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山羊INSIG1基因超表达对乳腺上皮细胞中脂质合成的影响 被引量:8
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作者 王苗 罗军 +4 位作者 许会芬 朱江江 赫秋亚 姚大为 史怀平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1806-1816,共11页
本研究旨在通过构建西农萨能奶山羊胰岛素诱导基因1(INSIG1)的重组腺病毒(Adenovirus,Ad)超表达载体,研究该基因超表达后对乳腺上皮细胞中脂质合成的影响,从而为该基因在山羊乳腺脂质合成调控中的功能研究奠定基础。根据GenBank(登录号:... 本研究旨在通过构建西农萨能奶山羊胰岛素诱导基因1(INSIG1)的重组腺病毒(Adenovirus,Ad)超表达载体,研究该基因超表达后对乳腺上皮细胞中脂质合成的影响,从而为该基因在山羊乳腺脂质合成调控中的功能研究奠定基础。根据GenBank(登录号:JQ665439)中山羊INSIG1基因序列设计引物,PCR扩增得到其CDS区序列。将目的基因连接到穿梭载体pAdTrack-CMV后获得pAdTrack-CMV-INSIG1质粒,将该质粒PmeⅠ线性化后转入大肠杆菌BJ5183感受态细胞进行同源重组,获得pAdEasy-INSIG1重组腺病毒超表达载体。该重组质粒经PacⅠ线性化后转染293A细胞进行病毒的包装及扩繁,利用LaSRT法测定其滴度。将获得的重组腺病毒AdINSIG1感染山羊原代乳腺上皮细胞,利用实时荧光定量PCR检测INSIG1及脂质合成相关基因的mRNA表达情况,利用GPO-Trinder酶学反应检测细胞中甘油三酯的含量。结果表明,成功构建了奶山羊INSIG1基因重组腺病毒超表达载体,获得了具有较高滴度(2×108 U·mL-1)的超表达腺病毒Ad-INSIG1;Ad-INSIG1感染山羊原代乳腺上皮细胞48h后,与Ad-GFP组相比,INSIG1基因的mRNA表达量上调约500倍,固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)和SREBP裂解活化蛋白(SCAP)的mRNA表达量无明显变化,参与脂肪酸从头合成(ACCα、FASN)及去饱和(SCD1)基因的mRNA表达量均显著下降(P<0.05);参与甘油三酯合成的3个关键基因中,GPAM及DGAT2的mRNA表达量显著下降(P<0.05),AGPAT6的表达无显著变化;同时,催化甘油三酯分解(ATGL)的基因mRNA表达量也显著下降(P<0.05);细胞内甘油三酯含量无显著变化。综上所述,在山羊原代乳腺上皮细胞中,INSIG1能够抑制脂质合成相关基因的表达,对山羊乳腺脂质合成具有调控作用。 展开更多
关键词 山羊乳腺上皮细胞 胰岛素诱导基因1(insig1) 超表达 脂质合成
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INSIG1基因多态性与成年人肥胖的相关性研究
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作者 魏娴 凯塞尔·吐尔吾东 +1 位作者 陶静 马依彤 《新疆医科大学学报》 CAS 2021年第10期1095-1100,共6页
目的探讨INSIG1基因的单核苷酸多态性(SNP)与成年人肥胖的相关性。方法本研究为病例对照研究,包括516名肥胖受试者(病例组)和463名年龄和性别匹配的正常体重对照者(对照组)。使用TaqManSNP基因分型分析对rs2721进行基因分型。结果rs272... 目的探讨INSIG1基因的单核苷酸多态性(SNP)与成年人肥胖的相关性。方法本研究为病例对照研究,包括516名肥胖受试者(病例组)和463名年龄和性别匹配的正常体重对照者(对照组)。使用TaqManSNP基因分型分析对rs2721进行基因分型。结果rs2721基因型分布,显性模型(GT/TT vs GG),隐性模型(TT vs GT/TT)在病例组和对照组之间的差异有统计学意义(分别为P=0.008,P=0.005和P=0.035)。校正混杂因素后,rs2721 GT基因型的显性模型(GT/TT vs GG)仍与肥胖明显相关(OR=1.393,95%CI=1.047~1.853,P=0.023)。rs2721 GT/TT基因型的TG水平明显高于GG基因型(P<0.05)。结论新疆成年人INSIG1基因rs2721位点与肥胖相关。rs2721的GT/TT基因型或T等位基因明显增加肥胖风险。 展开更多
关键词 肥胖 insig1基因 基因多态性
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INSIG1基因rs9769826多态性与2型糖尿病关系
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作者 张庆燕 陈高明 +3 位作者 吴义丽 王桂凤 姜文洁 张东峰 《青岛大学医学院学报》 CAS 2012年第4期321-323,326,共4页
目的探讨胰岛素诱导基因1(INSIG1)基因rs9769826位点单核苷酸多态性(SNPs)与青岛地区汉族人群2型糖尿病(T2DM)关系。方法采用频数匹配病例对照研究方法,选取125例T2DM病人和125例正常对照者,用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-... 目的探讨胰岛素诱导基因1(INSIG1)基因rs9769826位点单核苷酸多态性(SNPs)与青岛地区汉族人群2型糖尿病(T2DM)关系。方法采用频数匹配病例对照研究方法,选取125例T2DM病人和125例正常对照者,用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测技术,对其INSIG1基因rs9769826多态性进行基因分型,比较两组基因型频率和等位基因频率。结果 T2DM组INSIG1基因rs976982位点AA、AG、GG基因型频率分别为58.4%、37.6%和4.0%,对照组分别为76.8%、20.0%和3.2%,两组比较差异具有显著性(χ2=9.964,P<0.01);两组间G等位基因频率分别为22.8%、13.2%,病例组高于对照组(χ2=7.805,P<0.01)。多因素非条件Logistic回归分析显示,在控制混杂因素后,携带突变位点G的基因型(AG+GG)与T2DM有关(OR=3.220,95%CI=1.550~6.686)。结论 INSIG1基因rs9769826位点多态性与青岛地区汉族人群T2DM有关。 展开更多
关键词 糖尿病 2型 基因 insig1 多态性 单核苷酸 rs9769826
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High rumen degradable starch decreased goat milk fat via trans-10,cis-12 conjugated linoleic acid-mediated downregulation of lipogenesis genes,particularly,INSIG1 被引量:5
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作者 Lixin Zheng Shengru Wu +6 位作者 Jing Shen Xiaoying Han Chunjia Jin Xiaodong Chen Shengguo Zhao Yangchun Cao Junhu Yao 《Journal of Animal Science and Biotechnology》 CAS CSCD 2020年第3期805-818,共14页
Background:Starch is an important substance that supplies energy to ruminants.To provide sufficient energy for high-yielding dairy ruminants,they are typically fed starch-enriched diets.However,starch-enriched diets h... Background:Starch is an important substance that supplies energy to ruminants.To provide sufficient energy for high-yielding dairy ruminants,they are typically fed starch-enriched diets.However,starch-enriched diets have been proven to increase the risk of milk fat depression(MFD)in dairy cows.The starch present in ruminant diets could be divided into rumen-degradable starch(RDS)and rumen escaped starch(RES)according to their different degradation sites(rumen or intestine).Goats and cows have different sensitivities to MFD.Data regarding the potential roles of RDS in milk fat synthesis in the mammary tissue of dairy goats and in regulating the occurrence of MFD are limited.Results:Eighteen Guanzhong dairy goats(day in milk=185±12 d)with similar parity,weight,and milk yield were selected and randomly assigned to one of three groups(n=6),which were fed an LRDS diet(Low RDS=20.52%),MRDS diet(Medium RDS=22.15%),or HRDS diet(High RDS=24.88%)for 5 weeks.Compared with that of the LRDS group,the milk fat contents in the MRDS and HRDS groups significantly decreased.The yields of short-,mediumand long-chain fatty acids decreased in the HRDS group.Furthermore,increased RDS significantly decreased ruminal B.fibrisolvens and Pseudobutyrivibrio abundances and increased the trans-10,cis-12 conjugated linoleic acid(CLA)and trans-10 C18:1 contents in the rumen fluid.A multiomics study revealed that the HRDS diet affected mammary lipid metabolism down-regulation of ACSS2,MVD,AGPS,SCD5,FADS2,CERCAM,SC5D,HSD17B7,HSD17B12,ATM,TP53RK,GDF1 and LOC102177400.Remarkably,the significant decrease of INSIG1,whose expression was depressed by trans-10,cis-12 CLA,could reduce the activity of SREBP and,consequently,downregulate the downstream gene expression of SREBF1.Conclusions:HRDS-induced goat MFD resulted from the downregulation of genes involved in lipogenesis,particularly,INSIG1.Specifically,even though the total starch content and the concentrate-to-fiber ratio were the same as those of the high-RDS diet,the low and medium RDS diets did not cause MFD in lactating goats. 展开更多
关键词 Dairy goat insig1 Milk fat depression Rumen degradable starch Trans-10 cis-12 CLA
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豫西脂尾羊INSIG1基因克隆、序列分析及组织表达 被引量:1
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作者 权凯 宋飞虎 李君 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第6期1781-1790,共10页
胰岛素诱导基因1(INSIG1)是脂质合成与分解的重要调控基因,为了研究豫西脂尾羊INSIG1基因序列特征及其组织表达规律,试验采用Trizol法提取组织样RNA,RT-PCR扩增后克隆得到INSIG1基因序列并进行分析;采用实时荧光定量PCR法检测INSIG1 mRN... 胰岛素诱导基因1(INSIG1)是脂质合成与分解的重要调控基因,为了研究豫西脂尾羊INSIG1基因序列特征及其组织表达规律,试验采用Trizol法提取组织样RNA,RT-PCR扩增后克隆得到INSIG1基因序列并进行分析;采用实时荧光定量PCR法检测INSIG1 mRNA表达情况,并对结果进行比较分析。试验成功克隆了豫西脂尾羊INSIG1基因,其编码区长831 bp,编码276个氨基酸;基因的同源性分析表明,豫西脂尾羊INSIG1基因编码区与绵羊(XM_015095466.2)的亲缘关系相似性达99.64%,编码氨基酸序列的相似性达99.28%;蛋白理化性质分析表明,其分子质量为29.58 ku,理论等电点(pI)为9.07,属于稳定的碱性疏水性蛋白;跨膜结构、信号肽和亚细胞定位分析表明,该蛋白包含5个跨膜结构,没有信号肽,主要分布在细胞质;蛋白质三级结构预测发现,INSIG1蛋白结构含有6个α-螺旋和部分无规则卷曲;实时荧光定量PCR结果表明,INSIG1基因在肝脏中表达量最高,其次为肺脏、小肠和尾脂,肌肉中表达量最低。本研究完善了豫西脂尾羊的数据库,为INSIG1基因的功能及其在肉羊脂肪沉积过程中的作用机制提供了依据。 展开更多
关键词 豫西脂尾羊 insig1基因 克隆 组织表达
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黄河鲤胰岛素诱导基因1(INSIG1)序列特征、SNP位点及其与生长性状的关联分析
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作者 王新华 路畅 +2 位作者 徐文彦 齐子鑫 徐梦梦 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期763-771,共9页
为探究胰岛素诱导基因1(insulin-induced gene,INSIG1)在黄河鲤(Cyprinus carpio haematoperus)生长发育过程中的作用,采用候选基因法对黄河鲤生长候选基因INSIG1进行了序列特征分析、组织表达及SNP与生长性状的关联分析。结果表明:黄河... 为探究胰岛素诱导基因1(insulin-induced gene,INSIG1)在黄河鲤(Cyprinus carpio haematoperus)生长发育过程中的作用,采用候选基因法对黄河鲤生长候选基因INSIG1进行了序列特征分析、组织表达及SNP与生长性状的关联分析。结果表明:黄河鲤INSIG1基因全长为4853 bp,包含5个外显子和4个内含子,其中cDNA全长为1530 bp,蛋白编码区(CDS)全长为756 bp,可编码251个氨基酸;INSIG1在不同物种间序列保守性较高,黄河鲤INSIG1与金线鲃、斑马鱼和鲫等鲤科鱼类聚为一支;预测黄河鲤INSIG1蛋白相对分子质量为27674.25,理论等电点为8.09,属于稳定的疏水性蛋白,该蛋白无信号肽,包含6个跨膜结构,蛋白三级结构包含6个α-螺旋和部分无规则卷曲;qRT-PCR分析显示,INSIG1基因在黄河鲤肝、脾、肾、肠、心脏、鳃、脑、肌肉和皮肤等组织中均有表达,其中在肠和肝组织中表达量较高,在鳃组织中表达量最低;黄河鲤INSIG1基因共鉴定到10个SNP位点,其中g.1854T>C和g.1982A>T 2个SNP位点的不同基因型与黄河鲤肥满度性状显著相关(P<0.05),其他位点的不同基因型与生长性状未表现出显著关联性。研究表明,INSIG1基因参与了黄河鲤的生长发育过程,其突变位点g.1854T>C和g.1982A>T显著影响了黄河鲤的肥满度,该结果为黄河鲤生长性状的分子标记辅助育种提供了可用的分子标记,对于选育具有优良性状的黄河鲤具有重要的实践意义。 展开更多
关键词 黄河鲤 胰岛素诱导基因(insig1) 组织表达 SNP位点 生长关联性
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牛科物种胰岛素诱导基因1(INSIG1)研究进展 被引量:1
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作者 罗建椿 邱立华 +1 位作者 范新阳 苗永旺 《中国牛业科学》 2017年第3期31-35,共5页
胰岛素诱导基因1编码蛋白(INSIG1)定位于内质网膜上,是调控脂代谢的重要因子。INSIG1主要通过调控固醇调控元件结合蛋白(SREBP)和3-羟-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)来影响脂质代谢。越来越多的研究结果揭示了INSIG1在生物体内作用的... 胰岛素诱导基因1编码蛋白(INSIG1)定位于内质网膜上,是调控脂代谢的重要因子。INSIG1主要通过调控固醇调控元件结合蛋白(SREBP)和3-羟-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)来影响脂质代谢。越来越多的研究结果揭示了INSIG1在生物体内作用的复杂性。本文综述了INSIG1与SREBP和HMGR之间在脂代谢调控过程中的相互作用机制、INSIG1的结构及表达调控、INSIG1对牛科动物泌乳、生长等性状的影响。 展开更多
关键词 胰岛素诱导基因1 固醇调控元件结合蛋白 3-羟-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶 表达调控 泌乳性状 基因多态性
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在青岛汉族人群中INSIG1rs9769826单核苷酸多态性与血糖水平有关,与血脂水平无关(英文) 被引量:1
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作者 胡平 张庆燕 +1 位作者 王桂凤 张东峰 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第13期2429-2432,共4页
目的:探讨青岛汉族人群中INSIG1rs9769826单核苷酸多态性与血糖和血脂的关系。方法:随机选取217名年龄在35-86岁健康的青岛汉族居民作为受试者。应用聚合酶链式反应-限制片段长度多态性检测技术(PCR-RFLP)对INSIG1基因rs9769826多态性... 目的:探讨青岛汉族人群中INSIG1rs9769826单核苷酸多态性与血糖和血脂的关系。方法:随机选取217名年龄在35-86岁健康的青岛汉族居民作为受试者。应用聚合酶链式反应-限制片段长度多态性检测技术(PCR-RFLP)对INSIG1基因rs9769826多态性进行基因分型,用协方差分析的方法分析rs9769826多态性与血糖和血脂的关系。结果:INSIG1基因rs9769826位点AAAG GG基因型的频率分别为70.04%,36.73%和3.23%,INSIG1基因rs9769826多态性与空腹血糖水平之间差异有显著意义(P<0.001),与血脂水平差异无显著意义。结论:INSIGIrs9769826突变基因G与空腹血糖升高有关。 展开更多
关键词 insig1 Rs9769826 空腹血糖 血脂
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使用phiC31整合酶构建奶牛INSIG1基因乳腺恒定表达细胞系 被引量:1
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作者 韩立强 王林枫 +6 位作者 王月影 朱河水 王江 褚贝贝 郑悦亭 张超 杨国宇 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2135-2139,共5页
为了使用phiC31整合酶建立奶牛胰岛素诱导基因1(INSIG1)的稳定表达乳腺细胞系,首先从奶牛乳腺组织中克隆得到INSIG1基因的编码区,然后将克隆片段与phiC31载体进行BamHⅠ和KpnⅠ双酶切构建INSIG1-C31真核表达质粒;将其与phiC31整合酶质... 为了使用phiC31整合酶建立奶牛胰岛素诱导基因1(INSIG1)的稳定表达乳腺细胞系,首先从奶牛乳腺组织中克隆得到INSIG1基因的编码区,然后将克隆片段与phiC31载体进行BamHⅠ和KpnⅠ双酶切构建INSIG1-C31真核表达质粒;将其与phiC31整合酶质粒共同转染到小鼠乳腺细胞中,采用嘌呤霉素筛选细胞,荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白的表达,PCR鉴定细胞基因组中INSIG1基因的表达,荧光定量PCR检测细胞中INSIG1基因的表达。结果表明,试验成功构建INSIG1-C31真核载体,与phiC31整合酶共转染小鼠乳腺细胞,经过8mg/L嘌呤霉素筛选后获得完全表达绿色荧光蛋白的乳腺细胞系;对细胞系鉴定表明INSIG1基因已经整合到细胞基因组中,与对照组相比,INSIG1基因的mRNA表达丰度增加了597.98倍(P<0.001)。本研究获得了稳定表达奶牛INSIG1基因的乳腺细胞系,为深入研究INSIG1基因功能打下基础。 展开更多
关键词 奶牛 胰岛素诱导基因1 phiC31整合酶 乳腺细胞
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猪胰岛素诱导1基因的cDNA克隆和差异表达及蛋白质序列分析 被引量:2
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作者 王京京 魏麟 陈斌 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期505-510,共6页
克隆猪胰岛素诱导1(INSIG1)基因,并对其蛋白质序列进行分析。根据人INSIG1基因的保守序列设计1对引物,以猪总RNA为模板,经RT–PCR获得INSIG1基因序列,通过相对荧光定量PCR分析该基因在不同组织中的表达量;将INSIG1基因序列连接到pMD19–... 克隆猪胰岛素诱导1(INSIG1)基因,并对其蛋白质序列进行分析。根据人INSIG1基因的保守序列设计1对引物,以猪总RNA为模板,经RT–PCR获得INSIG1基因序列,通过相对荧光定量PCR分析该基因在不同组织中的表达量;将INSIG1基因序列连接到pMD19–T Simple载体上,用PCR检测阳性克隆后测序,并对克隆得到的基因进行生物信息学分析。结果表明,INSIG1基因在肺中的表达量最高,其次是在肝脏,再次是在脾脏,在心脏中的表达量最低;通过克隆,获得了一段999 bp的序列,其中831 bp的开放阅读框编码276个氨基酸;该蛋白不含信号肽序列,与其他动物INSIG1基因氨基酸序列的一致性在71%以上。 展开更多
关键词 胰岛素诱导1基因 基因克隆 序列分析
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乌药醇提物对酒精联合高脂饮食诱导的脂肪肝防治作用研究
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作者 顾建荣 韩丽萍 +4 位作者 吴瑶 赖威旨 何志刚 叶合 楼招欢 《浙江中西医结合杂志》 2023年第5期400-405,共6页
目的观察乌药醇提取物(LREE)对酒精性脂肪肝模型小鼠的保护作用,探讨其可能的作用机制。方法32只雄性ICR小鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、易善复组(0.2736 g/kg)和乌药组(1 g/kg),每组8只。采用饮食高脂饲料复合梯度浓... 目的观察乌药醇提取物(LREE)对酒精性脂肪肝模型小鼠的保护作用,探讨其可能的作用机制。方法32只雄性ICR小鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、易善复组(0.2736 g/kg)和乌药组(1 g/kg),每组8只。采用饮食高脂饲料复合梯度浓度白酒连续灌胃8周复制酒精性脂肪肝模型小鼠,造模的同时给予易善复、LREE进行干预;于第2、4、6、8周采血,全自动生化仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平;实验期末,解剖,取肝脏,油红O染色检测肝组织脂肪病变程度,RT-PCR检测肝组织低密度脂蛋白受体(LDLR)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-α)、胰岛素诱导基因1(Insig1)、固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)、固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)mRNA表达水平。结果LREE和易善复能抑制高脂饮食+酒精诱导的小鼠体质量增加[(38.6±2.9)g、(39.4±2.3)g比(42.3±1.9)g,P<0.05],实验期末,乌药组及易善复组小鼠血清ALT、AST活性显著降低[ALT:(37.5±8.2)U/L、(41.4±17.5)U/L比(64.3±14.7)U/L,P<0.05;AST:(67.3±23.0)U/L、(67.4±23.9)U/L比(96.3±11.5)U/L,P<0.01],肝组织脂质沉积改善;RT-PCR结果显示,LREE与易善复能上调肝组织LDLR[(0.6±0.1)、(0.8±0.1)比(0.3±0.1),P<0.01]和PPAR-α[(0.8±0.1)、(0.7±0.1)比(0.5±0.1),P<0.05或P<0.01]mRNA表达水平,下调Insig1[(1.6±0.1)、(1.6±0.1)比(3.1±0.4),P<0.01]、SCAP[(1.8±0.2)、(1.3±0.1)比(2.3±0.1),P<0.05]和SREBP-1[(1.5±0.3)、(1.2±0.1)比(2.5±0.1),P<0.01]mRNA表达水平。结论LREE对高脂联合酒精诱导的酒精性脂肪肝具有良好的保护作用,其机制可能与抑制Insig1-SCAP-SERBP1通路活化有关。 展开更多
关键词 小鼠 乌药醇提物 酒精性脂肪肝 低密度脂蛋白受体 胆固醇调节元件结合蛋白-1c 内质网胰岛素诱导基因1
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小鼠胰岛素诱导基因1 siRNA稳定表达细胞株的建立及其对细胞胆固醇代谢的影响 被引量:4
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作者 柯大智 陈庆伟 +2 位作者 李桂琼 邓玮 莫显刚 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第12期1445-1449,共5页
目的构建并筛选针对小鼠胰岛素诱导基因1(insulin induced gene 1,insig1)siRNA的特异性表达质粒,建立稳定转染细胞株,并观察其对小鼠巨噬细胞RAW264.7胆固醇代谢的影响。方法根据GenBank中登录的insig1基因序列及RNA干扰原则,设计3个... 目的构建并筛选针对小鼠胰岛素诱导基因1(insulin induced gene 1,insig1)siRNA的特异性表达质粒,建立稳定转染细胞株,并观察其对小鼠巨噬细胞RAW264.7胆固醇代谢的影响。方法根据GenBank中登录的insig1基因序列及RNA干扰原则,设计3个阳性克隆及1个阴性克隆序列,定向克隆入pGenesil-1质粒,构建insig1 shRNA真核表达质粒,测序鉴定后,脂质体法转染RAW264.7细胞,筛选干扰效果最佳的质粒,将其转染入RAW264.7细胞,经G418筛选建立稳定转染细胞株,采用RT-PCR及Western blot法检测转染细胞中insig1基因的转录水平及蛋白的表达水平,油红O染色观察转染细胞中胆固醇含量的变化。结果酶切及测序结果证实,insig1基因shRNA表达质粒构建正确,其中si-2为干扰效果最佳的质粒;在稳定转染的RAW264.7细胞中,si-2组insig1基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平较阴性质粒组和未转染组明显降低(P<0.05),油红O颗粒含量最多。结论成功建立了insig1 siRNA稳定表达细胞株,体外模型证明了对insig1基因的干扰可促进细胞胆固醇摄取。 展开更多
关键词 胰岛素诱导基因1 SIRNA RAW264.7细胞 胆固醇 代谢
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奶牛胰岛素诱导基因1的克隆、组织分布及稳定表达细胞系的建立 被引量:2
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作者 庞坤 石科 +1 位作者 杨亮 韩立强 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1681-1685,共5页
为研究奶牛INSIG1基因的功能,本研究检测了8个组织中INSIG1基因的分布情况,PCR扩增得到INSIG1基因的编码区序列,采用嘌呤霉素筛选稳定表达INSIG1的肝脏细胞系并进行鉴定,结果表明INSIG1基因在奶牛肝脏、小肠、肌肉和脂肪组织的表达丰度... 为研究奶牛INSIG1基因的功能,本研究检测了8个组织中INSIG1基因的分布情况,PCR扩增得到INSIG1基因的编码区序列,采用嘌呤霉素筛选稳定表达INSIG1的肝脏细胞系并进行鉴定,结果表明INSIG1基因在奶牛肝脏、小肠、肌肉和脂肪组织的表达丰度较高,将构建的INSIG1-C31真核载体与phi C31整合酶共转染肝脏细胞,经过4μg/m L嘌呤霉素筛选后,获得完全表达绿色荧光蛋白的肝脏细胞系,鉴定表明INSIG1基因已经整合到细胞基因组中。本研究获得了稳定表达INSIG1基因的肝脏细胞系,为深入研究INSIG1基因功能提供了材料。 展开更多
关键词 奶牛 胰岛素诱导基因1 组织分布 细胞系
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