消化道肿瘤MDR1基因和P-糖蛋白的表达与化疗药物耐药的关系

目的探讨消化道肿瘤多药耐药基因MDR1基因和P-糖蛋白(P-gp)的表达与肿瘤化疗药物耐药之间的关系。方法选择72例消化道肿瘤患者的手术标本,采用荧光定量PCR检测MDR1 mRNA表达量,ELISA法检测P-gp表达水平,并与ATP-TCA化疗药物敏感性试验结果作对照。结果 72份消化道肿瘤组织中,MDR1 mRNA阳性表达率为75%,P-gp阳性表达率为67%。72份消化道肿瘤组织中,对10种化疗药物均不敏感的有12份,对1种化疗药物敏感的有15份,对2种化疗药物敏感的9份,对3种化疗药物敏感的有9份,对5种化疗药物敏感的有15份,对8种化疗药物敏感的有9份,对所有化疗药物均敏感的有3份。消化道肿瘤MDR1mRNA、P-gp的阳性表达率与其对化疗药物敏感程度呈负相关(r s值分别为-0.672、-0.715,均P<0.05)。结论 MDR1基因、P-gp表达与肿瘤耐药性相关,MDR1基因、P-gp阳性表达提示患者可能对化疗药物存在获得性耐药。

RNA干扰技术抑制耐药细胞MDR1基因表达的研究

目的:探讨载体表达的小干扰RNA(siRNA)抑制MDR1基因的表达,并逆转卵巢癌耐药细胞多药耐药的可行性。方法:浓度梯度诱导法和人MDR1基因载体转染法建立阿霉素耐药细胞株OVCAR/AR和多药耐药亚株OVCAR/MDR细胞。脂质体介导将MDR1特异性siRNA的表达载体(pSN/mdr1a和pSN/mdr1b)转染耐药细胞,实时定量RT-PCR方法检测MDRl mRNA的表达,流式细胞术检测P-gp的表达,MTT法检测耐药细胞对化疗药的抵抗性。结果:耐药细胞OVCAR/MDR细胞MDR1 mRNA的表达高于OVCAR/AR细胞,两者均高于其亲代细胞OV-CAR-3;转染pSN/mdr1a和pSN/mdr1b可显著抑制两株耐药细胞MDR1 mRNA和P-gp的表达,OVCAR/MDR和OV-CAR/AR细胞对阿霉素抗药性的逆转率分别为79.5%和93.9%。结论:载体表达的MDR1特异性siRNA可抑制卵巢癌耐药细胞亚株MDR1基因的表达,因而增加耐药细胞对化疗药物的敏感性。

siRNA对SGC7901/VCR细胞mdr1基因沉默效果的影响因素分析

目的分析siRNA沉默人胃癌SGC7901/VCR细胞mdr1基因效果的相关因素。方法设计并体外转录合成4条靶向mdr1的siRNA(mdr1si326、mdr1si1513、mdr1si2631和mdr1si3071),转染SGC7901/VCR细胞,用RTPCR和免疫印迹检测mdr1mRNA和Pgp的表达、流式细胞仪检测细胞内阿霉素的蓄积和MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性,综合这4方面结果评价4条siRNA的沉默效果情况;用分子生物学软分析siRNA沉默效果的影响因素。结果沉默效果最好的mdr1si326和较好的mdr1si2631靶序列编码Pgp的跨膜区而且自身无茎和袢;沉默效果较差的mdr1si3071和最差的mdr1si1513靶序列编码Pgp的胞内区,前者自身成茎和成袢。沉默效果最好的mdr1si326和较好的mdr1si2631靶序列在靶位点和靶位点外间有较少的碱基配对和氢键。siRNA的沉默效果与siRNA3’5’端3个碱基中的A/U数量、N1和N19、GC含量间无规律可循。结论siRNA沉默SGC7901/VCR细胞mdr1的效果与靶序列的结构关系密切。

超声微泡促腺病毒载体转染MDR1基因效率的体外实验研究

目的探讨超声微泡造影剂在体外促进腺病毒载体介导的MDR1基因转染兔骨髓单个核细胞的效率,并初步探讨其安全性。方法根据是否加入超声微泡造影剂和超声辐照将分选的兔骨髓单个核细胞分为常规培养组(A)、腺病毒MDR1基因转染组(B)、腺病毒MDR1基因转染+超声辐照组(C)、微泡造影剂+腺病毒MDR1基因转染组(D)、微泡造影剂+腺病毒MDR1基因转染+超声辐照组(E)。收集各组细胞,应用RT-PCR法、流式细胞技术等分别从基因、功能及细胞生物学特性等方面检测外源性MDR1基因在骨髓单个核细胞内的功能性表达及安全性。结果收获高滴度的Ad5-MDR1腺病毒载体并成功制备腺病毒微泡造影剂;RT-PCR结果显示,除A组外其余4组在194bp处均观察到特异性MDR1电泳条带,证实外源性MDR1基因通过腺病毒载体整合到细胞基因组中,且E组MDR1电泳条带的光密度比值明显高于B、C、D组(P<0.05);柔红霉素排出实验证实外源性MDR1基因表达产物P-gp有药物外排泵功能,且E组P-gp阳性率最高(P<0.05),而柔红霉素阳性率显著降低;一定强度的超声辐照及微泡造影剂对骨髓单个核细胞的细胞周期无明显影响。结论低频超声波击碎微泡造影剂,能促进以腺病毒为载体介导的外源性MDR1基因转染兔骨髓单个核细胞的效率,且安全可行。

siRNA抑制K562/ADM细胞mdr1基因表达并逆转其耐药性

背景与目的白血病耐药性是白血病治疗中的难点,RNAi技术具有特异、高效、毒性小的特点,可高效、特异地抑制特定基因的过度表达。本文研究小干扰RNA分子(siRNA)对白血病多药耐药K562/ADM细胞mdr1基因表达和耐药性的影响。方法设计、筛选和合成针对mdr1基因的siRNAs(si-mdr1-1,si-mdr1-2),脂质体介导转染K562/ADM细胞;RT-PCR法检测mdr1mRNA的转录;流式细胞术测定P-糖蛋白(P-gp)表达水平;MTT法检测K562/ADM细胞对多柔比星(阿霉素,ADM)的敏感性。结果si-mdr1-1、si-mdr1-2转染24h和48h,si-mdr1-1的抑制率分别为55.5%和22.5%,而si-mdr1-2则分别为16.0%和57.6%。si-mdr1-1和si-mdr1-2作用72h时,P-gp的表达强度分别下降74%和85%。si-mdr1-1和si-mdr1-2均可提高K562/ADM细胞对多柔比星的敏感性、逆转其耐药性,逆转倍数分别为2.52倍和1.96倍。结论siRNA可特异性地沉默mdr1基因的表达,逆转P-gp介导的白血病细胞耐药性。

MDR1基因在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨多药耐药基因MDR1在胃癌组织中的表达及临床意义。方法收集2009年12月～2010年8月胃癌新鲜癌组织标本53例（实验组）、15例正常胃黏膜组织（对照组），采用逆转录一聚合酶链反应技术检测胃癌组织和正常胃组织中MDR1基因的表达，并分析与临床病理特征之间的关系及对化疗的指导意义。结果MDR1基因在正常胃组织及胃癌组织中的表达分别为0．57±0．27和0．20±0．10（t=8．13，P〈0．001）。MDR1基因的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移之间差异具有统计学意义（t=2．83，3．47；P=0．007，0．002），而与患者性别、肿瘤部位、大小之间差异无统计学显著性意义（t=1.41，0．54，1．16；P=0．16，0．60，0．25）。结论MDR1基因的高表达可能是胃癌多药耐药产生的基础，MDR1基因的检测对制定化疗方案和选择化疗药物有一定的指导意义。

胃癌组织mdr1基因表达的临床意义

目的探讨多药耐药基因（ｍｄｒ１基因）在人胃癌组织中的表达及其与临床病理的关系．方法应用ＲＴＰＣＲ法检测了２９例手术切除人胃癌组织中的ｍｄｒ１ｍＲＮＡ．术前未用过化疗．结果ｍｄｒ１ｍＲＮＡ的阳性率为４８３％（１４／２９），ｍｄｒ１ｍＲＮＡ的表达在肿瘤浸润浆膜者为３３３％（７／２１），明显低于未浸润浆膜者（７／８），基因的表达与年龄、性别、肿瘤大小、组织学类型、淋巴结转移及ＴＮＭ分期等无关．结论化疗前胃癌组织中ｍｄｒ１基因即存在较高的表达率，这为选用化疗药物和ＭＤＲ逆转剂提供了参考指标．ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达减少似与肿瘤进展相关．

肺鳞癌中MDR1基因产物P-gp、p53及nm23蛋白的表达及临床意义

目的 :研究肺鳞癌中 p5 3蛋白、nm2 3蛋白以及耐多药基因MDR1产物P 糖蛋白 (P glycoproteinP gp)的表达及相互关系 ,探讨它们在肺鳞癌发展、预后及耐药中的作用。方法 :采用免疫组化SP法 ,对 40例肺鳞癌及其癌旁正常肺组织中 p5 3蛋白、nm2 3和P gp进行检测。 结果 :p5 3蛋白、nm2 3及P gp在肺鳞癌中表达率分别为5 2 5 %、45 0 %和 6 5 0 % ,明显高于癌旁正常组织 (P <0 0 0 1) ,三者都与患者预后显著负相关 (P <0 0 5 ) ,p5 3蛋白表达与分化程度负相关 (P <0 0 5 )。nm2 3与淋巴结转移正相关 (P <0 0 5 )。p5 3、nm2 3与临床分期相关 ,P gp与临床分期无关。三者之间无相关性 (P >0 0 5 )。结论 :p5 3蛋白、nm2 3、P gp在肺鳞癌的发展过程中起了重要作用 ,可以作为评价肺鳞癌患者预后的有效参数 。

MDR1基因多态性及表达与急性白血病患者预后相关性的研究进展

多药耐药(multidrug resistant,MDR)是肿瘤细胞耐药的常见方式,也是急性白血病患者化疗失败和复发的主要原因。近年来,国外许多学者围绕MDR1基因多态性及MDR1 mRNA表达与其编码蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达和功能相关性进行了大量研究,多数研究表明P-gp与急性白血病的化疗预后相关。该文就国外关于MDR1基因多态性与急性白血病患者预后相关性的最新研究进展进行了总结,以期对急性白血病患者的治疗与预后评估有所帮助。

原位杂交法检测MDR1基因在食管癌中的表达及与p53的关系

目的:了解食管癌组织MDR1基因表达的临床意义及其与p53的关系。方法:用原位杂交法检测了57例食管癌组织标本中MDR1基因的表达,免疫组化法检测了其中44例p53蛋白的表达并进行临床病理分析及相关性分析。结果:57例食管癌组织中MDR1mRNA阳性表达率为35%(20/57),其中食管癌无淋巴结转移的患者阳性表达为29%(8/29),有淋巴结转移患者阳性表达分别为41%(12/28),高于无淋巴结转移患者的表达。临床Ⅱ期食管癌患者阳性表达分别为27%(8/30),临床Ⅲ-Ⅳ期阳性表达为44%(12/27),高于临床Ⅱ期患者的表达。食管癌患者MDR1mRNA表达与肿瘤大小、部位、分化程度、肿瘤浸润的程度无明显相关。44例食管癌组织中p53蛋白阳性表达率为73%(32/44),其中食管癌浸润至肌层,p53表达率为45%(5/11),肿瘤浸润至外膜,p53表达率为82%(27/33),差异有显著性,P<0.01。食管癌患者p53表达与肿瘤大小、部位、分化程度、有无淋巴结转移、临床分期无明显相关。32例p53蛋白表达阳性的组织中有10例MDR1mRNA表达阳性,它们之间的表达在统计学上无明显相关。结论:MDR1基因及突变型p53在食管癌组织中均有过表示,其表达可能与食管癌进展相关。在食管癌组织中MDR1基因表达可能并非受p53的调控。

鼻咽癌患者组织中WWOX和MDR1基因的表达

目的 探讨WWOX基因和MDR1基因在鼻咽癌患者中的表达及WWOX基因下调的机制。方法 采用荧光相对定量RT-PCR法检测89例鼻咽癌患者（实验组）和61例慢性鼻炎患者（对照组）鼻咽部组织中MDR1和WWOX mRNA表达水平,并用甲基化特异性PCR（MSP）和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析WWOX mRNA表达下调的机制。结果 与对照组比较,实验组WWOX mRNA表达水平明显降低,MDR1 mRNA表达水平明显升高（P〈0.01）。实验组临床分期Ⅲ~Ⅳ期患者较Ⅰ~Ⅱ期患者,低分化患者较高分化患者的WWOX mRNA表达量均明显降低（P均〈0.01）。实验组低分化者较高分化者MDR1 mRNA表达量明显升高（P〈0.01）。实验组WWOX基因启动子甲基化程度明显高于对照组（t=7.002,P〈0.01）,且WWOX mRNA与启动子甲基化程度呈负相关（r=-0.594,P〈0.01）。与对照组比较,实验组WWOX基因D16S504、16S3096、D16S3029微卫星位点杂合性缺失状态（LOH）明显升高（P〈0.01）。WWOX mRNA与该基因LOH呈负相关（r=-0.364,P=0.013）。结论启动子甲基化是鼻咽癌患者WWOX抑癌基因表达下调的原因。MDR1基因的上调表达与鼻咽癌的组织学分化关系密切。

沉默MDR1基因表达逆转白血病耐药HT9细胞对大蒜素的耐药性

目的:利用短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体沉默耐药细胞HT9中MDR1基因表达,从而逆转人早幼粒白血病细胞株HT9对大蒜素的耐药性。方法:根据MDR1基因序列设计shRNA片段,构建靶向MDR1基因的pSilencer3.1-shMDR1表达载体,稳定转染HT9细胞,real-time PCR检测细胞中MDR1 mRNA的表达,Western blotting检测HT9细胞中P-糖蛋白(MDR1基因编码)的表达,MTT法检测细胞存活率,琼脂糖凝胶电泳检测经大蒜素处理后HT9细胞的凋亡,电镜观察细胞超微结构变化,流式细胞术检测细胞周期。结果:成功构建靶向MDR1的表达载体pSilencer3.1-shMDR1,稳定转染HT9细胞形成HT9-shMDR1细胞系,HT9-shMDR1细胞中MDR1 mRNA表达显著降低[(0.027±0.002)vs(0.110±0.005),P<0.01],P-糖蛋白表达也明显降低[(0.856±0.014)vs(1.454±0.027),P<0.05]。大蒜素对HT9-shMDR1细胞的IC50较对未转染组HT9细胞明显降低[(26.66±0.59)vs(52.75±0.64)μg/ml,P<0.01],HT9-shMDR1细胞对大蒜素耐药的相对逆转率为(49.45±1.86)%。与未转染组HT9细胞相比,经大蒜素处理后HT9-shMDR1细胞凋亡的DNA片段更为明显,电镜下可见细胞凋亡特有的半月体形成。大蒜素处理不影响未转染组HT9细胞和对照质粒转染后HT9细胞(HT9-neo细胞)的细胞周期,但大蒜素处理使HT9-shMDR1细胞的S期细胞比例减少[(31.40±2.13)%vs(53.80±1.87)%,P<0.01],G2/M期细胞比例增多[(35.62±2.06)%vs(9.37±2.09)%,P<0.01]。结论:靶向MDR1的干扰表达载体pSilenc-er3.1-shMDR1能够抑制MDR1基因的表达,从而逆转HT9细胞对大蒜素的耐药性。

MDR1基因下调逆转人白血病阿霉素耐药细胞株K562/ADM的耐药性

目的探讨RNA干扰(RNAi)人MDR1基因对人白血病阿霉素耐药细胞株K562/ADM耐药性的影响。方法应用针对人MDR1基因的RNAi质粒pENTRTM/U6-MDR1转染人白血病阿霉素耐药细胞株K562/ADM和亲本细胞株K562,48h后实时荧光定量PCR检测MDR1mRNA表达,流式细胞术检测P-gp蛋白表达和P-gp功能,MTT法检测细胞对ADM的耐药性。结果与未转染细胞相比,K562/ADM耐药细胞pENTRTM/U6-MDR1组的MDR1mRNA和P-gp蛋白表达和功能均显著下降(P<0.05),对阿霉素的耐药性显著降低(P<0.05)。结论 MDR1基因下调可逆转人白血病阿霉素耐药细胞株对阿霉素的耐药性。

MDR1基因表达与贲门癌病理特征的关系

目的 :探讨贲门癌组织中多药耐药基因 (MDR1)表达与其病理特征的关系。方法 :应用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)方法 ,对 5 1例贲门癌组织、癌旁及 35枚淋巴结中MDR1基因的表达进行检测分析。结果 :贲门癌组织中MDR1阳性 18例(35 3% ) ,癌旁组织MDR1阳性 2例 (3 9% ) ,两者比较差异具有显著性 (P <0 0 5 )。 2 1枚转移淋巴结组织MDR1阳性 6例(2 8 6 % ) ,14枚非转移淋巴结中未见MDR1阳性表达 ;MDR1表达阳性与肿瘤大小、浸润程度、病理分期及淋巴转移与否虽无统计学意义 ,但在TNMⅢ、Ⅳ期和肿瘤侵犯深肌层以上的MDR1基因表达阳性率增高 ;低分化贲门癌的MDR1阳性分布明显高于高分化肿瘤 (P <0 0 5 )。对部分病例随访发现 ,MDR1阳性者肿瘤复发与转移的总发生率 (46 2 % )高于MDR1阴性者(2 1 1% )。结论 :贲门癌组织中存在着原发性MDR1基因表达 ,并与转移淋巴结组织的MDR1基因表达具有一致性 ,MDR1的表达除了表现肿瘤的多药耐药外 ,还可能是贲门癌恶性行为的观察指标 ,提示预后不良。

MDR1基因在卵巢癌组织中的表达及其临床意义

目的 检测多药耐药基因MDR1mRNA在卵巢癌组织中的表达及其临床应用价值。方法 选择卵巢癌组织 30例、卵巢良性肿瘤组织 30例、正常卵巢组织 30例。采用RT PCR复合定量技术检测卵巢癌组织中耐药相关基因MDR 1mRNA的表达水平及分析其表达与临床化疗的相关性。结果 正常卵巢组织不表达MDR1基因 ;卵巢良性肿瘤组织MDR1基因表达率为10 .0 % ;卵巢癌组织表达率为 73 .3 % ,其中高表达率占 77.3 %。卵巢癌组织中MDR 1基因表达与卵巢良性肿瘤的比较 ,有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。卵巢癌术前化疗组MDR 1基因表达率为 83 .3 % ;术前未化疗组MDR1基因表达率为 5 8.3 % ,2组比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。定量分析表明化疗可以诱导MDR1基因表达水平增高 ,与非化疗组比较有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 MDR1基因表达与卵巢癌有关。MDR 1表达与卵巢癌化疗与否无关 ,但化疗可诱导MDR1基因表达水平增高。因此检测MDR1基因表达水平的变化可以预测继发耐药性。在判断卵巢癌临床用药时 ,检测MDR1耐药相关基因的表达情况可得到一定的耐药信息 。

肺癌MDR1基因表达与临床病理特征的关系

目的 探讨MDR1基因表达与肺癌病理特征的关系。方法 应用逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR)技术对原发性肺癌 ,癌旁组织及淋巴结中MDR1基因的表达进行检测分析。结果 肺癌组织及癌旁组织中MDR1阳性率分别为 54%和 10 % ,两者比较差异显著 (P <0 .0 0 1) ;转移淋巴结组织MDR1阳性率为53% ,而非转移淋巴结组织未见MDR1阳性表达 ;各病理类型中不同分化程度肿瘤的MDR1阳性分布不同 ,高分化腺癌的MDR1阳性率较高 ( 73% )。术前化疗病例的MDR1阳性率 ( 78% )高于未化疗者 ( 4 7% )。随诊发现 ,MDR1阳性者肿瘤复发、转移的发生率 ( 50 % )高于MDR1阴性者 ( 13% )。结论 肺癌组织中MDR1基因表达增高 ,术前化疗可能起诱导作用 ;MDR1的过度表达与其肿瘤大小 ,临床分型 ,TNM分期无明显关系 (P>0 .0 5) ;转移淋巴结中的MDR1基因表达与其对应癌组织具有一致性。

肝细胞MDR1基因表达与胆囊胆固醇结石相关性研究

目的探讨肝细胞中MDR1基因的表达与胆囊胆固醇结石形成之间的关系。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)技术,检测胆囊胆固醇结石患者和正常对照人群肝细胞标本MDR1mRNA的表达水平。结果以β2微球蛋白为内参照,胆固醇胆囊结石患者肝细胞中MDR1mRNA表达水平低与对照组(1.30±0.19vs2.25±0.28),二者之间的差异具有显著性意义(P<0.01)。结论胆囊胆固醇结石的形成可能与肝细胞中MDR1基因的表达降低有关。

卵巢癌MDR1基因表达与近期化疗效果

目的 研究卵巢癌ＭＤＲ１ 基因表达对化疗的影响。 方法 应用免疫组织化学（ＡＢＣ） 法及改进的逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）分别检测ＰＧＰ和ＭＤＲ１ 基因ｍ ＲＮＡ 的表达水平。 结果 ４９ 例卵巢癌中用ＡＢＣ法检测ＰＧＰ表达的阳性率为４２８％ ，其中有化疗史的阳性率为３６０％ ；无化疗史的为５００ ％ （ Ｐ＞ ００５）。ＰＧＰ染色阴性的近期化疗有效率为５３６ ％ ，而染色阳性的为１４３ ％ （Ｐ＜ ００５） 。有３７ 例卵巢癌用改进的ＲＴＰＣＲ 检测ＭＤＲ１ 基因ｍ ＲＮＡ 表达的阳性率为７０３ ％ 。有化疗史的阳性率为９５２％ ；而无化疗史的阳性率为３７５ ％（ Ｐ＜０００１） 。ＭＤＲ１ 基因ｍＲＮＡ表达阴性的近期化疗有效率为８１８ ％ ，而表达阳性的为２３１％ （Ｐ＜ ０００５）。此同样３７ 例卵巢癌免疫组化结果并未见与化疗史相关，但仍发现与近期疗效存在相关性。 结论 ＭＤＲ１ 基因表达与卵巢癌化疗密切相关，ＰＧＰ／ ＭＤＲ１ ｍＲＮＡ 有可能作为预测卵巢癌化疗效果的一项指标。改进ＲＴＰＣＲ 方法适用于临床耐药性检测。

CYP3A5基因和MDR1基因位点的单核苷酸多态性与CML细胞遗传学复发风险的关系分析

目的:分析CYP3A5基因和MDR1基因位点的单核苷酸多态性(SNP)与慢性髓系白血病(CML)细胞遗传学复发风险的关系。方法:收集本院收治的90例行伊马替尼治疗的CML患者的临床资料,根据有无复发进行分组,并分析CYP3A5基因和MDR1基因位点的SNP与CML细胞遗传学复发风险的关系。结果:无细胞遗传学复发者41例(无复发组),复发者49例(复发组),随访36个月。相比MDR1基因位点中的C3435T、C1236T的TT+CT基因型的患者,CC基因型的患者细胞遗传学复发的几率显著升高(P <0. 05)。相比MDR1基因位点中的C3435T的CT+CC基因型的患者,TT基因型的患者细胞遗传学复发的几率显著下降(P <0. 05)。相比MDR1基因位点中的C1236T、C3435T的CT、CC基因型患者,TT基因型者无复发生存期明显延长(P <0. 05)。相比无复发组,复发组中性粒细胞减少症(29. 27%vs 71. 43%)、血液毒性(39. 02%vs 61. 22%)的发生率显著升高(P <0. 05)。伊马替尼剂量(OR=2. 95,95%CI:1. 37-7. 76)与MDR1基因中的C3435T基因型(OR=0. 09,95%CI:0. 05～0. 72)是CML患者细胞遗传学复发的影响因素(均P <0. 05)。结论:伊马替尼治疗剂量与MDR1基因中的C3435T、C1236T基因型对CML患者细胞遗传学复发造成一定的影响,其中MDR1基因中的C3435T基因型对评估患者细胞遗传学复发风险具有一定的预测价值,因此可作为一种临床潜在的生物标志物。

抑制mdr1基因对人宫颈癌细胞放射敏感性影响的实验研究

目的:探讨用反义技术抑制癌基因mdr1对宫颈癌细胞(HeLa)放射敏感性的影响。方法:设空白组、mdr1正义寡核苷酸组和脂质体组(仅加入等量的脂质体)为对照组以及mdr1反义寡核苷酸组,用RT-PCR检测宫颈癌细胞处理前后mdr1表达水平的变化。用集落形成试验检测各实验组照射后人宫颈癌HeLa细胞株集落形成率,AO/EB荧光染色法检测细胞凋亡率的变化,流式细胞仪测定Bcl-2蛋白的表达。结果:mdr1反义寡核苷酸能有效地抑制mdr1癌基因的表达,经脂质体介导的mdr1反义寡核苷酸作用的宫颈癌细胞经60Coγ射线照射后其集落形成率较正义寡核苷酸组及单纯照射组明显下降,而凋亡率明显增加,Bcl-2蛋白表达显著下调,与对照各组比较有显著差异(P<0.05)。结论:mdr1反义寡核苷酸通过抑制mdr1基因降低人宫颈癌HeLa细胞放射抗性。其辐射增敏作用可能与mdr1反义寡核苷酸增加照射后肿瘤细胞的凋亡率有关。