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Msx2条件性基因敲除小鼠动物模型的建立和表型的初步研究 被引量:3
1
作者 于紫燕 王春霞 +2 位作者 孙琦 赵江月 张劲松 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期964-967,共4页
目的利用Cre/LoxP系统建立晶状体组织特异性Msx2基因敲除小鼠模型,并初步研究其表型。方法设计基因敲除方案,获得条件基因敲除小鼠Msx2cko和对照野生型小鼠Msx2wt。通过PCR技术对小鼠或E10.5和E14.5胚鼠进行基因型鉴定,通过整胚LacZ染... 目的利用Cre/LoxP系统建立晶状体组织特异性Msx2基因敲除小鼠模型,并初步研究其表型。方法设计基因敲除方案,获得条件基因敲除小鼠Msx2cko和对照野生型小鼠Msx2wt。通过PCR技术对小鼠或E10.5和E14.5胚鼠进行基因型鉴定,通过整胚LacZ染色鉴定Le-Cre重组酶活性,同时通过对P1小鼠晶状体组织行HE染色进行初步表型观察。结果通过基因型检测证实了Msx2基因敲除小鼠模型建立成功,LacZ染色显示Le-Cre重组酶特异性表达在发育中的小鼠胚胎形成晶状体板的表面外胚叶特定区域。Msx2cko P21小鼠表现为小眼球畸形,眼周至鼻线性脱毛。HE染色显示Msx2cko小鼠晶状体体积减小及晶状体茎形成。结论初步建立了Msx2条件性基因敲除小鼠模型,Msx2条件基因敲除后引起小鼠晶状体发育异常,小眼球畸形。 展开更多
关键词 晶状体 条件基因敲除 小鼠 msx2
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miR-141及成骨基因Dlx5、Msx2、Runx2在去卵巢骨质疏松模型小鼠BMSCs成骨分化中的表达 被引量:7
2
作者 魏振朴 张文明 +2 位作者 孙攀 王志强 林燕萍 《康复学报》 CSCD 2019年第6期37-43,共7页
目的:观察去卵巢骨质疏松模型组与假手术组小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化中miR-141及成骨基因Dlx5、Msx2、Runx2的表达差异和变化趋势,探讨绝经后骨质疏松症的发生机制。方法:选用20只4周龄清洁级C57雌性小鼠,按照随机数字表法分为模型... 目的:观察去卵巢骨质疏松模型组与假手术组小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化中miR-141及成骨基因Dlx5、Msx2、Runx2的表达差异和变化趋势,探讨绝经后骨质疏松症的发生机制。方法:选用20只4周龄清洁级C57雌性小鼠,按照随机数字表法分为模型组和假手术组,每组各10只。模型组采用卵巢切除法建立小鼠绝经后骨质疏松症模型,假手术组保留卵巢,只切除卵巢周围脂肪。造模2个月后模型组小鼠经鉴定建模成功,此时采用全骨髓法分离培养2组小鼠BMSCs,进行细胞形态学观察,运用流式细胞技术进行细胞表型鉴定。对BMSCs成骨诱导分化,分别于第3天、8天、13天时采用碱性磷酸酶染色、定量和茜素红染色,观察BMSCs成骨能力。成骨诱导第3天、8天、13天时运用q-PCR检测miR-141及成骨基因Dlx5、Msx2、Runx2的表达,Western blot检测成骨基因蛋白的表达。结果:BMSCs经流式细胞表型鉴定CD29、CD44均阳性表达,CD34、CD45均阴性表达。2组BMSCs成骨诱导后,ALP表达量逐渐提高,第8天达到高峰,随后逐渐下降,呈"Λ"型变化;模型组较假手术组染色浅,活性检测结果与染色深浅程度一致。成骨诱导分化第3天、8天、13天时,模型组ALP表达量均低于假手术组(P<0.05),2组细胞进行茜素红染色,第8天时钙化结节出现,在第13天时,钙化结节数增多;成骨诱导第3天、第8天时,2组钙化结节数无明显差异,第13天时,与假手术组比较,模型组钙化结节数较少,成骨分化明显减缓。2组BMSCs成骨诱导后,成骨基因与蛋白的表达:成骨诱导第3天、8天、13天时,组内比较显示,Dlx5、Runx2表达均呈持续上升,miR-141、Msx2持续下降(P<0.05),与第3天时比较,第8天、13天的各项指标均有明显差异(P<0.05),组间比较显示,模型组miR-141、Msx2表达高于假手术组,Dlx5、Runx2表达低于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:卵巢切除影响BMSCs的成骨分化;BMSCs成骨诱导分化中,miR-141、Msx2是成骨负性调节因子,Dlx5、Runx2是正性调节因子。 展开更多
关键词 绝经后骨质疏松 间充质干细胞 miR-141 Dlx5 msx2 RUNX2
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糖尿病大鼠钙化血管中Msx2和Wnt3a的表达 被引量:4
3
作者 谈君 任晓妹 刘乃丰 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期173-176,共4页
目的研究糖尿病对血管钙化的影响及Msx2和Wnt3a基因在钙化血管中的表达变化。方法将48只雄性Wistar大鼠随机分为四组:维生素D3和尼古丁诱导的单纯血管钙化组(n=12)、链脲佐菌素诱导的单纯糖尿病组(n=12)、链脲佐菌素联合维生素D3和尼古... 目的研究糖尿病对血管钙化的影响及Msx2和Wnt3a基因在钙化血管中的表达变化。方法将48只雄性Wistar大鼠随机分为四组:维生素D3和尼古丁诱导的单纯血管钙化组(n=12)、链脲佐菌素诱导的单纯糖尿病组(n=12)、链脲佐菌素联合维生素D3和尼古丁诱导的糖尿病合并血管钙化组(n=12)和正常雄性Wistar大鼠为正常对照组(n=12)。测定大鼠血糖、血清胰岛素、总胆固醇和甘油三酯水平,以血管von Kossa染色、血管钙含量和碱性磷酸酶活性作为判断血管钙化程度的指标,测定大鼠血管中Msx2和Wnt3a mRNA的表达。结果与正常对照组相比,单纯血管钙化组大鼠血管中Msx2和Wnt3a mRNA相对表达量有所升高(P<0.05),但血管钙含量和碱性磷酸酶活性无明显变化。与正常对照组及单纯血管钙化组相比,糖尿病合并血管钙化组大鼠的血管中,可见沿中膜弹力层内广泛分布的钙盐沉积,大鼠血管中钙含量和碱性磷酸酶活性以及血管内Msx2和Wnt3amRNA相对表达量明显增高(P<0.05)。结论糖尿病可以明显加速血管钙化的发生和发展。在糖尿病大鼠钙化血管中,骨形成过程中的转录因子Msx2和Wnt3a表达增高,提示血管钙化是一个类似于骨形成的过程,Msx2和Wnt3a参与血管钙化病变的发生。 展开更多
关键词 糖尿病 血管钙化 msx2 WNT3A
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小鼠牙胚发育帽状期Msx2、BMP-4基因的表达和意义 被引量:2
4
作者 郑梁 吴补领 轩昆 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2001年第4期222-224,共3页
目的 :探讨Msx2、BMP - 4基因在小鼠牙胚发育帽状期的表达及其与牙胚形态发育的关系。方法 :利用原位杂交的方法观察小鼠牙胚帽状期Msx2、BMP - 4基因的表达方式 ;利用原位末端标记法 (TUNEL法 )研究牙胚细胞凋亡情况。结果 :Msx2、BMP ... 目的 :探讨Msx2、BMP - 4基因在小鼠牙胚发育帽状期的表达及其与牙胚形态发育的关系。方法 :利用原位杂交的方法观察小鼠牙胚帽状期Msx2、BMP - 4基因的表达方式 ;利用原位末端标记法 (TUNEL法 )研究牙胚细胞凋亡情况。结果 :Msx2、BMP - 4基因在牙胚的发育中有表达 ,帽状期牙胚细胞的凋亡主要集中于釉结处。结论 :Msx2、BMP - 展开更多
关键词 msx2 BMP-4 牙齿形态发育 凋亡 原位杂交 原位末端标记法
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基于Notch1-RBP-Jk/Msx2信号通路探讨大黄酸对糖尿病肾病主动脉钙化的作用及机制研究 被引量:5
5
作者 段晓星 常永丽 +1 位作者 张国光 潘雪 《临床肾脏病杂志》 2020年第1期51-56,共6页
目的基于人跨膜受体蛋白Notch-1通路(Notch1-recombining binding protein suppressor of hairless,Notch1-RBP-Jk)/相互作用蛋白Msx2(Msx2-interacting nuclear target protein,Msx2)信号通路,探讨大黄酸对糖尿病肾病主动脉钙化的控制... 目的基于人跨膜受体蛋白Notch-1通路(Notch1-recombining binding protein suppressor of hairless,Notch1-RBP-Jk)/相互作用蛋白Msx2(Msx2-interacting nuclear target protein,Msx2)信号通路,探讨大黄酸对糖尿病肾病主动脉钙化的控制作用。方法取32只大鼠建立糖尿病肾病主动脉钙化模型并随机分为4组(模型对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组),另取8只正常大鼠记为正常对照组,其中低剂量组、中剂量组和高剂量组分别给予50 mg/kg、100 mg/kg、150 mg/kg剂量的大黄酸灌胃,模型对照组和正常对照组给予等量生理盐水灌胃,每天1次,持续4周。对比干预前后肾功能变化;干预后将各组大鼠处死,取腹主动脉观察其钙化情况;取腹主动脉组织检测钙含量;采用实时聚合酶链反应检测各组腹主动脉组织Notch1、RBP-JK、Msx2、α-肌动蛋白(α-smooth muscle aorta,α-SMA)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)的信使核糖核酸(mRNA)表达;采用蛋白质免疫印迹法检测腹主动脉组织Notch1、RBP-JK、Msx2、α-SMA、Runx2蛋白表达。结果与模型对照组比较,3剂量组干预后肾功能指标均改善,腹主动脉钙化情况均减轻,腹主动脉组织钙含量减少,且3剂量组Notch1、RBP-JK、Msx2、Runx2 mRNA和蛋白表达均下降,α-SMA mRNA和蛋白表达升高。在3个剂量组中,高剂量组各项指标改善情况均为最佳。结论大黄酸能够保护糖尿病主动脉钙化大鼠的肾功能,减轻钙化,推测其作用机制与下调Notch1、RBP-JK、Msx2、Runx2 mRNA和蛋白表达,上调α-SMA mRNA和蛋白表达有关。 展开更多
关键词 大黄酸 Notch1-RBP-Jk/msx2信号通路 糖尿病肾病 主动脉钙化
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Doxycycline诱导表达Msx2-GFP的鼠晶状体上皮Alpha-TN4细胞株的建立 被引量:1
6
作者 张娇 于紫燕 赵江月 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期499-501,506,共4页
目的利用基因开关调节系统(Tet-on),拟建立由doxycycline调控表达的Msx2诱导细胞株,经与SWISS-2DPAGEDATA比对,发现差异蛋白点。方法向鼠晶状体上皮细胞(Alpha-TN4)中稳定转染质粒Msx2-GFP-M2和TAP-GFP-M2,转染后的细胞经过G418筛选,挑... 目的利用基因开关调节系统(Tet-on),拟建立由doxycycline调控表达的Msx2诱导细胞株,经与SWISS-2DPAGEDATA比对,发现差异蛋白点。方法向鼠晶状体上皮细胞(Alpha-TN4)中稳定转染质粒Msx2-GFP-M2和TAP-GFP-M2,转染后的细胞经过G418筛选,挑出doxycycline诱导Msx2-GFP表达且具有较低背景的诱导细胞株M8,将空载体细胞株T9作为阴性对照细胞株。并对2组细胞行二维凝胶电泳(2-DE)及基因表达微阵列进行分析。结果从二维凝胶电泳图谱上获得蛋白质斑点。对照组T9检测到5389个斑点,实验组M8检测到5460个斑点。经与SWISS-2DPAGEDATA比对,发现差异蛋白点。经基因表达微阵列分析发现,与晶状体及白内障疾病相关的差异基因为Col3α1,并在RNA水平进行了验证。结论Msx2基因过表达对Alpha-TN4蛋白质表达谱有影响,其中差异基因Col3α1与晶状体及白内障疾病相关。 展开更多
关键词 msx2 Col3α1 Tet-on系统 晶状体上皮细胞 诱导细胞株
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鹿茸中药复方对去卵巢骨质疏松症大鼠肾组织Msx2 mRNA及蛋白表达的影响 被引量:2
7
作者 王剑 郑洪新 +4 位作者 张锦萍 刘研 刘剑辉 宋光熠 刘瑞辉 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期800-802,836,共4页
目的:观察去卵巢骨质疏松症大鼠肾组织Msx2 mRNA及蛋白表达,探讨绝经后骨质疏松症(Postmenopausal Osteoporosis,PMOP)的发病机制以及鹿茸中药复方的疗效机理。方法:去卵巢复制骨质疏松症大鼠模型,实验设正常组、模型组、假手术组、鹿... 目的:观察去卵巢骨质疏松症大鼠肾组织Msx2 mRNA及蛋白表达,探讨绝经后骨质疏松症(Postmenopausal Osteoporosis,PMOP)的发病机制以及鹿茸中药复方的疗效机理。方法:去卵巢复制骨质疏松症大鼠模型,实验设正常组、模型组、假手术组、鹿茸中药复方组、钙尔奇D组、骨疏康组,灌胃给药12周。应用双能X线骨密度仪检测骨密度,实时定量RT-PCR及Western Blot检测Msx2 mRNA及蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组股骨骨密度明显降低、肾组织Msx2 mRNA及蛋白表达明显降低;与模型组比较,鹿茸中药复方组、骨疏康组股骨骨密度明显升高;鹿茸中药复方组、钙尔奇D组、骨疏康组肾组织Msx2mRNA表达明显上调;鹿茸中药复方组肾组织Msx2蛋白表达明显上调;与钙尔奇D组、骨疏康组比较,鹿茸中药复方组肾组织Msx2 mRNA及蛋白表达均明显升高。结论:PMOP的发病机制之一可能是肾组织Msx2 mRNA及蛋白表达降低,鹿茸中药复方可能通过上调肾组织Msx2 mRNA及蛋白表达,有效防治PMOP,其作用优于钙尔奇D和骨疏康。 展开更多
关键词 绝经后骨质疏松症 鹿茸中药复方 msx2
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转录因子Msx2在犬恒牙牙根发育过程中的表达
8
作者 轩昆 杨富生 +1 位作者 文玲英 金岩 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2006年第8期438-440,共3页
目的观察转录因子Msx2在犬恒牙牙根发育过程中的表达及时空变化,初步探讨其对牙根形态形成的调控作用。方法本研究采用原位杂交技术,对犬恒牙牙根不同发育时期Msx2mRNA的表达进行观察。结果在牙根发育启动期、生长期及成熟期,转录因子M... 目的观察转录因子Msx2在犬恒牙牙根发育过程中的表达及时空变化,初步探讨其对牙根形态形成的调控作用。方法本研究采用原位杂交技术,对犬恒牙牙根不同发育时期Msx2mRNA的表达进行观察。结果在牙根发育启动期、生长期及成熟期,转录因子Msx2具有不同的时空表达方式。结论Msx2作为牙齿发育过程中重要的转录因子,可能参与牙根形态发育的调控作用。 展开更多
关键词 转录因子msx2 牙根发育 原位杂交
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藏系绵羊MSX2和HOXA4基因的克隆与序列分析
9
作者 付伟 任亮 +4 位作者 王永 李彩霞 黄林 林亚秋 郑玉才 《中国草食动物科学》 CAS 2014年第4期9-12,共4页
对藏系绵羊的同源异型基因家族的两个成员(MSX2和HOXA4基因)进行克隆测序,为其功能分析奠定基础。从藏系绵羊皮肤中提取总RNA,采用常规的基因克隆方法,获得了MSX2和HOXA4基因编码区序列,长度分别为804 bp和552 bp。序列比对显示,MSX2基... 对藏系绵羊的同源异型基因家族的两个成员(MSX2和HOXA4基因)进行克隆测序,为其功能分析奠定基础。从藏系绵羊皮肤中提取总RNA,采用常规的基因克隆方法,获得了MSX2和HOXA4基因编码区序列,长度分别为804 bp和552 bp。序列比对显示,MSX2基因与预测的绵羊序列存在多个碱基差异;藏系绵羊HOXA4基因与预测的山羊序列间只有1个碱基差异,但与绵羊的预测序列差异大。 展开更多
关键词 藏系绵羊 msx2基因 HOXA4基因 毛囊
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PPARγ与MSX2在甲状腺肿瘤术后患者骨代谢的作用机制研究
10
作者 邹勇 余昌文 《检验医学与临床》 CAS 2018年第19期2916-2918,共3页
目的探讨过氧化物酶增殖物受体γ(PPARγ)与MSX2/Hox8.1蛋白(MSX2)在甲状腺肿瘤术后患者骨代谢过程中的作用。方法治疗组29例甲状腺肿瘤术后患者行骨髓穿刺+活检术,对照组为1︰1匹配非甲状腺肿瘤患者。两组进行骨组织HE染色,采用免疫组... 目的探讨过氧化物酶增殖物受体γ(PPARγ)与MSX2/Hox8.1蛋白(MSX2)在甲状腺肿瘤术后患者骨代谢过程中的作用。方法治疗组29例甲状腺肿瘤术后患者行骨髓穿刺+活检术,对照组为1︰1匹配非甲状腺肿瘤患者。两组进行骨组织HE染色,采用免疫组织化学半定量检测PPARγ与MSX2水平,比较治疗组与对照组之间的差异。结果 HE染色骨组织形态学显示,治疗组脂肪面积明显增多,骨小梁面积及宽度均减少,两组比较差异有统计学意义(t=2.293、2.872,P<0.05);免疫组织化学半定量结果显示,治疗组PPARγ表达量高于对照组,MSX2表达量低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 PPARγ与MSX2在甲状腺肿瘤术后骨代谢的过程中起到了重要作用,甲状腺肿瘤术后患者发生骨质疏松症可能与成脂肪作用被促进,成骨作用被抑制相关。 展开更多
关键词 过氧化物酶增殖物受体γ msx2/Hox8.1蛋白 甲状腺肿瘤 骨代谢
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敲低MSX2对胰腺癌PANC-1细胞上皮-间充质转化的影响 被引量:3
11
作者 张登勇 马翔 +3 位作者 吴斌全 崔培元 刘会春 鲁正 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期179-184,共6页
目的研究MSX2基因在胰腺癌PANC-1细胞的上皮-间充质转化(EMT)/间充质-上皮转化(MET)转变中的作用。方法通过脂质体2000将含有MSX2干扰序列的质粒(共3种,分别命名为sh MSX2-1、sh MSX2-2和sh MSX2-3,转染空质粒的阴性对照组NC)转染PANC-... 目的研究MSX2基因在胰腺癌PANC-1细胞的上皮-间充质转化(EMT)/间充质-上皮转化(MET)转变中的作用。方法通过脂质体2000将含有MSX2干扰序列的质粒(共3种,分别命名为sh MSX2-1、sh MSX2-2和sh MSX2-3,转染空质粒的阴性对照组NC)转染PANC-1细胞,利用Real-time RT-PCR、Western blot等技术检测MSX2在基因和蛋白水平的表达,检测干扰效率,并选取干扰效率最高的一组用于后续试验;进而检测EMT相关上皮标志分子E-cadherin、间质标志分子Vimentin在基因和蛋白水平的表达变化;采用CCK-8法检测干扰前后细胞的增殖能力变化,Transwell和划痕试验比较细胞的侵袭转移能力变化。结果3组干扰质粒中sh MSX2-1的干扰效率最高,CCK-8试验结果显示敲低MSX2可明显抑制PANC-1细胞增殖能力,与对照组相比差异有显著性(P<0.05);敲低MSX2可明显抑制PANC-1细胞的侵袭转移,差异有统计学意义(P<0.05);EMT相关分子Ecadherin表达升高,而Vimentin表达降低,且与对照组相比均有统计学意义(P<0.05);倒置显微镜下观察敲低MSX2后细胞形态由松散的长梭形变成紧密连接的椭圆形。RT-PCR发现敲低MSX2后转录因子twist和snail表达降低(P<0.05),而slug和zeb1表达变化无差异(P>0.05)。结论敲低MSX2可抑制胰腺癌PANC1细胞的增殖、侵袭转移能力,并且上皮标志分子E-cadherin表达升高,间质标志分子Vimentin表达降低,有发生MET的趋势,MSX2可能通过twist、snail发挥其抑制作用。 展开更多
关键词 胰腺癌 干扰 上皮间充质转化 msx2
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陕北白绒山羊MSX2基因克隆及表达分析 被引量:2
12
作者 曹春娜 李冉 +3 位作者 袁超 姜维 耿荣庆 陈玉林 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1037-1041,共5页
本研究旨在克隆陕北白绒山羊MSX2基因cDNA全序列,并对其序列特征及其表达规律进行分析。试验以陕北白绒山羊皮肤组织为材料,采用RT-PCR技术,对陕北白绒山羊MSX2基因的cDNA序列进行克隆,并进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR检测... 本研究旨在克隆陕北白绒山羊MSX2基因cDNA全序列,并对其序列特征及其表达规律进行分析。试验以陕北白绒山羊皮肤组织为材料,采用RT-PCR技术,对陕北白绒山羊MSX2基因的cDNA序列进行克隆,并进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR检测并分析MSX2mRNA在陕北白绒山羊毛囊不同发育时期皮肤组织中的表达规律。结果表明,山羊MSX2基因cDNA全长804bp(GenBank登录号:JQ617290),为一个完整的开放阅读框(ORF),编码267个氨基酸,与牛(NM_001079614)、人(NM_002449)、犬(NM_001003098)、黑猩猩(NM_001135625)、大鼠(NM_012982)和小鼠(NM_013601)的相似性分别为96%、90%、89%、88%、87%和85%;MSX2基因在4月和11月的相对表达量出现峰值,与其他月份差异显著(P<0.05)。山羊MSX2基因编码区核苷酸序列高度保守。MSX2基因在陕北白绒山羊皮肤毛囊发育的4月份和11份月高度表达,其余月份均有不同程度的表达,推测MSX2基因对毛囊周期调控具有一定的作用。 展开更多
关键词 陕北白绒山羊 msx2 基因克隆 表达分析
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同源盒基因Msx2在小鼠磨牙牙根发育早期的表达 被引量:3
13
作者 蒋少云 凌均棨 +1 位作者 宋萌 Zeichner-David Margarita 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2008年第1期9-11,共3页
目的:观察在小鼠的牙根发育早期同源盒基因Msx2的表达,以探讨其在此过程中所起的作用。方法:出生后第6天和第8天的小鼠,取含有下颌第一磨牙的下颌骨,进行固定和脱钙,制备5μm的石蜡切片,原位杂交方法检测Msx2在小鼠牙根发育早期的表达... 目的:观察在小鼠的牙根发育早期同源盒基因Msx2的表达,以探讨其在此过程中所起的作用。方法:出生后第6天和第8天的小鼠,取含有下颌第一磨牙的下颌骨,进行固定和脱钙,制备5μm的石蜡切片,原位杂交方法检测Msx2在小鼠牙根发育早期的表达。结果:第6天Msx2阳性信号出现在Hertwig’s上皮根鞘细胞、上皮根鞘周围的牙乳头细胞和早期的成牙本质细胞中;第8天在Hertwig’s上皮根鞘细胞、上皮根鞘周围的牙乳头细胞和成牙本质细胞中Msx2有阳性信号,而在成牙骨质细胞中无表达。结论:Msx2参与调控牙根早期发育的生理过程。 展开更多
关键词 牙根发育 同源盒基因msx2 上皮根鞘
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补肾益髓中药复方对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠肾组织Msx2 mRNA及蛋白表达的影响 被引量:5
14
作者 王剑 郑洪新 +2 位作者 刘研 张锦萍 刘瑞辉 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2012年第3期25-28,共4页
目的:观察糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)大鼠肾组织Msx2 mRNA及蛋白表达,探讨GIOP的发病机制以及补肾益髓中药复方的疗效机理。方法:肌注地塞米松复制GIOP大鼠模型,实验设正常组、模型空白组、补肾益髓中药复方组、补中益气颗粒组、血... 目的:观察糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)大鼠肾组织Msx2 mRNA及蛋白表达,探讨GIOP的发病机制以及补肾益髓中药复方的疗效机理。方法:肌注地塞米松复制GIOP大鼠模型,实验设正常组、模型空白组、补肾益髓中药复方组、补中益气颗粒组、血府逐瘀胶囊组、骨疏康颗粒阳性对照组,造模及灌胃给药9周。应用XR-26型双能X线骨密度仪测定股骨骨密度,实时定量RT-PCR及Western Blot检测肾组织Msx2 mRNA及蛋白表达。结果:与正常组比较,模型空白组股骨骨密度明显降低(P<0.01),肾组织Msx2 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型空白组比较,补肾益髓中药复方组股骨骨密度明显升高(P<0.01),肾组织Msx2 mRNA及蛋白表达明显上调(P<0.01)。结论:肾组织Msx2 mRNA及蛋白表达降低可能是GIOP的发病机制之一;补肾益髓中药复方可能通过上调肾组织Msx2 mRNA及蛋白表达,有效防治GIOP。 展开更多
关键词 糖皮质激素性骨质疏松症 补肾益髓中药复方 msx2
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琅琊鸡胚MSX2基因克隆及发育性表达变化
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作者 逄淯婷 张渝洁 +2 位作者 唐玮琦 王岩 邢晋祎 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第5期1641-1650,共10页
【目的】克隆鸡Msh同源框2(Msh-homeobox 2,MSX2)基因,并对其进行生物信息学和胚胎期表达模式分析,为进一步研究MSX2基因的结构和功能提供支持。【方法】对80枚琅琊鸡种蛋进行孵化,分别于孵化期第1、2、3、4、5、6、9、12、15、18天采... 【目的】克隆鸡Msh同源框2(Msh-homeobox 2,MSX2)基因,并对其进行生物信息学和胚胎期表达模式分析,为进一步研究MSX2基因的结构和功能提供支持。【方法】对80枚琅琊鸡种蛋进行孵化,分别于孵化期第1、2、3、4、5、6、9、12、15、18天采集样品(1~6胚龄采集整胚,9、12、15、18胚龄分别采集心脏和肝脏),提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增并克隆MSX2基因,对其进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR技术分析MSX2基因在琅琊鸡鸡胚和组织中的表达水平。【结果】成功克隆了琅琊鸡胚MSX2基因,序列长度为818 bp,开放阅读框为780 bp,编码259个氨基酸。琅琊鸡MSX2氨基酸序列与日本鹌鹑、秃鹰和仓鸮的相似性最高,均为99.23%,与山羊的相似性最低,为74.54%;系统进化树分析结果显示,琅琊鸡与日本鹌鹑聚为一类。生物信息学分析表明,MSX2蛋白分子质量为28235.18 u,等电点(pI)为9.71,没有信号肽和跨膜域,为不稳定的亲水性蛋白,主要分布在细胞核(60.9%);存在37个磷酸化位点、8个O-糖基化位点和1个N-糖基化位点;二级结构主要由无规则卷曲(63.32%)和α-螺旋(28.19%)组成。实时荧光定量PCR分析表明,MSX2基因在整胚(1~6胚龄)中的表达水平呈现先上升后下降趋势,且在4胚龄时表达水平最高,极显著高于1、2、3胚龄(P<0.01);MSX2基因在12胚龄鸡心脏中的表达水平极显著低于9胚龄(P<0.01);在9~18胚龄鸡肝脏中的表达量呈逐渐下降趋势,且在9胚龄鸡肝脏中表达水平最高(P<0.05)。【结论】试验成功克隆了琅琊鸡MSX2基因序列,其表达模式在不同胚龄和同一胚龄不同组织间存在差异,为进一步探索琅琊鸡MSX2基因的结构和功能奠定了基础。 展开更多
关键词 琅琊鸡 msx2基因 表达 生物信息学
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MSX2基因在山羊真皮毛乳头细胞增殖中的调控作用 被引量:5
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作者 郝斐 闫玮 +2 位作者 郭晓东 朱兵 刘东军 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期38-43,共6页
在山羊真皮毛乳头细胞中,建立MSX2基因过表达细胞株和MSX2基因干扰细胞株,通过生长曲线比较各细胞株的增殖能力,再通过Real-time PCR和Western Blot检测各株细胞中MSX2、LEF-1、cyclin D1基因的m RNA表达水平和蛋白质表达水平。结果表明... 在山羊真皮毛乳头细胞中,建立MSX2基因过表达细胞株和MSX2基因干扰细胞株,通过生长曲线比较各细胞株的增殖能力,再通过Real-time PCR和Western Blot检测各株细胞中MSX2、LEF-1、cyclin D1基因的m RNA表达水平和蛋白质表达水平。结果表明,分离得到的山羊真皮毛乳头细胞均表达α-SMA和CD133表面标记,鉴定该细胞即为真皮毛乳头细胞。通过Real-time PCR检测各细胞株MSX2的表达量,发现在初级毛乳头细胞中过表达试验组是对照组的11.85倍,干扰试验组是对照组的0.31倍;而在次级毛乳头细胞中过表达试验组是对照组的10.59倍,干扰试验组是对照组的0.45倍,表明MSX2基因过表达和干扰细胞系已被成功建立。与此同时,研究中还发现,随着MSX2表达水平的增加,LEF-1和cyclin D1的表达水平也同步增加,同时使真皮毛乳头细胞增殖能力增强;随着MSX2表达水平的下调,LEF-1和cyclin D1的表达水平也同步减少,同时使真皮毛乳头细胞增殖能力下降。旨在探究MSX2基因在山羊真皮毛乳头细胞增殖中的调控模式,并为深入研究山羊毛囊的发生与生长提供理论基础。 展开更多
关键词 山羊 真皮毛乳头细胞 msx2 过表达 干扰 细胞增殖
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MSX2 overexpression inhibits gemcitabine-induced caspase-3 activity in pancreatic cancer cells 被引量:4
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作者 Shin Hamada Kennichi Satoh +3 位作者 Kenji Kimura Atsushi Kanno Atsushi Masamune Tooru Shimosegawa 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第43期6867-6870,共4页
AIM: To evaluate the effect of MSX2 on gemcitabineinduced caspase-3 activation in pancreatic cancer cell line Panc-1. METHODS: Using V5-tagged MSX2 expression vector, stable transfectant of MSX2 was generated from P... AIM: To evaluate the effect of MSX2 on gemcitabineinduced caspase-3 activation in pancreatic cancer cell line Panc-1. METHODS: Using V5-tagged MSX2 expression vector, stable transfectant of MSX2 was generated from Panc-i cells (Px14 cells). Cell viability under gemcitabine administration was determined by MTF assay relative to control cell line (empty-vector transfected Panc-1 cells; P-3EV cells). Hoechst staining was used for the detection of apoptotic cell. Activation of caspase-3 was assessed using Western blotting analysis and direct measurement of caspase-3 specific activities. RESULTS: MSX2 overexpression in Panc-1 cells resulted in decreased gemcitabine-induced caspase-3 activation and increased cell viability under gemcitabine treatment in Px14 cells. CONCLUSION: MSX2 exerts repressive effects on gemcitabine-induced apoptotic pathway. This novel apoptosis-regulating function of MSX2 may provide a new therapeutic target for pancreatic cancer. 展开更多
关键词 msx2 CASPASE-3 GEMCITABINE
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敲低MSX2抑制小鼠成釉细胞釉基质蛋白表达及牙釉质形成
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作者 刘皓 姜建萍 +5 位作者 宫崎 田换兵 王晟 张娟娟 潘智芳 刘晓影 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期230-236,共7页
目的研究肌节同源结构域同源框基因2(MSX2)对小鼠成釉细胞釉基质蛋白的表达及牙釉质形成的影响。方法免疫化学染色检测出生后小鼠牙胚MSX2的表达情况及其在成釉细胞中的定位;设计并合成靶向小鼠MSX2基因的短发夹RNA(shRNA)寡聚单链DNA,... 目的研究肌节同源结构域同源框基因2(MSX2)对小鼠成釉细胞釉基质蛋白的表达及牙釉质形成的影响。方法免疫化学染色检测出生后小鼠牙胚MSX2的表达情况及其在成釉细胞中的定位;设计并合成靶向小鼠MSX2基因的短发夹RNA(shRNA)寡聚单链DNA,将退火成双链的DNA构建到RNAi慢病毒载体pG MLV-SC5中,包装慢病毒;慢病毒感染成釉细胞,实时荧光定量PCR筛选最佳干扰片段,并检测釉原蛋白(Amelx)、成釉蛋白(Ambn)、釉蛋白(Enam)、釉成熟蛋白(Amtn)及激肽释放酶4(Klk4)在mRNA水平表达的改变。通过分离小鼠E18.5牙胚并感染靶向MSX2的RNAi重组慢病毒,种植于小鼠肾囊膜下,10周后,取出组织,分离并观察牙齿结构。结果 MSX2在小鼠成釉细胞分泌期及成熟期均有表达,但分泌期表达信号较弱,成熟期较强。成功包装靶向MSX2基因的RNAi慢病毒MSX2-shRNA,敲低MSX2基因表达可不同程度地降低成釉细胞Amelx及Klk4的mRNA水平。靶向MSX2基因的RNAi慢病毒感染牙胚后其牙釉质矿化程度降低。结论 MSX2基因在小鼠成釉细胞中表达,敲低成釉细胞MSX2并促进釉基质蛋白基因的表达和牙釉质的矿化。 展开更多
关键词 肌节同源结构域同源框基因2(msx2) 慢病毒 成釉细胞 釉基质蛋白
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Msx2 plays a critical role in lens epithelium cell cycle control 被引量:3
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作者 Jiang-Yue Zhao Feng-Feng Zhuang +2 位作者 Hong-Yan Wang Di Wu Jin-Song Zhang 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2013年第3期276-279,共4页
AIM: To investigate the effects of Msx2 on lens epithelium cell cycle, and evaluate the changes of the proliferation, apoptosis of lens epithelium cells. METHODS: Mice lens epithelium cells were cultured and transfect... AIM: To investigate the effects of Msx2 on lens epithelium cell cycle, and evaluate the changes of the proliferation, apoptosis of lens epithelium cells. METHODS: Mice lens epithelium cells were cultured and transfected with pEGFP-Msx2 and control. Msx2-deficient mice (Msx2(-/-)) lens tissue were isolated. Lens tissue and transfected cells were prepared for mRNA extraction using Trizol reagent. CyclinD1 and Prox1 expression were evaluated by real-time RT-PCR. BrdU incorporation and apoptosis rate were investigated by immunofluorescence and flow cytometry analysis. RESULTS: After transfected with pEGFP-Msx2, lens epithelium cells failed to incorporate BrdU and anti - phospho-histone-3 immunofluorescence failed to detect cell nuclei which GFP were positive. Msx2 over expression resulted in increasing apoptosis rate in lens epithelium cells. CyclinD1 and Prox1 expression increased significantly in Msx2 knockout mice by real time RT-PCR quantization and CyclinD1 expression decreased significantly in Msx2overexpressed cell. CONCLUSION: Msx2 has the effect of inhibiting proliferation and differentiation, triggering apoptosis on mice lens epithelium cells. 展开更多
关键词 msx2 lens epithelium cell cell cycle
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MSX2通过SOX2降解抑制口腔鳞状细胞癌中的肿瘤干细胞表型
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作者 汪文君 刘守红 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2022年第9期1-4,共4页
探讨MSX2-SOX2途径控制OSCC肿瘤干细胞样特征的机制。方法 对2013年2月在安徽医科大学第一附属医院口腔科进行病理和临床诊断的45例石蜡包埋OSCC标本进行了评估;从OSCC细胞系(SCC9)中分离出CD44+/CD24-细胞和SCC131细胞,检测MSX2表达;... 探讨MSX2-SOX2途径控制OSCC肿瘤干细胞样特征的机制。方法 对2013年2月在安徽医科大学第一附属医院口腔科进行病理和临床诊断的45例石蜡包埋OSCC标本进行了评估;从OSCC细胞系(SCC9)中分离出CD44+/CD24-细胞和SCC131细胞,检测MSX2表达;在体内动物癌症模型中,进一步研究了MSX2对OSCC过程的致癌影响。结果 MSX2在OSCC显著下调,并且MSX2表达水平与OSCC患者的不良预后相关。同时,MSX2的表达水平较低。OSCC2细胞由于MSX2过度表达。CD44+/CD24-细胞百分比降低。例如肿瘤球状形成、CD44+亚群细胞和干细胞相关,OSCC CD44+/CD24-细胞中MSX2敲除增强了基因表达,在其他OSCC人群中由于MSX2过度表达而降低。然而,这些事件被共敲低或SOX2过表达所抵消。MSX2超过的单元格表达或敲除在体内形成更小或更大的癌症,从而显示更低或更高的肿瘤发病率。结论 MSX2对OSCC的肿瘤干细胞表型具有肿瘤抑制作用,并表明MSX2-SOX2信号通路可能是OSCC治疗的有用靶点。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 CD44 CD24 msx2 口腔鳞状细胞癌 SOX2
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