青藤碱在JNK/c-Jun信号通路中对LPS诱导的肺上皮细胞凋亡和自噬的影响

目的:探究青藤碱(SIN)通过JNK/c-Jun信号通路对LPS诱导的肺上皮细胞凋亡和自噬的影响。方法:培养肺上皮细胞MLE-12,通过CCK-8检测SIN的毒性。流式细胞术检测细胞凋亡,免疫荧光检测自噬体形成数量,Western blot检测细胞中凋亡、自噬以及JNK/c-Jun信号通路相关蛋白表达水平。结果:LPS造模后,细胞凋亡率和自噬体数量升高,Cleaved caspase-3、Bax和Beclin-1蛋白水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p-JNK/JNK和p-c-Jun/c-Jun均升高(P<0.05);Bcl-2、P62蛋白水平均降低(P<0.05)。SIN处理可明显改善LPS对细胞凋亡和自噬的影响,以及对JNK/c-Jun信号通路的调控(P<0.05)。细胞自噬抑制剂3-MA或JNK激动剂ANISO处理均可部分逆转SIN对LPS诱导的肺上皮细胞的保护作用(P<0.05)。结论:SIN可通过调控JNK/c-Jun信号通路相关蛋白提高细胞自噬,保护被LPS损伤的肺上皮细胞。

c-Jun氨基端激酶信号通路调控急性呼吸窘迫综合征中重要炎症介质表达机制的研究进展

急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是一种临床常见的危重症,其核心问题在于过度的炎症反应。c-Jun氨基端激酶(JNK)是促分裂原活化的蛋白质激酶(MAPK)家族最重要的成员之一,在调控细胞增殖、分化、凋亡、自噬及炎症等多个重要功能中发挥作用。JNK信号通路被过度激活时,会导致炎症反应的持续激活和炎症因子的过度生成,从而对机体造成严重损害。因此,明确JNK通过哪些信号通路参与炎症反应,对于控制ARDS的炎症进程和调节机体的免疫反应平衡具有重要意义。

Jun转录因子家族与肝细胞癌的研究进展

肝细胞癌(HCC)是目前世界范围内发病率与致死率均较高的恶性肿瘤,其发病机制较为复杂,与众多癌基因的异常激活有关。Jun转录因子家族是激活剂蛋白-1(AP-1)成员之一,其家族成员包括JunB、c-Jun、JunD和v-Jun,通过激活或抑制多种靶基因转录,参与多种癌症的发生发展。近年来,研究发现Jun转录因子家族参与调控肝癌细胞增殖、迁移、凋亡等多种细胞功能,与HCC的发生发展密不可分。本文就Jun转录因子家族成员与HCC发生发展的研究进展进行综述。

毛兰素通过JNK/c-Jun信号通路对2型糖尿病大鼠肝脏损伤的保护作用机制研究

目的基于c-Jun氨基末端激酶(JNK)/c-Jun信号通路对氧化应激反应的调控作用,研究毛兰素对2型糖尿病大鼠肝脏损伤的保护作用。方法于2021年10月至2022年2月腹腔注射链脲佐菌素构建糖尿病大鼠模型,将造模成功大鼠分为模型组、毛兰素低剂量组(10 mg/kg)、毛兰素高剂量组(40 mg/kg),及罗格列酮组(1.25 mg/kg)、毛兰素(40 mg/kg)+JNK激活组(5 mg/kg),每组10只,另取正常饲养大鼠10只作为对照组。连续给药6周后,通过血糖仪和胰岛素放射免疫分析试剂盒检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛素敏感指数(ISI);天平称取大鼠体质量和肝质量,计算肝脏指数;试剂盒检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量;HE染色观察肝脏组织病理学变化;western blotting法检测肝脏组织中JNK/c-Jun信号通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,模型组肝脏指数[(4.26±0.12)g/100 g比(2.24±0.09)g/100 g]、FBG[(21.49±1.78)mmol/L比(5.14±0.45)mmol/L]、FINS[(80.17±6.38)mmol/L比(22.35±2.04)mmol/L]、HOMA-IR[(76.46±6.56)比(5.11±1.12)]、ALT[(138.71±10.21)U/L比(70.29±5.54)U/L]和AST活性[(77.21±5.08)U/L比(40.38±3.27)U/L]、MDA含量[(13.45±1.34)nmol/mg prot比(3.72±0.87)nmol/mg prot]、JNK/c-Jun信号通路相关蛋白表达均明显升高(P<0.05),体质量、ISI[(−7.45±0.18)比(−4.74±0.11)]、SOD[(100.79±11.22)U/mg prot比(223.46±19.86)U/mg prot]和GSH-Px活性[(24.42±1.74)U/mg prot比(56.79±3.18)U/mg prot]明显降低(P<0.05),且肝脏组织病理损伤较为严重;与模型组相比,毛兰素低剂量组、毛兰素高剂量组和罗格列酮组肝脏指数、FBG、FINS、HOMA-IR、ALT和AST活性、MDA含量、JNK/c-Jun信号通路相关蛋白表达均明显降低(P<0.05),体质量、ISI、SOD和GSH-Px活性明显升高(P<0.05),减轻肝脏损伤程度;与毛兰素高剂量组相比,毛兰素低剂量组、毛兰素+JNK激活组肝脏指数、FBG、FINS、HOMA-IR、ALT和AST活性、MDA含量、JNK/c-Jun信号通路相关蛋白表达均明显升高(P<0.05),体质量、ISI、SOD和GSH-Px活性明显降低(P<0.05),肝脏损伤恢复缓慢。结论毛兰素可通过调控JNK/c-Jun信号通路,抑制JNK/c-Jun通路蛋白表达,从而缓解氧化应激反应,改善糖尿病大鼠肝脏损伤。

广藿香酮通过JNK/c-Jun信号通路调控肺癌A549细胞凋亡及自噬

目的探讨广藿香酮对肺癌A549细胞增殖、凋亡、自噬和JNK/c-Jun信号通路的影响。方法采用0、10、20、40μmol/L广藿香酮处理肺癌A549细胞,将细胞随机分为4组:0μmol/L、10μmol/L、20μmol/L和40μmol/L广藿香酮处理组,同时将5μmol/L顺铂处理后的肺癌A549细胞作为阳性对照组。EdU染色检测细胞增殖;Hoechst 33258染色检测细胞凋亡;Western blotting检测LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、Beclin-1、p62、JNK、p-JNK、c-Jun和p-c-Jun蛋白表达。10μmol/L JNK抑制剂SP600125与40μmol/L广藿香酮共处理A549细胞2 h及24 h,检测细胞增殖、凋亡及相关蛋白表达。结果与广藿香酮0μmol/L组比较,广藿香酮20、40μmol/L组EdU阳性细胞数降低,细胞凋亡率升高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Beclin-1蛋白表达升高,p62蛋白表达降低,LC3+含量升高,p-JNK/JNK、p-c-Jun/c-Jun比值升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,SP600125组p-JNK/JNK、p-c-Jun/c-Jun、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、细胞凋亡率及Beclin-1蛋白表达显著降低,EdU阳性细胞数、p62蛋白表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与SP600125组比较,广藿香酮40μmol/L+SP600125组p-JNK/JNK、p-c-Jun/c-Jun、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、细胞凋亡率及Beclin-1蛋白表达显著升高,EdU阳性细胞数、p62蛋白表达显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论广藿香酮通过JNK/c-Jun信号通路抑制肺癌A549细胞增殖,诱导细胞凋亡及自噬。

艾灸对偏头痛大鼠血清5-HT、ET-1与脑干c-fos、c-jun蛋白表达的影响

目的观察艾灸风池穴对偏头痛大鼠血清5-羟色胺(5-HT)、内皮素-1(ET-1)水平及脑干组织中癌基因fos(c-fos)、癌基因jun(c-jun)表达的影响,探讨艾灸治疗偏头痛的可能机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸治疗组和艾灸预防+治疗组,每组10只。除空白组外,其余组大鼠均采用颈背部皮下注射硝酸甘油方法制备偏头痛模型。艾灸预防+治疗组于造模前7 d(连续7 d)及造模后30 min艾灸双侧风池穴,每日1次,每次30 min;艾灸治疗组于造模后30 min艾灸双侧风池穴1次,持续30 min。记录大鼠造模前及造模后0~30 min、60~90 min、90~120 min的挠头次数;测量造模前、造模结束后、造模后60 min大鼠头面部机械痛阈值;造模结束4 h后,采用酶联免疫吸附法测定血清5-HT和ET-1水平,Western blot法检测脑干组织中c-fos和c-jun蛋白表达情况。结果模型组大鼠造模后0~30 min、60~90 min、90~120 min的挠头次数均明显高于空白组(P均<0.05),艾灸治疗组、艾灸预防+治疗组大鼠造模后60~90 min、90~120 min的挠头次数均明显少于模型组(P均<0.05)。造模结束后,模型组、艾灸治疗组、艾灸预防+治疗组大鼠头面部机械痛阈值均明显低于空白组(P均<0.05);造模后60 min,艾灸治疗组、艾灸预防+治疗组大鼠头面部机械痛阈值均明显高于模型组(P均<0.05),艾灸治疗组与艾灸预防+治疗组比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组大鼠血清5-HT水平明显低于空白组(P<0.05),血清ET-1水平及脑干组织中c-fos、c-jun蛋白相对表达量均明显高于空白组(P均<0.05);艾灸治疗组、艾灸预防+治疗组大鼠血清5-HT水平均明显高于模型组(P均<0.05),血清ET-1水平及脑干组织中c-fos、c-jun蛋白相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05);艾灸预防+治疗组大鼠血清ET-1水平及脑干组织中c-fos、c-jun蛋白相对表达量均明显低于艾灸治疗组(P均<0.05)。结论艾灸风池穴可明显缓解大鼠偏头痛,且早期介入效果更显著,其机制可能与调节血管舒缩相关的血管活性物质表达和下调c-fos、c-jun蛋白表达而抑制三叉神经血管系统激活有关。

c-Jun氨基末端激酶与首发精神分裂症患者认知功能及预后的相关性研究

目的探讨首发精神分裂症患者血清c-Jun氨基末端激酶(JNK)表达与认知功能及出院1年预后的相关性。方法对168例首发精神分裂症患者进行临床资料调查、认知功能评估和出院后随访。根据有无认知功能受损,168例患者被分为认知功能受损组65例和认知功能正常组103例。采用Pearson相关分析法分析患者血清JNK表达水平与认知功能[MATRICS共识认知成套测试(MCCB)得分]的相关性。采用Logistic回归分析探讨患者认知功能受损的影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清JNK表达水平等因素对患者认知功能受损的预测效能,采用Cox回归分析法对患者出院后1年的随访预后进行单因素和多因素分析。结果认知功能受损组血清JNK表达水平为(78.12±9.28)%,高于认知功能正常组的(59.38±6.17)%,差异有统计学意义(t=10.420,P<0.001)。首发精神分裂症患者血清JNK表达水平与MCCB得分呈显著负相关(r=-0.492,P<0.001)。血清JNK表达水平是首发精神分裂症患者认知功能受损的独立危险因素(OR=3.080,95%CI:1.864~12.157);血清JNK表达水平预测患者认知功能受损的曲线下面积(AUC)为0.756,最佳截断值为73.49,特异度为0.885,敏感度为0.913。出院后随访1年,高JNK水平患者的无病生存期短于低JNK水平患者,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析显示,年龄、睡眠障碍、抑郁、焦虑、血清JNK表达水平均为首发精神分裂症患者出院后随访预后不良的独立影响因素(P<0.05)。结论首发精神分裂症患者血清JNK表达水平与认知功能、出院1年预后存在相关性,临床医务人员应密切监测患者血清JNK表达水平。

基于c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路探讨阿魏酸钠对偏头痛大鼠炎症反应的抑制作用

目的 探讨阿魏酸钠(SF)通过调控JNK/p38 MAPK信号通路对偏头痛大鼠炎症反应的抑制作用。方法 腹腔注射硝酸甘油制备偏头痛大鼠模型,模型制作成功后随机分为模型组、SF低剂量(SF-L)组(50 mg/kg)、 SF高剂量(SF-H)组(100 mg/kg)、SF+JNK抑制剂(SF+SP600125)组(SF 100 mg/kg+SP600125 10 mg/kg)、 SF+JNK激活剂[SF+茴香霉素(AN)]组(SF 100 mg/kg+AN 5 mg/kg),每组12只,另取12只SD大鼠不做处理作为空白组。给药结束24 h后观察各组大鼠行为学变化,ELISA法检测血清中5-羟色胺(5-HT)、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平,TUNEL染色观察脑组织神经元凋亡情况,免疫组织化学法检测脑组织中TNF-α、 IL-6、降钙素基因相关肽(CGRP)表达,Western blotting法检测脑组织中JNK/p38 MAPK通路相关蛋白的表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠挠头次数以及爬笼次数明显增加,神经元凋亡率显著升高;血清5-HT含量显著降低,NO、TNF-α和IL-6水平显著升高;脑组织中TNF-α、IL-6和CGRP表达以及磷酸化JNK(p-JNK)/JNK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)/p38 MAPK比值均显著升高(均P<0.05)。与模型组比较,SF-L组、SF-H组大鼠挠头次数及爬笼次数显著减少,神经元凋亡率显著降低;血清中5-HT含量显著升高,NO、TNF-α和IL-6水平显著降低;脑组织中TNF-α、IL-6和CGRP表达以及p-JNK/JNK、p-p38 MAPK/p38 MAPK比值均显著降低(均P<0.05)。与SF-H组比较,SF+SP600125组能够显著增强SF对偏头痛大鼠的保护作用;SF+AN组能够显著逆转SF对偏头痛大鼠的保护作用。结论 SF可能通过抑制JNK/p38 MAPK信号通路的表达,有效抑制偏头痛大鼠神经源性炎症反应,减少神经元凋亡,实现对偏头痛大鼠的保护作用。

曲马多对坐骨神经痛大鼠脊髓c-jun、c-fos表达及星形胶质细胞活化的影响

目的 探究曲马多对坐骨神经痛大鼠脊髓组织中Jun原癌基因蛋白(c-jun)、fos原癌基因蛋白(c-fos)表达及对星形胶质细胞活化的影响。方法 采用腰椎间孔外口植入髓核法建立SD大鼠坐骨神经痛模型,随机分为模型组、曲马多低(10 mg/kg)、中(20 mg/kg)、高(30 mg/kg)剂量组、阳性对照组(吲哚美辛,7.5 mg/kg),每组10只,另设置假手术组10只(自体髓核不植入神经部位),于造模后3 d开始给药,1次/d。给药14 d后,观察大鼠一般行为活动;检测机械缩足痛敏阈值(PWT)及热辐射刺激缩爪反应潜伏期(PWL);酶联免疫吸附法(ELISA)检测疼痛标志物前列腺素(PG)E2、P物质(SP)水平;苏木素-伊红(HE)染色检测脊髓病理形态变化;免疫组化法检测脊髓星形胶质细胞活化标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达;Western印迹法检测脊髓c-fos、c-jun、活化蛋白(AP)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、一氧化氮合酶(iNOS)和环氧化酶(COX)-2表达。结果 与假手术组相比,模型组大鼠活动量降低并出现易激惹行为,神经纤维紊乱及坏死严重,PWT、PWL显著降低(P<0.05),血清PGE2、SP水平、脊髓GFAP、TNF-α、IL-1β、c-fos、c-jun、AP-1、iNOS、COX-2表达水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,曲马多各剂量组大鼠易激惹行为减少,神经纤维病理损伤减轻,PWT、PWL显著升高(P<0.05),血清PGE2、SP水平、脊髓组织GFAP、TNF-α、IL-1β、c-fos、c-jun、AP-1、iNOS、COX-2表达水平均显著降低(P<0.05);阳性对照组与曲马多高剂量组的上述各项指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 曲马多可通过抑制c-jun/c-fos通路激活,抑制星形胶质细胞活化,缓解坐骨神经痛模型大鼠神经炎症损伤及疼痛症状。

MicroRNA-21靶向PDCD4调控JNK/c-Jun信号通路促进胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探究MicroRNA-21 (miR-21)通过靶向PDCD4调控JNK/c-Jun信号通路对胶质瘤细胞的增殖和迁移的影响。方法 采用qRT-PCR和Western blot分别检测胶质瘤及瘤旁组织标本、人脑正常胶质细胞HEB、胶质瘤细胞U251、U87中miR-21和PDCD4的表达水平;将miR-21 inhibitor、inhibitor-NC、miR-21 mimics组、miR-NC组、PDCD4 siRNA、siRNA-NC分别转染至U87细胞中,记为miR-21 inhibitor组、inhibitor NC组、PDCD4 siRNA组和siRNA-NC组;将inhibitor-NC与siRNA-NC共转染至U87细胞,记为inhibitor NC+siRNA NC组;将miR-21 inhibitor分别与siRNA NC组和DCD4 siRNA组共转染,记为miR-21 inhibitor+siRNA-NC组、miR-21 inhibitor+PDCD4 siRNA组。采用qRT-PCR检测转染后细胞miR-21和PDCD4的表达;CCK-8检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告实验验证miR-21与PDCD4的靶向关系;Western blotting检测细胞p-JNK1/2、JNK1/2、p-cJun和c-Jun的蛋白表达量。结果 与癌旁组织和人脑正常胶质细胞HEB比较,miR-21在胶质瘤组织和U251、U87细胞中表达量显著升高(P<0.05),PDCD4表达水平显著降低(P<0.05);与Control组和miR-NC组比较,miR-21 inhibitor组miR-21表达和细胞增殖、迁移和侵袭能力显著降低(P<0.05),p-ERK1/2和p-c-Jun蛋白水平显著降低(P<0.05);与Control组和si-NC组比较,PDCD4 siRNA组PDCD4表达显著下降、细胞增殖、迁移和侵袭能力显著升高(P<0.05),p-ERK和p-c-Jun蛋白水平显著升高(P<0.05)。双荧光素报告实验结果表明,miR-21可调控PDCD4表达。此外,与Control组和miR-21 inhibitor+siRNA NC组比较,miR-21 inhibitor+PDCD4 siRNA组细胞PDCD4表达显著升高,细胞增殖、迁移和侵袭能力显著增加(P <0.05),p-ERK1/2和p-c-Jun蛋白水平显著升高(P <0.05)。结论 在胶质瘤细胞中,MicroRNA-21通过靶向PDCD4调控JNK/c-Jun信号通路影响细胞增殖、迁移和侵袭能力。

石菖蒲挥发油对炎性痛大鼠脊髓背角中胶质纤维酸性蛋白、c-Jun氨基末端蛋白激酶和肿瘤坏死因子α表达的影响

目的探讨石菖蒲挥发油(VOA)对炎性痛大鼠脊髓背角中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、c-Jun氨基末端蛋白激酶(JNK)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响。方法36只雄性SD大鼠随机分为:对照组(control)、假手术组(sham)、完全弗氏佐剂组(CFA)、5 g/(kg·d)低剂量VOA+CFA组(VOA-L+CFA)、10 g/(kg·d)中剂量VOA+CFA组(VOA-M+CFA)和20 g/(kg·d)高剂量VOA+CFA组(VOA-H+CFA),共6组,每组6只,于连续灌胃给药的第22天取材。利用免疫荧光染色和Western blotting技术检测各组大鼠脊髓背角中GFAP、JNK和TNF-α的表达情况。结果免疫荧光染色及Western blotting结果表明,与control和sham组相比,CFA组中大鼠脊髓背角中GFAP、JNK和TNF-α阳性表达均显著增多(P<0.01);与CFA组相比,不同剂量VOA处理组大鼠脊髓背角中GFAP、JNK和TNF-α阳性表达均减少,且VOA-H+CFA组大鼠脊髓背角中GFAP、JNK和TNF-α阳性表达减少更明显(P<0.05,P<0.01)。结论VOA可降低CFA诱导的炎性痛大鼠脊髓背角中GFAP、JNK和TNF-α的表达。

微小核糖核酸-146a、c-Jun氨基末端激酶在成人过敏性紫癜患者外周血单个核细胞中的水平及临床意义

目的探究微小核糖核酸(miR)-146a与c-Jun氨基末端激酶(JNK)在成人过敏性紫癜(HSP)患者外周血单个核细胞中的水平及临床意义。方法选取2020年1月至2022年12月开封市人民医院收治的50例成人HSP患者作为研究组(HSP组)。选取同期与HSP组性别、年龄组成相匹配,且于医院体检的健康成年人50例作为正常对照组(Normal组)。收集HSP组与Normal组人群外周血样本,检测两组外周血免疫球蛋白(Ig)A、IgG、IgM水平。分离外周血单个核细胞,通过实时荧光定量聚合酶链式反应检测HSP组与Normal组外周血单个核细胞中miR-146a、JNK表达情况,通过流式细胞术检测淋巴细胞亚群。通过相关性分析,探究miR-146a与JNK水平的相关性以及miR-146a、JNK与淋巴细胞亚群、IgA、IgG、IgM等免疫学指标的相关性。结果与Normal组相比,HSP组患者外周血单个核细胞中miR-146a水平降低,JNK水平升高(P<0.05),miR-146a水平与JNK水平呈负相关(P<0.05);HSP组IgA水平、CD8^(+)T细胞比率、Th2细胞比率、Th17细胞比率高于Normal组(P<0.05),CD4^(+)T细胞比率、Th1细胞比率、Treg细胞比率低于Normal组(P<0.05);HSP组患者外周血单个核细胞中miR-146a水平与IgA水平、CD8^(+)T细胞比率、Th2细胞比率、Th17细胞比率呈负相关(P<0.05),与CD4^(+)T细胞比率、Th1细胞比率、Treg细胞比率呈正相关(P<0.05)。JNK水平与CD4^(+)T细胞比率、Th1细胞比率、Treg细胞比率呈负相关(P<0.05),与IgA水平、CD8^(+)T细胞比率、Th2细胞比率、Th17细胞比率呈正相关(P<0.05)。结论miR-146a在成人HSP患者外周血单个核细胞中呈低表达,JNK呈高表达,二者呈负相关,两者可能通过相互作用,在HSP的发病中发挥重要作用。

绞股蓝总皂苷对全脑缺血再灌注大鼠海马区c-jun蛋白表达的抑制作用

目的探讨绞股蓝总皂苷(GP)对全脑缺血再灌注大鼠海马区c-jun蛋白表达的影响。方法用改良的Pulsinelli 4-血管阻断(4-VO)法制做大鼠急性全脑缺血再灌注损伤模型,分别按照再灌注6 h、24 h、72 h取材,应用免疫组织化学法标记各实验组大鼠脑组织海马区c-jun蛋白表达数量。结果与对照组比较,模型组Jun蛋白表达最高。各组海马区的Jun蛋白表达随着缺血再灌注时间的延长呈递减趋势(再灌注6 h>再灌注24 h>再灌注72 h)。再灌注6 h各实验组的Jun蛋白表达结果是:模型组>GP低剂量给药组>GP高剂量给药组。与模型组相比,绞股蓝总皂苷2个剂量组在不同灌注时间(6 h2、4 h、72 h)均具有显著的抑制JUN蛋白表达的作用。结论绞股蓝总皂苷可明显下调JUN蛋白的表达,具有抑制全脑脑缺血再灌注时神经细胞凋亡作用,从而改善受损的神经功能。GP对急性全脑缺血模型大鼠的脑损伤的预防保护有一定的剂量相关趋势。

豌豆蚜Jun蛋白的原核表达与抗体制备

对豌豆蚜Jun蛋白进行原核表达进而进行抗体制备,可为探究JNK通路对靶基因的调控机制奠定材料基础。本研究提取豌豆蚜的总RNA,经反转录、PCR扩增后进行原核表达与抗体制备,并用ELASA法测定其抗血清效价、Western-Blot法检测抗体特异性。结果表明:本文所构建的pET-28a-SUMO表达载体能在大肠杆菌体内成功表达出Jun蛋白,并通过免疫兔子成功制备了多克隆抗体,其抗血清效价良好、抗体特异性较好。本研究成功表达出豌豆蚜Jun蛋白,并成功制备出抗体,可用于下步试验,对进一步探究JNK通路对靶基因的调控机制具有重要意义。

前列地尔对局灶性脑缺血大鼠p-JNK及p-c-Jun表达的影响

目的探讨前列地尔对局灶性脑缺血大鼠大脑皮层磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)和磷酸化c-Jun(p-c-Jun)表达的影响。方法将30只健康大鼠随机分为假手术组(A组)、缺血对照组(B组)、前列地尔治疗组(C组)、阳性药物对照组(D组),其中C组又分为1.25、2.50、5.00μg/kg三个亚组,每组5只。采用大脑中动脉闭塞法制作局灶性脑缺血模型,大鼠清醒后行神经功能缺损评分;应用免疫组化法检测其大脑皮层缺血6 h后的p-JNK、p-c-Jun表达。结果 C、D组神经功能缺损评分明显低于B组(P均<0.05)。A组大脑皮层偶见p-JNK、p-c-Jun阳性细胞,B组可见大量阳性细胞;与B组比较,C组各亚组p-JNK、p-c-Jun阳性细胞数明显降低(P均<0.05)。结论前列地尔预处理对大鼠局灶性脑缺血有保护作用,其机制可能与抑制脑组织p-JNK、p-c-Jun表达有关。

JNK/c-jun在肝脏应激与损伤中的研究进展

C-jun是一种即早基因,其表达受到c-jun的N-末端激酶(JNK)的调控。C-jun和JNK信号通路作为创伤、应激、细胞增殖与凋亡相关的调节因子,参与调节多种肝脏应激与损伤的过程。本文对近年来c-jun和JNK信号通路在肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)导致的肝损伤、内质网应激、缺血再灌注损伤、药物性肝损伤、航空生理环境下肝脏应激损伤中的作用机制及其药物干预方面的研究进展作一综述。

绞股蓝总皂苷对c-jun在大鼠全脑缺血再灌注损伤后的齿状回和顶叶皮质的蛋白表达影响

【目的】探讨绞股蓝总皂苷(gypenosides,GP)对全脑缺血再灌注大鼠齿状回和皮层顶叶c-jun蛋白表达的影响。【方法】用改良的Pulsinelli4-血管阻断(4-VO)法制做大鼠急性全脑缺血再灌注损伤模型,分别按照再灌注6、24、72h取材,应用免疫组织化学法标记各实验组大鼠脑组织齿状回和皮层顶叶c-jun蛋白表达数量。【结果】与对照组比较,模型组JUN蛋白表达最高。各组齿状回和皮层顶叶的JUN蛋白表达随着缺血再灌注时间的延长逐渐减少(再灌注6h>再灌注24h>再灌注72h)。再灌注6h各实验组的JUN蛋白表达结果是:模型组>GP低剂量给药组>GP高剂量给药组。与模型组相比,绞股蓝总皂苷2个剂量组在不同灌注时间(6、24、72h)均具有显著的抑制JUN蛋白表达的作用。【结论】绞股蓝总皂苷可明显下调JUN蛋白的表达,具有抑制全脑血再灌注时神经细胞凋亡作用,从而改善受损的神经功能。GP对急性全脑缺血模型大鼠的脑损伤的预防保护有一定的剂量相关趋势,GP高剂量给药组保护效果好于GP低剂量给药组。

溶血磷脂酸对背根神经髓鞘相关基因Mag和髓鞘形成负性调节转录因子c-Jun表达的影响

目的探讨单次鞘内注射溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)对背根神经(dorsal root,DR)髓鞘相关基因Mag和髓鞘形成的负性调节转录因子c-Jun表达的影响以及其作用机制。方法实验1:鞘内注射LPA (1 nmol),在不同的时间点(1 h、3 h、1 d、2 d、3 d、7 d、14 d)行髓鞘相关基因Mag的实时荧光定量PCR(Real-time PCR)。实验2:鞘内注射LPA(1 nmol),在不同的时间点(1 h、3 h、6 h、24 h、3 d、5 d)行cJun、p-c-Jun的Western blot。实验3:预先30 min给予JNK抑制剂SP600125(0. 5μg)鞘内注射,再给LPA(1 nmol)鞘内注射,在不同的时间点(20、40、60、120、180 min)行c-Jun的Western blot。结果 (1)给予LPA后1 h髓鞘相关基因Mag的mRNA水平明显的降低,一直持续到注射后第7天,但第14天时不明显。(2)给予LPA(1 nmol)鞘内注射之后1 h,c-Jun明显升高,一直持续到第3天,但第5天不明显; p-c-Jun也在加LPA后1 h明显升高,但只持续到6 h,24 h不明显。(3)预先30 min给JNK抑制剂SP600125后,不能抑制DR c-Jun的升高。结论在给予LPA之后DR髓鞘相关基因Mag是下调的;在给予LPA之后髓鞘形成的负性调节转录因子c-Jun和p-c-Jun都是升高的,但c-Jun不是通过经典的JNK-c-Jun通路发挥作用。

c-Jun和c-Fos及其与人类肿瘤

Jun蛋白和Fos蛋白组成的二聚体复合物AP-1是细胞核内重要的转录因子,细胞的外界刺激信号从上游的信号通路传递至AP-1,并激活AP-1的功能,进而调节其下游一系列基因启动子区域含有AP-1结合位点靶基因的转录表达,使细胞对外界刺激作出适应性的反应。本文综述了jun和fos基因的结构及其与细胞增殖、分化、凋亡以及与肿瘤发生发展关系的研究进展。

C-jun基因与脑血管病及学习记忆

即早基因C-jun是病毒癌基因v-jun的细胞同源系列,它通过JUN蛋白的表达来实现功能。C-jun普遍存在于中枢神经细胞中,正常情况下表达水平很低。生理刺激下其表达在与刺激物有关的脑功能区是增多的。病理情况下C-jun在中枢神经系统中广泛表达,其表达及调控变化与脑缺血,脑出血及学习记忆的发生和发展相关。脑出血及脑缺血后C-jun基因均不同程度的增加,且有一定的时间依赖性,其表达及作用涉及多种机制;同时越来越多的研究显示C-jun参与学习记忆过程,并在其中起到重要的作用。现就C-jun基因在疾病中的表达情况做一综述。