miR-10b靶向TGFBR1/SMAD3通路对特发性矮小症的软骨细胞增殖、肥大的影响机制

目的研究miR-10b对特发性矮小症(ISS)的影响及作用机制。方法收集ISS患儿(ISS组)和体检健康儿童(健康对照组)各54例,qPCR检验血清miR-10b表达量,分析ISS组患儿血清miR-10b表达与患儿临床资料的关系。采用miR-10b inhibitor、si-TGFBR1及各自阴性对照转染C28/I2细胞,利用CCK-8实验检测C28/I2细胞增殖能力,Western blot检测侏儒相关转录因子2(RUNX2)、X型胶原α1链(COL10A1)、转化生长因子β受体1(TGFBR1)、SMAD3、pSMAD3蛋白表达量。在StarBase数据库筛选miR-10b靶点,利用双萤光素酶报告基因实验验证miR-10b与TGFBR1的靶向关系。结果ISS组血清miR-10b表达量高于健康对照组,且miR-10b表达越高,患儿的身高、IGF-1、骨特异性碱性磷酸酶的下降越明显(P<0.05)。与NC组相比,miR-10b inhibitor组细胞增殖能力升高,RUNX2、COL10A1、TGFBR1、pSMAD3蛋白表达上调(P<0.05);StarBase数据库提示miR-10b存在TGFBR1的结合位点,双萤光素酶报告基因实验证实两者结合。与si-NC相比,si-TGFBR1组TGFBR1表达量下调,细胞增殖能力下降(P<0.05)。结论miR-10b通过靶向TGFBR1/SMAD3通路在特发性矮小症中抑制软骨细胞的增殖、肥大。

miR-10b通过激活KLF4/Notch-1/STAT3信号途径加速腹主动脉瘤的进展

目的:miR-10b促进动脉瘤的进展但其机制未明确,本实验通过检测miR-10b对KLF4/Notch-1/STAT3途径的影响阐明其机理。方法:双荧光素酶实验验证miR-10b的靶基因。取20只apoE-/-小鼠构建腹主动脉瘤模型,其中10只尾静脉注射miR-10b过表达的慢病毒,分别记为模型组和miR-10b组。另取10只apoE-/-小鼠作为假手术组,28 d后解剖小鼠腹主动脉行病理学染色、Western-blot实验。将血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用后的THP-1巨噬细胞根据是否转染miR-10b mimic及其Nc对照、是否添加抑制剂分组:(1)Nc组;(2)miR-10b mimic组;(3)Nc+KLF4抑制组;(4)miR-10b mimic+KLF4抑制组;(5)Nc+Notch-1抑制组;(6)miR-10b mimic+Notch-1抑制组;(7)Nc+STAT3抑制组;(8)miR-10b mimic+STAT3抑制组,检测细胞内蛋白水平。结果:检测双荧光素酶活性得知miR-10b可靶向作用于基因KLF4。小鼠血管病理实验发现,与正常小鼠相比,动脉瘤模型小鼠的血管明显增粗、组织结构异常,miR-10b可加重血管病变;CD68+巨噬细胞、蛋白Notch-1、p-STAT3、MMP-2、MMP-9在假手术组、模型组与miR-10b逐渐增多,而α-SMA、蛋白KLF4逐渐减少。(1)、(2)两组细胞间,后者KLF4表达较少、而Notch-1、p-STAT3、MMP-2、MMP-9表达显著偏多;KLF4抑制剂抑制KLF4表达,而Notch-1显著增多;Notch-1被抑制而减少表达,p-STAT3也随之减少;p-STAT3被抑制表达,MMP-2与MMP-9表达量也明显降低。结论:miR-10b通过作用于KLF4/Notch-1/STAT3信号途径,引起动脉瘤组织中MMP-2、MMP-9表达增加,从而加速动脉瘤的进程。

miR-10b在细胞衰老中的研究进展

细胞衰老被描述为一种细胞周期的永久停滞状态,既可延缓肿瘤等增生性病理进展,又可加速机体衰老的退行性病变进程。鉴于细胞衰老在诸多年龄相关疾病中的关键作用,量化和评估衰老水平的标志物仍在探索。微RNA调节与衰老相关疾病的发生及发展关系密切。包括miR-10b在内的微RNA通过调节细胞周期、端粒酶活性、自由基水平和线粒体功能等方式参与细胞衰老的过程,并发挥有益或有害作用。本文对细胞衰老定义与机制、miR-10b与其调控细胞衰老的机制及中医药作用于miR-10b的机制等进行综述,探讨miR-10b作为预测和评估细胞衰老的生物标志物及治疗潜在靶点的可行性。

miR-10b与乳腺癌侵袭及预后的相关性研究

背景与目的:miR-10b通过增加其下游转移基因RHOC的表达,影响肿瘤的转移和侵袭能力。本研究探讨miR-10b在乳腺癌石蜡组织中的表达及其与乳腺癌侵袭转移及预后的关系。方法:采用实时定量PCR(real-time qPCR)对60例乳腺癌患者原发肿瘤蜡块提取的RNA进行miR-10b表达水平的测定,MannWhitney-U非参数检验比较miR-10b表达水平和乳腺癌临床病理参数的关系,预后分析采用Kaplan-Meier生存分析和log-rank计算。结果:miR-10b表达水平与乳腺肿瘤的大小、淋巴结转移、组织学分级、激素受体状态、肿瘤病理分期、组织类型及是否复发等无明显关系(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明,miR-10b表达水平并不影响乳腺癌患者的生存期(P=0.485)。结论:miR-10b表达在乳腺癌侵袭转移中的作用有限,并不是影响预后的主要因素,尚不足以作为基于石蜡组织标本的乳腺癌预测预后指标。

神经鞘瘤中miR-10b基因表达和甲基化水平分析

目的分析miR-10b小RNA在神经鞘瘤中的表达水平和该基因上游甲基化水平,并识别miR-10b在神经鞘瘤中的潜在靶基因。方法应用实时定量PCR定量miR-10b及潜在靶基因HOXB3、HOXD10、PTEN、PIK3CA、MAPRE1、HADC4在13例神经鞘瘤和6例正常前庭蜗神经的表达;进一步分析差异表达基因与神经鞘瘤临床特征的相关性;最后应用焦磷酸测序分析两组之间miR-10b基因上游甲基化水平差异。结果与正常神经相比,神经鞘瘤组织中miR-10b分子表达水平显著升高(P=0.000 3),而PTEN表达显著下降(P=0.004 7),两者显著负相关(P=0.001,r=-0.689)。此外,miR-10b基因启动子区内甲基化水平下调,并与该基因表达显著负相关(P=0.011,r=-0.571)。miR-10b高表达组与低表达组比较,肿瘤直径有差异(P=0.016);但发病年龄及1年后肿瘤复发率无差异(P>0.05)。结论神经鞘瘤中miR-10b启动子甲基化水平下降引起该基因持续高表达,而miR-10b可能靶向抑制PTEN表达。

miR-10b通过mTOR/P70S6K信号通路对宫颈癌大鼠的作用机制研究

目的探讨miR-10b通过mTOR/P70S6K信号通路对宫颈癌大鼠的作用机制。方法采用人宫颈癌HeLa细胞株构建宫颈癌大鼠模型,分为Gg组(宫颈癌大鼠)、Gm组(注射miR-10b-mimics)、Gi组(注射miR-10b-inhibitions)。采用HE染色观察癌组织变化,Western blotting、RT-PCR检测mTOR/P70S6K的mRNA和蛋白表达水平,Transwell检测HeLa细胞的侵袭能力。结果Gg组肿瘤组织出现丰富的血供,界限分明,切面呈鱼肉状,肿瘤细胞大小较为均等;Gm组肿瘤组织中有大量纤维血管形成,肿瘤细胞大小不等,胞浆着色较深;Gi组肿瘤组织中纤维血管较少,胞浆着色稍浅。Western blotting结果显示,mTOR/P70S6K蛋白表达水平为Gm组<Gg组<Gi组(P<0.05)。RT-PCR结果显示,mTOR/P70S6K mRNA水平为Gi组>Gg组>Gm组(P<0.05),miR-10b mRNA水平为Gi组<Gg组<Gm组(P<0.05)。Transwell结果显示,肿瘤细胞侵袭能力为Gi组>Gg组>Gm组(P<0.05)。结论miR-10b过表达可激活mTOR蛋白,增加P70S6K活性,抑制宫颈癌细胞的增殖和迁移,有望成为宫颈癌治疗的新靶点。

鼻咽癌患者中的miR-10b表达及调控机制研究

目的研究miR-10b在鼻咽癌患者活检组织中的表达及调控机制,探讨miR-10b与鼻咽癌细胞增殖和迁移的关系。方法取79例鼻咽癌初诊患者(观察组)和35例鼻咽正常黏膜组织标本(对照组),采用实时荧光定量PCR法检测两组miR-10b、LMP1和Twist1的表达情况,分析三者的相关性。Western法检测两组患者E-钙黏蛋白、β-连环蛋白、纤连蛋白、N-连环蛋白、波形蛋白和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达情况。结果miR-10b在鼻咽癌活检组织中的表达远高于鼻咽正常组织。Twist1以及EBV癌蛋白LMP1阳性组miR-10b过度表达(P<0.05)。鼻咽癌组织中上皮细胞标志物E-钙黏蛋白和β-连环蛋白的表达低于鼻咽正常组织,间充质细胞标志物纤连蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白和MMP-9的表达高于鼻咽正常组织(P<0.05)。结论在鼻咽癌患者中,miR-10b基因通过LMP1、Twist1进行基因调控。过度表达的miR-10b促进鼻咽癌细胞的增殖和迁移,诱导上皮-间质转化(EMT),从而有可能成为治疗鼻咽癌的新靶点。

miR-10b对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的探讨miR-10b在人肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法搜集兰州军区乌鲁木齐总医院46例肝癌组织作为观察组，同期选取18例正常肝组织作为对照组，利用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）方法检测受试者miR-10b的表达水平，分析miR-10b表达与肝癌组织病理特征之间的关系：利用脂质体2000向肝癌细胞系HepG2转染人工化学合成miR-10b模拟物（miR-10bmimics）、miR-10b抑制剂（miR-10binhibitor），同时设置阴性对照组（NC＋脂质体2000），采用MTT实验检测HepG2肝癌细胞增殖能力，采用Transwell实验及细胞划痕实验检测HepG2肝癌细胞侵袭、迁移能力。结果肝癌组miR-10b水平较对照组明显上调表达（P〈0．05），且肝癌转移组miR-10b水平明显高于未转移组（P〈0．05）；miR-10b高表达组与低表达组患者性别、年龄、肿瘤分化程度、有无肝硬化以及肿瘤数量之间比较差异无统计学意义（P〉0．05），肝癌患者miR-10b表达与肝癌是否转移以及肝癌的美国癌症联合委员会（AJCC）分期有关，且肝癌转移患者miR-10b表达高于未转移患者（P〈0．05），Ⅲ-Ⅳ期患者miR-10b表达高于Ⅰ-Ⅱ期（P〈0．05）；miR-10b过表达组HepG2细胞增殖能力明显高于miR-10b抑制组，过表达阴性对照组与抑制表达阴性对照组HepG2细胞生长趋势接近一致：miR-10b过表达组HepG2细胞侵袭、迁移能力较过表达阴性对照组均明显增强，miR-10b抑制组HepG2细胞侵袭、迁移能力较抑制表达阴性对照组明显减弱，过表达阴性对照组与抑制表达阴性对照组HepG2细胞侵袭、迁移能力基本一致。结论miR-10b在人肝癌组织中的表达水平明显高于正常肝组织，抑制miR-10b表达可有效降低肝癌细胞的增殖、侵袭及转移能力。

过表达miR-10b促进肺癌细胞系A549增殖

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者肺癌及癌旁组织中miR-10b(miR-10b)表达水平及miR-10b是否通过调控锌指转录蛋白基因(KLF4)对肺癌细胞系A549恶性化的影响。方法 40例NSCLC患者病理切片,原位杂交检测肺癌及癌旁组织中miR-10b的表达量;对肺癌细胞系A549转染miR-10b mimics后,CCK-8法检测肺癌细胞增殖;real-time PCR及Western blot检测KLF4 mRNA及蛋白水平;软琼脂克隆形成实验检测过表达miR-10b对A549细胞的肿瘤恶性化程度的影响。结果肺癌细胞A549及肺癌组织中miR-10b的表达量分别高于正常肺上皮细胞16HBE及癌旁组织;过表达miR-10b模拟物的A549细胞中,KLF4蛋白水平显著下降(P<0.05);过表达的miR-10b可显著增加A549细胞的增殖速度及在软琼脂内的成瘤性。结论 miR-10b在不同类型细胞及组织中具有分布差异性、可能是通过抑制KLF4的表达促进肺癌细胞增殖及恶性化。

鼻咽癌组织miR-10b与患者临床病理参数及HoxD4 mRNA表达的关系

目的观察鼻咽癌组织中miR-10b的表达变化,并探讨其与患者临床病理参数及相邻基因HoxD4 mRNA表达的关系。方法选择鼻咽癌患者65例作为观察组,术中收集其癌组织65例份;因慢性鼻咽炎进行活检的患者10例作为对照组,收集其鼻咽正常组织10例份。采用实时荧光定量PCR法检测两组鼻咽组织miR-10b及HoxD4 mRNA表达,并分析二者的关系;收集观察组临床资料,分析鼻咽癌组织miR-10b表达与患者临床病理参数的关系。结果观察组与对照组鼻咽组织miR-10b相对表达量分别为3.94±0.21、1.25±0.14,两组比较P<0.05;观察组与对照组鼻咽组织HoxD4 mRNA相对表达量分别为1.48±0.67、0.98±0.30,两组比较P>0.05。鼻咽癌组织中miR-10b与HoxD4 mRNA相对表达量无明显相关性(r=0.038,P>0.05)。患者年龄<30岁、临床TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、T分期为T 3~T 4期的鼻咽癌组织miR-10b表达均高于患者年龄≥30岁、临床TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、T分期为T 1~T 2期的鼻咽癌组织(P均<0.05)。不同性别、组织学类型、N分期、M分期、分化程度的鼻咽癌组织miR-10b表达比较均无统计学差异(P均>0.05)。结论鼻咽癌组织miR-10b表达升高,miR-10b表达与患者的年龄、TNM分期及T分期有关,与HoxD4 mRNA表达无关。

宫颈病变中湿热证分布及其与miR-10b表达的相关性研究

目的:探讨宫颈病变不同病理级别中证型为湿热证的分布特征及其与miR-10b表达的相关性。方法:将全部宫颈上皮内瘤变(CIN)和早期宫颈癌的患者根据病理级别分为低级别鳞状上皮内病变组(LSIL组,71例)、高级别鳞状上皮内病变组(HSIL组,45例)和早期宫颈癌组(23例)。对所有患者行中医证候判定,比较不同病理级别中湿热证的分布情况;对辨证为湿热证的患者进行中医证候评分,比较不同病理级别中湿热证患者的中医证候积分。采用实时荧光定量PCR检测法测定患者宫颈病变组织中的miR-10b含量,比较不同病理级别患者miR-10b含量差异;根据有无湿热证见症将患者分为湿热证组和非湿热证组,比较两组患者宫颈病变组织中miR-10b含量差异。结果:早期宫颈癌组中湿热证的构成比高于HSIL组(P<0.001),HSIL组高于LSIL组(P<0.001);早期宫颈癌组中湿热证的中医证候积分高于HSIL组(P<0.01),HSIL组高于LSIL组(P<0.01);早期宫颈癌组miR-10b表达量低于HSIL组(P<0.05),HSIL组低于LSIL组(P<0.001);湿热证组miR-10b相对表达量低于非湿热证组(P<0.05)。结论:湿热是CIN最常见的证候要素,也是促进宫颈病变进展的主要病理因素,抑制miR-10b表达可能是湿热促进CIN病变进展的机制之一。

miR-10b与肿瘤侵袭转移关系的研究进展

微小RNA（miRNA）是一类进化上高度保守的、内源性的非编码小分子单链RNA,它通过与靶基因相互作用来降解靶mRNA或抑制靶基因的翻译,从而进行转录后的表达调控[1].Lee等[2]和Reinhart等[3]分别在线虫中发现了能调控胚胎后期发育的小分子RNA lin-4和具有转录后调节功能的小分子RNA let-7.

血清中miR-10b、LMP1和Twist1联合检测在鼻咽癌早期诊断及复发诊断中的应用

目的探讨血清中微小核糖核酸-10 b(miR-10b)、潜伏膜蛋白1(LMP1)和人Twist相关蛋白1(Twist1)联合检测在鼻咽癌(NPC)早期诊断和复发诊断中的应用价值.方法选取113例NPC患者(记为NPC组)和45例鼻咽炎患者(记为鼻咽炎组)为研究对象,依据NPC组患者随访结果分为复发组和无复发组,比较各组血清miR-10b、LMP1和Twist1相对表达量,应用ROC曲线评估联合检测血清miR-10b、LMP1和Twist1在NPC早期诊断及复发诊断中的应用价值.结果NPC组血清miR-10b、LMP1和Twist1相对表达量明显高于鼻咽炎组(P<0.05).Twist1阴性表达组、Twist1阴性而LMP1阳性表达组、Twist1、LMP1同时阳性表达组miR-10b表达水平依次明显增高,组间两两比较差异显著(P<0.05).血清miR-10b、LMP1和Twist1三项联合(串联)检测预测NPC的价值较高(特异度、ROC曲线下面积分别为86.5%、0.860),较单独检测高,而血清miR-10b预测NPC的ROC曲线下面积、灵敏度较LMP1、Twist1高,临界值为2.31、1.92、1.87.校正混杂因素后提示血清miR-10b(OR=1.523,95%CI:1.216~1.909)、LMP1(OR=1.523,95%CI:1.029~2.142)和Twist1相对表达量(OR=1.523,95%CI:1.052~2.189)是NPC患者复发的影响因素(P<0.05).血清miR-10b、LMP1和Twist1表达联合(串联)检测预测NPC患者复发的特异度(89.9%)、ROC曲线下面积(0.892)高于单一检测.结论血清中miR-10b、LMP1和Twist1表达与NPC发生及复发密切相关,三者可作为NPC早期诊治的有效标志物.

MiR-10b及其前体和Dicer在乳腺癌中的表达

目的比较癌组织与正常组织中mi R-10b及其前体和Dicer表达的差异,了解乳腺癌与其表达的关系.方法通过SYBR Green实时荧光定量PCR方法检测乳腺癌组织和正常乳腺组织中mi R-10b及其前体的含量.结果 (1)mi R-10b和Dicer在乳腺癌组织中的表达均显著低于癌旁正常组织中的表达(P<0.05);(2)正常组织中的mi R-10b的表达与C-erb B-2成负相关相关(rs=-0.42,P<0.05),正常组织中的Dicer与C-erb B-2的表达与成正相关(rs=0.60,P<0.05).结论 mi R-10b和Dicer在乳腺癌组织中处于低表达状态,可能在乳腺癌的发生发展中起到抑制作用.

miR-10b、肿瘤间质比、miR-466与乳腺癌病理参数、预后关联性分析

目的探讨miR-10b、肿瘤间质比(TSR)、miR-466与乳腺癌(BC)病理参数、预后关联性。方法选取2017-02—2019-02我院212例BC患者作为研究组,同期选取189例乳腺良性肿瘤患者作为对照组。对比两组不同病理参数、不同预后患者miR-10b、TSR、miR-466,Spearman分析各指标与病理参数相关性,K-M曲线、多元线性回归分析各指标与预后关系。结果研究组miR-10b、miR-466、TSR水平高于对照组(P<0.05);不同临床分期、分化程度、淋巴结转移、肿瘤大小、组织学类型、患者miR-10b、miR-466、TSR水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);miR-10b、miR-466、TSR水平与临床分期、淋巴结转移、肿瘤大小、组织学类型呈正相关,与分化程度呈负相关(P<0.05);生存患者miR-10b、miR-466、TSR水平低于死亡患者(P<0.05);多元线性回归分析模型控制年龄、临床分期、淋巴结转移、分化程度、肿瘤大小、组织学类型等其他因素后,miR-10b、miR-466、TSR仍与预后显著相关(P<0.05);miR-10b、miR-466、TSR高危组生存率低于低危组(P<0.05)。结论miR-10b、miR-466、TSR在BC中呈异常状态,与BC病理特征、随访预后呈独立显著相关,可应用于BC辅助诊断及预后评估。

miR-10b介导乳腺癌转移的机制与靶向治疗

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,它的局部浸润和远处转移是目前治疗的难点。微小RNA(miRNA)在癌症中的功能研究,为肿瘤的发生及侵袭转移机制提供了新的思路。目前已研究发现miRNA家族中的miRNA-10b(miR-10b)通过三条通路介导乳腺癌的侵袭和转移。随着miR-10b的分子靶向药物如miR-10b阻断剂、CCN5激活剂、NSAID舒林酸(SS)的不断发现,miR-10b可能成为治疗乳腺癌转移的新靶点。该文就miR-10b在乳腺癌转移中的机制与靶向治疗作一综述。

miR-10b对胃癌细胞侵袭迁移的影响

目的分析miR-10b在胃癌组织中的表达情况;探讨miR-10b ASO对胃癌细胞侵袭和迁移的影响。方法运用RT-PCR检测120例胃癌组织及对应正常组织中miR-10b的表达;通过miR-10b ASO降低胃癌细胞中miR-10b的表达,采用transwell实验和划痕实验观察miR-10b ASO对胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响,同时运用western blot的方法检测侵袭相关蛋白的表达变化。结果在120例胃癌病例中,48.33%(58/120)的胃癌组织miR-10b表达明显高于19.17%(23/120)对应正常癌旁组织(P<0.05)。与空白对照组和转染随机ASO组相比,miR-10b ASO可以显著降低miR-10b的表达(P<0.05);Transwell实验和划痕实验结果显示转染miR-10b ASO后,胃癌细胞的侵袭迁移能力下降明显,同时相关侵袭蛋白RHOC表达下降(P<0.05)。结论 miR-10b在胃癌组织中表达上调,降低miR-10b表达可有效抑制胃癌细胞的侵袭和迁移。miR-10b有可能成为胃癌侵袭转移调控的新靶点。

miR-10b、miR-18b及miR-130b在肺癌中的表达研究

目的探讨miR-10b、miR-18b及miR-130b在肺癌中的表达特征及其在肺癌发生发展过程中的作用。方法收集47例肺癌住院患者的癌组织和癌旁组织,利用Trizol提取总RNA,实时荧光定量PCR检测基因相对表达量。结果肺癌组织与癌旁组织中miR-10b(t=2.83,P<0.05)、miR-18b(t=2.88,P<0.05)及miR-130b(t=2.46,P<0.05)表达量均差异存在显著性。比较鳞癌、腺癌和癌旁组织中miR-10b(F=7.16,P<0.05)、miR-18b(F=4.11,P<0.05)及miR-130b(F=3.43,P<0.05)的表达量也有显著性。癌组织中miR-10b与pri-miR-10b表达量存在负相关关系(r=-0.50,P<0.05)。癌组织与临床指标之间的关系中miR-18b、miR-130b与KI67呈正相关(P<0.05),pri-miR-10b与TOPOⅡ、pri-miR-130b与MRP呈负相关(P<0.05)。结论 miR-10b、miR-18b及miR-130b在癌组织中表达量上调,可能具有促进肺癌发生发展的作用。

鸡miR-10b-5p生物信息学及组织表达分析

【目的】通过对苏禽3号肉鸡的miR-10b-5p进行靶基因预测、生物信息学分析及其在鸡不同生长时期组织表达变化规律研究,探索其在鸡肌肉生长发育中作用。【方法】通过文献和miRBase检索脊椎动物的miR-10b-5p序列,利用Ensembl数据库查询并确定miR-10b-5p在基因组中的位置,根据前体序列构建系统进化树;使用miRDB、microT和TargetScan网站预测miR-10b-5p靶基因,并对靶基因进行GO功能和KEGG通路分析,进而揭示miR-10b-5p的基因功能。采用实时荧光定量PCR技术检测不同生长时期鸡miR-10b-5p组织表达量,探索其在大脑、小脑、垂体、下丘脑、胸肌、腿肌、卵巢、心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏组织中表达变化。【结果】miRBase检索共获得59种动物59条miR-10b-5p序列,即每一种动物都只有一种miR-10b-5p形式。基因定位分析发现,鸡miR-10b-5p位于2号染色体上的HOX基因家族中。常见物种miR-10b-5p成熟序列比对分析结果表明,miR-10b-5p的成熟序列相似性较高,物种间较为保守。系统进化树分析发现,miR-10b在哺乳类中的灵长目、啮齿目、鸟类、鱼类中各自先聚为一支,然后再共同聚为一类,这表明miR-10b在进化过程中是保守的。靶基因预测发现,miR-10b-5p共有300个靶基因。GO功能分析发现,靶基因主要富集到染色质组装和基因表达的转录后调控、组蛋白甲基转移酶复合物、转录因子复合物等功能。KEGG通路分析表明,靶基因主要富集到Wnt和p53信号通路上。组织表达分析显示,miR-10b-5p在检测的各个组织中均有表达;3日龄时大脑、小脑、垂体、胸肌和腿肌中miR-10b-5p表达量显著高于心脏、下丘脑、肾脏和肺脏等组织(P<0.05);90日龄时,垂体、胸肌、腿肌和大脑中miR-10b-5p表达量显著高于其他组织(P<0.05)。与3日龄雏鸡相比,90日龄时垂体、胸肌和腿肌中miR-10b-5p表达量均显著上升(P<0.05)。【结论】鸡miR-10b-5p是组织广泛表达的miRNA,miR-10b在进化过程中是保守的,其可能通过Wnt及p53信号通路调控肌肉细胞增殖分化,进而调控鸡肌肉生长发育。

唾液miR-10b对食管癌诊断及预后的预测价值

【目的】探讨唾液miR-10b对食管癌诊断及预后的预测价值。【方法】收集40例食管癌患者和40例健康对照组的唾液并提取总RNA,采用RT-PCR方法检测miR-10b表达量,并分析其对食管癌的临床病理特征、诊断及预后的关系。【结果】食管癌患者唾液上清及全唾液中miR-10b表达水平显著高于正常对照组(P<0.0001),平均上调倍数分别为26.60倍和36.99倍,其诊断食管癌的敏感性和特异性分别为100.0%和77.5%、77.5%和97.5%。miR-10b的表达水平不受淋巴结转移、癌症分期的影响(P>0.05)。Kaplan-Meier分析表明唾液上清miR-10b低表达组(<35.49±58.90)的生存时间长于高表达组(>35.49±58.90,P=0.046)。【结论】唾液中miR-10b是食管癌预测诊断的敏感性指标,唾液上清液中miR-10b表达量可作为评价预后的预测指标。