虾其主要过敏原组分相对分子质量(Mr)在36000附近,不同种类的蟹主要过敏原组分Mr在29000、36000、66000、89000附近。结论:不同种类的虾蟹存在共同过敏原。