金银花—大血藤治疗类风湿关节炎作用机制的网络药理学分析

目的分析金银花—大血藤药对治疗类风湿关节炎(RA)的机制。方法通过TCMSP、Genecards、OMIM、TTD等数据库获取金银花、大血藤药物作用及RA疾病靶点;基于Venny平台寻找药物靶点与疾病靶点交集;通过Cytoscape软件及VLOOKUP函数建立“药物—成分—关键靶点—疾病”网络;运用String数据库构建关键靶点的蛋白相互作用网络;对关键靶点进行GO分析和KEGG分析;将核心成分与核心靶点进行分子对接。结果金银花—大血藤药对靶点共323个,RA疾病靶点5093个,“药物—成分—关键靶点—疾病”网络中筛选出核心靶点PTGS1、PTGS2,核心成分包括丁香酚、大黄素、β-谷甾醇、熊果酸、山萘酚、木樨草素、三羟黄酮、槲皮素;金银花—大血藤药对主要通过AGE-RAGE信号通路、滑膜细胞凋亡信号通路、HIF-1信号通路、NF-κB信号通路、JAK-STAT信号通路及RAS信号通路等参与细胞对氮化合物的反应、淋巴细胞分化、生长因子调控、LPS诱导的炎症反应等过程的调控;分子对接结果显示,8个核心成分与2个核心靶点之间亲和作用较好。结论金银花—大血藤可能通过调节PTGS1、PTGS2表达从而减轻RA患者自身免疫紊乱导致的炎症反应。

银翘的本草考证

银翘是金银花和连翘的合称。两者都是清热解毒药物,相须为用起到协同作用,提高疗效。作者通过对历代古籍及权威药学专著的收集、整理、比较、分析,分别对连翘和金银花的名称、性味归经、功效主治以及用药部位进行考证,结果发现历代本草著作对连翘、金银花记载不尽相同。连翘早期名为异翘,性味由“苦、平”转为“味苦性寒或微寒”,用药部位由根部发展为全叶,具有消肿排脓、清热解毒、疏散风热的功效。忍冬为金银花早期用名,只采用茎叶作为用药部位到茎、叶、花均可入药,属“寒”性药物,具有清热解毒之功效。考证结果可为今后成方制剂开发及临床应用提供重要参考。

高效液相色谱法同时测定金银花口服液中6种成分含量

目的建立同时测定金银花口服液中新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、芦丁、异绿原酸B、异绿原酸C含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Shimadzu-GL C18柱(250 mm×4.6 mm,5µm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为320 nm,柱温为30℃,进样量为10µL。结果新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、芦丁、异绿原酸B、异绿原酸C的质量浓度分别在6.52~62.5µg/mL、15.48~154.8µg/mL、1.82~18.2µg/mL、2.62~26.2µg/mL、3.34~33.4µg/mL、2.18~21.8µg/mL范围内与峰面积线性关系良好(R2≥0.9993,n=6);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于3.0%;平均加样回收率分别为98.95%,101.37%,99.34%,97.85%,100.94%,98.95%,RSD分别为2.06%,1.91%,2.54%,1.58%,2.18%,1.66%(n=6)。3批样品中上述6种成分的含量分别为0.3502~0.3944 mg/mL、0.8513~0.9214 mg/mL、0.0349~0.0370 mg/mL、0.0837~0.1091 mg/mL、0.1079~0.1172 mg/mL、0.1264~0.1362 mg/mL。结论该方法操作简便、结果准确、专属性和重复性好,可用于同时测定金银花口服液中6种成分的含量。

金银花质量控制研究进展

金银花是大宗常用药材,常用于治疗风热感冒、温病发热等症,其质量决定了临床用药的安全性和有效性,是产业发展的关键所在。查阅近5年金银花质量控制领域的研究成果,归纳金银花性状、显微、薄层及DNA分子标记的鉴别依据,并梳理多种高效液相色谱、超高效液相色谱、质谱、光谱等多种检测平台及方法的创新及其对提升金银花质量的推动作用,全面总结了金银花质量控制体系。可为金银花质量控制与评价提供参考和依据,指导农业生产促进质量提升,助力金银花产业高质量发展。

基于网络药理学和分子对接探讨金银花口服液防治新型冠状病毒感染的作用机制

利用网络药理学和分子对接探讨金银花口服液防治新型冠状病毒感染的分子机制。通过中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)检索药物的化学成分,借助Swiss Target Prediction数据获取药物成分对应的相关靶点;在GeneCards、CTD、TTD、DrugBank数据库中检索疾病的相关靶点;利用Venny 2.1.0在线软件获取药物与疾病的共同靶点;由Cytoscape 3.8.2绘制药物-成分-靶点-疾病网络;String数据库构建蛋白互作网络;借助David数据库进行基因本体论(gene ontology,GO)功能富集和京都基因和基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析;运用AutoDock软件对成分和靶点进行分子对接验证。结果发现,金银花口服液中16个有效成分通过调控88个靶点和108条通路对新型冠状病毒感染产生作用,伞房花耳草素、金圣草素、木犀草素、亚油酸乙酯、山奈酚、槲皮素等成分可以通过AKT1、SRC、EGFR、HIF1A、PPARG、MMP9、ESR1、MAPK1、PTGS2、MMP2等关键靶点调控HIF-1、化学致癌-受体激活、内分泌抵抗、粘着斑、PI3K-Akt、VEGF、松弛素、ErbB、丙型肝炎、乙型肝炎、Rap1等信号通路来治疗新型冠状病毒感染。分子对接结果显示,靶点蛋白与活性成分具有较好的结合能力。结果表明,金银花口服液可以通过多成分、多靶点、多途径参与新型冠状病毒感染的防治,这为其临床应用及深入研究防治新型冠状病毒感染的机制提供了理论依据。

金银花提取物对茶碱在大鼠体内药代动力学的影响

目的研究金银花提取物对茶碱在大鼠中的药代动力学行为的影响。方法将12只雄性SD大鼠随机分至对照组(6只)和实验组(6只)。对照组大鼠和实验组大鼠分别于第1~7天灌胃给予溶媒(纯净水溶液)或金银花提取物(20 g·kg^(-1)),在第7天灌胃给予溶媒或金银花提取物后灌胃给予茶碱溶液(10 mg·kg^(-1))。分别于茶碱给药前和给药后不同时间点采集血样,采用HPLC-MS/MS方法测定茶碱的血药浓度,使用DAS 2.0药代动力学软件计算药动学参数,并采用SPSS 17.0软件进行统计学分析。结果对照组大鼠的平均茶碱C_(max)、AUC_(0-t)和AUC_(0-∞)分别为11557.0 ng·mL^(-1)、96153.7 ng·mL^(-1)·h^(-1)和105524.7 ng·mL^(-1)·h^(-1);实验组大鼠的平均茶碱C_(max)、AUC_(0-t)和AUC_(0-∞)分别为8718.0 ng·mL^(-1)、67905.2 ng·mL^(-1)·h^(-1)和72811.8 ng·mL^(-1)·h^(-1)。与对照组相比,实验组大鼠的茶碱暴露显著降低,C_(max)、AUC_(0-t)和AUC_(0-∞)分别是对照组的0.77(90%CI:0.64,0.90)、0.73(90%CI:0.58,0.88)和0.71(90%CI:0.57,0.86)倍(P<0.05);实验组大鼠的茶碱清除率明显高于对照组(0.14 L·h^(-1)·kg^(-1)vs.0.10 L·h^(-1)·kg^(-1))。结论金银花提取物可影响茶碱在大鼠体内的药代动力学行为,降低其体内暴露水平。

金银花和山银花9种抗炎成分对二甲苯耳肿胀模型小鼠体内的多成分药代动力学比较研究

目的比较金银花(LJF)和山银花(LF)体内整体多成分药代动力学(PPK)相似性或差异性,为临床用药提供参考。方法运用PPK模型及其总量统计矩相似性(TQSMS)方法比较LJF和LF中具有抗炎作用的9种成分(芦丁、咖啡酸、绿原酸、隐绿原酸、川续断皂苷乙、灰毡毛忍冬皂苷乙、异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C)整体PPK特征。54只无特定病原体级(SPF)昆明(KM)小鼠分为2组(n=27),每组根据不同测试时间点分为9个亚组(n=3)。随后口服给予LJF或LF并复制对二甲苯耳肿胀模型小鼠。通过超高效液相色谱/四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS/MS)测定血浆中9种成分浓度。由药物与统计(DAS)软件分析获得单成分药代动力学(PK)参数,并由自编Excel程序分析获得多成分整体PPK参数[总量统计矩(TQSM)参数和TQSMS]。结果LJF与LF单成分PK参数存在显著差异(P<0.05),而多成分TQSM参数无显著差异,包括总量零阶矩(AUCT0-t,AUCT0-∞)和总量一阶矩(MRTT0-t,MRTT0-∞)(P>0.05)。相应地,单成分TQSMS为0.2204–0.9689,而9种成分整体TQSMS为0.8284,表明LJF和LF生物利用的速度和程度没有显著差异。此外,TQSMS(0.8284)较大,表明LJF和LF 9种抗炎成分整体PPK特征在90%置信区间下相似。结论PPK模型及其TQSMS方法可能是比较多成分中药整体PPK相似性或差异性的一种合适且有效方法。本研究表明金银花和山银花临床治疗炎症时可替代使用。

基于网络药理学探讨“金银花-连翘”药对防治新型冠状病毒肺炎的作用机制

目的:利用网络药理学的技术和方法探索“金银花-连翘”(简称“银翘”)药对对防治新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)作用的活性成分及其作用机制。方法:通过中药系统药理学分析平台(traditional Chinese medicine system pharmacology,TCMSP)根据口服生物利用度(oral bioavailability,OB)和类药性(drug-likeness,DL)检索中药“金银花”“连翘”中的化学成分和作用靶点,并在人类基因数据库(genecards:the human gene database)数据库中寻找“novel coronavirus pneumonia”的相关靶点,将“银翘”药对作用靶点与COVID-19相关靶点进行映射分析,筛选“银翘”药对防治COVID-19的活性成分和作用靶点。并用Cytoscape 3.7.2软件建立“中药活性成分-作用靶点-疾病”网络、通过STRING平台构建蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络、通过DAVID分析平台,对靶点基因GO富集分析和KEGG代谢通路进行分析,探究“银翘”药对防治COVID-19的作用机制。结果:从“金银花”中筛选化合物23个,“连翘”中化合物23个,二者有效作用靶点204个,通过Venn图获得与COVID-19有关的作用靶点44个,PPI网络发现IL-6、IL-1B、MAPK1、MAPK8、CXCL8、RELA、CCL2、IL10、ICAM1、IL-2、PTGS2、CASP3、MAPK14、STAT1、EGFR、FOS、IL-4等可能是“银翘”药对防治COVID-19的作用靶点。GO功能分析发现79个条目,涉及转录因子活性、受体活性、细胞因子活性、酶活性及生物合成过程的调控等方面。KEGG通路分析发现44个疾病药物交集靶点显著富集在146条通路上(P<0.01),涉及炎症、免疫、凋亡、自噬、激素代谢、肿瘤等方面,通路包括糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、IL-17信号通路、TNF信号通路、Toll样受体信号通路、C型凝集素受体信号通路、HIF-1信号通路、NF-κB信号通路、NOD样受体信号通路等经典信号通路,此外还参与细菌或病毒感染通路,如甲型流感、丙肝、百日咳、结核、巨细胞病毒感染、EB病毒感染等。这些作用通路可能是“银翘”药对防治COVID-19的依据。结论:初步验证了“银翘”药对防治COVID-19的作用机制,“银翘”药对相须配伍具有多个活性成分,能通过多个靶点、多个通路以发挥抗病毒、抑菌抗炎、调节免疫作用来防治COVID-19。

金银花多糖的提取、分离纯化、结构特征和生物活性研究进展

金银花Lonicera japonica Thunb.作为我国传统药食两用的中药之一,具有清热解毒、凉风散热的功效。金银花富含多糖、黄酮类、有机酸类、挥发油类、环烯醚萜类等多种活性成分,多糖作为其主要的活性成分,具有抗病毒、抗氧化、抗炎、降血脂、降血糖、抗肿瘤等多种生物活性。不同提取方法会影响金银花多糖的得率,而多糖结构的不同使其具有不同的生物活性。因此对金银花多糖的提取、分离纯化、结构特征及生物活性进行了综述,为金银花多糖理化性质的进一步研究及应用提供有益参考。

探讨药对金银花-连翘干预痤疮的网络药理学机制

目的:基于网络药理学原理探讨药对金银花-连翘干预痤疮的分子通路及作用机制。方法:应用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索金银花、连翘化学成分、作用靶点;通过GeneCards数据库获取痤疮差异性靶点基因,预测中药中痤疮相关的作用靶点;通过STRING平台构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,构建“中药-成分-关键靶标-主要通路”的可视化网络图。运用DAVID数据库对筛选出的靶点基因进行基因富集分析,从而获得基因本体论(GO)生物功能及京都基因和基因组百科全书(KEGG)信号通路注释结果,进而探究中药干预痤疮的分子作用机制。结果:药对金银花-连翘干预痤疮共预测得到活性成分29个,涉及核心靶点基因97个、GO生物功能103个、KEGG信号通路119个。结论:药对金银花-连翘主要活性成分通过多靶点、多通路干预痤疮,主要涉及核受体的活性、转录因子活性等功能,以及白细胞介素(Interleukin,IL)-17信号通路、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)信号通路和磷脂酰肌醇3激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt Serine/Threonine Kinase,Akt)等信号通路。

金银花解热作用及机制的实验研究

目的探讨金银花的解热作用及中枢电生理解热机制。方法复制IL-1β性发热新西兰兔模型,观察金银花的解热作用,并应用微电极细胞外放电记录技术观察金银花对IL-1β作用下POAH温度敏感神经元放电频率的影响。结果金银花对IL-1β性发热有解热作用;金银花能增加IL-1β作用下热敏神经元的放电频率,而减少IL-1β作用下冷敏神经元的放电频率。结论逆转IL-1β引起的温度敏感神经元放电频率的改变,可能是金银花起解热作用的机制之一。

金银花中酚酸类和黄酮类成分的黄嘌呤氧化酶抑制活性

建立基于紫外分光光度原理的微孔板筛选方法,用于金银花药材中黄嘌呤氧化酶抑制剂的筛选,并进行抑制活性测定。通过对筛选条件优化,建立了可靠的筛选模型,并对从金银花中分离得到的20个单体化合物进行了筛选,发现8个酚酸类成分和4个黄酮类成分具有黄嘌呤氧化酶抑制活性,其中3,4-二咖啡酰奎宁酸甲酯、槲皮素和木犀草素有很好的活性,其IC50分别为8.36,6.46和2.08μmol/L。筛选结果表明,金银花中黄酮苷元的活性优于黄酮苷,双咖啡酰奎宁酸的活性明显优于单咖啡酰奎宁酸类成分,双咖啡酰奎宁酸甲酯的活性明显优于双咖啡酰奎宁酸,且双咖啡酰奎宁酸的5位取代对化合物的活性贡献最大。

金银花对发热新西兰兔解热作用机制的研究

目的探讨金银花解热作用的中枢机制,为其在临床应用提供实验依据。方法用白细胞介素-1β(IL-1β)复制新西兰兔发热模型,在观察金银花解热作用的基础上,应用免疫组化技术检测静脉注射金银花对IL-1β作用下新西兰兔视前区-下丘脑前部(preoptic anterior hypothalamus,POAH)组织中前列腺素受体EP3(E-type prostaglandin receptorEP3)表达的影响。结果金银花静脉注射后对正常新西兰兔结肠温度没有明显影响,与生理盐水组相比,最大体温上升高度(△T)及1 h体温反应指数(TRI1)两组间无统计学意义(P>0.05);IL-1β组在静脉注射IL-1β后,结肠温度逐渐升高,△T及TRI1与生理盐水组比较,有统计学意义(P<0.01);而金银花+IL-1β组结肠温度上升峰值明显低于IL-1β组,两组△T及TRI1有显著性差异(P<0.05)。新西兰兔POAHEP3在生理状态下仅有少量表达;静脉注射IL-1β诱导实验动物发热时,EP3表达明显增强(P<0.01);而金银花能减少IL-1β引起的EP3表达(P<0.05)。结论金银花对IL-1β性发热新西兰兔的解热作用机制可能与其抑制视前区-下丘脑前部EP3的表达有关。

金银花配方颗粒评价性抽验结果分析与建议

目的:通过开展金银花配方颗粒评价性抽验,比较分析不同厂家金银花配方颗粒的质量情况,并提出监管建议。方法:收集各企业金银花配方颗粒质量标准,依据企业标准进行法定检验。结果:共抽验117批金银花配方颗粒,涉及9家生产企业。按各自企业标准进行检验,总体合格率为100%。但是各企业之间金银花配方颗粒含量差异较大且每克颗粒相当的药材(饮片)量不同,转移率不同。结论:通过本次抽验发现金银花配方颗粒的整体质量较高,但是不同厂家之间所用原料药材及生产工艺存在一定差异,导致最终产品质量参差不齐。因此,有必要规范中药配方颗粒生产工艺,尽快统一标准,加强监管。

清热解毒经典药对金银花-连翘干预新型冠状病毒肺炎分子机制及相须配伍实质

目的运用网络药理学方法探讨清热解毒经典药对金银花-连翘干预新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的作用机制,并藉此阐释该药对相须配伍的实质。方法利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选金银花-连翘药对中的活性成分并收集成分相关靶点,将获得的成分靶点与GeneCards数据库中检索到的新型冠状病毒肺炎疾病靶点进行映射,获得金银花-连翘干预COVID-19的作用靶点,利用Cytoscape软件构建“药对-活性成分-干预COVID-19的靶点”网络。得到的靶点利用STRING数据库构建蛋白互作网络并通过CytoHubba筛选关键靶点,在OmicShare在线云平台对靶点进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,预测其干预COVID-19的作用机制。结果共筛选到32个活性成分,成分相关靶点235个,COVID-19疾病靶点259个,药对-疾病的共同靶点49个。网络拓扑学分析表明,药对干预COVID-19的潜在关键活性成分有槲皮素、木犀草素、山柰酚、β-谷甾醇、汉黄芩素、5-羟基-7-甲氧基-2-(3,4,5)-三甲氧苯基色原酮,其中前4个是药对的共有成分。提取到的关键靶点为TNF、IL6、MAPK1、MAPK8、PTGS2、MAPK14、CXCL8、IL1B、TP53、HMOX1等。GO功能富集分析获得531个生物过程,主要为细胞因子介导的信号通路、细胞对细胞因子刺激的反应、外源性凋亡信号通路负调节、炎性反应等生物学过程;KEGG富集分析获得146条信号通路,主要为癌症通路、糖尿病并发症的晚期糖基化终产物及其受体信号通路、乙型肝炎、肺结核等信号通路。分子对接结果表明,筛选出的6个关键活性成分与SARS-CoV-23CL水解酶有较好的亲和作用。结论金银花-连翘药对通过多个信号通路发挥抗感染、抗炎及免疫调节等作用来干预COVID-19,共有的多个黄酮和植物甾醇类活性成分且对应丰富的COVID-19疾病靶点是金银花-连翘相须配伍成药对的关键。

清开灵注射液中金银花液生产工艺多元统计过程监控研究

以清开灵注射液为代表的中药注射剂正面临着安全性问题的严峻挑战,清开灵注射液生产工艺复杂、周期长,整个工艺过程缺乏严密完善的监控手段,因而无法确保制剂质量的均一稳定,进而影响制剂的安全性。因此,本文从加强清开灵注射液生产工艺过程监控的角度出发,以金银花液生产过程为载体,研究先进控制策略——多元统计过程监控(MSPM)在中药生产工艺中的应用。该方法采用PCA将金银花液生产过程中的40个过程参数投影到主成分代表的空间,在合理选择主元数目的基础上建立主元得分图、SPE图和Hotelling T2图,用于生产过程的监控,并提供控制限。同时在此基础上研究了通过贡献图进行过程故障诊断的方法。从制剂生产过程监控角度出发,该研究结果将为降低中药注射剂安全性风险提供切实可行的思路。

牙周中药固齿缓释剂的研制—主要成分的质量测定

目的 固齿缓释剂中主要成分的质量测定。方法 采用液相色谱系统检测固齿缓释剂中丹参、金银花的含量。结果 固齿缓释剂中丹参、金银花的含量在实验浓度范围内 ,呈良好的线性关系。结论 固齿缓释剂用于治疗牙周炎有抗炎。

重庆金银花类中药的种类与分布

目的查清重庆金银花类中药资源状况。方法产地和市场调查、标本查阅与分类鉴定研究。结果明确了重庆金银花类中药共10种3变种的分布及药用情况。结论有助于重庆金银花类中药资源的利用和深入研究。

金银花及其提取物指纹图谱研究

目的:研究建立金银花及金银花提取物指纹图谱检测标准。方法:以绿原酸为参照物,甲醇-0.4％磷酸溶液(38:62)为流动相,应用液相色谱在波长325nm下,分别检测各批样品的指纹图。结果:药材、提取物均有6个共有峰,共有峰的参数符合“中药注射剂指纹图谱技术要求”的有关规定。结论:方法准确,重复性好,建立的指纹图谱检测标准,可作为金银花及其提取物质量评价与品种鉴别的重要依据之一。

金银花露本草考证

对本草记载的“露”“药露”“金银花露”进行系统考证。“金银花露”又名银花露、金银露、忍冬花露,归类为“药露”,由金银花鲜品或干品蒸馏而来,最早见于明朝《医学穷源集》,临床应用盛于清朝,既可单方,亦可复方配伍,因其“气芬郁而味甘,能开胃宽中、解毒消火”,用于治疗肺热津伤、胃热、舌疔及疮痘、小儿胎毒等热毒证,临床疗效显著。考证结果对于深入探究金银花的药效物质,提升和完善金银花药材质量标准,提高金银花相关产品临床治疗效果,具有重要的参考价值。