芍药苷对氯化钾及N-甲基-D-门冬氨酸诱导的PC12细胞钙超载损伤的保护作用

目的 :探讨芍药苷对PC12细胞钙超载损伤模型的保护作用及其机制。方法 :采用组织培养法 ,以大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆株PC12细胞为材料 ,制备氯化钾及N 甲基 D 门冬氨酸诱导的钙超载损伤模型。结果 :形态学检查发现芍药苷对 2种不同类型的钙超载损伤模型中PC12细胞均具有明显保护作用 ,MTT法活细胞测定提示 12 .5～ 2 0 0 μg·mL-1的芍药苷可显著提高损伤模型中PC12细胞存活数 ,减少胞内乳酸脱氢酶渗漏 ,并显著减少胞内钙离子浓度。结论 :芍药苷对钙超载所致PC12细胞损伤有显著的保护作用。

儿童抗N-甲基-D-门冬氨酸受体脑炎的脑电图特点

目的研究抗N-甲基-D-门冬氨酸受体(NMDAR)脑炎儿童患者不同病程分期的系列脑电图特点。方法选择2011年12月至2014年12月于我院神经内科确诊的儿童抗NMDAR脑炎20例,对其在精神症状和(或)癫痫发作期、无反应期、恢复期分别进行视频脑电图检查,分析脑电图在病程不同时期的表现,总结脑电图特点、探寻脑电图与临床表现的相关性。结果共入组20例,男8例,女12例,年龄1岁11个月至13岁4个月。监测精神症状和(或)癫痫发作期脑电图25份,23份异常;无反应期脑电图17份,17份异常;恢复期脑电图13份,7份异常。异常表现以慢波增加为主,可合并双侧导联不对称和快波性异常,局灶性棘波。精神症状和(或)癫痫发作期以局灶性慢波增多为主要表现,无反应期以弥漫性慢波增多为主要表现,慢波频率进一步减低。极度σ刷少见。恢复期慢波明显减少或消失。结论儿童抗NMDAR脑炎脑电图的显著特征是随病程进展而逐渐加重的慢波性异常,EEG的表现与临床症状有一定相关性。

N-甲基-D-门冬氨酸2B受体mRNA在纹状体边缘区的表达

目的 通过研究N-甲基-D-门冬氨酸（N-methyl-D-asparate, NMDA）2B受体是否在纹状体边缘区表达，从而在基因分子方面确定边缘区在学习记忆过程中的作用。方法 用地高辛标记多相探针方法，原位检测大鼠纹状体边缘区内NMDA 2B受体表达。结果 原位杂交结果发现NMDA 2B受体mRNA阳性信号在纹状体内分布不均匀，主要见于尾壳核，在尾壳核和苍白球间的边缘区部位可见中等大小梭形神经元，呈密集的带状分布，而苍白球只有少量的阳性胞体。结论 大鼠纹状体边缘区可以合成NMDA 2B受体，推测边缘区的学习记忆功能与NMDA受体有关。

赤芍总甙对氯化钾及N-甲基-D-门冬氨酸诱导的PC12细胞钙超载损伤的保护作用

目的探讨赤芍总甙对PC12细胞钙超载损伤的保护作用及其机制。方法采用组织培养法 ,以大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆株PC12细胞为材料 ,制备KCl及NMDA诱导的钙超载损伤模型。结果形态学检查发现赤芍总甙对两种不同类型的钙超载损伤模型中PC12细胞均具有明显保护作用 ,MTT法活细胞测定提示赤芍总甙可显著提高损伤模型中PC12细胞存活数 ,减少胞内乳酸脱氢酶渗漏 ,并显著减少胞内钙离子浓度。结论赤芍总甙对钙超载所致PC12细胞损伤有显著的保护作用。

N-甲基-D-门冬氨酸受体与使君子酸受体在培养海马神经元树突上的膜表面表达与共定位

目的 研究含NR2B亚单位的N 甲基 D 门冬氨酸 (NMDA)受体 (NR2B NMDAR)与含GluR1亚单位的使君子酸 (AMPA)受体 (GluR1 AMPAR)在发育不同阶段的培养海马神经元树突上的膜表面表达与共定位。 方法 以FLAG NR2B和GFP GluR1表达载体共转染原代培养第 5d(DIV5 )的大鼠海马神经元 ,分别用相应特异性抗体和荧光标记二抗作活细胞染色 ,显示膜表面表达的受体簇。 结果 对DIV7和DIV14的培养海马神经元树突表面受体簇计数 (个数 10 0 μm) ,GluR1 AMPAR受体簇分别为 5 9 2± 5 6和 74 8± 3 1(P <0 0 5 ) ;NR2B NMDAR为 38 7±3 5和 80 8± 4 9(P <0 0 1) ;两者共定位为 16 3± 5 2和 4 0 1± 6 0 (P <0 0 1)。DIV14海马神经元 4 0 %的共定位受体簇分布在树突棘上。 结论 随着海马神经元的发育 ,树突膜表面NR2B NMDAR、GluR1 AMPAR及两者共定位受体簇密度均增加 ,提示 ,形成更多具有活性的兴奋性突触 ,且主要位于树突棘上。

戊四氮致痫大鼠情感反应、学习记忆功能及海马N-甲基-D-门冬氨酸受体mRNA表达的改变

目的:探讨实验性癫痫持续状态(SE)对大鼠认知功能的影响及N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体表达的变化。方法:戊四氮诱导大鼠SE,采用抬高迷宫和Morris水迷宫观察大鼠情感反应和学习记忆功能的改变。RT-PCR方法检测大鼠海马NMDA受体亚单位NR1 mRNA的表达。结果:SE组大鼠在抬高迷宫开放臂中逃避时间延长(P<0.01),进入次数增多(P<0.01);水迷宫中逃避潜伏期延长(P<0.01),搜寻策略变差(P<0.05),平台象限游泳时间百分比降低(P<0.01),穿越平台次数减少(P<0.01)。同时伴有海马NR1 mRNA表达下调(P<0.01)。结论:SE可使大鼠情感行为改变和学习记忆功能受损,NR1可能参与这一变化的病理生理过程。

神经生长因子对N-甲基-D-门冬氨酸诱导人胚胎RPE细胞凋亡的保护作用

目的 探讨神经生长因子(NGF)对体外培养的人胚胎视网膜色素上皮(hFRPE)细胞凋亡的保护作用。方法 将传代培养的hFRPE细胞,用200μmol/L,300μmol/L N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)建立诱导的hFRPE细胞凋亡模型,并用吖啶橙(AO)荧光染色计数和透射电镜(TEM)观察NGF对凋亡细胞的保护作用。 结果 用AO荧光染色及TEM均观察到经200 μmol/L,300μmol/L NMDA处理72 h后的hFRPE细胞出现典型的凋亡形态学改变。200μmol/L.NMDA作用72 h后hFRPE细胞凋亡指数为(32.587 9±1.488 0)％和200 μmol/L NMDA+300 μmg/L NGF作用72 h后的hFRPE细胞凋亡指数(20.768 7±1.302 4)％相比,差异有显著性(q=2.941 4,P=0.005 0);300 μmol/L NMDA作用72 h后hFRPE细胞凋亡指数为(42.506 4±3.014 8)％,与300 μmol/L NMDA+300 μg/L NGF作用72 h后的hFRPE细胞凋亡指数(25.687 2±1.8974)％相比,差异有非常显著性的意义(q=4.117 8,P=0.000 0)。 结论 NCF能拈抗NMDA诱导的hFRPE细胞凋亡。

N-甲基-D-门冬氨酸诱导体外培养的视网膜色素上皮细胞凋亡

目的 探讨用N-甲基-D-门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)诱导体外目的 探讨用 N-甲基 -D-门冬氨酸 (N-methyl-D-aspartate,NMDA)诱导体外培养的人胚胎视网膜色素上皮 (retinal pigment epithelium,RPE)细胞的凋亡。方法 加入终浓度分别为 1 0、50、1 0 0、2 0 0、3 0 0 μmol· L-1的 NMDA作用 72 h;3 0 0 μmol· L-1NM-DA作用 1 2、2 4、3 6、48、72 h后用透射电镜定性观察凋亡细胞 ,并用吖啶橙荧光染色进行定量和定性分析。结果 经 2 0 0、3 0 0 μmol· L-1NMDA作用 72 h后 RPE细胞凋亡指数分别为 (51 .0 0 0± 1 .4491 ) %和 (74.0 0 0± 1 .71 2 7) %与对照组 (2 .0 0 0 0± 0 .42 1 6) %相比 ,差异有显著性 (t=1 0 .0 66、1 4.790 ,P=0 .0 0 0、0 .0 0 0 ) ,随着 NMDA浓度的增加 ,RPE细胞凋亡数逐渐增多 ;3 0 0 μmol·L-1NMDA作用 2 4、3 6、48、72 h后 RPE细胞凋亡指数分别为(9.0 0 0 0± 0 .73 79) %、 (1 3 .0 0 0 0± 1 .0 593 ) %、(2 5.0 0 0 0± 0 .70 71 ) %、(53 .0 0 0 0±0 .82 3 3 ) %与对照组 (2 .0 0 0 0± 0 .42 1 6) %相比差异有显著性 (t=2 .0 1 4、3 .1 65、6.61 8、1 4.676,P=0 .0 50、0 .0 0 3、0 .0 0 0、0 .0 0 0 )。结论 NMDA能诱导体外培养的人胚胎

N-甲基-D-门冬氨酸对体外培养的视网膜色素上皮细胞增殖及DNA合成的影响

目的 :探讨N -甲基 -D -门冬氨酸对体外培养的人胚胎视网膜色素上皮细胞的抑制作用及DNA合成的影响。方法 :分别用MTT法测定加入NMDA 10 ,50 ,10 0 ,2 0 0 ,3 0 0 ,40 0 μmol/L 72h后RPE细胞数量的改变和核酸蛋白分析仪测定加入NMDA 10 0 ,150 ,2 0 0 ,2 50 ,3 0 0 μmol/L 72h后RPE细胞DNA浓度的变化。结果 :50 ,10 0 ,2 0 0 ,3 0 0 ,40 0 μmol/LNMDA作用 72h后其细胞OD与对照组相比 ,差异有显著性 (t检验 ,P <0 .0 5) ;10 0 ,150 ,2 0 0 ,2 50 ,3 0 0 μmol/LNMDA作用 72h后其细胞DNA与对照组相比 ,差异有显著性 (t检验 ,P <0 .0 5)。结论 :NMDA可抑制体外培养的RPE细胞增殖及促进细胞DNA合成。

抗N-甲基-D-门冬氨酸受体脑炎所致精神障碍与功能性精神障碍的鉴别诊断

抗N-甲基-D-门冬氨酸受体脑炎(NMDAR)是一类中枢神经系统自身免疫性疾病,临床表现复杂多样,常以精神异常、认知功能受损、言语及运动障碍、意识状态改变为主要表现,易出现误诊或者诊断延迟的情况。本文结合案例探讨抗NMDAR脑炎所致精神障碍与功能性精神障碍的区别,以提高该疾病的诊治效率。

5-脂氧合酶抑制剂齐留通对N-甲基-D-门冬氨酸诱导的小鼠脑损伤的保护作用

[目的]观察5-脂氧合酶(5-LOX)抑制剂齐留通对N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)皮层注射诱导的小鼠脑损伤的影响。[方法]NMDA(100 nmoL)皮层直接注射建立脑损伤模型,用干湿重法评价脑水肿,脑切片TTC染色检测梗死体积,甲苯胺蓝染色法评价神经元的损伤。以NMDA拮抗剂氯胺酮(30mg.kg-1)为阳性对照药,3、10、30 mg.kg-1齐留通在NMDA皮层注射前30 min腹腔注射给药1次,NMDA注射后24 h评价上述指标。[结果]干湿重法显示皮层注射NMDA并未引起脑水含量的变化,齐留通对脑水含量没有影响;NMDA(100nmoL)皮层注射能诱导大面积脑梗死,中、高剂量的齐留通(10、30mg.kg-1)和氯胺酮(30 mg.kg-1)能明显降低梗死灶体积;NMDA诱导神经元变性,中、高剂量的齐留通和氯胺酮减轻神经元变性,增加损伤区神经元数量。[结论]5-LOX抑制剂齐留通对NMDA皮层注射诱导的小鼠脑损伤有保护作用。

氟哌啶醇对N-甲基-D-门冬氨酸诱导的大鼠海马神经细胞损伤的保护作用

用原代培养大鼠海马神经细胞的方法 ,观察氟哌啶醇对 N-甲基 - D-门冬氨酸 (NMDA)诱导的大鼠海马神经细胞损伤的保护作用 .结果表明 ,氟哌啶醇能剂量依赖地抑制 NMDA诱导的大鼠海马神经细胞内乳酸脱氢酶 (L DH)的释放 ,并改善受损细胞形态 ,四唑盐比色法 (MTT)显示存活率增高 .提示氟哌啶醇对

大鼠脑N-甲基-D-门冬氨酸受体在非洲爪蟾卵母细胞的表达

从成年和14d龄大鼠脑中提取mRNA,并分别注入到非洲爪蟾卵母细胞内,以全细胞电压钳位法测N-甲基-D-门冬氨酸（NMDA）引起内向膜电流,成年组为（5.2±+1.3）nA,14d龄组为（13.3±0.8）nA,组间比较差异显著（P<0.01）;以最小反应模型分析14d龄组的NMDA量效反应曲线呈S形,K值为86μmol/L。结果表明14d龄鼠脑NMDA受体在非洲爪蟾卵母细胞表达较成年鼠好。

米诺环素对大鼠原代皮层神经元的毒性及N-甲基-D-门冬氨酸损伤的保护作用

目的：米诺环素是具有中枢抗炎作用的半合成四环素类药物，本研究评价米诺环素对不同发育阶段大鼠原代皮层神经元的毒性，以及对N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)诱导神经元损伤的保护作用。方法：神经元与不同浓度米诺环素和／或NMDA作不同时间处理后，观察细胞形态，并以MTT试验评价细胞活性。

发育中的海马神经元缺氧后N-甲基-D-门冬氨酸受体通道电流变化及腺苷干预作用

目的研究缺氧对发育中的海马神经元N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体通道电流的影响及腺苷干预作用的离子通道机制。方法应用膜片箝技术分别对培养日龄为61、6 d的海马神经元缺氧前、后NMDA受体通道电流进行全细胞记录,测定其电流的最大幅值并研究腺苷对其干预作用。结果在缺氧状态下,培养日龄为6 d的海马神经元,其NMDA受体通道电流最大幅值与正常对照组相比显著升高(P<0.05)。培养日龄为16 d的海马神经元,其NMDA受体通道电流最大幅值与正常对照组相比亦显著升高(P<0.001)。予腺苷干预则使缺氧状态下培养日龄为6 d的海马神经元NMDA受体通道电流最大幅值显著降低(P<0.01)。而培养日龄为16 d的海马神经元,腺苷干预后其NMDA受体通道电流最大幅值无明显变化。结论缺氧使海马神经元NMDA受体通道电流幅值升高。腺苷通过降低NMDA受体通道电流幅值,对未成熟的海马神经元缺氧性损伤有一定的保护作用。

P77PMC大鼠惊厥后脑内N-甲基-D-门冬氨酸受体功能的研究

目的 探讨惊厥后大脑皮质N 甲基 D 门冬氨酸 (NMDA)受体兴奋性的改变与癫 #发病机制的关系。方法 利用配基结合实验观察听源性惊厥大鼠P77PMC惊厥前后大脑皮质突触膜对3 H MK 80 1的结合改变以及不同激动剂组合对其结合的影响。结果 反应体系中无任何NMDA受体激动剂时 ,惊厥后大脑皮质突触膜对3 H MK 80 1的结合有增加趋势 ,但无统计学意义 ;当反应液中加入NMDA受体激动剂时 ,惊厥后大脑皮质突触膜对3 H MK 80 1的结合明显增加 ,除惊厥后 4h与正常对照组相比无统计学差异外 ,其他惊厥后各时间点与正常对比均有统计学差异 (P <0 .0 1)。结论 听源性惊厥大鼠P77PMC惊厥后 ,大脑皮质NMDA受体活性增高 ,对其激动剂的敏感性增加 ,受体通道更易被打开。

抗N-甲基-D-门冬氨酸受体脑炎1例并文献复习

患者，女，23岁，于2014年4月1出现记忆力减退伴发热、头痛、呕吐，4月5日间断出现言语混乱、幻觉、妄想，未就诊。4月10日突然出现意识不清、癫痫发作就诊于潞河医院，既往体健，否认精神病及癫痫史。

罗建红教授团队在《细胞研究》发文阐明N-甲基-D-门冬氨酸受体含GluN2A亚型选择性调控的新机制

NMDA受体是介导突触可塑性的关键分子，因此在脑高级功能及神经精神疾病中具有重要作用。突触NMDA受体的数量和亚型组成受神经元的精准调控，其中GluN2A型和GluN2B型NMDA受体的调控及意义多年来一直是该领域的研究热点。

人免疫球蛋白治疗抗N-甲基-D-门冬氨酸受体脑炎的疗效和安全性分析

目的:探讨人免疫球蛋白治疗抗N-甲基-D-门冬氨酸受体脑炎的疗效和安全性。方法:选取我院收治的34例抗N-甲基-D-门冬氨酸受体脑炎患者,以随机数表抽取法将其分为对照组和观察组,各17例,对照组给予糖皮质激素治疗,观察组给予人免疫球蛋白治疗,对两组患者临床疗效和安全性进行观察对比。结果:观察组患者治疗总有效率高于对照组(P<0.05);观察组患者不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论:人免疫球蛋白治疗抗N-甲基-D-门冬氨酸受体脑炎临床疗效较为理想,能够改善患者临床症状,并具有较高的安全性,值得在临床上广泛推广。