lncRNA MIR17HG调节miR-214-3p/RNF38信号轴对肝癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)人类微小RNA17簇宿主基因(MIR17HG)调节微小RNA(miR)-214-3p/环指蛋白38(RNF38)信号轴对肝癌细胞恶性生物学行为的影响。方法收集2022年5月至2023年10月于本院行手术切除的46例肝癌患者的癌组织及癌旁组织,检测lncRNA MIR17HG、miR-214-3p和RNF38的表达。体外培养HepG2、Bel-7402、SMMC-7721、HL-7702细胞,并比较lncRNA MIR17HG、miR-214-3p和RNF38的表达,选择Bel-7402细胞继续研究,随机分为sh-NC组、sh-MIR17HG组、anti-NC组、anti-miR-214-3p组和Bel-7402组。探究各组Bel-7402细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移情况,蛋白质印迹法分析RNF38、半胱天冬酶-3(caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、基质金属蛋白酶-2(MMP2)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)蛋白表达,双荧光素酶验证lncRNA MIR17HG与miR-214-3p以及miR-214-3p与RNF38的关系。结果肝癌组织中lncRNA MIR17HG、RNF38的mRNA表达较高,miR-214-3p的mRNA表达较低,RNF38的蛋白阳性表达率较高(P<0.05)。细胞SMMC-7721、HepG2、Bel-7402中lncRNA MIR17HG mRNA、RNF38 mRNA和RNF38蛋白表达高于HL-7702细胞,miR-214-3p mRNA表达低于HL-7702细胞(P<0.05)。与Bel-7402组、sh-NC组比较,sh-MIR17HG组OD 450nm值、克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细胞数和RNF38、MMP2、Bcl-2、MMP9表达减少,凋亡率和caspase-3表达增加(P<0.05);与sh-MIR17HG组、anti-NC组比较,anti-miR-214-3p组OD 450nm值、克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细胞数和RNF38、MMP2、Bcl-2、MMP9表达增加,凋亡率和caspase-3表达减少(P<0.05)。lncRNA MIR17HG与miR-214-3p以及miR-214-3p与RNF38分别存在靶向关系。miR-214-3p+WT-MIR17HG组荧光素酶活性低于miR-NC+WT-MIR17HG组(P<0.05),miR-214-3p+WT-RNF38组荧光素酶活性低于miR-NC+WT-RNF38组(P<0.05)。结论lncRNA MIR17HG可能通过调控miR-214-3p/RNF38轴促进肝癌细胞的恶性生物学行为。

过表达lncRNA MIR17HG促进宫颈癌HeLa细胞的恶性生物学行为与裸鼠移植瘤生长

目的:探究lnc RNA MIR17HG在宫颈癌组织和细胞中的表达水平与临床意义,分析其对宫颈癌HeLa细胞恶性生物学行为和裸鼠移植瘤生长的影响及其可能的作用机制。方法:采用TCGA数据库分析MIR17HG和TRIM25在宫颈癌中的表达水平,并分析MIR17HG和TRIM25表达水平与患者的临床病理特征的相关性。收集2019年8月至2020年12月山东大学齐鲁医院收治的30例宫颈癌患者的肿瘤组织和癌旁组织,体外培养人正常宫颈上皮End1/E6E7细胞、人乳腺癌细胞HeLa、C33A、CasKi和SiHa,采用qPCR技术检测宫颈癌组织和细胞中的MIR17HG表达水平。采用脂质体将MIR17HG过表达质粒或敲降质粒分别转染宫颈癌HeLa细胞,CCK-8法、克隆形成实验和Transwell实验分别检测MIR17HG对HeLa细胞的增殖、集落形成、迁移和侵袭能力的影响。采用ENCORI预测并用q PCR和WB法验证MIR17HG对TRIM25的靶向调控作用。采用Targetscan和荧光报告系统验证miR-377与TRIM25之间的靶向关系。采用WB法检测MIR17HG对HeLa细胞中AKT信号通路相关蛋白表达的影响。构建MIR17HG过表达HeLa细胞裸鼠移植瘤模型,观察移植的瘤生长。结果:宫颈癌组织中MIR17HG和TRIM25 m RNA均呈高表达(均P<0.05),宫颈癌细胞中MIR17HG表达水平高于人正常宫颈上皮细胞(P<0.01或P<0.001)。MIR17HG和TRIM25的高表达与宫颈癌的恶性程度有关(P<0.05)。与对照组相比,MIR17HG过表达组HeLa细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力均显著升高,而MIR17HG敲降组则相反(P<0.05或P<0.01)。MIR17HG可能通过抑制miR-377来上调TRIM25的表达。MIR17HG过表达组HeLa细胞中AKT信号通路相关蛋白表达水平升高。MIR17HG过表达组裸鼠移植瘤的生长水平高于对照组(P<0.01)。结论:MIR17HG在宫颈癌组织和细胞中呈高表达,过表达MIR17HG能够促进HeLa细胞的恶性生物学行为、加速裸鼠移植瘤的生长,其可能是通过抑制miR-377上调TRIM25激活AKT通路来发挥其促癌的作用。

MIR17HG基因多态与食管鳞癌发病风险的关联研究

目的探讨miR-17-92基因簇宿主基因(microRNA 17-92 cluster host gene,MIR17HG)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)发病风险的关联。方法选取2014年10月至2018年12月河南省林州市肿瘤医院确诊的437例ESCC患者为病例组,选取同期在当地医院参加筛查项目的490名健康者为对照组。采用MassArray时间飞行质谱生物芯片检测MIR17HG区域中SNPs位点(rs17735387、rs4284505、rs9589207和rs72631821)基因型,并对各位点与ESCC发病风险进行关联分析。结果rs4284505(A/G)与ESCC发病风险相关。经多因素校正后,与rs4284505AA基因型携带者相比,AG基因型携带者发生ESCC风险增加(调整OR=1.548,95%CI:1.085~2.210,P=0.016);显性模型提示rs4284505AG/GG基因型携带者罹患ESCC的风险是AA基因型携带者的1.465倍(95%CI:1.040~2.065,P=0.029)。分层分析显示,在男性及吸烟亚组中,rs4284505AG基因型相比于AA基因型增加ESCC的发病风险。交互作用分析表明,与rs4284505AA基因型且不吸烟者相比,AG基因型且吸烟者更易患ESCC(OR=4.218,95%CI:2.135~8.333,P<0.001)。结论MIR17HG区域的SNP位点rs4284505与ESCC发病风险相关,其突变型G等位基因携带者罹患ESCC的风险高于野生型A等位基因携带者。