Kir6.2基因两位点多态性与胰岛B细胞功能指数和胰岛素敏感性指数的相关研究

钾离子内向整流器(Kir6.2)和磺脲类受体(SUR)共同组成ATP敏感的钾通道复合体.在胰岛素分泌和作用过程中,ATP敏感钾通道均发挥着十分重要的作用[1,2].Kir6.2和SUR编码基因同位于11q15,1,Kir 6.2位于SUR下游4.5 Kb,仅有一个外显子,无内含子,全长1173 bp.在Caucasian人群中研究发现的错义突变位点有E10K、E23K、L270V和I337V,此外,还发现两个寂静突变[3].本研究即观察Kir6.2基因上E23K和I337V两位点的多态性是否对正常糖耐量人群空腹胰岛素水平,胰岛B细胞分泌功能以及胰岛素敏感性构成影响.

Kir6.2基因E23K位点多态性与耐力训练后血糖、胰岛素和VO_2max改变的关系

目的:探讨Kir6.2基因E23K位点多态性与耐力训练所致的血糖、胰岛素和VO2max改变间的关系。方法:采用PCR-RFLP技术对214例美国各种族50至75岁男女受试者的Kir6.2位点E23K多态性进行基因型分析。受试者在专人监控下进行24周的耐力训练后,观察其E23K与血糖、胰岛素和VO2max之间的关系。结果:(1)三种基因型受试者的空腹血糖、胰岛素和VO2max的基础值无显著差异;(2)24周耐力训练后,三种基因型受试者的VO2max均显著升高(P<0.05),体重和体脂则显著下降(P<0.05),身高体重指数(BMI)和呼吸商(RER)则在男性各基因型中显著下降(P<0.05);(3)24周耐力训练后,三种基因型受试者的空腹胰岛素水平和曲线下面积(AUC)均显著下降(P<0.05),但训练并未引起空腹血糖及其AUC显著变化。(4)男性EK基因型RER显著低于EE和KK基因型,女性则表现为KK基因型显著高于EE基因型。结论:(1)无论E23K位点的基因型为EE、EK或KK,24周的耐力训练均可提高受试者的VO2max并降低体重、体脂、空腹胰岛素水平和AUC;(2)耐力训练对男性BMI和RER降低的影响更显著;(3)E23K多态性与RER的关系较VO2max和血糖水平更密切。

扩张型心肌病患者Kir6.2基因中E23K和I337V多态性与室性心律失常的关系

目的研究扩张型心肌病(DCM)患者三磷酸腺苷敏感性钾通道(KATP)上两个多态性位点(E23K和I337V)与室性心律失常之间的关系。方法选取DCM患者41例,常规12导联心电图及24h动态心电图记录心电资料,并按照室性心律失常评分法进行评分;同时采用聚合酶链反应(PCR)等分子生物学技术,对41例患者KATP上的亚单位Kir6.2进行扩增测序。结果发现E23K突变组和无突变组室性心律失常评分分别是2.71±0.272,1.82±0.431(P<0.05);I337V突变组和无突变组室性心律失常评分分别是2.58±0.273,1.93±0.473(P>0.05)。结论在DCM患者中,E23K多态性与室性心律失常相关,I337V多态性与室性心律失常无明显的相关性。

Kir6.2基因多态性与2型糖尿病、胰岛B细胞功能指数、胰岛素敏感性指数的相关研究

目的 探讨钾离子内向整流通道 (Kir6 2 )基因上E2 3K和I337V两个位点的多态性与 2型糖尿病、血浆空腹胰岛素、胰岛B细胞功能指数以及胰岛素敏感性指数的关系。方法 采用PCR 限制性片段长度多态性 (RFLP)的方法 ,对 2 75例 2型糖尿病 (2DM )患者 ,4 0名糖耐量异常 (IGT)和 10 6名糖耐量正常对照者的Kir6 2两位点E2 3K和I337V进行基因型分析 ,了解本地区汉族人群有无这两个位点的多态性 ,比较各组基因型频率和等位基因频率有无异同 ,并在 10 6例正常人中比较不同基因型之间 ,空腹血浆胰岛素、胰岛B细胞功能指数以及胰岛素敏感性指数有无不同。结果 发现Kir6 2基因E2 3K和I337V两位点的多态 ;2DM组、IGT组和正常组之间Kir6 2位点E2 3K基因型频率和等位基因频率无差别 (组间比较、两两比较P值均 >0 0 5) ,而 2DM组Kir6 2位点I337V带V的基因型频率稍高于正常对照组 (0 75/0 6 3) ,但统计学结果无显著性差异 (P =0 0 52 ) ;不同基因型之间 ,空腹血浆胰岛素、胰岛B细胞功能指数以及胰岛素敏感性指数也没有差异 (组间比较、两两比较P值均 >0 0 5)。结论 安徽地区汉族人群Kir6 2基因存在E2 3K和I337V两位点的多态性 ,而且该人群中E2 3K位点等位基因K频率高于文献报道Caucasian人群 ;

SUR1和Kir6.2基因多态性与磺脲类药物继发性失效的相关性研究进展

磺脲类降糖药长期应用会导致继发性失效的发生,而ATP敏感性K+通道亚基的SUR1和Kir6.2基因多态性与其继发性失效存在一定相关性。现就目前SUR1和Kir6.2基因多态性与磺脲类药物继发性失效的相关性研究作一简要综述。

深圳汉族Kir6.2基因与2型糖尿病关系的病例-对照研究

目的研究深圳汉族人群钾离子内向整流通道Kir6.2基因多态性与胰岛素抵抗(IR)特征和2型糖尿病(T2DM)的关系。方法运用聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术对深圳市251例T2DM患者和170例非DM对照(NGT)人群的Kir6.2基因第一外显子E23K多态性进行分析,并对T2DM组不同基因型间临床及生化指标进行比较。结果 T2DM组与非DM对照组比较,Kir6.2基因型频率和等位基因频率分布差别均无统计学意义;T2DM组携带K等位基因者空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及空腹血C肽(CP)水平显著高于携带E等位基因者(P<0.05)。结论深圳市汉族人群Kir6.2基因E23K多态性与2型DM患者胰岛素抵抗表型相关,但与T2DM的发生无明显关联。

大鼠Kir6.2基因真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达

目的克隆Kir6.2基因,构建真核表达载体pcDNA3.0/Kir6.2,将重组质粒转染HEK293细胞获得高表达Kir6.2基因的细胞克隆。方法从SD大鼠脑组织中提取总RNA,采用RT-PCR方法获得Kir6.2基因的全长cDNA,插入T1-simple克隆载体中进行序列测定,测序正确后将其亚克隆至表达载体pcDNA3.0,利用脂质体将重组质粒转染HEK293细胞,经G418筛选获得抗性细胞克隆,采用RT-PCR和Western blot方法,鉴定Kir6.2基因在HEK293细胞中的过表达。结果经PCR和DNA序列测定证实,目的基因已插入重组质粒,RT-PCR和West-ern blot证明,经G418筛选得到的转基因HEK293细胞克隆中存在Kir6.2基因的表达。结论成功构建Kir6.2基因的真核表达载体,获得稳定表达Kir6.2基因的HEK293细胞克隆。

应用Kir6．2基因敲除鼠研究KATP通道与帕金森病的相关性

目的：阐明ATP敏感性钾通道（KATP）与帕金森病（PD）发生的相关性。方法：应用Kir6．2^-/-小鼠，建立MPTP单次毒性模型和慢性PD小鼠模型，并给予KATP开放剂埃塔卡林（IPT）、二氮嗪（Dia）和克罗卡林（Cro）观察其作用效果。通过对小鼠自主活动和爬竿行为的观察评价行为学改变，应用高效液相色谱法测定纹状体单胺类神经递质含量评价神经生化改变，应用免疫组织化学法观察TH阳性DA能神经元、

胰岛β细胞基因突变致低血糖伴高血糖综合征的临床识别及处理

自1981年Aynsley-Gren等首次报道PHHI以来，后续学者对其遗传背景做了大量和深入的研究，清楚一些，还有相当一些还不算清楚。PHHI至今还是一种极少见的遗传性疾病，使胰岛β细胞持续不适当分泌胰岛素是PHHI的病理生理基础。

mitoK_(ATP)通道经FOXO1-PGC1α通路调节后负荷过载小鼠心肌线粒体的代谢功能

目的:通过ATP依赖的钾离子通道(KATP)亚基-Kir6.2基因敲除小鼠(Kir6.2KO)模型,研究线粒体ATP敏感钾离子通道mitoKATP对心肌线粒体和代谢酶的调控机制。方法:分别将野生型小鼠(WT平行对照组)和Kir6.2KO小鼠(实验组)分为假手术、主动脉横断缩窄(TAC)2周和4周各3个亚组。检测并比较各组心功能、心肌能量代谢酶基因表达水平、信号转导通路中叉头框O1(FOXO1)和转录因子PGC1α水平、线粒体比面积和嵴间距。结果:与平行WT组相比较,TAC前Kir6.2KO小鼠心肌PGC1α表达水平有所降低、FOXO1略提高,能量代谢酶中链乙酰辅酶A脱氢酶(MCAD)、肉碱软脂酰基转移酶1(CPT1)和细胞色素C氧化酶亚单位III(COXIII)明显负表达,线粒体比面积和线粒体嵴间距有所增加(8.45%和3.11%),表现为有氧代谢能力降低,线粒体代偿增生。TAC后2周时,Kir6.2KO组的心肌线粒体比面积没有变化(8.75%vs0.14%),而嵴间距增加幅度低于WT组(18.27%vs11.65%),线粒体失代偿。TAC后4周时,Kir6.2KO组FOXO1和PGC1α的蛋白或mRNA水平均显著降低,下游能量代谢酶mRNA和蛋白显著负调表达,心肌线粒体比面积降低幅度更大(-8.45%vs-23.6%),嵴间距变化与WT组相同(6.60%vs7.17%),心功能障碍更为明显,有氧代谢功能衰竭。结论:阻断mitoKATP降低了心肌线粒体对负荷增加时的增生和正调能量代谢酶的反应能力,这与FOXO1-PGC1α信号通路的弱化有关。说明mitoKATP通过FOXO1-PGC1α信号通路调节负荷过载小鼠心肌线粒体增殖和能量代谢功能。

1型儿童糖尿病的诊断与治疗

儿童糖尿病以往多指<15岁发生的糖尿病,由于WHO(世界卫生组织)已将儿童定义为0～18岁,因此儿童糖尿病应指<18岁发生的糖尿病。儿童糖尿病比成人糖尿病重,起病也较急,不易早期发现,起病时常伴有酮症酸中毒。儿童糖尿病病程长,可影响儿童的生长发育。近年来,糖尿病发病逐渐趋于低龄化,儿童及青少年的发病率明显上升,尤其是肥胖儿童。儿童及青少年糖尿病主要有以下类型:①1型糖尿病:为免疫介导性和特发性;②2型糖尿病;③年轻的成年发病型糖尿病(MODY):分子生物学检查可见一系列特定的基因缺陷,为常染色体显性遗传;④其他类型糖尿病:包括胰高糖素瘤、嗜铬细胞瘤、生长抑素瘤以及药物或化学制剂所致的糖尿病。在新生儿发生的糖尿病中部分(30%～58%)是胰岛β细胞的磺脲类受体Kir6.2基因突变引起的,此类病人罕见。在我国,目前儿童及青少年糖尿病仍以1型为主,但2型糖尿病有明显地上升趋势。有时区分儿童和青少年糖尿病的类型很困难,当患儿貌似2型糖尿病时,仍应注意有1型糖尿病或其他类型糖尿病的可能。有条件的单位应进一步测定β细胞自身抗体和C肽释放水平,并经过一段时间对治疗方法和疗效的随访,有助于分型诊断。目前认为,在遗传易感性的基础上,外界环境因素(可能包括病毒感染)引发机体自身免疫功能紊乱,导致胰岛β细胞的损伤和破坏,胰岛素分泌绝对不足,引发糖尿病。我国儿童1型糖尿病的发病率约为0.6/10万,属低发病区,但由于我国人口基数大,故1型糖尿病患者的绝对数已经≥100万。

Kir．2基因E23K多态性与冠心病的相关研究

武汉大学中南医院检验科郑芳教授等在中国汉族人群Kir6．2基因E23K多态性与冠心病的相关性研究中发现Kir．2基因的变异与冠心病之间存在一定的相关性，影响冠心病的早期诊断和治疗。