食品微生物检验中大肠菌群MPN计数法培养基质量控制措施分析

食品安全已经成为食品领域重点关注的问题之一,食品微生物检验不仅是食品安全的重要保障,也对公众健康有着直接的影响。目前,食品微生物频繁地引发食品安全问题,亟需采取有效措施对食品微生物检验质量加以控制。在开展食品微生物检验的过程中,检验结果会很大程度上受到培养基质量的影响。鉴于此,文章在简要分析MPN计数法的基础上,指出在食品微生物检验中采用MPN计数法面临的挑战,并以大肠菌群为例,总结MPN计数法应用过程中对培养基质量的控制措施,以期为提高食品微生物检验质量提供可靠参考。

大肠菌群MPN计数法不确定度评估

目的为减少大肠菌群检测中的实验误差,提高检验精确度,对大肠菌群MPN计数法不确定度进行评估。方法使用大肠杆菌标准菌株,分析大肠菌群检测结果的不确定度来源,对测定过程中引入的不确定度分量进行评定。采用合成的方法计算检验结果的不确定度。结果合成不确定度为0.06398,扩展不确定度为0.1446（以对数计）。大肠杆菌含量范围结果为1212~2358 MPN/m L。结论本研究发现重复性对不确定度影响最大,应在分析过程中注意控制。

对基于MPN数据清洗算法的改进

相似重复记录的清除是数据清洗领域中的一个很重要的方面,它的目的是清除冗余的数据。介绍了该问题的流行算法—多趟近邻排序算法MPN(Multi-Pass Sorted Neighborhood),该算法能较好地对相似重复记录进行清除,但也有其不足:一是在识别中窗口大小固定,窗口的大小选取对结果影响很大。二是采用传递闭包,容易引起误识别。提出了基于MPN算法的一种改进算法,试验结果证明改进算法在记忆率和准确率上优于MPN算法。

精确模型化学中MPn微扰外推的一个问题

通过对 BH、 AlH、 BF和 AlF的高级别 ab initio势能曲线计算和理论分析 ,发现在分子的几何构型偏离平衡时 ,由于参考态组态不充分的问题 ,Hartree-Fock单参考态的 MPn微扰计算可能给出错误的能量值 .从而表明，目前的精确模型化学方法 (G1、 G2、 G3和 CBS系列 )中用 MPn微扰外推的办法拟合高级别 ab initio,对偏离平衡构型体系 (如动力学研究中的过渡态、中间体等 )的能量计算 ,在一般意义上是不可靠的 .但是 ,在相同的参考态上 ,即使 MPn微扰能已经发生错误 ,QCISD(T)、 CCSD(T)方法却能较好地描述分子解离过程的能量 ,且 QCISD(T)比 CCSD(T)更好 .因此 ,在单参考态理论框架内，发展以严格的 QCISD(T)方法为基础的模型化学方法 ,似更适用于反应动力学方面的研究 .

基于MPN原理的TEMPO/TVC法检测食品中的细菌总数及其测量不确定度的评定

细菌总数(也称需氧细菌数)的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣,是最常见的食品卫生指标之一。本文比较了传统的菌落计数方法和基于最大近似值(MPN)原理的TEMPO/TVC仪器法,对多个种类的190个食品样品进行了检测。实验数据的比对表明TEMPO/TVC法与菌落计数方法一致性程度较好(符合率97.4%,准确度和精确度无差异),测量不确定度相近,具有简便、快速、高效、人为误差较小的特点。

对基于MPN的相似重复记录识别算法的改进

相似重复记录识别是数据清理中的一个关键问题。文章针对常用的多趟邻接排序法提出了两点改进:一是在多趟排序识别过程中直接合并有重叠的相似记录集,取消了最后计算传递闭包的环节;二是利用关键字按字典序排序的特性,在求编辑距离之前先过滤前面的公共子串,减少了相似记录比较的开销。文章最后给出了改进算法与原算法的对比试验结果。

盐度对MPN法测定沿岸海水粪大肠菌群数的影响

粪大肠菌群是在44℃温度下能生长并发酵乳糖产酸产气的微生物生理群，是总大肠菌群中的一部分，水质污染的生物学指标之一。文中使用五管发酵MPN法研究了培养液和稀释水盐度在5，10，15，20，25，30，35七个盐度梯度下对沿岸海水粪大肠菌群数量的影响，结果表明：5～35的七个盐度梯度间的粪大肠菌群数量差异极显著（P〈0．01），在盐度为10～25时，粪大肠菌群数量较为丰富，而在两端盐度的范围，粪大肠菌群数量较少，表明使用MPN法测定近岸海水的粪大肠菌群数量时，培养液和稀释水的盐度不宜过高和过低。调查站位间粪大肠菌群数的水平差异与陆源排污及其影响有关。

MPN-PCR法定量检测武汉鸡肉制品中的空肠弯曲菌

空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni）是引起人类细菌性腹泻的主要人畜共患病原菌之一,严重时可导致人类格林-巴利综合征。其中鸡肉污染导致的食源性传播是人类感染的重要原因。为了调查武汉市鸡肉制品的空肠弯曲菌污染情况,运用最可能数法（MPN）及聚合酶链式反应（PCR）技术结合,即MPNPCR方法 ,对市场采集的128份鸡肉样品进行了空肠弯曲菌的定量检测,结果阳性检出率为18.75%,其中鲜鸡肉检出率为28.26%,冻鸡肉检出率为13.41%,含菌量范围为3.6-92.0 MPN/g。

油田硫酸盐还原菌APS-MPN-PCR快速定量检测方法

为了解决现有油田污水中硫酸盐还原菌检测周期长、检测费用较高的问题，应用聚合酶链式反应（PCR）技术与倍比稀释法（MPN）相结合的APS-MPN-PCR法，对硫酸盐还原菌进行快速定量检测．从污水中制备了直接用于PCR扩增的菌液，保证了定量检测的准确性；建立以腺苷酰硫酸还原酶基因（APS）为靶位点的通用探针APS7F和APS8R的反应体系和扩增条件．研究结果表明，与液体稀释培养法相比，该方法检测灵敏度提高了两个数量级，操作时间缩短（整个检测过程只需要3～4h），检测费用也降低．该方法检测结果非常稳定，真实的表征了污水中实际的SRB菌数量，可以在生产中应用．

大肠菌群MPN检测法用于药品微生物限度检查的探讨

采用大肠菌群作为卫生指示菌，对口服药品进行细菌学检验，实验结果表明有利于口服药品染菌状况的监督与控制。

MPN法测油田水及工业循环水中铁细菌的阳性反应判定

通过ICP测铁离子浓度,革兰氏染色,扫描电镜,证明MPN法可测水样中铁细菌数量。当测试瓶内仅出现红棕色沉淀,测试瓶上层液体棕色并未消失变透明时,并非铁细菌的阳性反应,为油田测铁细菌时的阳性反应判定提供参考。

MPN法的原理与局限性分析

1915年，McCrady首次发表了用MPN法(最大可能数法)来估算细菌浓度的方法，这是一种应用概率理论来估算细菌浓度的方法。目前，我国仍普遍将MPN法用于大肠菌群，大肠杆菌等的检测。因此了解MPN法的原理及局限性，对实验室的微生物检测及食品工业的微生物控制都有着重要的指导作用。

应用概率理论拓宽MPN值的计算与实用性

应用多管法检测大肠菌群细菌数是一种适用各种水样的行之有效的检验方法，但此方法操作繁琐，数据处理较难。本文应用概率理论，推导出多种情况下大肠菌群最可能数ＭＰＮ值计算公式，并编制了方便可靠的ＨＢＧ程序，从而进一步提高了此法的实用价值。

湖泊中军团菌的巢式PCR-MPN检测法

为了直接检测环境水体中军团菌的存在,文章将巢式PCR与倍比稀释法相结合(巢式PCR-MPN法),采用两对引物扩增环境样品基因组DNA。将检测到含有军团菌的样品DNA模板进行十倍梯度稀释,由最低检测的稀释度,计算出样品中军团菌的细胞数,同时确定方法检测的灵敏度。并用克隆建库、构建系统树的方法来验证该文研究方法的特异性。研究结果表明,巢式PCR第二步后获得的序列均为军团菌序列,该方法军团菌DNA的检出限可以低至2.74 fg/μL。该研究建立的水体军团菌检测方法具有简便快捷、特异性好、灵敏度高的特点。

应用概率理论拓宽MPN值的计算

应用概率理论拓宽ＭＰＮ值的计算１前言大肠菌群细菌的检验方法有多管发酵法及滤膜法。滤膜法使用的时间、设备和材料比较经济，但仅适用于杂质较少的水样。多管法克服了滤膜法的缺点，从生理生化和镜检两个方面进行检定，检测可靠程度高，适用于淡水及咸水多种水样，还可...

乙炔还原-MPN(最可能数)法测水稻根系固氮菌数的研究

本文重点介绍了乙炔还原-MPN法测定水稻根系固氮菌数的结果,并与经典方法滤纸条-MPN法及TTC-MPN法进行了比较。乙炔还原-MPN法具有实验周期短、专一性强和判断客观等优点,是一种快速准确地测定水稻根系固氮菌数及初步筛选高活性固氮菌株的有效手段。

肺炎支原体MPN 668蛋白的克隆和表达与纯化

目的克隆表达与纯化肺炎支原体mpn 668蛋白。方法以Mp 129株基因组DNA为模板,PCR法扩增目的基因mpn 668,将其亚克隆至pGEX-6 P-1载体中。经鉴定后将其转化至表达菌E.coli BL 21中进行诱导表达。采用SDS-PAGE和蛋白质印迹等方法对表达产物进行分析鉴定并纯化GST融合蛋白。结果成功扩增出总长度为423 bp的mpn 668基因,所构建的原核重组质粒经PCR、双酶切以及测序鉴定与预期目的基因相符。SDS-PAGE显示,IPTG可诱导一分子量约为41 kD的可溶性GST融合蛋白,经GST·BindTMPurification Kit纯化后,纯度可达95%以上。结论本研究成功克隆表达出mpn 668融合蛋白,为下一步研究其功能奠定了基础。

对耐胆盐革兰氏阴性菌检验采用MPN法和平板法的比较

目的:比较MPN法和平板法对耐胆盐革兰氏阴性菌计数是否存在显著性差异。方法:采用单人四种方法计数和多人两种方法计数,通过统计学分析是否存在显著性差异。结果:MPN的离散性较大,预培养5h较2 h菌体有增殖。结论:检查耐胆盐革兰氏阴性菌应尽量在2 h内完成,MPN法较灵敏,更适合于污染轻的样品。

不同培养基对湖泊氨氧化细菌MPN计数的影响

本文研究了培养时间、培养基类型、硫酸铵浓度对湖泊沉积物与水中氨氧化细菌(AOB)MPN计数的影响。结果表明,MPN值随培养时间的延长而增大,且趋于稳定。对不同样品而言,培养40d后,MSF培养基均给出稳定的MPN值。在3种不同类型的培养基(XZ-AOB、MSF、SW)中,MSF产生的MPN值最大。此外,培养基中的硫酸铵浓度对MPN计数亦有重要影响,与沉积物AOB相比,湖水AOB对硫酸铵浓度更为敏感。

GB 4789.3-2010 MPN法适合酱腌菜大肠菌群现行指标的研究

实验采用GB/T 4789.3-2003方法与GB 4789.3-2010的MPN(最可能数)计数法对散装酱腌菜与袋装酱腌菜共90个样品中的大肠菌群进行检测,并结合2010版国家标准对2003版大肠菌群的限量指标进行替换来对比两类酱腌菜的检测结果,在此基础上,对两类酱腌菜的不合格率进行了分析。结果表明:两类酱腌菜中,2003版大肠菌群限量指标分别为90,30 MPN/100mL(g),替换后的2010版大肠菌群限量指标分别为0.9,0.3MPN/g(mL),两种方法检测袋装酱腌菜均为大肠菌群阴性,即合格样品。散装酱腌菜2003版的不合格率为8.6%,替换后的2010版不合格率为11.4%,二者差值小于5%,其原因在于2003版与2010版检测方法的灵敏度有差异,因此替换后的检测结果对酱腌菜的不合格率未产生影响。研究结果可为食品中大肠菌群限量指标的确定提供一定依据。