MALDI—TOF质谱仪关键技术及进展

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪是当前研究蛋白质组不可缺少的质谱仪,已经得到广泛的应用,本文对这种仪器的结构原理、构造特点、关键技术和最新进展等作简要介绍。

MALDI-TOF-MS在耐碳青霉烯肠杆菌多黏菌素B快速药敏试验中的应用

目的构建一种耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)多黏菌素B的快速药敏试验方法,为临床抗生素的选择和精准调整提供依据。方法采用WHONET 5.6软件对分离自西安市第一医院2023年3月至2024年3月的108株CRE菌株信息进行筛选,以肉汤稀释法为参比方法,采用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)进行多黏菌素B快速药敏测定。结果108株CRE分离株以肺炎克雷伯菌为主(48.14%),其次是产气肠杆菌和奇异变形杆菌(各占13.89%)。标本来源以痰液为主(65.74%),其次尿液(18.52%)和血液(8.33%)。临床科室分布以神经外科为主(48.15%),其次为重症医学科(18.52%)和呼吸内科(14.81%)。CRE分离株对大部分药物呈现高度耐药,对常见β内酰胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类、β内酰胺复合药物耐药率分别超过70%,80%,50%和75%。与肉汤稀释法相比,MALDI-TOF-MS法测定CRE对多黏菌素B药敏结果的分类一致率(CA)为98.1%,重大误差(ME)为1.85%,未出现非常重大误差(VME),均在可允许范围之内。结论本院分离的CRE对多种抗菌药物广泛耐药,基于MALDI-TOF-MS的快速药敏试验方法准确可靠,可用来评价CRE对多黏菌素B的敏感性,便于临床及时调整泛耐药细菌治疗方案。

MALDI-TOFMS在尿液中直接鉴定病原体准确性的Meta分析

目的:本研究旨在评估基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)与传统方法相比较从尿液样本中直接鉴定病原体的诊断性能。方法:检索Cochrane Library Medline、Embase、Pubmed、万方数据库、维普中国科技期刊数据库、中国生物医学文献数据库、中国知网数据库等有关MALDI-TOFMS用于直接从尿液中鉴定病原体的文献。采用MetaDisc1.4软件和STATA12.0进行系统评价。评价指标为总体灵敏度、特异性、阳性似然比、阴性似然比、诊断优势比以及受试者工作特征曲线下面积。结果:本研究在检索选择后最终纳入11篇文章。总体灵敏度为0.87(95%CI0.86-0.88),总体特异性为0.97(95%CI0.96-0.98)。阳性似然比、阴性似然比分别为30.56(95%CI9.42-99.13)和0.17(95%CI0.12-0.23)。受试者工作特征曲线下面积为0.9365。敏感性分析表明,该Meta分析的结果是稳定的。结论:MALDI-TOFMS提供了一种可靠的直接鉴定病原体的方法,可以直接从尿液样本中识别微生物,具有高灵敏度和特异性。

MALDI-TOF MS法快速鉴定散装即食食品中3种食源性致病菌

本研究旨在利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)快速检测并鉴定散装即食食品中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌3种食源性致病菌。通过对点样方式、前处理方式、不同培养基及培养时间等各项实验条件的优化筛选确定最佳方法,并考察其检测限和稳定性,同时用所建立的方法与多重PCR法、VITEK 2等生化鉴定法进行结果比对,比较三者鉴定结果的一致性,最后进行批量食品样本检测来探寻MALDI-TOF MS鉴定法在散装即食食品中的适用性。结果表明,三种目标菌同一批次及不同传代次数的鉴定得分均大于95%,变异系数均小于2%,所建立的方法重复性和稳定性良好,且检测限为10^(5)CFU/mL,MALDI-TOF MS菌株鉴定结果与多重PCR法、生化鉴定法结果高度一致,且比二者检测用时更短,更加特异高效;在点样方式上,相较于夹心法与混合干滴法,三种覆盖法点样平均鉴定得分更高,均为99.9%,其中1μL+1μL覆盖法点样可获得的平均峰数目更多,特征峰更复杂且强度更高;而在前处理方式上,甲酸乙腈法与其他两种菌体处理方法相比可获得更多的出峰量和更高的峰强度,平均鉴定得分均在98%以上,且与数据库中图谱匹配度更高。综上所述,MALDI-TOF MS法在致病菌鉴定方面不仅灵敏特异、准确快速,且操作简便、结果直观,作为国标法的有力补充,为食源性致病菌的分析鉴定与分型溯源提供了新思路。

NMR、GPC和MALDI-TOF应用于聚乙二醇单甲醚的教学实验

将核磁共振(NMR)、凝胶渗透色谱(GPC)和基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)三种高级分析技术整合到本科《高分子材料研究方法》课程的实验教学中。通过分析聚乙二醇单甲醚样品,学生深入学习了高分子结构和分子量的表征方法,熟悉了这三种仪器的操作和原理。本实验显著提升了课程内容的深度和广度,激发了学生的学习兴趣,并且增强了学生的实践操作能力和创新思维。综合应用这些分析技术,使学生在高分子材料的研究中获得了更全面的理解和技能的提升。

MALDI-TOF MS在鲍曼不动杆菌同源性分析中的临床应用评估

目的评估基质辅助激光解析电离飞行质谱(MALDI-TOF MS)分析鲍曼不动杆菌(AB)同源性的临床应用价值。方法剔除同一患者或环境多次送检标本中的重复菌株,收集某三甲综合医院2020年5月—2021年2月神经内科重症监护病房(ICU)住院患者痰标本及环境标本分离的46株AB,使用VITEK-MS质谱仪检测菌株,应用SARAMIS Premium软件进行聚类分析,并采用多位点序列分型(MLST)的方法进行验证。结果通过MALDI-TOF MS和MLST聚类分析和比较,46株AB中,39株为MALDI-TOF MS的MS-a型,其中,22株为MLST的MT-A簇,包括ST208型3株,ST540型3株,ST195型8株,ST369型5株,以及ST136、ST436、ST1893型各1株;16株为MT-B簇,包括ST381型4株、ST469型11株和ST938型1株;1株为MT-C簇(ST1821);MS-b型1株为ST381;MS-c型2株为ST369;MS-d型1株为ST195;MS-e型2株分别为ST540、ST369;MS-f型1株为STN1。结论作为AB同源性分析工具,MALDI-TOF MS具有一定的局限性,其菌株同源性分析结果与MLST结果一致性低,分辨特异性低,不可取代MLST技术。

基于MALDI-TOF MS定量快速药敏试验在肺炎克雷伯菌对亚胺培南和替加环素药敏试验中的适用性分析

目的:探讨基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF MS)的定量快速药敏试验(rAST)在肺炎克雷伯菌(KP)对亚胺培南(IPM)和替加环素(TGC)药敏试验中的实用性分析。方法:选取天津医科大学总医院2018年1月至2021年6月120株临床非重复KP,应用微量肉汤稀释法(BMD)检测其对IPM和TGC的最低抑菌浓度(MIC)值。采用优化甲酸提取法提取KP菌体蛋白,进行基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法的快速药敏试验[(MALDI-TOF MS)-based rAST]检测IPM和TGC的MIC值,并评估最佳的菌液稀释度和孵育时间。采用Cohen′s kappa统计来评估(MALDI-TOF MS)-based rAST法和标准参考BMD的一致性。结果:在不同的孵育时间,上述两种方法处理后的质谱均能成功鉴定KP(P>0.05);但优化后的甲酸提取法简化了操作流程,并且在菌量较低情况下的成功鉴定率高于常规方案。稀释25倍即菌液含量为6×10^(6) CFU/mL、孵育时间分别为2 h和3 h条件下,(MALDI-TOF MS)-based rAST法测得IPM(P<0.01)和TGC(P<0.001)的MIC值效果最佳;此条件下,(MALDI-TOF MS)-based rAST与BMD测得的MIC值相当,分别为IPM 70.83%(85/120)、TGC 66.67%(40/60),基本一致性(EA)分别为98.33%(118/120)、98.33%(59/60)。结论:(MALDI-TOF MS)-based rAST缩短了报告时间,是一种可靠的快速定量药敏试验方法。

微生物培养体系预处理在MALDI-TOF MS快速鉴定血培养阳性病原菌的应用价值

目的分析微生物培养仪(HB&L)微生物培养体系预处理在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)快速鉴定血培养阳性样本病原菌的临床应用价值。方法收集2022年1月至2022年12月安阳市人民医院实验室常规方法鉴定的120份血培养报警后单一细菌感染的阳性样本,所有样本均接受HB&L微生物培养体系预处理、分离胶促凝管法预处理,将传统方法的鉴定结果作为“金标准”对照,运用MALDI-TOF MS鉴定。对比HB&L微生物培养体系预处理、分离胶促凝管法预处理下MALDI-TOF MS快速鉴定的鉴定率;另外对比HB&L微生物培养体系预处理、分离胶促凝管法在不同分值下MALDI-TOF MS样本细菌菌属快速鉴定结果。结果HB&L微生物培养体系预处理下MALDI-TOF MS快速鉴定例数为116例,鉴定率为96.67%;分离胶促凝管法预处理下MALDI-TOF MS快速鉴定例数为92例,鉴定率为76.67%,两种预处理方法鉴定率对比差异有统计学意义(P<0.05);在3.000~2.300分值下HB&L微生物培养体系MALDI-TOF MS样本细菌菌属快速鉴定率均高于分离胶促凝管法,差异有统计学意义(P<0.05);在2.299~2.000、1.999~1.700、<1.700分值下两种预处理方法菌属鉴定率对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论HB&L微生物培养体系是MALDI-TOF MS快速鉴定血培养阳性样本病原菌优质的预处理方法,可大幅提升鉴定率,值得应用。

MALDI-TOF MS分析大肠菌群不合格餐(饮)具中的微生物污染情况

为了解餐(饮)具中大肠菌群污染情况及被污染的餐(饮)具是否有致病风险,对大肠菌群项目不合格餐(饮)具中的微生物进行菌种鉴定。将餐(饮)具复发酵阳性的培养物转接伊红美蓝琼脂平板进行分离,利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术对28批不合格餐具中分离到的62株野生菌株的单个菌落进行精确鉴定,鉴定率为93.55%,鉴定结果均与自动微生物生化鉴定仪鉴定结果一致。主要鉴定出阪崎克罗诺杆菌、丙二酸盐克罗诺杆菌、大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、弗氏柠檬酸杆菌、阴沟肠杆菌等10种微生物。其中存在致病风险的微生物比例达68.97%,而28批次不合格餐(饮)具中存在致病风险的达26批次,占比92.86%。MALDI-TOF MS技术能同时且快速准确地鉴定出餐(饮)具中存在的不同微生物,而大肠菌群不合格餐(饮)具存在较高的致病风险,需加强餐(饮)具卫生管理与监测。

关于在MALDI-TOF MS技术背景下提高临床微生物检验实习教学能力的探讨

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)技术是临床微生物诊断中的一项革命性创新技术,给临床微生物诊断带来了极大的便利,同时也给临床微生物实习带教带来了新的挑战。本文阐述了MALDI-TOF MS技术在临床微生物检验实习带教中的应用探讨,旨在充分运用MALDI-TOF MS技术结合传统鉴定技术,提高临床微生物检验实习的教学能力。

基于MALDI-TOF-MS技术筛选及鉴定大曲中芽孢杆菌

该研究对基质辅助激光解吸电离-飞行时间-质谱(MALDI-TOF-MS)技术体系进行改进与优化,创新性地引入浓香型大曲中芽孢杆菌(Bacillus)的筛选及鉴定,并结合分子生物学技术对该技术鉴定结果进行验证。结果表明,采用传统微生物培养分离法从大曲中分离得到126株菌株,其中125株通过MALDI-TOF-MS技术筛选鉴定获得9.0以上可信度分值,其中目标菌株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)及地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)的鉴定结果与分子生物学鉴定结果一致,说明该技术历经5~6 d可以准确地完成大曲样品中目标菌株的筛选鉴定,比传统微生物筛选鉴定方法至少节约1~2周时间。因此,基于MALDI-TOF-MS技术参与复杂样品中目标菌株的筛选与鉴定是一条高效的、可行的路径。

MALDI- TOF MS快速鉴定腹泻病原菌的评价

目的 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)是近年发展迅速的鉴定病原菌的新技术,具有快速、准确、高通量、方便、低成本的优越性,本研究评价MALDI Microflex鉴定腹泻病原菌的效果。方法 收集3家医院临床分离的腹泻病原菌379株,采用提取法对其进行鉴定,评价质谱的鉴定效果;选择其中200株病原菌进行直接涂抹法和提取法前处理,对比鉴定效果。结果 腹泻病原菌包括沙门菌属、气单胞菌属、志贺菌属、大肠埃希菌属、弧菌属、艰难梭菌属、邻单胞菌属、耶尔森菌属等8个菌属,28个菌种,MALDI-TOF MS技术鉴定腹泻病原菌整体在属水平鉴定正确率为87.07%,种水平鉴定正确率59.37%;不同菌属及不同种的鉴定正确率有差别,气单胞菌和沙门菌较好;提取法鉴定沙门菌和气单胞菌的正确率明显高于直接涂抹法(P<0.05)。结论 MALDI-TOF MS技术鉴定腹泻病原菌具有简单、快速、部分准确的优越性,需要扩充菌种库并结合生化及血清学鉴定。

MALDI-TOF MS在NTM临床分离株快速鉴定中的应用研究

目的 建立临床非结核分枝杆菌(NTM)分离株的快速鉴定方法,为临床NTM病的诊断和治疗提供参考。方法 收集2018-2020年泉州某三甲医院的临床疑似NTM感染患者的痰液、肺泡灌洗液、胸部穿刺液和脑脊液等标本,借助基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术,通过改良前处理方法(甲酸提取法),摸索上机检测条件,建立临床NTM分离株的快速鉴定方法,并以16S rRNA测序为金标准,验证鉴定的准确性。结果 收集的50株临床NTM菌株,采用传统(常规)处理方法进行质谱鉴定,仅鉴定出4株,检出率为8.0%,而采用甲酸提取法共鉴定出24株,检出率为48.0%,两种方法检出率比较,差异有统计学意义(P<0.01),且改良处理后鉴定出的24株鉴定结果与PCR测序结果完全一致,符合率为100.0%。结论 初步建立的NTM甲酸提取前处理的质谱鉴定方法检出率明显提高,具有一定的临床应用价值。

MALDI-TOF MS在不同禽肉动物源性成分检测中的研究

[目的]建立基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)技术检测不同禽肉动物源性成分的方法,构建不同禽肉蛋白质分子指纹图谱标准数据库,对不同禽肉进行鉴别。[方法]样品用磷酸盐缓冲液提取,净化后用MALDI-TOF MS法测定。采用ChemPattern软件对不同禽肉蛋白图谱进行化学计量学分析,建立识别模型。[结果]鸡、鸭、鹅3种不同禽肉之间具有明显差异。首次建立不同禽肉蛋白质分子指纹图谱标准数据库,可一次性对每个样品中鸡、鸭、鹅等肉源性成分进行同时分析。[结论]建立的基于蛋白质组学的鸡、鸭、鹅源性成分鉴定系统具有简便、稳定、准确、重现性好的优点,适用于不同禽肉中鸡鸭鹅动物源性成分的鉴别。

MALDI-TOF-MS鉴定成人颅内感染人型支原体1例

人型支原体是一类没有细胞壁、具有多形性、可通过滤菌器的已知最小原核型微生物。在人体中,其主要引起泌尿生殖系统感染,而在成人颅内感染中极为少见,且引起的颅内感染在诊断、治疗、预后管理等方面尚缺乏统一的共识。本文报告1例成人因车祸伤行神经外科手术后出现人型支原体颅内感染的病例,旨在为临床此类疾病诊治提供参考。

MALDI-TOF-MS高灵敏度分析EGFR基因多位点突变方法的建立与应用

目的以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)为分析平台,建立表皮生长因子受体(EGFR)基因多位点突变的高灵敏度同步检测方法,用于辅助临床伴随诊断。方法使用MALDI-TOF-MS推荐的网站设计引物和单碱基延伸引物(UEP),设计添加针对野生型基因组的blocker,以减少野生型模板对突变位点检测的干扰。用数字PCR定量标准品,使用定量后的标准品验证检测体系的灵敏度。收集228例非小细胞肺癌(NSCLC)患者的血液标本,比较MALDI-TOF-MS平台与微滴式数字PCR(ddPCR)平台检测结果的特异度、灵敏度。结果MALDI-TOF-MS检测E746_A750del位点、T790M位点突变灵敏度达0.1%,最小突变检出拷贝数达2.8;L858R位点突变灵敏度达0.5%,最小突变检出拷贝数达12。与ddPCR检测相比,MALDI-TOF-MS检测E746_A750del、L858R和T790M位点的灵敏度、特异度、Kappa值分别为94.4%(34/36)、99.5%(191/192)、0.95,94.6%(35/37)、100.0%(191/191)、0.97,83.3%(15/18)、99.5%(209/210)、0.87。结论MALDI-TOF-MS建立的检测方法具有很高的灵敏度,与ddPCR检测具有非常高的一致性,有广阔的临床应用前景。

氮掺杂芦丁基碳点作为MALDI-TOF-MS基质对氨基酸的检测

以芦丁为碳源、乙二胺为氮源,采用水热法制备氮掺杂芦丁基碳点(N-CD)。通过优化温度、时间、碳源质量等反应条件得到N-CD荧光最大值。将N-CD作为基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)基质对氨基酸进行检测。结果显示:氮原子在N-CD中主要以吡啶氮形式存在,氮原子的孤电子对与碳点的sP2芳香体系以垂直形式构成的共轭结构,增大了共结晶电子解吸/电离效率。使用N-CD对谷氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和天冬氨酸进行检测。检测结果表明氨基酸离子信号强度最高可达30382。N-CD溶液作为基质最佳质量浓度为0.5 mg/mL,最大耐盐度为1 mol/L,初步实现对人体血清中氨基酸进行高通量检测。N-CD作为MALDI-TOF-MS新型基质材料在分析化学检测、环境检测以及生物小分子检测中具有良好的应用潜力,也为多元素掺杂生物质碳点材料作为MALDI-TOF-MS基质提供了参考。

MALDI-TOF质谱仪在血培养中的应用

目的评估MALDI-TOF质谱仪在血培养中的应用,探究MALDI-TOF质谱仪对血培养阳性报告时间(TTP)的影响,尽可能缩短TTP,及早终止临床错误用药,提供正确治疗方案。方法收集2021年12月至2022年4月中国人民解放军联勤保障部队第九〇〇医院的104份标本,统计TTP以及标本周转时间(TAT),同时进行MALDI-TOF质谱仪和WalkAway96plus仪细菌鉴定结果比对。另对2022年3月和5月共53份阳性血培养瓶原液,利用十二烷基硫酸钠(SDS)和皂素进行标本前处理,直接比对两者的优势,选最优试剂。结果与WalkAway96plus仪鉴定相比,MALDI-TOF质谱仪鉴定的共104株菌株(57株革兰氏阴性菌和47株革兰氏阳性菌)的属种水平完全相符,每个样本的置信度均大于99.9%,无错误鉴定,总得阳性符合率是100%(104/104)。WalkAway96plus仪正确的属鉴定率为84.6%(88/104),正确的种鉴定率为68.3%(71/104)。MALDI-TOF质谱仪对菌株的属、种鉴定水平均优于WalkAway96plus仪,差异有统计学意义(P<0.05)。结论用SDS进行标本前处理,结合MALDI-TOF质谱仪,使得TTP大大缩短及血培养鉴定流程更加优化,为临床提供更好服务。

MALDI-TOF MS快速鉴定联合直接药敏试验在尿路感染诊断中的应用评估

目的评估基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)快速鉴定联合直接药敏试验在尿路感染(urinary tract infection,UTI)诊断中的临床应用价值。方法收集2022年5月至12月首都医科大学附属世纪坛医院清洁中段尿培养样本共2610份。全部通过MUS9600全自动尿液分析系统筛选后,经差速离心浓缩纯化后使用MALDI-TOF MS直接鉴定,使用Vitek 2 Compact全自动微生物鉴定和药敏系统,K-B法及ATB FUNGUS3进行直接药敏试验,并根据美国临床实验室标准化研究所(CLSI)发布的药敏试验标准进行结果判读。将其结果与清洁中段尿培养鉴定药敏结果进行比较。结果2610例清洁中段尿培养样本中经常规鉴定后共有阳性483例(483/2610,18.51%),阴性或疑似污染2127例(2127/2610,81.49%)。与MUS9600计数结果相比,阳性样本符合率为97.92%(472/483):其中杆菌97.90%(280/286),球菌98.48%(130/132),真菌92.31%(60/65)。阴性及污染样符合率为98.92%(2104/2127)。在这483个样本中,质谱快速鉴定符合率为90.48%(437/483),其中,革兰氏阴性菌92.86%(260/280),革兰氏阳性菌89.13%(123/138),真菌83.10%(54/65)。对部分阳性样本进行了直接药敏试验。革兰阴性杆菌数据显示,直接药敏试验与传统药敏试验的符合率为94.42%(5552/5880),微小错误率、严重错误率和非常严重错误率分别为4.42%(260/5880)、0.95%(56/5880)和0.20%(12/5880)。革兰氏阳性球菌数据显示,直接药敏试验与传常规药敏试验的符合率为91.91%(1340/1458),微小错误率、严重错误率和非常严重错误率分别为5.69%(83/1458)、1.65%(24/1458)和0.75%(11/1458)。假丝酵母菌药敏数据显示,直接药敏试验与传统药敏试验的符合率为77.69%(101/130),微小错误率、严重错误率和非常严重错误率分别为16.15%(21/130)、4.62%(6/130)和1.54%(1/130)。结论我们的发现表明,以MUS9600筛选,MALDI-TOF MS直接鉴定和Vitek 2 Compact、K-B法及ATB FUNGUS3直接药敏试验的组合为清洁中段尿培养提供了较直接、快速和可靠的鉴定和药敏结果,在尿路感染的早期诊断和合理治疗中具有显著的临床价值。

MALDI-TOF MS在临床微生物鉴定中的应用进展

基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是一种新型的软电离生物质谱技术,是鉴定微生物的快速、可靠和高通量诊断工具。该技术可在几分钟内确定微生物的分离物,与传统鉴定方法相比,每个样本的快速周转时间和耗材成本最低,导致MALDI-TOF MS越来越多地用于世界各地的临床实验室[1]。在过去十几年中,MALDI-TOF MS已被广泛用作鉴定微生物的快速可靠方法,MALDI-TOF MS可将常规工作流程中用于微生物鉴定的时间缩短约1天。改进了微生物菌落的样品制备,提高了鉴定的准确性和速度[2]。MALDI-TOF MS也用于检测血液、脑脊液和尿液,因为它可以直接识别这些液体样品中的微生物,而无需事先培养或继代培养[3-4]。此外,MALDI-TOF MS目前正与流式细胞术等其他技术相结合,以扩大临床应用范围[5]。本文拟对MALDI-TOF MS的原理及在临床微生物鉴定中的应用进行概述,同时探讨该技术仍存在的局限性和未来前景。