目的探讨索拉非尼(sorafenib)体外对EC9706细胞生长抑制作用及其机制。方法 q RTPCR检测sorafenib作用后MMP-2、MMP-9、TIMP1、AKT和Bcl-2 m RNA的表达;Western blot检测sorafenib作用后AKT、p-AKT、Bcl-2、MMP-2和TIMP1蛋白表达水平的...目的探讨索拉非尼(sorafenib)体外对EC9706细胞生长抑制作用及其机制。方法 q RTPCR检测sorafenib作用后MMP-2、MMP-9、TIMP1、AKT和Bcl-2 m RNA的表达;Western blot检测sorafenib作用后AKT、p-AKT、Bcl-2、MMP-2和TIMP1蛋白表达水平的变化;Hoechst/PI染色荧光显微镜观察sorafenib诱导的细胞凋亡/坏死;细胞划痕实验观察sorafenib对EC9706细胞的迁移抑制作用。结果与对照组相比,q RT-PCR显示sorafenib下调MMP-2、MMP-9、AKT、Bcl-2 m RNA表达,上调TIMP1 m RNA表达(P<0.05);Western blot显示sorafenib降低MMP-2、AKT、p-AKT、Bcl-2蛋白的表达水平,上调TIMP1蛋白表达水平(P<0.05);荧光显微镜观察发现sorafenib诱导红染细胞增加(P<0.05);细胞划痕实验发现sorafenib作用后划痕明显变宽,并且具有浓度依赖性(P<0.05)。结论索拉非尼能够上调TIMP1表达水平、下调MMP-2、MMP-9、AKT、Bcl-2表达水平,可以抑制食管鳞癌EC9706细胞的迁移、促进凋亡坏死,这些可能是其产生抗肿瘤作用的机制之一。展开更多
文摘目的探讨索拉非尼(sorafenib)体外对EC9706细胞生长抑制作用及其机制。方法 q RTPCR检测sorafenib作用后MMP-2、MMP-9、TIMP1、AKT和Bcl-2 m RNA的表达;Western blot检测sorafenib作用后AKT、p-AKT、Bcl-2、MMP-2和TIMP1蛋白表达水平的变化;Hoechst/PI染色荧光显微镜观察sorafenib诱导的细胞凋亡/坏死;细胞划痕实验观察sorafenib对EC9706细胞的迁移抑制作用。结果与对照组相比,q RT-PCR显示sorafenib下调MMP-2、MMP-9、AKT、Bcl-2 m RNA表达,上调TIMP1 m RNA表达(P<0.05);Western blot显示sorafenib降低MMP-2、AKT、p-AKT、Bcl-2蛋白的表达水平,上调TIMP1蛋白表达水平(P<0.05);荧光显微镜观察发现sorafenib诱导红染细胞增加(P<0.05);细胞划痕实验发现sorafenib作用后划痕明显变宽,并且具有浓度依赖性(P<0.05)。结论索拉非尼能够上调TIMP1表达水平、下调MMP-2、MMP-9、AKT、Bcl-2表达水平,可以抑制食管鳞癌EC9706细胞的迁移、促进凋亡坏死,这些可能是其产生抗肿瘤作用的机制之一。
