复方氨基酸注射液中有关物质N,N′-二乙酰-L-胱氨酸测定

目的:建立测定复方氨基酸注射液中乙酰半胱氨酸有关物质N,N′-二乙酰-L-胱氨酸含量的高效液相色谱法。方法:采用Atlantis dC_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,3μm),以甲酸铵溶液(取甲酸铵315 mg,加水960 mL溶解,摇匀)-乙腈-甲酸(970∶30∶1)为流动相,流速为0.7 mL·min^(-1),检测波长为210 nm。结果:N,N′-二乙酰-L-胱氨酸浓度在2.697~53.94μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9999),检测限和定量限分别为1.4μg·mL^(-1)和4.4μg·mL^(-1),平均回收率为100.2%,RSD为0.5%。结论:经方法学验证,证明本法适用于复方氨基酸注射液中N,N′-二乙酰-L-胱氨酸的含量测定。

首批N,S-二乙酰半胱氨酸国家药品对照品的研制

目的:研制首批N,S-二乙酰半胱氨酸国家药品对照品,用于氨基酸类药品有关物质的检查,控制相关药品质量,保证患者用药安全。方法:采用高效液相色谱、红外吸收光谱、高分辨质谱及核磁共振谱对N,S-二乙酰半胱氨酸化学结构进行确证,检查其水分、炽灼残渣、无机离子、残留溶剂、有关物质等杂质的含量,采用液相色谱法、核磁共振谱定量法及质量平衡法对其含量进行测定和计算,并采用质量平衡法对其含量进行赋值,考察了其引湿性、均匀性和短期稳定性。结果与结论:试验确证了N,S-二乙酰半胱氨酸的分子结构,测得水分为0.05%,无机离子为0.21%,有关物质为0.90%,未检出残留溶剂。以质量平衡法赋值首批N,S-二乙酰半胱氨酸对照品,含量为98.8%。本批次对照品含量分布均匀,试验结果证明N,S-二乙酰半胱氨酸短期内稳定。

高效液相色谱法对N-乙酰-L-酪氨酸生产工艺的中间物监控分析

为了探讨在生产N-乙酰-L-酪氨酸时,中间物料对产品质量的影响,试验研究了在采用乙酸酐乙酰化生产N-乙酰-L-酪氨酸过程中,对中间产生物料L-酪氨酸、N-乙酰-L-酪氨酸和N,O-二乙酰-L-酪氨酸的中控分析并测定它们的含量。具体方法是:把样品用超纯水稀释100倍后,在色谱柱(C_(18),150mm×4.6mm,5μm)上进行分离,以10mmol·L^(-1)磷酸盐(pH3.0)-甲醇(60:40,V/V)为流动相进行等度洗脱,在波长270nm处进行紫外检测。结果表明:L-酪氨酸、N-乙酰-L-酪氨酸、N,0-二乙酰-L-酪氨酸的质量浓度分别在10~1000mg·L^(-1),10~1000mg·L^(-1),50~1000mg·L^(-1)内与对应的峰面积呈现线性关系,检出限(3S/N)分别为1.1mg L^(-1),1.2mg·L^(-1),14.0mg·L^(-1);对实际样品进行加标回收试验,回收率分别在98.4%~105.0%,98.5%~100.8%,98.9%~100.5%之间,测定值的相对标准偏差RSD(n=6)分别为1.8%、0.7%和0.9%,均小于2.0%。说明所建立的高效液相方法切实可行,重现好,精密度高,可用于乙酰酪氨酸生产工艺中间物的监控分析。

N,N’-二乙酰-L-胱氨酸对半乳糖胺联用脂多糖引起小鼠免疫性肝衰竭的作用(英文)

目的 研究N,N’-二乙酰-L-胱氨酸(DiNAC)对免疫性肝衰竭的治疗作用。方法 观察DiNAC对Balb/C小鼠由半乳糖胺联用脂多糖引起免疫性肝衰竭的作用。半乳糖胺/脂多糖攻击6 h后,小鼠血清ALT,AST和外周血T细胞亚群分别用全自动生化仪、流式细胞仪测定,并用光镜观察肝组织病理切片,统计半乳糖胺/脂多糖攻击24 h后的小鼠存活率。结果 给肝衰竭小鼠ip DiNAC(50,200,800 mg·kg-1),能明显阻止小鼠血清ALT和AST活力增高,使肝组织损害减轻及提高小鼠存活率,并呈剂量依赖关系;DiNAC能增强免疫性肝衰竭小鼠外周血CD4+,CD8+,Th1和Th2 T淋巴细胞的增殖分化。结论 DiNAC对免疫性肝衰竭动物有明显的治疗作用,这一作用与其免疫调节有关。

N-乙酰半胱氨酸对偏二甲基肼和四氧化二氮吸入性肺损伤的保护作用

目的 观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大剂量火箭液体推进剂偏二甲基肼(UDMH)和四氧化二氮(N2O4)吸入性急性肺损伤(ALI)的保护性作用。方法 42只大鼠随机平均分为对照组、毒物暴露组(暴露组)和毒物暴露+NAC治疗组(NAC干预组)。制模动物在静式染毒柜中染毒,UDMH和N2O4质量浓度分别为0.98 mg/L和0.19 mg/L,均染毒10 min。NAC干预组染毒后立即经尾静脉注射NAC150 mg/kg,3 h后再次补充50 mg/kg NAC腹腔注射;另两组均以等量生理盐水代替。各组动物均于实验后6 h测定肺组织湿/干质量比(W/D)、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量和乳酸脱氢酶(LDH)活性、肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和血浆丙二醛(MDA),并观察动物一般情况及组织病理学变化。结果 与对照组相比,暴露组大鼠肺W/D、BALF中蛋白和LDH以及血浆MDA等均明显增加,而肺组织SOD、GSH-Px活性则明显降低;NAC干预组上述指标均有不同程度改善。暴露组大鼠有明显憋喘症状,病理学表现为明显的肺泡内渗出和肺间质水肿;而NAC干预组上述改变明显减轻。肺W/D与肺组织SOD和GSH-Px活性均呈显著负相关,相关系数r分别为-0.662和-0.707(P均<0.01)。结论 NAC对大剂量UDMH和N2O4吸入性ALI有保护性治疗作用,其作用机制可能与其抗氧化和防治脂质过氧化损伤?

毛细管电泳-激光诱导荧光检测法测定卡托普利和N-乙酰-L-半胱氨酸

建立了一种高效、快速的毛细管电泳分离-激光诱导荧光(CE-LIF)检测卡托普利(CAP)和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)的分析方法。采用1,3,5,7-四甲基-8-溴甲基-二氟二硼-二吡咯甲川(TMMB-Br)为柱前衍生试剂,在50 mmol/L磷酸盐缓冲溶液(pH=8.5)中,40℃下进行衍生反应10min。以荧光素为内标,25mmol/L硼酸盐缓冲溶液(pH=9.5)为电泳背景电解质,14min内达到基线分离。CAP和NAC的检出限分别为0.65nmol/L、0.76nmol/L。将该方法应用于人体尿液和血清中这两种物质的测定,回收率在97.0%~105.7%之间。

应用N-乙酰-L-半胱氨酸合成紫色-近红外荧光发射的量子点

应用生物活性分子N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）作为配体,采用加热回流和水热合成法制备具有紫色-近红外荧光发射、高质量的水溶性碲化镉量子点（CdTe QD s）,并通过紫外可见、荧光分光光度计表征量子点的光学性质,透射电镜（TEM）和粉末X射线衍射（XRD）表征量子点结构。结果表明,以N-乙酰-L-半胱氨酸为配体可以合成出荧光量子产率为11%-62.4%、荧光发射峰在415-800 nm宽范围内可调的Zn1-xCdxSe和CdTe水溶性量子点。XRD结果表明量子点荧光发射峰与其粒径相关。这是首次应用单一配体——N-乙酰-L-半胱氨酸作为稳定剂,合成具有紫色近红外宽荧光发射的水溶性荧光量子点。用此方法制备的水溶性量子点具有较好的荧光量子产率、较窄的半峰宽以及较强的光稳定性。

N-乙酰-L-半胱氨酸减轻大鼠糖尿病肾病的机制探讨

目的研究N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)减轻大鼠糖尿病肾病(DN)的机制。方法 30只清洁级雄性SD大鼠随机分为健康对照组(Sham组)、糖尿病肾病组(DN组)、NAC组,各组分别给予不同的干预。动物取肾后测定肾皮质中丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组大鼠肾皮质中Caspase-3的mRNA表达。结果 NAC能降低DN大鼠肾皮质中MDA含量,使SOD活性增强,凋亡相关因子Caspase-3的mRNA表达减少。结论 NAC保护大鼠DN的机制是通过抑制氧化应激、减少肾皮质细胞凋亡而实现的。

N-乙酰-L-半胱氨酸对急性胰腺炎大鼠脑保护作用的实验研究

目的探讨N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对急性胰腺炎(AP)大鼠脑组织损坏的保护作用,为临床应用NAC治疗胰性脑病(PE)提供实验依据。方法将90只SD大鼠随机分成正常对照组,经胰胆管逆行注射5%牛黄胆酸钠复制AP模型组和AP伴NAC处理组。AP伴NAC组在注射牛黄胆酸同时静脉注射NAC。造模后第24 h,处死所有实验组大鼠检测脑组织水含量、肿瘤坏死因子α和丙二醛(MDA)的含量以及微血管内白细胞聚集附壁,在电镜下观察海马CA1区结构。结果经NAC干预后,脑组织含水量、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、丙二醛量以及微血管内白细胞聚集附壁现象显著降低。结论 NAC对大鼠急性胰腺炎时的脑损伤有明显的保护作用。

基于CdTe量子点荧光猝灭-恢复法测定N-乙酰-L-半胱氨酸

以CdTe量子点作为荧光探针,Hg^(2+)为猝灭剂,建立了一种基于荧光猝灭-恢复模式的N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)检测方法.考察了不同缓冲溶液、pH值、金属离子、Hg^(2+)的浓度及反应时间对反应体系的影响,探讨了Hg^(2+)对CdTe量子点荧光猝灭和NAC对CdTe量子点荧光恢复的机理.结果表明:在pH=7.8的B-R缓冲溶液中,当Hg^(2+)的浓度为1.0×10^(-6)mol/L、NAC的浓度范围为5.0×10^(-7)~2.0×10^(-5)mol/L时,NAC的浓度与量子点的荧光恢复程度之间呈良好的线性关系,可实现对NAC的快速定量分析.该检测方法较常规的方法操作简便、检测速度快、灵敏度高.

N-乙酰-L-半胱氨酸的稳定性研究

用HPLC检测了N-乙酰-L-半胱氨酸在室温储存的质量情况,发现在储存一年后产品中有N,N-二乙酰-L-胱氨酸和N,S-二乙酰-L-半胱氨酸等相关杂质生成,采用重结晶可将该两种杂质去除。

N-乙酰-L-半胱氨酸与缺血再灌注损伤的研究进展

缺血再灌注损伤一直是临床上一个亟待解决的问题 ,但其发病机制仍未彻底阐明。目前 ,发现一个巯基化合物N 乙酰 L 半胱氨酸具有多种生物活性 ,不仅能够转化为谷胱甘肽起保护细胞的作用 ,也能直接清除自由基 ,抑制内皮细胞粘附和白细胞浸润 ,对心、肝、肺等多种内脏器官具有很好的抗缺血再灌注损伤作用。本文对N 乙酰 L

N-乙酰半胱氨酸保护下给药钆-二乙三胺五乙酸后慢性肾衰大鼠的尿液代谢组学研究

N-乙酰半胱氨酸(NAC)有减轻造影剂引发肾损伤的作用,但其作用机制尚未明确。本研究采用基于1H NMR的代谢组学方法,结合正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA),在NAC保护下对慢性肾衰大鼠给药造影剂钆-二乙三胺五乙酸(Gd-DTPA),通过分析大鼠尿液中内源性代谢物的变化,研究了NAC对慢性肾衰大鼠的保护机制。结果表明,慢性肾衰大鼠能量代谢、尿素循环等代谢通路发生紊乱。给药Gd-DTPA后,大鼠尿液中胆碱、N-氧三甲胺、邻羟基苯乙酸苯酯、对羟基苯乙酸苯酯、马尿酸、甘氨酸、烟酸、牛磺酸减少,尿囊素增加;而在NAC保护下相关代谢产物向模型组的恢复,说明NAC对Gd-DTPA引发的大鼠肠道细菌代谢、肝线粒体代谢、犬尿氨酸代谢紊乱及氧化损伤具有一定修复作用。NAC对尿素循环代谢的改善可能减轻大鼠体内的肾损伤,而其对细胞中谷胱甘肽的补充可能减轻Gd-DTPA造成的氧化损伤。

N-乙酰半胱氨酸对硫酸葡聚糖钠诱导的实验性肠炎的预防及治疗作用

目的:探讨还原型巨噬细胞诱导剂N-乙酰半胱氨酸(N-Acetylcysteine,NAC)对硫酸葡聚糖钠(Dextran Sodi- um Sulphate,DSS)诱导的小鼠实验性肠炎的预防及治疗作用。方法:建立DSS实验性小鼠肠炎模型,NAC及氧化型巨噬细胞诱导剂N,N’-联乙(?)-L-胱氨酸(N,N’-diacetyle-L-cystine,(NACOMe)2)在致模前后腹腔注射;检测腹腔巨噬细胞中还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)的变化;对结肠进行病理学评价,并检测结肠IL-4、IFN-g的表达。结果:NAC预处理组:结肠长度和病理学指标均优于其他预处理组,腹腔巨噬细胞内GSH及GSH/GSSG升高;结肠分泌的IL-4、IFN-γ明显降低。NAC治疗组:体重增加程度明显高于其它治疗组,结肠炎症及黏膜损伤较轻,腹腔巨噬细胞内GSSG明显减低,GSH和GSH/GSSG升高,病变结肠分泌的IL-4、IFN-γ明显降低。结论:还原型巨噬细胞诱导剂NAC可以通过诱导巨噬细胞内GSH产生增多从而减轻实验性肠炎的黏膜损伤及临床症状,对DSS诱导的实验性肠炎有一定的预防及治疗作用。

N-乙酰半胱氨酸对大鼠肺纤维化模型血清MDA的影响

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对博莱霉素所致大鼠肺纤维化血清MDA的影响。方法取健康、雌性Wistar大鼠75只,随机分为三组:博莱霉素模型组(B组);NAC治疗组(N组):模型制备同B组,于博莱霉素处理前1周及此后每日经强饲法口服NAC(3mmol/kg);正常对照组(C组):同样条件下向气管内注入等量生理盐水。三组动物分别于气管灌注后的第1、3、7、14及28天随机处死五只。取肺组织标本行病理学观察、肺系数测定及血清丙二醛(MDA)检测。结果肺系数N组与B组统计学分析显示除第1天外其余各时间点差异均有显著性(P<0.05);B组与C组比较,第3、7、14、28天MDA升高(P<0.05),而N组与C组相比,第1、14、28天MDA差异无显著性(P>0.05),第3、7天差异存在显著性(P<0.05)。B组与N组血清MDA含量均第7天达到高峰,而后逐渐下降,进行两组间统计学比较,第7、14、28天差异存在显著性(P<0.05)。结论NAC可降低博莱霉素所致肺纤维化大鼠MDA的产生,通过抗氧化作用抑制肺纤维化的发展,对肺纤维化具有较明显的保护作用。

N,N'-二乙酰胱氨酸对四氯化碳诱导肝纤维化的保护作用

目的探讨N,N'-二乙酰胱氨酸(DiNAC)对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的保护作用。方法采用随机数字表法将90只大鼠分为正常组、模型组、DiNAC低剂量组、DiNAC中剂量组、DiNAC高剂量组、二硫氨基甲酸肽吡咯烷(PDTC)组(作为阳性对照)6组,每组15只。后5组大鼠采用50%CCl4按1ml/kg皮下注射2次/周,连续10周制备大鼠肝纤维化模型。建模开始第2周起DiNAC低、中、高剂量组大鼠分别腹腔注射DiNAC12.5、25、50 mg/(kg·d),PDTC组大鼠腹腔注射PDTC100mg/kg,连续8周。通过检测血液生化指标及胶原、抗氧化指标,观察肝脏形态及组织结构,对DiNAC治疗大鼠肝纤维化的疗效进行评价。结果与模型组比较,DiNAC治疗组血清学指标AST、ALT和ALP明显改善,血清胶原指标下降,肝组织丙二醛含量下降,超氧化物歧化酶活性增加;DiNAC各组HE、网状纤维染色结果显示肝细胞脂肪变性、炎症、坏死及肝纤维化均有所好转。结论 DiNAC具有抗氧化作用,对大鼠肝纤维化具有较好的治疗作用。

丹红注射液联合乙酰半胱氨酸治疗特发性肺纤维化疗效评价

目的:观察丹红注射液联合乙酰半胱氨酸治疗特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)的疗效及其对血清转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的影响。方法:将120例IPF患者随机分为治疗组(n=60)和对照组(n=60)。对照组给予乙酰半胱氨酸口服,600mg/次,3/d;治疗组在对照组基础上联合丹红注射液30ml静脉滴注,1/d,疗程12周。观察两组治疗前后动脉血气、肺功能、肺纤维化指标变化情况。检测两组治疗前后血清TGF-β1、HIF-1α、SOD、MDA水平。结果:两组治疗后用力肺活量(forced vital capacity,FVC)、肺总量(total lung capacity,TLC)、第1秒率占预计值的百分比(forced expiratory volume in one second prediction,FEV1pred)、肺一氧化碳弥散量(lung diffusion capacity for carbon monoxide,DLCO)均较治疗前升高(P<0.05),且治疗组改善情况优于对照组(P<0.05);两组治疗后动脉血氧分压(arterial oxygen partial pressure,PaO2)、动脉血氧饱和度(arterial oxygen saturation,SaO2)均较治疗前升高,动脉血二氧化碳分压(arterial carbon dioxide partial pressure,PaCO2)较治疗前降低(P<0.05),且治疗组改善情况优于对照组(P<0.05);两组治疗后透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层粘连蛋白(laminin,LN)、Ⅲ型前胶原(type Ⅲ procollagen,PCⅢ)和Ⅳ型胶原(type Ⅳ collagen,CⅣ)均较治疗前下降(P<0.05),且治疗组改善情况优于对照组(P<0.05);两组治疗后血清TGF-β1、HIF-1α、MDA含量均下降(P<0.05),SOD含量均升高,且治疗组改善情况优于对照组(P<0.05)。结论:丹红注射液联合乙酰半胱氨酸通过抑制炎症反应,纠正氧化(抗氧化)失衡,可延缓IPF患者肺纤维化进程。

乙酰半胱氨酸含量及其相关物质测定方法的研究

目的：建立用高效液相色谱法测定乙酰半胱氨酸原料和制剂的含量及相关物质。方法：采用Waters Spherisorb ODS色谱柱(250mm×4．6mm，5μm)，0．01mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH＝2．15)-甲酵(95：5)为流动相；检测波长210nm；柱温30℃；流速1mL·min-1。结果：乙酰半胱氨酸在0．68-1．8mg·mL-1浓度范围内与峰面积呈良好线性关系，回归方程为：Y＝1．291×10-7—0．1936，r＝0．9995；4种有关物质N，N’-二乙酰胱氨酸、半胱氨酸、N，S-二乙酰半胱氨酸、胱氨酸的最低检测限分别为169，40，39，86ng。3种制剂富露施泡腾片、富露施颗粒剂、美可舒颗粒剂的平均回收率(n＝9)分别为98．78％，100．3％，100．6％。结论：方法简便、准确、可靠，适用于产品的质量控制。

HK2和VDAC1在二乙酰吗啡致心肌细胞凋亡中的作用

目的探讨HK2和VDAC1在二乙酰吗啡致心肌细胞凋亡中的作用。方法采用剂量递增方法,建立二乙酰吗啡成瘾大鼠模型。将40只SD大鼠随机分为3组,正常组(Control,n=10)皮下注射等量生理盐水;模型组(Model,n=15)首次皮下注射二乙酰吗啡剂量为5 mg/kg,以后逐日递增剂量2.5 mg/(kg·d),连续注射20 d;模型+10 D组(Model+10D,n=15)在模型组基础上继续递增剂量至第10天。采用ELISA法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、谷草转氨酶(glutamic oxaloacetic transaminase,GOT)含量;采用HE染色观察各组心肌组织病理变化;采用TUNEL染色检测各组心肌组织细胞凋亡;采用免疫组化、RT-qPCR和Western blot检测HK2、VDAC1及凋亡相关因子的mRNA和蛋白的表达变化。结果HE染色发现随着二乙酰吗啡干预时间的延长,心肌组织表现出不同程度的损伤。与正常组相比,模型组中血清LDH、GOT含量及心肌凋亡率升高,HK2和抗凋亡因子Bcl-2的mRNA和蛋白水平下降,VDAC1和促凋亡因子Bax、Caspase-3的mRNA和蛋白水平升高,Clevead Caspase-3蛋白水平升高;与正常组相比,模型+10 D组中以上指标,差异有统计学意义(P<0.05)。结论二乙酰吗啡可导致心肌细胞凋亡,HK2和VDAC1可能参与了二乙酰吗啡致心肌细胞凋亡的过程。

柱前衍生高效液相色谱法测定茶叶中茶氨酸及γ-氨基丁酸(英文)

对茶叶中的茶氨酸和γ-氨基丁酸(GABA)建立了柱前衍生方法,并利用高效液相色谱法(HPLC)对衍生物进行了测定。采用邻苯二甲醛(OPA)及N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)为衍生试剂,考察了脯氨酸(Pro)、茶多酚(Tp)及维生素C(Vc)等对衍生体系的影响,并对色谱分离条件进行了优化。结果表明,茶氨酸与GABA衍生物在色谱柱上的保留行为与分离效率主要受流动相pH及缓冲盐浓度的影响;Pro、Tp及Vc对茶氨酸的衍生产率影响较小。而Vc可以提高GABA检测的灵敏度,并能稳定衍生用储备液。GABA与茶氨酸衍生后的方法检出限(LOD)分别为3.01×10-5 mmol/L和7.98×10-5 mmol/L;定量限(LOQ)分别为9.99×10-5 mmol/L和2.658×10-4m m o l/L;线性范围分别为0.01～0.4 m m o l/L(相关系数为0.996)和0.05～0.8 m m o l/L(相关系数为0.995);方法的回收率分别为99.29%～119.60%和93.18%～141.06%(除本身含茶氨酸量高的绿茶中回收率为62.88%外)。这说明经优化的柱前衍生-高效液相色谱体系可用于茶叶中两种特征性氨基酸的测定。