血清MG7-Ag水平检测与新型胃癌评分系统在胃癌高危人群风险评估中的价值

目的:研究血清MG7-Ag与新型胃癌评分系统在胃癌高危人群风险评估中的临床价值。方法:纳入2021年1月至2022年12月在本院接受胃镜检查及活检的163例胃癌癌前病变患者和42例胃癌患者作为研究对象。收集一般资料,包括年龄、性别、血清幽门螺杆菌抗体(呼气试验C13/C14)、胃蛋白酶原I/胃蛋白酶原II比值(PGR)、胃泌素17(G17)、内镜检查及病理诊断结果:根据新型胃癌筛查评分系统将入组患者分为低危组、中危组、高危组,采用酶联免疫吸附法进行MG7-Ag检测,分析影响胃癌诊断的影响因素,评价MG7-Ag和新型胃癌评分系统在胃癌高危人群风险评估中的价值。结果:胃癌癌前病变和胃癌组患者一般资料差异无统计学意义,具有可比性。所有205例患者中,新型胃癌评分系统分为高危34例、中危63例和低危108例,其中胃癌检出率分别为24(73.53%)例、13(20.63%)例、5(4.63%)例。以MG7-Ag表达的中位数分为高表达组和低表达组,其中高表达组41例、低表达组164例,其中胃癌检出率分别为33(80.49%)例、9(5.49%)例。单因素和多因素分析显示,新型胃癌评分系统和MG7-Ag检测均为影响胃癌诊断的影响因素之一。通过ROC曲线分析新型胃癌评分系统和MG7-Ag检测在癌前病变和胃癌中的诊断价值,结果显示,新型胃癌评分系统的曲线下面积(AUC)为0.71(95%CI:0.65~0.74),MG7-Ag检测的AUC为0.78(95%CI:0.75~0.80),两者联合诊断的AUC为0.86(95%CI:0.81~0.90),两者联合诊断的价值明显优于单独诊断。结论:血清MG7-Ag与新型胃癌评分系统联合诊断在筛选胃癌高危人群中的价值明显优于单独检测,对未来胃癌癌前病变和胃癌的诊断具有很高的临床指导价值。

血清P53、G-17及MG7-Ag检测联合胃镜下病理检查在胃癌及癌前病变诊断中的应用

目的研究血清P53抑癌基因、胃泌素-17(G-17)及人胃癌抗原MG7(MG7-Ag)检测联合胃镜下病理检查在胃癌及癌前病变诊断中的应用效果。方法本研究采用回顾性的方法,选取2022年3月至2023年1月空军第九八六医院收治的经胃镜检查诊断为胃早癌或癌前病变患者152例为研究对象。统计病理诊断结果;比较胃癌组与癌前病变组血清P53、G-17及MG7-Ag水平;以病理诊断为金标准,分析胃镜检查表现与金标准的一致性;采用ROC曲线评估血清P53、G-17及MG7-Ag水平联合胃镜下病理检查对胃癌癌前病变的诊断价值。结果152例疑似胃早癌及癌前病变患者经病理学诊断,发现胃癌患者75例(49.35%);胃癌癌前病变患者77例(50.65%),其中肠上皮化36例(23.68%),萎缩性胃炎30例(19.74%)及胃溃疡11例(7.24%)。胃癌组G-17及MG7-Ag水平高于癌前病变组,P53阳性表达例数多于癌前病变组,差异有统计学意义(P<0.05)。152例疑似胃早癌及癌前病变患者经胃镜检查,发现胃癌患者70例(46.05%);胃癌癌前病变患者82例(53.95%),其中肠上皮化36例(23.68%),萎缩性胃炎32例(21.05%)及胃溃疡14例(9.21%)。ROC曲线显示,胃镜+P53+G-17+MG7-Ag联合检测诊断胃癌癌前病变的灵敏度、特异度分别为92.55%、91.18%,明显高于三者单独检测(P<0.05)。结论血清P53、G-17及MG7-Ag与胃癌及癌前病变的发生、发展有密切联系,且上述血清检测联合胃镜下病理检查诊断胃癌及癌前病变的准确率更高。

MG7-Ag、UBCH10联合DDX21在胃癌中的表达及临床意义

胃癌是高发病率、高死亡率的恶性肿瘤,严重威胁着人们的生命健康。随着分子技术研究的不断深入,人们发现胃癌的发生机制复杂多样,随着医学发展,学者们经过不断研究,从手术到化疗,现阶段胃癌的五年生存率仍低。许多潜在风险因素仍未得到充分了解,需要进一步深入研究,以运用更有针对性的可靠的预防措施。因此,早期发现胃癌以及寻找新的更加有效的治疗靶点对于治疗胃癌具有重要意义。研究发现MG7-Ag、UBCH10联合DDX21在胃癌中高表达且联合检测具有指导意义。本文论述了三者在胃癌组织中的表达及临床意义。

血清Mg7-Ag检测联合ME-NBI对诊断高危胃低级别上皮内瘤变的临床价值

背景人类胃癌相关抗原(monoclonal gastric cancer7 antigen,MG7-Ag)可在胃癌细胞系中高表达,并与病程进展密切相关,窄带放大内镜(magnifying narrow-band imaging endoscopy,ME-NBI)对早期胃癌特别是分化型胃癌的诊断有较高的敏感度和特异度.基于上述基础,本研究将其应用于胃低级别上皮内瘤变(low-grade intraepithelial neoplasia,LGIN)病灶的研究,分析其对高危胃LGIN的临床诊断价值.目的探讨检测血清Mg7-Ag结合ME-NBI检查对判断胃LGIN术后是否出现病理升级的临床价值.方法选取2019-01/2022-12在我院胃镜活检病理报告为低级别上皮内瘤变并在1 mo内进行诊断性粘膜剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)的病例,对比术后及术前病理结果,将病例分为高危组(病理升级)、低危组(病理未升级)及炎症组(病理降级);所有病例均在术前1周内检测血清Mg7-Ag水平及行胃镜ME-NBI精查.分别统计各组中Mg7-Ag检测值和Mg7-Ag(+)与Mg7-Ag(-)人数,以及ME-NBI(+)与ME-NBI(-)人数,计算和分析各单项检测和两项联合检测对LGIN判断病灶发生术后病理升级的敏感度、特异度、准确度和阳性似然比.结果本研究共纳入了行诊断性ESD切除的125例胃LGIN,其中高危组37例,低危组76例,炎症组12例;分析发现Mg7-Ag水平在三组间两两比较均有显著差异(P<0.05),并且高危组Mg7-Ag检测水平均明显高于低危组和炎症组病例(P<0.05);炎症组ME-NBI阳性率明显低于其它两组(P<0.05),且高危组中ME-NBI阳性率亦高于低危组(P<0.05);经比较Mg7-Ag与ME-NB单项阳性对预测LGIN病理升级的敏感性、特异度、准确度与阳性似然比差异无显著性;联合检测Mg7-Ag+ME-NBI阳性对预测高危LGIN的敏感度较单项检测略低,而特异度达90.5%、准确度达84.0%,阳性似然比达8.3,均显著高于单项检测(P<0.05).Mg7-Ag+ME-NBI均阴性对判断炎症组病例准确度和阳性似然比较单项检测明显升高(P<0.05).结论联合检测血清Mg7-Ag和ME-NBI筛查,可作为预判胃LGIN是否出现病理升级的临床指标.

胃癌血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA联合检测的意义

目的联合检测胃癌患者血清及骨髓中糖类抗原72-4(CA72-4)、胃癌相关抗原(MG7-Ag)、癌胚抗原(CEA)含量,评价三者联合检测用于胃癌诊断的价值。方法应用酶联免疫吸附测定法、放射免疫测定法对61例胃癌患者血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量进行检测,并对结果进行分析。结果胃癌患者血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量均明显高于正常对照组(均P<0.01);三者联合检测较单一指标检测准确率明显升高(均P<0.05)。结论联合检测血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量可提高胃癌诊断的阳性率。

表达胃癌MG7-Ag模拟表位的减毒鼠伤寒杆菌疫苗的研制和初步鉴定

目的 研制可表达胃癌ＭＧ７－Ａｇ模拟表位的减毒鼠伤寒杆菌疫苗。 方法将ＮｃｏⅠ位点和ＭＧ７－Ａｇ模拟表位编码序列的互补序列设计到上游引物的５′端。以含有ＨＢｃＡｇ全序列的质粒ｐ１．２Ⅱ为模板，通过ＰＣＲ扩增，获得ＭＧ７－Ａｇ模拟表位与ＨＢｃＡｇ的融合基因。将目的基因插入载体ｐＵＣｍ－Ｔ，经酶切鉴定和序列测定证实后，再亚克隆至与减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４５５０互补的质粒ｐＹＡ３３４１中，再以此重组质粒转化减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４５５０。结果序列测定证实，ＰＣＲ产物为胃癌ＭＧ７－Ａｇ模拟表位与ＨＢｃＡｇ的融合基因片段；最终得到含有目的基因片段的重组表达载体ｐＹＡ３３４１。重组质粒在Ｘ４５５０中的表达产物，经Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ表明，在相对分子质量（Ｍｒ）约在２２ ０００处有１条可与抗ＭＧ７ ｍＡｂ特异性结合的多肽表位。结论成功地研制可表达胃癌ＭＧ７－Ａｇ模拟表位减毒鼠伤寒杆菌疫苗，为进一步研究其在胃癌免疫治疗中的作用奠定了基础。

利用细菌内重组腺病毒系统构建胃癌MG7-Ag模拟表位疫苗

目的:以复制缺陷的腺病毒为疫苗载体,构建基于胃癌MG7-Ag模拟表位的重组腺病毒疫苗.方法:将编码MG7-Ag模拟表位的互补序列设计到上游引物的5/端.以含有HBcAg全序列的质粒p1.2Ⅱ为模板,通过PCR扩增,获得MG7-Ag模拟表位与HBcAg的融合基因.经序列测定证实后,亚克隆至pAdTrack-CMV穿梭质粒,再与pAdEasy-1质粒在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组.经抗性筛选及酶切鉴定的重组质粒,再用导入293细胞进行包装,利用Adeasy系统上的绿色荧光蛋白标签鉴定病毒表达.结果:序列测定证实,PCR产物为胃癌MG7-Ag模拟表位与HBcAg的融合基因片段;酶切鉴定表明胃癌MG7-Ag模拟表位与HBcAg的融合基因片断插入了pAdTrack-CMV穿梭质粒,卡那霉素进行抗性筛选及PacⅠ酶切鉴定证实腺病毒重组质粒构建成功.PacⅠ酶切线性化的重组质粒导入293细胞3d后见明显的绿色荧光蛋白表达.回收病毒,可重复感染293细胞,证实有感染能力的病毒颗粒包装成功.结论:胃癌MG7-Ag模拟表位的重组腺病毒载体的构建成功,为进一步研究胃癌MG7-Ag模拟表位诱发抗胃癌免疫打下了基础.

中晚期胃癌介入干预前后血清MG7-Ag、sIL-6R、VEGF的变化

目的观察血清MG7-Ags、IL-6R、VEGF在中晚期胃癌患者介入干预前后水平变化。方法选择中晚期胃癌患者50例,其中介入干预30例,静脉化疗20例,化疗药物选用5-氟脲嘧啶、亚叶酸钙及草酸铂,分别在干预前、干预后2周、干预后4周,清晨空腹留取静脉血5 ml,室温下静置半小时,再3 000 r/min离心10 min,留取血清进行检测,MG7-Ags、IL-6R、VEGF的测定采用ELISA法。结果介入干预组中MG7-Ags、IL-6R的水平呈下降趋势,在干预后4周、干预后2周与干预前比较均有显著性差异,干预后4周与干预后2周比较亦有显著性差异,VEGF的水平在干预后2周较干预前有所增高,但干预后4周却是下降的,比较差异有显著性;静脉化疗组中MG7-Ag、VEGFs、IL-6呈下降趋势,干预后4周与干预前比较均有显著性差异,其中只有sIL-6R干预后4周与干预后2周比较有显著性差异,而MG7-Ag、VEGF干预后4周与干预后2周无显著性差异;介入干预组中MG7-Ag、VEGFs、IL-6R的水平变化较静脉化疗组明显,两组组间比较均有显著性差异(分别为F=4.356,P=0.042<0.05、F=4.078,P=0.049<0.05,F=4.389,P=0.041<0.05)。结论通过对中晚期胃癌患者动脉介入干预前后血清MG7-Ags、IL-6R、VEGF动态观察,上述三项指标在干预后均有变化,但介入干预组中MG7-Ag、VEGFs、IL-6R的水平变化较静脉化疗组明显,故MG7-Ags、IL-6R、VEGF可作为评估胃癌干预疗效及预后的一个重要参考指标。

血清胃癌相关抗原MG7-Ag的检测对胃癌的诊断价值

胃癌是常见的消化道肿瘤，高度恶性且预后较差，早期诊断、早期治疗是提高患者生存质量、降低病死率的唯一途径。胃镜加病理活检是目前公认的最有效的胃癌检查方法，但作为普查手段费用过高且人群接受度较低。血清肿瘤标志物检测操作简单、无创、便于动态监测，更易为受试者所接受，

1A6/DRIM表达及血清MG7-Ag含量在胃癌早期诊断中的价值

目的:对不同类型胃黏膜活检组织1A6/DRIM表达和血清MG7-Ag检测,探讨两者的相关性及胃癌前病变风险预测的临床应用价值。方法:131例胃黏膜活检组织及其血清标本(浅表性胃炎30例,胃黏膜糜烂溃疡26例,萎缩性胃炎伴肠上皮化生21例,胃癌54例),采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清MG7-Ag含量;免疫组化SP法检测胃黏膜组织标本中1A6/DRIM的表达水平。结果:从浅表性胃炎、胃黏膜糜烂溃疡、萎缩性胃炎伴肠上皮化生到胃癌,血清MG7-Ag含量呈逐渐升高趋势,并且各组间比较差异均有显著性(P<0.05),胃癌患者血清MG7-Ag含量明显高于其他胃病患者,差异有显著性(P<0.01)。1A6/DRIM在54例胃癌组织中阳性表达34例(63.0%),在其他胃病患者中阳性表达9例(11.7%),差异有显著性(P<0.05)。随着病变组织中1A6/DRIM表达的上升,血清MG7-Ag含量有上升趋势,两者具有良好的相关性(rs=0.346,P=0.001)。血清MG7-Ag和1A6/DRIM组织表达水平与胃癌分化程度呈负相关,二者有良好的相关性。结论:MG7-Ag可以作为胃癌的血清学检测指标,对早期胃癌进行筛查,结合组织学1A6/DRIM基因表达的检查,有助于胃癌高危个体的筛查和诊断,提高胃癌早期诊断水平。

胃癌血清CA72-4、MG7-Ag、CEA与临床生物学行为的关系

目的检测胃癌患者血清CA72-4、MG7-Ag、CEA含量,并分析其与胃癌临床生物学行为的关系。方法应用酶联免疫吸附测定法、放射免疫测定法对61例胃癌患者血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量进行检测,并分析与胃癌临床生物学行为的关系。结果胃癌患者血清CA72-4、MG7-Ag、CEA含量明显高于相应的正常对照组(P<0.01);三者联合检测较单一指标检测阳性率明显升高(P<0.01);胃癌患者血清中CA72-4、MG7-Ag含量与胃癌Borrmann分型、浸润深度、淋巴结转移、临床分期密切相关;CEA含量与肿瘤大小、Borrmann分型、浸润深度、临床分期密切相关(P<0.05或<0.01)。结论检测血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA将有助于判断胃癌的转移、复发及监测预后。

血清MG7-Ag对胃癌诊断的应用价值

目的测定血清MG7-Ag以探讨其对胃癌诊断的临床价值。方法采用ELISA法定量检测54例胃癌患者,51例胃癌前病变患者,94例胃炎患者及46例胃癌术病人的血清MG7-Ag,并对其结果进行比较。结果胃癌患者血清中MG7-Ag的阳性表达率为83.33%,胃癌前病变组阳性表达率为47.05%,胃炎病变组为4.25%。经统计学处理,胃癌组与其它组比较有非常显著性差异(P<0.01)。46例胃癌患者术后血清MG7-Ag阳性率比术前明显下降。胃癌患者血清MG7-Ag的敏感性比CEA,CA19-9高,且有统计学意义(P<0.05)。结论血清MG7-Ag对胃癌诊断有特异性,可作为胃癌早期诊断的有效指标,也可作为监测病情、判断疗效之用。

红藤养胃汤对胃癌患者血清MG7-Ag、PG、TPS、OPN水平的影响

目的：探究红藤养胃汤对胃癌患者血清胃癌相关抗原（MG7-Ag）、胃蛋白酶（PG）、组织多肽特异性抗原（TPS）及骨桥蛋白（OPN）表达水平的影响,为胃癌治疗提供依据。方法：将我院2012年4月~2015年4月因胃癌接受治疗的患者90例纳入本研究,均衡分为A、B、C组,每组各30例,A组服用红藤养胃汤进行治疗,B组胃富春片进行治疗,C组则采用西药进行治疗,治疗前及治疗1、2个月后检测各组MG7-Ag、PG、TPS及OPN。结果：治疗前及治疗1、2个月血清MG7-Ag检测,各组治疗后MG7-Ag低于治疗前,差异有统计学意义（P〈0.05）。A组服用红藤养胃汤,治疗后与C、B组MG7-Ag水平比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）;治疗1、2个月,A组血清PG水平高于治疗前,并高于B、C组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;血清OPN、TPS水平显著低于治疗前,差异有统计学意义（P〈0.05）,A组血清OPN、TPS水平低于B、C组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：胃癌患者服用红藤养胃汤后,血清OPN、TPS显著降低,血清PG升高,效果较为显著,患者血清MG7-Ag水平与西药、胃富春片疗效无显著变化,应进一步深入研究。

胃粘膜癌前病变组织中MG7-Ag的表达

胃粘膜癌前病变组织中ＭＧ７┐Ａｇ的表达６１００８３成都成都军区成都总医院汤礼军田伏洲麻晓林①晏才杰①周丁华①关键词胃肿瘤；抗原，肿瘤中国图书资料分类号Ｒ７３５．２萎缩性胃炎、胃粘膜肠上皮化生（肠化生）及胃粘膜上皮异型增生（异型增生）是内镜活检及手术切...

胃癌相关抗原MG7-Ag对胃癌的诊断价值

目的研究胃癌相关抗原MG7-Ag对胃癌的诊断价值。方法通过敏感的ELISA方法检测180例因消化道症状入院患者的血清胃癌相关抗原MG7-Ag含量,并进行对照分析。结果胃癌组的MG7-Ag含量明显高于其他疾病组(P<0.05);除胃癌组外,其它各组合并为对照组,以≥6U/ml为诊断标准,则MG7-Ag对胃癌的诊断特异性为60%,敏感性为75%。结论测定胃癌相关抗原MG7-Ag对于胃癌的早期诊断是一项有价值的辅助方法。

PG、MG7-Ag联合G-17检测对胃癌前病变、胃癌的诊断及鉴别诊断

目的分析胃蛋白酶原(PG)、胃癌单克隆抗体(MG7-Ag)联合胃泌素-17(G-17)检测对胃癌前病变、胃癌的诊断价值。方法收集2018年6月至2019年1月本院收治符合纳入标准的胃癌患者126例设为胃癌组,依据组织病理学肿瘤细胞不同分化程度将分为高分化组(n=38)、中分化组(n=52)及低分化组(n=36),同时选取同期本院正常健康体检者51例(健康对照组)、胃癌前病变患者112例(胃癌前病变组),胃癌前病变组再次分为浅表性胃炎组(n=38)、胃溃疡组(n=46)、慢性萎缩性胃炎组(n=28)。比较不同人群PG、MG7-Ag、G-17指标水平,计算HP阳性感染率,对比不同检测对胃癌前病变、胃癌的诊断效能。结果胃癌组MG7-Ag、G-17表达水平高于胃癌前病变组、健康对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),胃癌前病变组PGⅠ、PGR表达水平显著高于健康对照组、胃癌组,胃癌组PGR水平显著低于胃癌前病变组、健康对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。低分化组MG7-Ag高于高分化、中分化组,高分化组G-17水平显著低于中分化组、低分化组,差异均具有统计学意义(P<0.05);高、中、低分化胃癌患者PGⅠ、PGⅡ、PGR水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。慢性萎缩性胃炎组G-17、PGR、PGⅠ水平显著低于浅表性胃炎组、胃溃疡组,浅表性胃炎组PGⅡ低于其余两组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。胃癌组HP阳性率高于胃癌前病变组,差异具有统计学意义(P<0.05)。PG+G-17+MG7-Ag+HP检测胃癌、浅表性胃炎、胃溃疡、慢性萎缩性胃炎特异度、灵敏度显著高于单一检测(P<0.05)。结论 PG、MG7-Ag及G-17与胃癌疾病发生、进展存在一定联系,通过检测上述指标水平,可有效综合评估患者病情,联合检测可提高诊断灵敏度、特异度。

血清MG7-Ag和TAG-72对胃癌的诊断价值

目的 测定血清ＭＧ７ － Ａｇ 和ＴＡＧ－ ７２ ，以探讨对胃癌的诊断价值。方法 本文测定３６ 例胃癌患者血清胃癌单抗ＭＧ７ 相应抗原（ ＭＧ７Ａｇ） 和单抗Ｂ７２－３ 相应抗原即肿瘤相关糖蛋白抗原（ ＴＡＧ－ ７２） 。结果 血清ＭＧ７Ａｇ 和ＴＡＧ－ ７２ 测定诊断胃癌的敏感性分别为５２－８ ％ 和６９－４ ％ ，特异性分别为８６－２ ％ 和８４－５ ％ ，两者联合检测可提高胃癌的阳性检出率达８６－１ ％ 。胃癌切除后血清ＭＧ７Ａｇ 和ＴＡＧ－ ７２ 较术前降低，手术前后比较有显著性差异（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。结论 提示这两项指标可用于胃癌的疗效评估。

胃镜下可疑恶性溃疡MG7-Ag表达与临床随访二次活检病理结果的对照研究

为了探讨胃镜下可疑恶性溃疡组织MG7-Ag表达对其临床随访、二次活检的辅助指导价值,对58例经首次胃镜检查可疑恶性溃疡、活检、病理未能确诊者的病理标本进行MG7-Ag的ABC免疫组化染色,同时进行1～72周(平均7周)临床随访。所有病人均再次胃镜复查,组织活检,病理检查。结果表明,MG7-Ag阳性表达30例中有19例二次活检病理检查确诊为胃癌(63.3%),阴性组28例中有5例确诊为胃癌(17.9%),两组胃癌检出率差异有非常显著意义(P<0.01)。结论:MG7-Ag阳性表达的胃镜下可疑恶性溃疡与胃癌关系密切,对这部分病人进行密切随访,有助于胃癌的早期发现。

胃癌前病变不同中医证型患者血清MG7-Ag水平的研究

目的:本研究旨在探讨胃癌前病变(Precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)患者血清胃癌单克隆抗体7相关抗原(monoclonal gastric cancer 7 antigen,MG7-Ag)水平与中医证型的关系。方法:对南京中医药大学镇江附属医院收治的PLGC患者进行前瞻性横断面研究。并用ELISA法测定血清MG7-Ag水平。结果:共收治PLGC患者200例,其中男性91例,女性109例。脾胃湿热证、胃阴不足证、肝胃郁热证、肝胃气滞证、脾胃虚弱证及胃络血瘀证患者MG7-Ag水平分别为(3.44±1.82)U/mL、(4.32±1.92)U/mL、(3.81±1.67)U/mL、(3.65±1.70)U/mL、(4.02±2.07)U/mL、(5.60±1.93)U/mL,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胃阴不足证与胃络瘀血证PLGC患者血清MG7-Ag水平最高,可作为筛选高危人群进行内镜精查的参考,提高早期胃癌的检出率。

基于胃癌MG7-Ag模拟表位基因疫苗的构建

目的 构建以胃癌 MG7- Ag模拟表位为基础的DNA疫苗 .方法 将 H ind 酶切位点、MG7- Ag模拟表位和通用性辅助性 T细胞 (Th细胞 )表位编码序列的反向互补序列顺次设计于下游引物中 ,通过 2次聚合酶链式反应将 2种表位连接于一段载体基因 ,H ind 酶切位点位于载体片段与表位基因之间 .将目的基因插入 p UCm - T载体 ,酶切鉴定和序列测定证实后 ,利用 p UCm- T载体和 pc DNA3.1(+)载体共有的 Kpn 和 Xba 酶切位点 ,将目的基因亚克隆入真核表达载体 pc DNA3.1(+)载体 .酶切鉴定后 ,利用目的基因和pc DNA3.1(+)载体上的 H ind 酶切位点 ,H ind 酶切去除载体基因片段 ,得到胃癌 MG7- Ag模拟表位和通用性 Th细胞表位的真核表达载体 .结果 经序列测定证实 :PCR产物为载体基因、H ind 酶切位点、MG7- Ag模拟表位及通用性Th细胞表位的融合片段 ;最终得到的重组 pc DNA3.1(+)质粒含有正确编码以上 2种表位的基因片段 .结论 以胃癌MG7- Ag模拟表位为基础的 DNA疫苗构建成功 。