MHC-Ⅰ类分子抗原呈递相关蛋白与乙肝相关性研究

目的探讨正常肝组织与乙型肝炎中TAP1、TAP2、HSP70、HSP90、CNX、β2-MG蛋白表达及相关关系。方法以内源性生物素阻断S-P法来检测32例乙肝患者和16例健康对照者石蜡包埋肝组织的TAP1、TAP2、HSP70、HSP90、CNX、β2-MG蛋白表达情况。结果β2-MG、TAP1、HSP70、HSP90、CNX蛋白在乙肝组表达高于正常组(P均<0.05);通过相关性分析发现,TAP2蛋白与HSP70蛋白在正常组中呈相关性(χ2=16.000,P=0.008)。结论TAP1、TAP2、HSP70、HSP90、CNX、β2-MG蛋白均在乙肝组表达高于正常组(P<0.05),提示这些蛋白均参与MHC-Ⅰ类分子的乙肝病毒抗原处理及提呈过程,并且可以做为诊断乙肝的临床指标。

携带非A5.1型MHC-Ⅰ类相关分子A穿膜区等位基因中晚期食管癌患者对NK细胞免疫治疗的敏感性高

目的:探讨非A5.1型MHC-Ⅰ类相关分子A(MHC classⅠ-related molecules A,MICA)穿膜区等位基因对中晚期食管癌患者术后化疗联合NK细胞免疫治疗疗效的影响。方法:选取福建省肿瘤医院2013年4月至2015年10月收治的中晚期(TNMⅢ-Ⅳa期)食管癌患者152例,均在姑息性手术后行全身化疗,根据患者MICA穿膜区等位基因是否为A5.1分为4组:(1)A5.1化疗+NK细胞治疗(A5.1+NK)组;(2)A5.1单纯化疗(A5.1)组;(3)非A5.1化疗+NK细胞治疗(no A5.1+NK)组;(4)非A5.1单纯化疗(no A5.1)组,观察各组患者临床疗效。构建食管癌组织标本MICA等位基因A5.1的真核表达载体p TE-1A5.1,转染食管癌TE-1细胞株;Western blotting检测p TE-1A5.1转染对TE-1细胞MICA蛋白表达的影响,LDH法检测TE-1细胞转染p TE-1A5.1前后对NK细胞杀伤敏感性的变化,ELISA法检测食管癌患者血清可溶性MICA及转染p TE-1A5.1前后TE-1细胞上清中可溶性MICA含量。结果:经过3年的随防,A5.1+NK组患者中位总生存期(medium overall survival,m OS)为15.0个月,A5.1组为16.0个月,no A5.1+NK组为22.4个月,no A5.1组为16.0个月,no A5.1+NK组m OS明显长于其他3组(P<0.05)。经Cox多因素回归分析发现,患者年龄、性别、ECOG评分及基因型与预后均无明显相关(P>0.05),将基因类型与是否NK细胞治疗进行交叉分析,no A5.1+NK组m OS明显长于其他3组(P<0.01)。转染p TE-1A5.1后TE-1细胞内MICA表达显著升高,培养液上清可溶性MICA分泌明显增加[(256.2±45.3)vs(45.3±11.5)pg/ml,P<0.01];与转染前相比,NK细胞对过表达MICA的TE-1细胞的杀伤率明显降低[(29.5±7.2)%vs(42.5±7.1)%,P<0.05]。结论:相对中晚期食管癌MICA穿膜区A5.1等位基因患者,非A5.1基因患者手术后化疗联合NK细胞的疗效较好,其机制与其不容易产生可溶性MICA密切相关。

卵巢癌细胞MHC-Ⅰ类抗原表达与肿瘤微环境免疫细胞分布关系

目的 探讨卵巢癌细胞MHC Ⅰ类分子表达与肿瘤微环境免疫活性细胞分布的关系 ,了解机体肿瘤微环境免疫功能状态。方法 用流式细胞仪检测卵巢癌细胞MHC Ⅰ类分子表达 ,同时用免疫组化方法检测肿瘤微环境中LCA+ 、CD3 + 细胞分布情况。结果 卵巢癌细胞MHC Ⅰ类分子表达存在不同程度的下降或缺如 ,且与肿瘤微环境中LCA+ 、CD3 + 细胞分布呈正相关 ,前者r=0 .846 ,P =0 .0 0 0 1,后者r =0 .738,P =0 .0 0 0 1。结论 上皮性卵巢癌细胞MHC Ⅰ类抗原分子的表达影响肿瘤微环境中浸润免疫细胞数 ,进而影响肿瘤微环境免疫监视能力。检测MHC Ⅰ类分子表达可为肿瘤浸润淋巴细胞临床过继治疗选择合适病例提供实验依据。

人食管癌TE-1细胞MHC-Ⅰ相关抗原肽的初步研究

目的寻找TE1细胞MHCⅠ类分子提呈的抗原肽。方法用弱酸洗涤法获得TE1细胞表面与MHCⅠ类分子结合的抗原肽,经SepPakC18柱、Centrion3超滤器和RPHPLC去盐纯化后,用负载该抗原肽的树突状细胞刺激生成肿瘤特异性杀伤细胞,以Cr51释放法测定CTL的杀伤活性。结果高效液相色谱图显示多个峰;负载抗原肽DC刺激的CTL比未负载抗原肽DC刺激的CTL对TE1细胞杀伤率高,两者差异有统计学意义;负载抗原肽DC刺激的CTL对与抗原肽孵育的T2细胞比对未经与抗原肽孵育的T2细胞杀伤率高,两者差异有统计学意义。结论弱酸洗涤法可从TE1细胞上获得有效的抗原肽;混合抗原肽中有可与HLAA2分子结合并能激发CTL的抗原肽。

维吾尔族和汉族子宫颈癌患者病变组织主要组织相容性复合物Ⅰ类分子抗原呈递相关蛋白的表达

宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤之一，在新疆维吾尔族妇女宫颈癌发病率高，属于宫颈癌高发区之一，其发病率及病死率明显高于生活在同一环境的其他民族。主要组织相容性复合物（major histoeompatibility complex，MHC）是介导抗病毒T淋巴细胞免疫的关键分子，呈递细胞内产生的内源性抗原（如病毒感染细胞、肿瘤细胞的抗原）与MHC-Ⅰ类分子结合后最终呈递至细胞表面供T淋巴细胞识别，其组装和负载过程中需要一系列的相关蛋白参与，

低亲和力CTL表位肽在治疗性肿瘤疫苗中应用的研究

因为细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)在肿瘤控制中起着重要作用,所以基于CTL表位(epitope)的治疗性肿瘤多肽疫苗已经成为当前肿瘤综合生物治疗中一个倍受瞩目的策略。传统的免疫治疗策略通常选择与MHC-Ⅰ类分子具有高亲和力的CTL表位肽作为治疗工具,但部分高亲和力的CTL表位肽在体内往往有免疫耐受或者副反应。近来研究表明:低亲和力的CTL表位肽及其改构体能很好地克服这些问题。本文就低亲和力CTL表位肽及其改构体在肿瘤免疫治疗中的研究进展做一综述。

垂体腺瘤组织中NF-κB、MMP-9、MICA的表达变化及意义

目的观察垂体腺瘤组织中NF-κB、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、MHC-Ⅰ类链分子相关抗原A(MICA)的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化法对垂体腺瘤组织和正常脑组织中的NF-κB蛋白、MMP-9蛋白及MICA蛋白进行检测;采用qRT-PCR法对垂体腺瘤组织及正常脑组织中的NF-κB mRNA、MMP-9 mRNA、MICA mRNA进行检测。结果垂体腺瘤与正常脑组织中NF-κB蛋白阳性表达率分别为100%(40/40)、30%(6/20),MMP-9蛋白阳性表达率分别为100%(40/40)、15%(3/20),MICA蛋白阳性表达率分别为100%(40/40)、0;两组比较,P均<0.01。垂体腺瘤与正常脑组织中NF-κB mRNA相对表达量分别为13.045±6.200、2.040±2.067,MMP-9 mRNA相对表达量分别为28.770±7.661、2.369±1.460,MICA mRNA相对表达量分别为231.817±41.046、5.062±3.849;两组比较,P均<0.05。NF-κB蛋白与MICA蛋白、MMP-9蛋白表达均呈正相关(r分别为0.368、0.345,P均<0.05)。结论 NF-κB、MMP-9及MICA在垂体腺瘤组织中高表达,NF-κB可能通过促进MMP-9及MICA表达而促进垂体腺瘤发生、发展。

三肽基肽酶Ⅱ(TPPⅡ)对抗原的提呈作用机制研究进展

三肽基肽酶Ⅱ(Ripetidyl PeptidaseⅡ,TPPⅡ)是存在于细胞质中的一种多功能丝氨酸蛋白酶,主要协助蛋白酶体和其他的胞外酶并且参与蛋白周期代谢。最近的数据显示,TPPⅡ对MHC-Ⅰ类分子抗原表位的产生与破坏均有重要作用,但是TPPⅡ在MHC-Ⅰ类抗原递呈中的具体作用机制尚有待进一步研究。本文综述TPPⅡ的细胞生物学特征,着重探究TPPⅡ在MHC-Ⅰ类抗原递呈中作用,并且指出TPPⅡ在新型疫苗设计上具有重要的指导意义。

系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞MⅠCs分子异常表达及其机制

目的:了解系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单核细胞主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类链相关分子(MⅠCs)、IL-15表达水平变化及其潜在机制。方法:收集20例SLE患者及20例健康志愿者外周血,分离单核细胞及血清,采用流式细胞术检测单核细胞表面MⅠCs及mIL-15的表达,EILIS法检测血清中干扰素-γ(INF-γ)、干扰素-α(INF-α)浓度,并对单核细胞表面MⅠCs表达水平与血清INF-γ浓度作相关性分析。进一步以SLE患者血清与健康志愿者单核细胞体外孵育,在有或无抗INF-γR存在的情况下,检测单核细胞表面MⅠCs分子的表达情况。结果:SLE患者血清IFN-γ浓度与健康对照组相比有显著性差异,其中IFN-γ在SLE患者为(429.7±145.0)pg/ml[健康对照为(73.8±18.9)pg/ml],二者有显著性差异(P<0.01);单核细胞MⅠCs及mIL-15的阳性率分别为(37.0±18.1)%和(36.0±7.3)%,而健康志愿者单核细胞MⅠCs及mIL-15的阳性率为(7.2±2.4)%和(7.6±2.5)%。SLE患者MⅠCs及mIL-15阳性率显著高于健康志愿者(P<0.01);SLE患者单核细胞MⅠCs分子表达水平与血清INF-γ浓度呈正相关;SLE患者血清中高浓度的IFN-γ可以刺激正常人单核细胞表达高水平的MⅠCs及mIL-15。结论:SLE患者血清INF-γ浓度异常升高,导致外周血单核细胞表面MⅠCs及IL-15异常高表达。

射波刀联合替吉奥治疗原发性肝癌疗效观察

目的:观察射波刀联合替吉奥治疗原发性肝癌(PHC)的临床疗效。方法:选取我院74例PHC患者,按照治疗方法分组,各37例。对照组行射波刀治疗,观察组在对照组基础上予以替吉奥治疗。对比两组临床疗效、治疗前、治疗3个周期后血清可溶性人类MHC-Ⅰ类分子链相关基因A蛋白(sMICA)、组织多肽特异性抗原(TPS)水平、毒副反应发生情况、无进展生存期、2年生存率。结果:观察组客观有效率81.08%(30/37)高于对照组59.46%(22/37)(P<0.05);治疗3个周期后两组血清sMICA、TPS水平均低于治疗前,观察组低于对照组(P<0.05);观察组无进展中位生存期为10.8个月长于对照组的7.4个月,观察组2年生存率71.43%(25/35)高于对照组38.24%(13/34)(P<0.05);两组骨髓抑制、消化道反应、发热发生率对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:射波刀联合替吉奥治疗PHC患者,可提高治疗效果,降低血清sMICA、TPS水平,抑制肿瘤细胞增殖,从而延长患者生存时间,且毒副反应较轻。

泛癌中SMYD3的表达与预后及免疫浸润之间的关系

目的研究SMYD3表达在泛癌中的预后价值,分析SMYD3对于肿瘤组织免疫浸润的影响。方法从TCGA、GTEx、HPA等数据库收集基因表达矩阵以及蛋白质表达等数据。使用Kaplan-Meier算法评价了SMYD3在不同肿瘤中的预后价值。使用ESTIMATE算法和Timer数据库的信息分析SMYD3与免疫浸润的关系。以小鼠黑色素瘤细胞系B16为例,在细胞水平验证SMYD3对抗原提呈基因表达的影响。结果转录组和蛋白组学数据表明SMYD3在肿瘤组织中表达升高,并且SMYD3的高表达和泛癌的不良预后相关(P<0.05);SMYD3抑制了多种免疫细胞的浸润(P<0.05),敲除Smyd3的B16细胞抗原呈递基因表达水平升高(P<0.05)。结论Smyd3是一个重要的肿瘤预后相关基因,其通过下调抗原递呈基因的表达,抑制免疫细胞浸润,诱导肿瘤细胞免疫逃逸。

免疫球蛋白样转录子的研究进展

免疫球蛋白样转录子（ILT）家族表达于髓系和淋巴系细胞表面,包括抑制性受体和激活性受体,通过与相应的配体结合发挥抑制或激活作用.配体包括MHC-Ⅰ类分子及其相关分子.由于抑制性受体与激活性受体特征相似,但在细胞内的功能却截然相反,因而研究ILT的结构、功能及其在临床相关疾病中的作用十分重要.

NK细胞发育与耐受的研究进展

NK细胞是固有免疫系统的重要组成部分,可特异直接杀伤靶细胞,也可分泌细胞因子或趋化因子调节其他免疫细胞的活性,进而激活机体的适应性免疫.生理情况下,NK细胞对自身正常组织细胞耐受,这种平衡依赖于特定环境下NK细胞表面多样性受体与MHC-Ⅰ类分子的相互作用,然而并非所有的NK细胞都表达识别MHC-Ⅰ类分子的抑制性受体.NK细胞发育在NK细胞诱导耐受的过程中发挥着重要作用,相关研究对临床应用具有重要意义.