凝血因子Ⅶ及其基因MspI多态性与心肌梗塞危险性的研究

目的；探讨凝血因子Ⅶ活性及其基因ＭｓｐＩ多态性与中国汉族人心肌梗塞的关系。 方法：测定１２５例健康人（正常对照组）和１３７例心肌梗塞患者（心肌梗塞组）血浆凝血因子Ⅶ活性；采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＭｓｐＩ酶切法确定其基因型。 结果：①心肌梗塞组血浆凝血因子Ⅶ活性（Ｐ＜０．０１）和血清总胆固醇（Ｐ＜０．０５）均显著高于正常对照组；仅前者与心肌梗塞的危险性独立相关（ＯＲ＝１．０４，Ｐ＜０．０１）。②凝血因子Ⅶ基因型和等位基因的频率分布在两组间无显著差异。③Ｍ_１Ｍ_１纯合子血浆凝血因子Ｗ活性显著高于Ｍ_１Ｍ_２杂合子（Ｐ＜０．０５）。 结论：支持血浆凝血因子Ⅶ活性升高是中国汉族人心肌梗塞的危险因素；凝血因子Ⅶ活性受其基因ＭｓｐＩ多态性的影响，但该多态性并不是中国汉族人心肌梗塞的独立危险因子。

饮酒和CYP1A1-MspI、ALDH-2基因多态性与食管癌的相关性

目的探讨饮酒和细胞色素P4501A1-MspI（CYP1A1-MspI）、乙醛脱氢酶-2（ALDH-2）基因多态性与食管癌发病之间的关系。方法采用病例-对照研究的方法,以160例食管癌患者及160例非癌对照者的外周血白细胞为样本,利用聚合酶链反应（PCR）技术分析了CYP1A1-MspI和ALDH-2基因多态性。结果 CYP1A1-MspI突变纯合型（m2/m2）和ALDH-2变异基因型频率分布分别为39.375%、70.625%（病例组）和20.000%、43.750%（对照组）,二者差异显著（P〈0.01,P〈0.01）。CYP1A1-MspI（m2/m2）患食管癌的风险显著增加（OR=2.598,95%CI=1.819~4.265）。ALDH-2变异基因型者患食管癌的风险也显著增加（OR=3.091,95%CI=1.922~4.738）。基因突变的协同分析发现CYP1A1-Ms-pI（m2/m2）/ALDH-2变异基因型者在食管癌组和对照组中的分布频率分别为31.875%和6.250%,二者有显著差异（P〈0.01）。CYP1A1-MspI（m2/m2）/ALDH-2变异基因型者患食管癌的风险显著增加（OR=9.909,95%CI=3.574~12.532）。病例组的饮酒率显著高于对照组的饮酒率（OR=3.096,95%CI=1.532~4.88 0,P〈0.01）,CYP1A1-MspI（m2/m2）/及ALDH-2变异基因型与饮酒有协同作用（OR=40.727,95%CI=17.965~66.572）。结论 CYP1A1-MspI（m2/m2）/ALDH-2变异基因型和饮酒是食管癌的易患因素,三者的联合在食管癌的发生中起着协同的作用。

彝族乳腺癌遗传易感性CYP1A1基因MspI多态性的相关性研究

目的探讨云南省彝族乳腺癌遗传易感性与CYP1A1基因MspⅠ位点多态性的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性PCR-RFLP技术,对云南省肿瘤医院51例彝族乳腺癌患者及60例健康女性人群的CYP1A1基因3′端限制性内切酶MspI位点基因多态性进行分析。结果乳腺癌组C等位基因分布频率(51.0%)明显高于对照组(33.3%),差异均有统计学意义(均P<0.05)。3种基因型分布频率与对照组相比,差异有统计学意义(均P<0.05)。TC、CC基因型患乳腺癌的危险度分析OR(95%CI)分别是TT基因型的1.19和1.95倍。结论云南省彝族乳腺癌发病率可能与CYP1A1基因型有关,基因突变增加了患乳腺癌的风险。

CYP1A1基因MspI多态性与卵巢癌易感性关系的研究

目的探讨张家口地区卵巢癌易感性与CYP1A1基因MspI位点多态性的关系。方法研究采用PCR-RFLP技术,将张家口地区34例卵巢癌患者作为实验组,45例健康女性人群作为对照组,分析CYP1A1基因3′端限制性内切酶MspI位点基因的基因多态性。结果卵巢癌组MspI基因型分布为:基因型TT占21.8%;基因型TC占52.7%;基因型CC占25.5%;等位基因T、C分别为48.2%、51.8%。健康人群组MspI基因型分布为,基因型TT占42.2%;基因型TC占46.7%;基因型CC占11.1%;等位基因T、C分别为65.6%、34.4%。结论该地区健康人群组和卵巢癌组CYP1A1基因MspI位点均呈多态性分布,两者之间差异有显著性(P<0.05),提示卵巢癌发病率可能与CYP1A1基因型有关。

延边朝鲜族人群Ⅰ型胶原蛋白A2基因MspI多态性位点研究

[目的 ]了解中国朝鲜族人群的Ⅰ型胶原蛋白A 2基因MspI多态性位点的存在和等位基因频率 ,并与其它地区人群进行比较 .[方法 ]按酚 氯抽提法提取人类基因组DNA ,采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性方法对Ⅰ型胶原蛋白A 2基因MspI多态性位点进行检测 .[结果 ]12 0名个体中 ,无酶切位点的纯合个体为 89例 ,P-P-基因型频率为 74 2 % ;有酶切位点的杂合个体为 2 2例 ,P+ P-基因型频率为 18 3% ;有酶切位点的纯合个体为 9例 ,P+ P+ 基因型频率为 7 5 % ;2 4 0个等位基因中MspI酶切位点基因P+ 的频率为 16 7% .[结论 ]延边朝鲜族人群Ⅰ型胶原蛋白A 2基因存在多态性 ,Ⅰ型胶原蛋白A 2基因MspI多态性分布与其它地区人群的分布有所不同 ,可以作为朝鲜族的一个遗传标记 .

中国人及高加索人群P_(20)探针MSPI位点多态性差异

本文应用抗肌萎缩蛋白基因内P2o（DXS269）探针对中国人和高加索人MspI位点进行限制性片段长度多态性（RFLP）分析，发现高加索人的杂交日上除了出现文献报告的多态性住点M1外。尚存在中国人杂交图上M2的1.9kb片段，且为高加索人的常有片段，同时存在与中国人相同的常有片段－小于1.okb（约o.3kb）的片段、此结果表明中国人和高加索人群在P2o区域经MspI酶切后的片段长度差异是MSPI识别位点的多态性。

载脂蛋白B基因MspI多态性分析及其临床应用

为研究载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）基因多态性与冠心病的关系，应用ＰＣＲ检测９０例冠心病患者和１２０例健康人ａｐｏＢＭｓｐＩ酶切位点的限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）。结果产生三种基因型：Ｍ＋Ｍ＋、Ｍ＋Ｍ－、Ｍ－Ｍ－，冠心病组等位基因Ｍ＋、Ｍ－频率分别为０．９２、０．０８；对照组Ｍ＋、Ｍ－频率分别为０．９８、０．０２，少见等位基因Ｍ－的频率在冠心病组显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），但两组各基因型之间的血脂、脂蛋白、载脂蛋白水平均无显著性差异。提示ａｐｏＢ基因该位点的多态性可能与冠心病的发病有关。

内源性高甘油三酯血症患者载脂蛋白AⅠ基因MspI酶切位点多态性

探讨中国人内源性高甘油三酯血症患者载脂蛋白AⅠ基因MspI酶切位点变异频率及其对血脂、载脂蛋白水平的影响。应用多聚酶链反应对成都地区汉族 2 5 5例正常人和 134例内源性高甘油三酯血症患者apoAⅠ基因启动子 (- 78bp)及内含子I(+83bp)两个MspI限制性片段多态性进行分析。内源性高甘油三酯血症组及对照组载脂蛋白AⅠ基因MspI的多态性以G/G基因型占优势。载脂蛋白AⅠ基因启动子区MspI酶切位点A等位基因频率内源性高甘油三酯血症组显著高于对照组 (0 .35 0比 0 .2 73,P <0 .0 5 ) ,并显著高于欧美的白种人 (0 .30 0vs 0 .12 0～ 0 .191,P <0 .0 1) ,而 +83bpT等位基因则未见差异。在所研究对象中具有A/A基因型者血清甘油三酯水平、甘油三酯 /高密度脂蛋白胆固醇比值及载脂蛋白CⅢ水平较具有G/G及G/A基因型者显著升高 (P <0 .0 5 ) ,血清载脂蛋白CⅡ水平有增加趋势 (P >0 .0 5 )。载脂蛋白AⅠ基因启动子 (- 78bp)MspI酶切位点的突变与中国人内源性高甘油三酯血症有一定关联 ,载脂蛋白AⅠ基因A/A基因型对血清甘油三酯、载脂蛋白CⅡ水平及甘油三酯 /高密度脂蛋白胆固醇比值的升高有一定影响。

高甘油三酯血症患者载脂蛋白B基因的MspI多态性研究

利用Apo B cDNA探针（LB 1.5）,检测13名高甘油三酯血症（HTG）患者和21名正常对照者的Apo B基因MspI限制性片段长度多态性（RFLP）等位基因频率。研究结果显示,34份标本共出现2.35kb（M_1）和2.60kb（M_2）二种不同长度的杂交片段。M_2等位基因频率在HTG患者（0.192）和对照者（0.024）之间存在明显差异（P=0.02）。

国人载脂蛋白A1基因多态性与血脂水平及冠心病的关系

为探讨载脂蛋白A1基因 - 75bp +83bp位点多态性与血脂水平及冠心病发生之间的关系 ,采用生物化学方法分别测量经冠状动脉造影证实的 92例冠心病患者及 4 5例正常人空腹血脂水平 ,应用聚合酶链反应对载脂蛋白A1基因DNA 4 33bp的 5’末端片段进行限制性片段长度多态性分析。结果发现 ,冠心病组甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白、载脂蛋白B及脂蛋白 (a)水平均高于对照组 (均P <0 .0 5 ) ,而高密度脂蛋白 (P <0 .0 0 5 )与载脂蛋白A1 (P <0 .0 5 )水平则低于对照组 ;冠心病组较对照组M1 -及M2 -基因型频率明显为低 (P <0 .0 0 5 ,P <0 .0 5 ) ;与M1 + +相比 ,M1 +- - -者血中高密度脂蛋白及载脂蛋白A1水平分别升高 1 8.0 9%和 1 5 .6 8% ,而M2 +- - -者血中高密度脂蛋白及载脂蛋白A1水平较M2 + +分别升高 6 .1 9%和 8.6 5 %。以上结果表明 ,载脂蛋白A1基因- 75bp位点G被A取代及 +83bp位点C被T取代或G被A取代后个体血载脂蛋白A1及高密度脂蛋白水平升高 ;

昆明地区汉族人vWF基因多态性与急性脑梗死的相关性

目的探讨血浆血管性假性血友病因子(von Willebrand factor vWF)表达水平及其基因19内含子MspI(Major surface proteaseI)多态性与急性脑梗死的相关性。阐明vWF基因19内含子MspI多态性在昆明地区汉族人群中的分布。方法收集119例急性脑梗死(24h内)和117名昆明地区汉族健康人为对照,免疫比浊法检测血浆vWF表达水平;聚合酶链反应-限制性片段长度多态性结合MspI酶切技术进行vWF基因19内含子MspI多态性分析。结果急性脑梗死血浆vWF表达水平为(189.37%±89.55%)明显高于对照组(P<0.05)。昆明地区汉族人群中vWF基因19内含子MspⅠM+/M+、M+/M-和M-/M-基因型频率分布分别为0.047、0.377和0.576;M+/M-等位基因型频率分布分别为0.235、0.765。脑梗死组MspⅠ多态性M-/M-基因型频率高于对照组(P<0.05)。脑梗死组M+/M+、M+/M-和M-/M-型的循环vWF水平分别为(170.00%±78.67%)、(148.62%±62.58%)和(205.38%±92.68%),各基因型之间差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论血浆vWF表达水平及vWF基因19内含子MspⅠ多态性M-/M-基因型与急性脑梗死发生有显著相关性;昆明地区汉族人群中vWF基因19内含子MspⅠ等位基因M+和M-的分布与其他人群不同。

vWF基因19内含子MspⅠ多态性、循环水平与中国人冠心病关系的研究

目的 探讨vWF基因 19内含子MspⅠ多态性在中国人冠心病发病中的作用。 方法 收集冠心病患者 (冠心病组 ) 10 9例和中国汉族健康人 (正常对照组 ) 10 4名的资料 ,冠心病组进一步分为心肌梗死和心绞痛亚组。采用PCR技术结合MspⅠ酶切分析等测定vWF基因 19内含子MspⅠ限制性片段长度多态性 ;同时采用ELISA法测定循环vWF水平。结果 ①正常对照组中M+/M+、M+/M-和M-/M-基因型频率分别为0 .0 2 0、0 .490和 0 .490 ;心肌梗死、心绞痛亚组的MspⅠ多态性基因型分布与正常对照组相比 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,其M-/M-型频率分别为 0 .64 9和 0 .712 ,均显著高于正常对照组 (P值均 <0 .0 5 ) ;②冠心病心功能Ⅰ～Ⅱ级及Ⅲ～Ⅳ级患者的M-/M-基因型频率分别为 0 .667和 0 .70 6,低射血分数 (EF)和正常EF分别为 0 .744和 0 .5 89,差异均无显著性 (P >0 .0 5 ) ;③经冠状动脉造影确诊的冠心病患者M-/M-基因型频率在单支、双支和多支病变分别为 0 .778、0 .667和 0 .5 84;④冠心病组、心肌梗死、心绞痛亚组和正常对照组循环vWF水平分别为 ( 185 .0 7± 80 .5 7) %、( 2 11.2 2± 85 .85 ) %、( 15 6.3 2± 63 .60 ) %和 ( 117.0 1± 5 5 .5 2 ) % ,各疾病组与正常对照组相比 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) ;冠心?

CYP1A1基因多态性和吸烟对肺癌的易感性

目的采用PCR-RFLP技术测定CYP1A1的mspI和exon 7位点多态性,并观察两者及吸烟对肺癌易感性的影响。方法研究采用等位基因特异性扩增和PCR-RFLP技术,分析CYP1A1基因3'端限制性内切酶mspI和exon 7位点基因的基因多态性。结果 CYP1A1的mspI和exon 7位点各自基因型分布频率均无显著性差异(χ2=1.34,P>0.05);其中mspI突变型TC和CC患肺癌的相对危险性增加(OR=1.18,P<0.05;OR=1.49,P<0.05);exon 7突变型Ile/Val和Val/Val患肺癌的相对危险性亦增加(OR=1.35,P<0.05;OR=2.70,P<0.05);两多态位点联合作用分析,表明携带突变基因的个体肺癌易感性较高(OR=4.42,P<0.05)。对肺癌易感性与吸烟的关系分析,吸烟者患肺癌的危险性是不吸烟者1.77倍(χ2=5.72,P<0.05);携带突变基因且吸烟者肺癌易感性显著增加(OR=2.16,P<0.05;OR=2.63,P<0.05)。结论 CYP1A1突变型基因可能增加肺癌的易感性;CYP1A1突变型基因与吸烟之间存在协同作用,明显提高了患肺癌的风险性。

恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1 DNA与改良痘苗病毒组合疫苗诱导小鼠抗体应答

目的探索DNA与改良痘苗病毒(MVA)组合免疫对增强恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1(MSP1)抗体应答的作用。方法以人工合成MSP1全基因为基础分别构建DNA免疫质粒VR1020/190和重组MVA,单用VR1020/190或与表达质粒GM-CSF共同对小鼠进行初始免疫后,用重组病毒追加强化,采用DNA/MVA组合方案免疫BALB/c小鼠,ELISA测定血清IgG及其亚类水平,经腹腔接种转基因伯氏疟原虫Pb-PfM19进行攻击。结果DNA免疫能有效诱导小鼠产生抗MSP1-190抗体,其终点稀释度为1∶2500,GM-CSF质粒共免疫组抗体的终点稀释度为1∶11150,抗体亚类的测定表明GM-CSF质粒显著促进了IgG1类抗体应答,MVA追加可使单独免疫组和共免疫组抗体分别增加53和10倍;两实验组产生了水平相近的抗19000抗体(1∶32000),其含量占血清中MSP1总IgG的1/4-1/3。经转基因伯氏疟原虫Pb-PfM19攻击后小鼠的存活时间并没有明显延长(P>0.05)。结论采用合成MSP1全基因进行DNA/MVA组合免疫可诱导小鼠产生显著的抗体应答,抗体的详细特性和保护作用正在进一步研究中。

载脂蛋白A基因启动子区G→A置换及内含子ⅠC→T置换与冠心病的关联

目的 探讨冠心病患者载脂蛋白 (apo) A 基因 Msp 酶切位点变异频率及其对血脂水平的影响。方法 应用多聚酶链反应对成都地区汉族 178例正常人和 118例冠心病患者 apo A 基因启动子 (- 78bp)及内含子 (+83bp) ,Msp 限制性片段多态性进行分析。结果 冠心病组及对照组 apo A 基因 Msp 的多态性以G/ G基因型占优势。apo A 基因启动子区 Msp 酶切位点 A等位基因频率冠心病组与对照组比较有升高趋势 ,但无显著性差异 (0 .331vs. 0 .2 70 ,P=0 .0 6 7) ,+83bp T等位基因频率冠心病组较对照组显著升高 (0 .0 72 vs.0 .0 34 ,P<0 .0 5 )。在所研究对象中具有 A/ A基因型者血清 TG水平较具有 G/ G基因型者显著升高 (P<0 .0 5 )。结论 apo A 基因内含子 (+83bp) Msp 酶切位点的突变与中国人冠心病有一定关联 ,apo A 基因 A / A基因型对血清甘油三酯的升高有一定影响。

昆明汉族急性脑梗死患者vWF基因多态性研究

目的阐明vWF基因19内含子MspI多态性在昆明地区人群中的分布;探讨vWF基因19内含子MspI多态性与急性缺血性脑梗死的关系。方法收集119例急性缺血性脑梗死患者(脑梗死组)和117名昆明地区健康人(对照组),应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析vWF基因19内含子MspI多态性。结果昆明地区汉族人群中vWF基因19内含子M+/M+、M+/M-和M-/M-基因型频率分别为0.034、0.470和0.496;M+和M-等位基因频率分别为0.269和0.731。脑梗死组中M+/M+、M+/M-和M-/M-基因型频率分别为0.059、0.286和0.655,M+等位基因和M-等位基因频率分别为0.202和0.798,其M+/M-基因型频率低于对照组,M-/M-基因型频率高于对照组。2组基因频率分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论昆明地区汉族人群中vWF基因19内含子MspⅠ酶切位点各基因型的分布与文献报道中的高加索人群差异较大,与中国地区其他民族人群也不尽相同。急性脑梗死的发生可能与vWF基因19内含子MspI多态性有关。

张家口地区健康人群CYP1A1基因多态性

目的探讨张家口地区健康人群CYP1A1基因MspI和Ile/Val的多态性。方法采用等位基因特异性扩增和PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)技术,分析360例张家口地区健康成人的CYP1A1基因3′端限制性内切酶MspI位点和Exon7位点的3种基因型的分布规律。结果张家口健康人群MspI基因型m1m1占35.8%,基因型m1m2占50.2%,基因型m2m2占14.0%,等位基因m1m2分别为60.9%,39.1%。Ile/Val多态性,其Ile及Val等位基因的频率分别为68.5%,31.5%。Ile/Ile,Ile/Val,Val/Val基因型分布频率分别为44.4%,48.1%,7.5%。结论张家口地区健康人群CYP1A1基因存在MspI和Ile/Val的多态性。

CYP1A1、NAT2基因多态与急性淋巴细胞白血病的关系

目的探讨CYP1A1MspI、NAT2基因多态与急性淋巴细胞白血病(ALL)易感性的关系。方法应用PCR-RFLP和自动实时荧光Light-cycler技术,分析78例ALL患者和112例健康人CYP1A1MspI和NAT24个位点基因多态性,比较ALL患者与对照组间频率差异。结果基因多态位点,各等位基因和基因型频率与对照组比较有显著性差异(p【0.05),其中等位基因m2使患ALL的危险度提高了1.54倍,m1m2、m2m2基因型使患ALL的危险度分别提高了2.27倍和2.77倍,ALL组NAT2慢乙酰化基因型频率与对照组比较有显著性差异(p【0.05);同时具有MspI和慢乙酰化基因型的个体ALL易患风险明显升高(p【0.01,OR=7.14)。结论CYP1A1MspI基因多态和NAT2慢乙酰化基因型可能与ALL的发生有关。

基质金属蛋白酶-2和-9在食管鳞状细胞癌中的过表达

目的探讨人食管鳞癌组织中基质金属蛋白酶(MMP)-2、-9的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法,检测57例食管鳞癌及10例食管正常黏膜石蜡标本中MMP-2、-9蛋白的表达情况。结果食管鳞癌组织中MMP-2及MMP-9阳性表达率(40.3%,61.4%)显著高于正常组织(0.0%,10.0%)(P<0.05)。食管鳞癌组织中MMP-2及MMP-9阳性表达与淋巴结转移和癌组织浸润深度有显著相关性(P<0.05),而与患者的性别、年龄和组织分化程度无显著相关性(P>0.05)。结论 MMP-2和MMP-9在食管癌中显著高表达,与食管癌的转移及侵袭有关,其异常表达可能共同参与食管癌的发生、发展过程,检测MMP-2、-9可作为食管癌病理学特点的参考指标。

两个国外猪品种GH基因MspⅠ多态性及其与生产性状的相关分析

采用PCR-RFLP技术,比较分析了大约克夏猪和长白猪生长激素基因全序列的MspⅠ酶切位点多态性。结果显示,两个国外猪品种pGH基因全序列中均存在11个MspⅠ酶切位点;在大约克夏猪中有6种MspⅠ-RFLP带型,长白猪中有7种MspⅠ-RFLP带型,带型分布在两个猪品种中差异极显著(P<0.01)。MspⅠ-RFLP与生产性状的相关分析表明,两个国外猪品种各带型与生产性状的差异均未达到显著水平(P>0.05)。