sTNFR1、NCAM及脑白质高信号对老年急性脑梗死患者溶栓后早期神经功能恶化的诊断价值

目的 探讨可溶性肿瘤坏死因子受体1 (sTNFR1)、神经细胞黏附分子(NCAM)及头颅MIR脑白质高信号(WMH)对老年急性脑梗死(ACI)患者溶栓后早期神经功能恶化(END)的诊断价值。方法 选取2020年1月至2023年1月在简阳市中医医院脑病科接受溶栓治疗的132例老年ACI患者为研究对象,根据是否出现END分为非END组和END组。收集患者临床资料,使用单因素和多因素Logistic回归分析sTNFR1、NCAM、WMH及其他因素对老年ACI患者溶栓后END发生的影响并构建患者END发生的风险预测模型,使用受试者工作特征(ROC)曲线评价该模型的预测性能。结果 其中非END组90例(68.18%),END组42例(31.82%),多因素分析结果显示,两组患者脂蛋白a(LPa)(OR=1.135,95%CI=1.026~1.255,P=0.014)、白蛋白(OR=0.854,95%CI=0.732~0.996,P=0.045)、sTNFR1 (OR=1.391,95%CI=1.107~1.747,P=0.005)、NCAM (OR=0.880,95%CI=0.816~0.948,P=0.001)为ACI患者溶栓后END发生的独立影响因素(^(均)P<0.05)。在此基础上建立风险预测模型,模型公式:Logitic(P)=-11.159+0.127×LPa-0.158×白蛋白+0.330×sTNFR1-0.128×NCAM。其ROC曲线下面积为(AVC)0.920,95%CI(0.978~1.000),敏感度为0.976,特异度为0.944,Youden指数为0.920。结论 老年ACI患者sTNFR1、NCAM是其溶栓后END发生的独立影响因素,WMH未能纳入模型,可能与其他数据的干扰有关,在此基础上构建的风险预测模型预测效能良好,证明其有较高的预测价值。

NCAM基因对人涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83生长抑制作用的研究

目的探讨NCAM基因对人涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-83体外生长的抑制作用。方法应用电穿孔转染方法将NCAMcDNA转入人涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83中,经G418筛选2～3周,用兔抗人NCAM抗体进行免疫组化染色鉴定,然后绘制细胞生长曲线,进行软琼脂培养。结果应用电穿孔方法可成功将NCAM基因转染入人涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-83中,免疫组化染色鉴定显示转染NCAM的SACC-83细胞有NCAM蛋白的表达。与对照组相比,经NCAM基因转染后的SACC-83细胞增殖明显受到抑制。转染了NCAM基因的SACC-83细胞克隆形成率明显降低。结论NCAM基因对人涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83的生长有一定的抑制作用。

神经细胞NCAM及TGF-β_2在脑胶质瘤中表达的意义

目的 研究神经细胞黏附分子 ( NCAM)、转化生长因子β2 ( TGF-β2 )在胶质瘤中的表达。方法 采用免疫组化 ( Envision)二步法 ,对 71例脑胶质瘤及 6例正常脑组织进行研究。对所有入选病例均进行随访。结果 TGF-β2在正常脑组织中未见表达 ,NCAM在正常脑组织中高表达 ,两者在胶质瘤细胞中均有不同程度的表达 ,表达强度与肿瘤的恶性程度相关。 NCAM与 TGF-β2 表达呈负相关 ( P<0 .0 5 )。生存率统计表明 NCAM、TGF-β2 表达不同的组间 3年生存率差异均有显著性。结论 NCAM及 TGF-β2 在不同病理级别胶质瘤表达差异有显著性 ,NCAM反映肿瘤侵袭性 ,TGF-β2 反映肿瘤的恶性生物学行为 。

芹菜素对急性大鼠脑缺血再灌注后脑组织NCAM表达的影响

目的:探讨NCAM在大鼠脑缺血再灌注后不同时间的表达变化及芹菜素对其表达的影响。方法:采用改良线栓法建立大鼠脑缺血再灌注后不同时间损伤模型。动物随机分为假手术组(S)、模型组(M)、芹菜素组(A)和地塞米松组(D)。各手术组按再灌注时间不同又分为再灌注6 h组、24 h组、72 h组、7 d组,各组动物麻醉清醒后均给予神经行为学评分,每组1只大鼠TTC染色观察脑梗死灶、6只免疫组化法测定NCAM的表达。结果在A72h组神经行为学评分低于M72h(P<0.05);脑组织切片TTC染色显示各手术组均出现白色梗死灶;正常脑组织NCAM少量表达,缺血再灌注后表达增加,于72 h达高峰,A组能显著提高NCAM的表达,各时间点A和M组比较差异显著(P<0.05)。结论:芹菜素可增加脑缺血再灌注后NCAM的表达,提示芹菜素可能通过NCMA达到促进脑组织损伤后神经细胞修复和再生的作用。

难治性癫痫患者颞叶新皮质中NCAM-140kDa的表达:颞叶新皮质的可塑性与难治性癫痫的关系

目的研究难治性颞叶癫痫患者颞叶新皮质中NCAM-140kDa(神经细胞粘附分子B)的表达,探讨其在难治性癫痫形成中的意义,并初步探讨颞叶新皮质的可塑性与难治性癫痫的关系。方法按随机化原则,在我们建立的难治性癫痫患者术后脑组织库中抽取15例患者的颞叶脑组织,用免疫组织化学、免疫荧光法分别检测其NCAM-140kDa的表达,并与对照组进行比较。结果免疫组化检测到的实验组和对照组的NCAM-140kDa平均光密度值分别为:0.2290±0.0427、0.1789±0.0258,两组比较差异有显著性(P<0.05)。免疫荧光检测到的实验组和对照组的NCAM荧光强度分别为28.8345±3.2635、20.4513±2.2834,与对照组相比,差异有显著性(P<0.05)。结论NCAM-140kDa在难治性颞叶癫痫患者的颞叶新皮质中表达增加,提示其参与了难治性颞叶癫痫的形成及颞叶皮质神经细胞的可塑性改变与难治性癫痫的形成密切相关。

外伤性癫痫大鼠海马NCAM及GAP-43的动态表达

目的:动态观察神经细胞黏附分子(NCAM)及颗粒细胞生长相关蛋白-43(GAP-43)在外伤性癫痫(PTE)大鼠海马的表达,探讨有关发病机制。方法:立体定向注射1000nmolFeCl2:于大鼠右侧运动皮层致痫,在不同时间点行为学视频、脑电图监测,用免疫组织化学法检测1、2、3、4周大鼠海马内NCAM及GAP-43的表达。结果:所有大鼠在注射FeCl2后不久记录到癫痫样放电,致痫后1周即可见海马神经元NCAM大量表达,15天达高峰,20天后减少,持续30天;GAP-43表达在5～7天达高峰,2周后明显减少。结论:FeCl2皮层注射可以制成PTE动物模型。与NCAM及GAP-43表达相关的神经元及胶质细胞的动态变化在PTE的发病机制中起重要作用。NCAM表达增加而GAP-43表达减少可能为FeCl2致痫的共同途径。

NCAM和DPC4的表达与胆管癌神经浸润的关系

为探讨NCAM和DPC 4在胆管癌神经浸润中的作用,笔者采用免疫组化技术(SP法)对5 2例胆管癌标本及1 6例正常胆管组织中NCAM和DPC 4的表达进行检测,结果显示,NCAM高表达及DPC 4低表达的胆管癌神经浸润率高,NCAM低表达及DPC 4高表达的胆管癌神经浸润率低。提示NCAM高表达及DPC 4低表达,在胆管癌的神经浸润转移的分子机制中可能有重要的作用;NCAM可能成为临床预测胆管癌神经倾向的生物学指标,并对判断胆管癌恶性程度与预后有较重要的临床意义。

成胶质细胞瘤与PTEN基因及NCAM的关系

目的 :研究成胶质细胞瘤中PTEN基因突变及NCAM(神经细胞粘附分子 )的表达 ,并探讨与两者之间的关系。方法 :对 10 2例胶质瘤石蜡切片PTEN基因进行PCR SSCP分析 (聚合酶链反应 单链构象多态性分析 ) ,检测PTEN基因突变 ;同时通过免疫组化方法检测NCAM在胶质瘤中的表达。结果 :共有 11例成胶质细胞瘤发生PTEN基因突变 ,突变发生率为 2 6% ( 11 4 2 ) ,显著高于其它胶质瘤 ( χ2 =11.62P <0 .0 0 5 ) ;无一例成胶质细胞瘤发现NCAM阳性表达 ,阳性表达率显著低于其它胶质瘤 (P =0 .0 0 0 )。结论 :PTEN基因突变在成胶质细胞瘤发生、发展中起重要作用 ;NCAM在成胶质细胞瘤侵袭。

受体显像剂^(99m)Tc-NCAM在小鼠脑组织中的药物代谢动力学研究

对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂锝标记N-[2-(N-(2-巯基乙基))氨基乙酰基]-N-(2-巯基乙基)-3,5-二甲基金刚烷胺基乙酰胺(99mTc-NCAM)进行小鼠脑组织中药物动力学研究。KM小鼠尾静脉注射0.2mL(7.4MBq)99mTc-NCAM,分别于注射后5、10、30、60、120、180min处死,取大脑皮层、纹状体、海马、小脑和丘脑,称重和测计数。以相同的时间点,小鼠断尾取血20μL,测计数。用药物动力学定域模型进行脑组织和血药动力学研究。结果表明,99mTc-NCAM静脉注射给药后迅速进脑,在大脑皮层和海马有较高的摄取,最高摄取分别为1.51±0.13%ID/g和0.74±0.002%ID/g。理论计算表明,99mTc-NCAM在小鼠体内符合二室模型,并获得各种脑组织和血液的药物动力学方程和参数。99mTc-NCAM能透过血脑屏障进入小鼠脑内特定区域,以NMDA受体分布最多的大脑皮层和海马摄取较多,可望成为一种新的NMDA受体显像剂,用于一些神经退行性疾病的诊断预后等。

NCAM L1小基因模型的建立及其剪接模式研究

目的:建立可用于前体mRNA可变剪接分析的NCAM L1小基因模型。方法:以人基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得NCAM L1小基因片段,并将其克隆至真核表达载体中,构建小基因的质粒。在此基础上,用NCAM L1小基因模型转染HeLa、COS-1、PFSK及R28细胞,并用RT-PCR进行被剪接的小基因产物的半定量检测。结果:NCAM L1小基因在4种细胞中的剪接模式不同,在PFSK以及Hela细胞中,存在2种剪接亚型,而在COS-1以及R28细胞中只有一种剪接亚型存在。结论:所构建的NCAM L1小基因可用于细胞水平的基因剪接分析。

乳腺癌组织GFRα1、RET及NCAM表达水平与淋巴结转移关系的研究

目的探讨有淋巴结转移和无淋巴结转移的乳腺癌组织中胶质细胞系源性神经营养因子受体α1(glial cell line derived neurotrophic factor α1,GFRα1)、RET原癌基因(RET proto-oncogene,RET)及神经细胞黏附分子(nerve cell adhesion molecule,NCAM)的表达水平,探索GFRα1可能的下游通路与淋巴结转移的关系。方法从乳腺癌患者中采用随机数字表法抽取有淋巴结转移和无淋巴结转移者各50例,分为淋巴结转移组和无淋巴结转移组,收集其组织标本和临床资料。采用免疫组织化学及Western blot法检测两组中GFRα1、RET及NCAM的表达水平,结合患者淋巴结状态进行分析。结果在免疫组织化学评分中GFRα1和RET在淋巴结转移组中的表达水平高于无淋巴结转移组[(3.967±1.847) vs (2.367±1.903),(3.967±1.752) vs (2.433±1.591),均P<0.05]。Western blot法显示,GFRα1和RET在淋巴结转移组中的蛋白表达水平高于无淋巴结转移组[(0.679±0.044) vs (0.495±0.064),(0.510±0.018) vs (0.291±0.035),均P<0.05]。免疫组织化学和Western blot法均显示,两组NCAM表达水平比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论 GFRa1和RET在淋巴结转移乳腺癌患者的原发灶组织中的表达高于无淋巴结转移患者,可能与神经胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF)GDNF-GFRα1-RET通路的激活有关。

PSA及NCAM表达差异COS-7细胞的建立及PSA对COS-7细胞迁移侵袭能力的影响

目的构建PSA与NCAM表达差异的COS-7细胞,并检测PSA的表达对细胞粘附、迁移侵袭能力的影响,为今后进一步研究PSA介导的细胞迁移侵袭信号通路变化,阐明PSA对肿瘤转移影响的分子机制奠定基础。方法该文通过双转染质粒构建PSA与NCAM表达差异的COS-7细胞株,利用流式细胞术及Western blot方法检验转染效率;采用MTT法检测PSA表达差异COS-7细胞的增殖;粘附分析法检测COS-7细胞对细胞外基质Fn的粘附能力;利用tran-swell小室比较PSA与NCAM表达差异的COS-7细胞迁移、侵袭能力。结果PSA与NCAM表达差异COS-7细胞构建成功,PSA可降低COS-7细胞与基底膜的粘附,增强其迁移及侵袭能力。结论该文所建立的PSA与NCAM表达差异的COS-7细胞株可用于今后进行PSA对细胞迁移侵袭信号通路影响的机制研究。

NMDA受体显像剂^(99)Tc^m-NCAM的制备和受体结合分析

用99Tcm标记新的美金刚胺(memantine)衍生物N-[2-(N-(2-巯基乙基))氨基乙酰基]-N-(2-巯基乙基)-3,5-二甲基金刚烷胺基乙酰胺(N2S2-memantine,简称NCAM),并通过优化标记条件获得放射化学纯度达95%以上的标记化合物99Tcm-NCAM。脂溶性实验测得其脂水分配系数lgP=1.90。放射性受体结合分析显示,其与N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体结合具有饱和性,根据受体B区理论编制的计算机程序求出NMDA受体结合参数最大结合容量Bmax=56.8μmol/g,平衡解离常数Kd=706.3 nmol/L,特异性NMDA受体拮抗剂能阻断其与NMDA受体的结合。结果显示99Tcm-NCAM与NMDA受体结合具有中等程度的亲和力和结合特异性,具有较好的脂溶性,易透过血脑屏障,有可能成为一种新的NMDA受体显像剂。

NCAM与精神医学研究

本文简述了 NCAM 的一般概念、分子特性及分布,同时介绍了 NCAM所代表的意义,并结合几种类型精神障碍与 NCAM 的关系进行了讨论。

NCAM、CEA及caspase-3在甲状腺髓样癌中的表达及临床价值

目的探究神经细胞黏附因子(NCAM)、癌胚抗原(CEA)及caspase-3在甲状腺髓样癌中的表达及意义。方法选择82例甲状腺髓样癌患者为实验组,另选取同期41例良性甲状腺病变组织为对照组,对比2组组织NCAM、CEA及caspase-3的表达,并分析上述因子与甲状腺髓样癌临床病理特征的相关性。结果(1)甲状腺髓样癌组织中NCAM和caspase-3表达阳性率明显低于良性甲状腺病变组织,CEA水平明显高于良性病变组织(P<0.05);(2)临床病理特征比较显示,淋巴结转移与TNM分期Ⅲ~Ⅳ期甲状腺髓样癌患者NCAM和caspase-3表达明显更低,CEA水平明显更高(P<0.05)。结论NCAM和caspase-3在甲状腺髓样癌组织中呈现明显低表达态,CEA水平明显增高,同时临床病理特征分析显示NCAM、caspase-3的低表达和CEA的异常高水平与淋巴结转移及TNM分期相关。

运动训练对局灶性脑梗死大鼠梗死灶周围皮层NCAM mRNA表达的影响

目的:探讨运动训练对脑梗死大鼠梗死灶周围皮层NCAMmRNA表达的影响。方法:用Wistar大鼠制作大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。48h后随机分为3组:运动训练组、手术对照组、假手术对照组。每组均单独饲养于小鼠笼中,运动组每天被动跑笼40min。在MCAO后7、14、21、28天用原位杂交的方法检测梗死灶周围皮层NCAMmRNA的表达。结果:梗死灶周围皮层NCAMmRNA表达明显增加(P<0.01),运动训练组梗死灶周围皮层NCAMmRNA表达明显高于非训练组(P<0.05)。结论:脑缺血梗死可明显诱发NCAMmRNA的表达,运动训练可增加其表达。

基于蛋白质组学研究NCAM1在运动诱发的肺动脉高压及特发性肺动脉高压中的差异表达

目的研究通过侵入性心肺运动试验(invasive cardiopulmonary exercise testing,i CPET)确诊的运动诱发的肺动脉高压(exercise-induced pulmonary arterial hypertension,EiPAH)及特发性肺动脉高压(idiopathic pulmonary arterial hypertension,IPAH)患者血浆中人神经细胞黏附分子1(human neural cell adhesion molecule 1,NCAM1)的表达差异,并分析其表达差异与临床参数的相关性,以进一步探寻肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)新的分子标志物。方法将研究对象分为右心导管确诊的IPAH患者组、iCPET确诊的EiPAH患者组及健康对照组。运用蛋白质组学LC-MS技术对各组血浆样本进行分析,采用ELISA进一步验证,并通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)分析,判断血浆中NCAM1与临床指标的相关性。结果EiPAH患者及IPAH患者血浆中NCAM1蛋白质水平与对照组相比均明显增高,差异倍数(fold change,FC)分别为4.32和4.91(P<0.01)。扩大各组样本,采用ELISA技术进一步验证:EiPAH及IPAH患者血浆中NCAM1蛋白质水平与对照组相比有明显升高(P<0.01)。ROC曲线结果表明,在IPAH组与EiPAH组中NCAM1血浆蛋白质的AUC分别为0.93和0.98。结论EiPAH及IPAH患者血浆中NCAM1蛋白质水平均明显增高,可能与PAH密切相关。

自主跑轮运动对小鼠空间记忆能力及海马NCAM、SCF基因表达的影响

目的研究8周自主跑轮运动对小鼠空间记忆能力及海马内NCAM、SCF等相关基因表达的影响。方法12只5周龄雄性C57BL/6小鼠,随机分为运动组(E,n=6)和对照组(C,n=6)。E组进行8周自主跑轮运动,C组安静饲养。第8周利用Morris水迷宫测试其学习记忆能力。运动结束后断颈处死小鼠,取双侧海马。用RT-PCR检测小鼠海马内NCAM、SCF、VEGF、IGF-1的mRNA表达水平。结果 Morris水迷宫实验显示,E组小鼠学习记忆能力显著强于C组;RT-PCR结果显示,E组小鼠海马内NCAM mRNA(P<0.05)、SCF mRNA(P<0.05)、VEGF mRNA(P<0.05)和IGF-1 mRNA(P<0.01)的表达水平较C组显著上调。结论 8周自主跑轮运动上调VEGF mRNA、IGF-1 mRNA的表达,增加了NCAM mRNA、SCF mRNA表达,提高了小鼠空间学习记忆能力。

多聚唾液酸(PSA)及其修饰的神经粘附分子(PSA-NCAM)对肿瘤及细胞信号通路的影响

神经粘附分子(Neural cell adhesion molecule,NCAM)是免疫球蛋白家族中的一员,在细胞粘附和细胞通信,尤其是神经系统的生长和塑型中起重要作用。而多聚唾液酸(Polysialic acid,PSA)则是控制NCAM粘附能力形成与神经系统分化的重要因素。研究发现,多种肿瘤细胞中存在PSA以及多聚唾液酸化的神经粘附分子(PSA-NCAM)再表达的现象,预示PSA及PSA-NCAM与多种肿瘤细胞的粘附性、迁移性和侵袭性等特性密切相关,影响肿瘤细胞的生长与转移,并通过介导多种细胞信号通路影响癌症的发生与发展。文章综述了NCAM以及PSA对癌症的发生与发展、预后的作用及其功能对细胞下游信号传导的影响。

行为训练对双侧海马梗死大鼠学习记忆与NCAM的影响

目的探讨行为训练对双侧海马梗死大鼠空间学习记忆功能恢复及海马神经细胞粘附因子(NCAM)的影响及其作用机制。方法30只SD大鼠采用光化学诱导法制作双侧海马CA1区梗死模型,于24h后随机分为行为训练组和制动组,于造模3d后分别给予行为训练或制动,在大鼠造模后3d、行为训练后7d、14d和21d时进行学习记忆能力测试。并于不同时间取脑进行免疫组织化学染色,观察其梗死灶海马周围NCAM含量的变化。结果行为训练组学习记忆能力评估均优于制动组(P<0.05),海马NCAM含量均较制动组增多。结论行为训练可促进大鼠空间学习记忆能力的恢复,其作用机制可能与海马NCAM的增多有关。