降钙素基因相关肽对脂多糖诱导血管平滑肌细胞TLR4/NK-κB及炎症因子表达的影响

目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对脂多糖(LPS)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)TLR4/NK-κB及炎症因子表达的影响。方法贴壁法培养VSMCs,根据不同的处理方案,分为对照组、LPS处理组、CGR P组、(LPS+CGRP)组及(LPS+CGRP+C8-37)组;ELISA检测不同组VSMCs中白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和CGRP基因表达水平,免疫印迹法(Western blot)检测不同组VSMCs中Toll样受体4(TLR4)、IκBa及p65蛋白表达水平。结果 (1)LPS处理VSMCs后,随着LPS浓度的升高,IL-1β和TNF-α表达水平成梯度增加,并于1 000 ng/ml时分泌水平最高(P<0.05),在8 h时达到峰值(P<0.05);(2)CGRP剂量依赖性降低LPS诱导IL-1β和TNF-α的表达(P<0.05),并于100 nmol/L时达到低峰点(P<0.05);(3)CGRP能抑制LPS诱导的细胞TLR4蛋白的积累(P<0.05),抑制IκBa与p65蛋白的磷酸化水平(P<0.05);(4)CGRP阻断剂C8-37可以逆转CGRP对LPS刺激的VSMCs中IL-1β和TNF-α表达(P<0.05),拮抗CGRP对TLR4和NK-κB的抑制(P<0.05)。结论 CGRP通过抑制TLR4蛋白的积累,阻断NF-κB信号蛋白IκBa与p65的磷酸化,进而削弱LPS诱导的细胞炎症因子IL-1β和TNF-α的激活,抑制LPS诱导的VSMCs炎症的激活。

冠心病患者血清LDL-C、NK-kB、IL-6水平与annexin A1的相关性研究

目的分析血清低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、核转录因子(nuclear transcription factor kappa B,NF-κB)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平变化与冠心病患者膜联蛋白A1(annexin A1)的相关性。方法选取本院确诊的冠心病患者80例纳入研究,对血清LDL-C、NK-κB、IL-6水平变化与冠心病患者annexin A1的相关性进行分析。结果患者血清的annexin A1、LDL-C、NK-κB、IL-6水平在男女之间差别均未见统计学意义,P>0.05。LDL-C、NK-κB、IL-6水平异常增高组患者的annexin A1水平低于非增高患者水平,且在不同性别患者中均如此,差别均有统计学意义,P<0.05。annexin A1水平与血清LDL-C、NK-KB、IL-6水平均表现负相关关联,且均P<0.05;在男性患者和女性患者中也分别观察到类似趋势。结论冠心病患者中的血清annexin A1的血清表达水平同LDL-C、NK-κB、IL-6水平负相关,见于LDL-C、NK-κB、IL-6水平增高与冠心病病情的恶化相关联,因此推知annexin A1在体内减缓冠心病病情恶化。

NK-104在人肝癌细胞系对TNF-α诱导的NF-κB基因活性的影响

背景与目的:炎症与癌症的发生已经引起学者们的关注。Nuclear factor KappaB因子(NF-κB)是炎症过程中关键的基因之一,在细胞的生存及恶化的演变过程中起着重要的调节作用,能够被各种外界刺激因素激活。本研究探讨第三代3-羟基-3-甲基戊二酰辅A(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA,HMG-CoA)还原酶抑制剂NK-104在人肝癌细胞系对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的NF-κB基因活性的影响。方法:以肝癌细胞系Huh7为靶细胞,WST-8法测定NK-104对细胞增殖的影响;以Western blot法检测NK-104对TNF-α诱导的细胞核NF-κB基因活性的表达及IκBα的表达;ELISA法检测NK-104对IL-8产物的影响。结果:NK-104(0.1μmol/L)单独治疗组对NF-кB基因的表达无明显影响,TNF-α(1ng/ml)能够明显提高NF-кB基因的表达呈1.8倍左右,与NK-104共同作用后,能够显著抑制它的表达(P<0.01)。而细胞内IκBα的表达差异无显著性(P>0.05);NK-104可显著降低NF-кB激活后炎性细胞因子IL-8产物的分泌。结论:NK-104在人肝癌细胞系对TNF-α诱导的NF-κB基因活性及其IL-8产物的分泌具有明显的抑制作用,为临床治疗肝癌提供一定的实验依据。

楮实子对肝星状细胞增殖、凋亡及TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路的影响

目的 探究楮实子对肝星状细胞(HSC)增殖、凋亡及Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)/肿瘤坏死因子-α(TNF-α)信号通路的影响。方法 体外培养大鼠肝星状细胞系(HSC-T6),正常培养细胞作为空白组;使用转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激细胞24 h后,分别添加不同质量浓度(0、1、5、10 g/L)的楮实子培养细胞,依次作为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。MTT法、Annexin V-FITC/PI双染法检测楮实子对HSC-T6细胞增殖、凋亡的影响;ELISA法检测HSC-T6细胞上清液中TNF-α、白细胞介素-6(IL-6)含量;Western blotting法检测HSC-T6细胞中TLR4、NF-κB、TNF-α蛋白表达。结果 楮实子可抑制活化的HSC-T6细胞增殖,促进其凋亡,且呈质量浓度依赖性(P<0.05);楮实子可降低活化的HSC-T6细胞上清液中TNF-α、IL-6水平,下调细胞中TLR4、NF-κB、TNF-α蛋白水平,并均呈质量浓度依赖性(P<0.05)。结论 楮实子可抑制HSC-T6细胞增殖,促进HSC-T6细胞凋亡,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路激活有关。

胃泌素对人结肠癌细胞NF-κB信号通路的影响

目的探讨胃泌素对人结肠癌细胞Colo320WT中核转录因子NF-κB通路的影响。方法实验分为4组:对照组(C)、胃泌素组(G17)、胃泌素+L365,260组(G17+L365,260)及L365,260组。胃泌素组用胃泌素干预Colo320WT细胞12h,胃泌素加L365,260组是先用胃泌素受体拮抗剂L365,260预干预Colo320WT细胞30min,再用胃泌素干预12h,L365,260组是L365,260干预Colo320WT细胞30min。用EMSA测定NF-κB活性,用RT-PCR测定uPA的mRNA表达,免疫印迹方法测定uPA蛋白的表达。结果胃泌素干预Colo320WT细胞后NF-κB的活性明显增加,uPA蛋白和mRNA表达明显增加。L365,260阻断后,细胞NF-κB活性下降、uPA蛋白和mRNA表达降低。结论胃泌素可活化Colo320WT细胞中NF-κB的信号通路。

阿托伐他汀对实验性肾间质纤维化大鼠细胞间黏附分子1、核因子-κB表达的影响

目的研究阿托伐他汀对肾间质纤维化大鼠的肾脏保护机制。方法 54只Wistar大鼠随机分为假手术组(A组,n=18)、单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)模型组(B组,n=18)、阿托伐他汀治疗组(C组,n=18)。C组于术前3天开始灌胃(阿托伐他汀10mg·kg^(-1)·d^(-1),制成混悬液),A组及B组给予等量生理盐水灌胃,分别于术后第3、7、14天处死。光镜观察肾脏病理改变,并采用免疫组织化学染色测定肾小管间质中细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的表达。结果 B组ICAM-1、NF-κB的表达随梗阻时间延长明显增加,C组术后第3、7、14天ICAM-1、NF-κB的表达均显著低于同期B组(P<0.05)。相关分析结果显示,第3、7、14天NF-κB的表达与同期、同组ICAM-1的表达呈正相关(P<0.05)。结论阿托伐他汀能下调肾小管间质中ICAM-1、NF-κB的表达,抑制和延缓肾间质纤维化的进展。阿托伐他汀对ICAM-1的下调作用至少部分是通过抑制NF-κB的表达而实现的。

内毒素诱导兔肺动脉平滑肌iNOS生成中NF-κB作用的探讨

目的和方法：实验采用内毒素的主要成分脂多糖（ＬＰＳ）离体孵育去内皮兔肺动脉环方法，观察血管收缩性的改变，并加入诱生型ＮＯ生成抑制剂氨基胍（ＡＧ）以及核转录因子（ＮＦκＢ）的拮抗剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（ＰＤＴＣ）后观察了血管收缩性的变化。结果：ＬＰＳ孵育１６ｈ后血管环对新福林（ＰＥ）的反应性明显减低（Ｐ＜０．０１），与ＬＰＳ孵育组比较，ＬＰＳ与ＡＧ共同孵育后血管环反应性增加，ＰＤＴＣ预孵育血管环后再用ＬＰＳ孵育，血管环反应性也较ＬＰＳ孵育的血管环反应明显增加。经ＬＰＳ孵育的血管环用ＮＯ生成抑制剂Ｌ硝基精氨酸（ＬＮＮＡ）处理后，对血管收缩剂ＰＥ的反应性有明显增加，而ＰＤＴＣ预孵育组的血管环用ＬＮＮＡ处理后收缩反应性无明显增加。结论：ＬＰＳ离体孵育去内皮肺动脉后，血管平滑肌ｉＮＯＳ诱生，致使血管反应性降低，而ＮＦκＢ在肺动脉平滑肌ｉＮＯＳ诱生中起信息传递作用。

高血压前期中医辨证分型与血清NF-κB及热休克蛋白70相关性研究

目的:探讨高血压前期中医辨证分型对NF-κB炎症信号通路、应激状态的影响。方法:以151例不同中医证型的高血压前期受试者(高血压前期组)和30例正常血压健康体检者(对照组)为研究对象,检测受试者外周血清NK-κB p 65的磷酸化水平、热休克蛋白70(HSP 70)水平,分析中医辨证分型对二者的作用。结果:高血压前期组NF-κB p 65磷酸化活性及血清HSP 70水平显著高于对照组(P<0.01),高血压前期组组内比较,痰湿壅盛组NF-κB p 65磷酸化活性及血清HSP 70水平高于其他3组(P<0.05),其他3组两两比较无统计学差异(P>0.05)。结论:(1)高血压前期组NF-κB p 65磷酸化活性及血清HSP 70水平显著高于对照组,说明在高血压病的早期阶段(高血压前期)即出现了NF-κB炎症信号通路的激活和应激反应;(2)痰湿壅盛型高血压前期NF-κB p65磷酸化活性及血清HSP 70水平均高于其他3个证型,或可说明NF-κB炎症信号通路的激活程度和应激反应状态与中医辨证分型有关,或可作为对高血压前期进行中医辨证分型的客观指标;(3)对NF-κB炎症信号通路和应激反应进行早期干预或许对延缓高血压病情进展有积极作用。

NF-κB上调VEGF表达影响胃癌预后

目的:探讨胃癌内核转录因子κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)活化对血管内皮生长因子(vascularendothelialRrowthfactor,VEGF)表达的影响及对预后的影响.方法:选择胃癌根治术切除标本41例,应用免疫组织化学方法测定NK-κB,VEGF及CD34的表达,检测结果与胃癌临床病理学多参数进行经统计分析.结果:NF-κB呈活化型型表达者占受检病例的68.3%,VEGF呈强阳性表达者占受检病例的70.73%.NF-κB活化型表达组与VEGF高表达组有较高一致性(κ=0.393,P=0.012).NF-κB与VEGF同时表达组微血管密度明显较NF-κB与VEGF同时阴性组高(P=0.000),NF-κB与VEGF同时表达组生存期明显短于NF-κB与VEGF同时阴性组(P=0.035).结论:胃癌细胞通过活化NF-κB信号通道促进VEGF高表达,从而影响肿瘤内微血管密度及预后.

白细胞介素10对大鼠肝星形细胞表达α-平滑肌肌动蛋白和核因子-κB的影响

目的 研究外源性白细胞介素 10 (IL - 10 )干预对实验性大鼠肝纤维化肝星形细胞表达α-平滑肌肌动蛋白 (α- SMA)和核因子 -κB(NF-κB)的影响。 方法 6 0只清洁级 SD大鼠 ,随机分为正常对照 (N组 )、肝纤维化 (C组 )和 IL - 10干预 (I组 )。以 CCl4 腹腔内注射构建肝纤维化模型 ,并予 IL - 10腹腔内注射干预造模。于第 7周和第 11周分别随机选取一批大鼠 ,分离肝星形细胞 (HSC) ,以免疫细胞化学法检测各组 HSC中α- SMA和 NF-κB表达情况。 结果 N组α- SMA和 NF-κB仅少量表达且着色浅 (阳性率分别为 36 .5 %和 2 8.5 % ) ,免疫化学评分分别为0 .6 6± 0 .0 7和 0 .4 2± 0 .0 5 ;C组所有细胞均表达α- SMA和 NF-κB且表达明显增强 ,第 7周二者评分分别为 2 .4 3± 0 .0 3和 1.73± 0 .0 9,第 11周为 2 .4 7± 0 .14和 2 .4 8± 0 .70 (与 N组比较 ,P<0 .0 1) ;I组二者表达较 C组明显减弱 ,第 7周时评分分别为 2 .14± 0 .11和 1.6 2± 0 .1(P<0 .0 5 ) ,第 11周为 2 .0 9± 0 .0 6和 1.92± 0 .4 2。随肝纤维化进展 ,C组中第 11周 NF-κB的表达较第 7周有增加趋势 (P<0 .0 1) ,而α- SMA的表达不随纤维化的进展而变化 (P>0 .0 5 )。 结论 外源性 IL -

梅花入骨丹通过Toll样受体4/核转录因子-κB信号通路调节大鼠退变软骨细胞外基质代谢紊乱的作用机制

目的:探讨梅花入骨丹通过Toll样受体4/核转录因子-κB(TLR4/NK-κB)信号通路调节退变软骨细胞外基质代谢紊乱的作用机制。方法:体外培养大鼠软骨细胞并鉴定,采用CCK-8法检测梅花入骨丹水提物(BCAE)对体外软骨细胞的增殖-毒性,筛选药物作用的最佳浓度和时间。采用10 ng·mL-1白细胞介素-1β(IL-1β)建立软骨细胞炎症退变模型,将软骨细胞分为空白对照组、模型对照组、BCAE组、抑制剂TAK-242组和抑制剂PDTC组,分别进行相应干预后,qRT-PCR及Western blot法检测各组基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、MMP-3、MMP-9、MMP-13、TLR4、IKKβ、IκBα、p-p65、ColⅡ的mRNA、蛋白表达情况。结果:与空白对照组比较,模型对照组MMP-1、MMP-3、MMP-9、MMP-13、TLR4、IKKβ、p-p65的mRNA及蛋白的表达明显升高(P<0.01),而IκBα、ColⅡ表达下降(P<0.01);与模型对照组比较,TAK-242组、PDTC组、BCAE组MMP-1、MMP-3、MMP-9、MMP-13、TLR4、IKKβ、p-p65的mRNA及蛋白的表达明显减少(P<0.01),而IκBα、ColⅡ表达升高(P<0.01)。结论:梅花入骨丹通过TLR4/NK-κB信号通路抑制MMPs的关键调控因子表达,从而抑制IL-1β介导的退变软骨细胞外基质代谢紊乱,发挥抗炎和保护软骨细胞的作用。

基于Notch 1/NF-κB/STAT3通路探讨塞来昔布逆转NK/T细胞淋巴瘤细胞阿霉素耐药的作用机制

目的:观察塞来昔布(celecoxib)对淋巴瘤细胞SNK6阿霉素(adriamycin)耐药性的逆转及作用机制。方法:不同浓度的塞来昔布(10、20、40、60、80、100μmol/L)作用于SNK6和SNK6/ADR细胞,噻唑蓝比色法(MTT)检测塞来昔布对SNK6及SNK6/ADR细胞的生长抑制率,筛选塞来昔布对SNK6/ADR的低毒浓度,计算半数抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50)值;采用低毒浓度塞来昔布联合不同浓度的阿霉素处理SNK6/ADR后,测得阿霉素联合塞来昔布后的IC50,并计算逆转倍数;选择低毒浓度塞来昔布联合阿霉素处理SNK6/ADR细胞后,应用流式细胞术测细胞凋亡情况;药物蓄积实验检测罗丹明123蓄积情况;用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测Notch 1、核转录因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)、信号转导子和转录激活子(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)mRNA表达水平;用蛋白质印迹法(Western blot)检测Notch 1、NF-κB、STAT3、P-gp蛋白表达水平。结果:不同浓度塞来昔布可明显抑制SNK6、SNK6/ADR细胞的增殖,且其抑制作用随着塞来昔布浓度的增大而增加。塞来昔布对SNK6细胞的IC50为(57.54±6.89)μg/mL,对SNK6/ADR细胞的IC50为(43.39±4.38)μg/mL,阿霉素对SNK6/ADR细胞的IC50为(7.34±0.56)μg/mL,与10μmol/L塞来昔布联合作用后,阿霉素对SNK6/ADR细胞的IC50为(3.51±0.25)μg/mL(P<0.01),逆转倍数为2.09;阿霉素与10μmol/L塞来昔布联合作用后,与阿霉素组比较,SNK6/ADR细胞凋亡率显著增加(P<0.01);细胞内罗丹明123的蓄积量显著增加(P<0.01);SNK6/ADR细胞内P-gp蛋白表达显著降低(P<0.01);SNK6/ADR细胞内Notch 1、NF-κB、STAT3 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:塞来昔布可诱导NK/T细胞淋巴瘤细胞凋亡及逆转其阿霉素耐药,其可能是通过调节Notch 1/NF-κB/STAT3信号通路来实现的。

鼻腔NK/T细胞淋巴瘤LMP-1和NF-κB蛋白的表达及与细胞凋亡的关系

目的检测鼻腔 NK/T(natural killer)细胞淋巴瘤中 EB(Epstein-Bart)病毒感染潜伏膜蛋白(latentmembrane protein-1,LMP-1)与细胞因子κB(nuclear foctor-κB,NF-κB)的表达及细胞凋亡指数(apoptotic idex,AI),研究 EB 病毒与鼻腔 NK/T 细胞淋巴瘤的关系。方法 26例鼻腔 NK/T 细胞淋巴瘤为实验组,30例良性淋巴组织反应性增生病例为对照组。应用免疫组化 SP 法检测石蜡包埋块中 LMP-1和 NF-κB蛋白的阳性率,DNA 末端标记技术(TUNEL)检测 AI,比较这些指标在实验组和对照组中的差异,分析三者间的相互关系。结果 LMP-1检出率、NF-κB蛋白表达阳性率、AI 在实验组分别为69.2%(18/26)、65.4%(17/26)、2.31±0.38;对照组分别为10%(3/30)、30%(9/30)、3.12±0.45。两组指标间差异均有统计学意义(P<0.01)。LMP-1检出率与 NF-κB蛋白表达阳性率呈正相关(P=0.0010,r=0.6860),与细胞凋亡指数呈负相关(P=0.0001);NF-κB蛋白的表达与细胞凋亡率呈负相关。结论 EB 病毒感染与鼻腔 NK/T 细胞淋巴瘤的发生及发展关系密切。(中国眼耳鼻喉科杂志,2007,7:31～32)

哮喘豚鼠模型血淋巴细胞及嗜酸细胞与肺微血管内皮细胞粘附性的研究

观察哮喘豚鼠模型嗜酸细胞和淋巴细胞与肺微血管内皮细胞的粘附率 ;探讨肺微血管内皮细胞在哮喘豚鼠模型血清孵育下的功能变化及炎症细胞与其粘附的分子基础。设豚鼠哮喘模型及对照组观察分离的外周血淋巴细胞和嗜酸细胞与内皮细胞的粘附率。RT PCR法测定内皮细胞VCAM 1及eotaxinmRNA的表达强度 ;EMSA法测定NF κB和AP 1的DNA结合活性。与对照组血清孵育相比 ,肺微血管内皮细胞在模型组血清刺激下 :①与两组外周血淋巴细胞及仅与模型组嗜酸细胞的粘附率显著升高 (P <0 0 1) ;②VCAM 1和eotaxinmRNA表达量显著增多 (P <0 0 1或P <0 0 5 ) ,NF κB和AP 1的DNA结合活性也显著升高 (P <0 0 1)。肺微血管内皮细胞可被哮喘模型血清激活 ,使粘附分子、趋化因子及核转录因子的合成和分泌显著增多 ,从而显著提高其与炎症细胞的粘附率。嗜酸细胞的粘附需其自身及内皮细胞两者激活。肺微血管内皮细胞活化及NF kB和AP 1的DNA结合活性增高在哮喘发病中可能起重要作用。

苯丁酸钠联合奥沙利铂对结肠癌细胞HT29的凋亡作用

目的:探讨苯丁酸钠(SPB)联合奥沙利铂(L-OHP)诱导HT29细胞的凋亡作用及其机制。方法:结肠癌HT29细胞分为空白对照组、奥沙利铂组、苯丁酸钠(1 mmoL/L)+奥沙利铂组、苯丁酸钠(2 mmoL/L)+奥沙利铂组,MTT法测定各组细胞存活率,流式细胞仪检测凋亡率;Western blot检测细胞中凋亡相关蛋白Caspase-3和核转录因子NK-κB的表达。结果:苯丁酸钠能降低奥沙利铂诱导的HT29细胞存活率,随着其浓度增高,细胞凋亡率逐渐升高(P<0.01),细胞中Caspase-3蛋白和NK-κB蛋白表达则逐渐降低(P<0.05),均呈浓度依赖性。结论:苯丁酸钠(SPB)联合奥沙利铂(L-OHP)可诱导HT29细胞凋亡,其机制可能与抑制Caspase-3和NK-κB信号传导通路有关。

炎症因子在2型糖尿病及妊娠期糖尿病发病中的作用研究进展

妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus，GDM）是指在妊娠期间首次发现或发生的糖代谢异常，包括糖尿病及糖耐量异常，不包括妊娠前已诊断的糖尿病患者，是妊娠期常见的并发症之一，发病率逐年升高。其发病相关因素有胰岛素抵抗、自身免疫遗传因素、慢性炎症等。胰岛素抵抗过程中的炎性反应通常是先天性免疫反应，这种反应常引起机体异常炎症因子的产生、急性期反应蛋白的增加以及炎症信号转导通路的激活。当这些细胞如巨噬细胞、抗原提呈细胞、内皮细胞等受到来自感染、化学物质等体内外潜在危险因素刺激时，便通过结构识别受体激活炎症信号通路，从而释放肿瘤坏死因子（TNF）、白介素-6（IL-6）、IL-8、IL-10、IL-12、C-反应蛋白（CRP）、核因子-κB （NF-κB）等炎症因子以及炎症介质，进而引起胰岛素抵抗和胰岛素分泌障碍。胰岛素抵抗与促炎性细胞因子（如TNF-α、IL-6）的分泌异常及抗炎性调节因子（如IL-4、IL-10）分泌减少有关[1-2]。GDM 的病因至今尚不清楚，胰岛素抵抗及胰岛β细胞分泌降低被认为是GDM发病机制的重要环节。Hotamisligil[3]认为，炎症与胰岛素抵抗之间存在相关关系，并推测炎症可能为促进胰岛素抵抗发生的重要因素之一。近年来，炎性反应在糖尿病发生、发展中的作用研究已受到广泛关注。本文对2型糖尿病及GDM发病中的相关炎症因子综述如下。

云南白药对牙龈卟啉单胞菌诱导骨破坏中RANK/RANKL/OPG系统的影响

目的建立昆明小鼠头颅骨接种牙龈卟啉单胞菌(Pg)的动物模型,客观评价云南白药对Pg诱导的骨破坏中核因子-κB受体活化因子(RANK)/RANK配体(RANKL)/骨保护素(OPG)系统的影响。方法 72只雄性昆明小鼠分为模型组、云南白药治疗组、对照组。模型组和云南白药治疗组在小鼠两耳中间颅顶至枕部骨的骨上接种Pg,同时云南白药治疗组在建模的当天开始给予云南白药灌胃。在建模的第5、8、14天各组分别处死8只小鼠。检测头颅骨中破骨细胞的含量及头颅骨中RANKL、OPG mRNA的表达。结果在术后3个时间点模型组的破骨细胞数目及头颅骨中RANKL mRNA的表达均明显高于云南白药治疗组(P<0.05);模型组、云南白药治疗组也明显高于对照组(P<0.05)。OPG mRNA的表达在各组之间进行比较则发现在术后3个时间点中云南白药治疗组均明显高于模型组和对照组(P<0.05);而在第5天模型组低于对照组(P<0.05),第8、14天模型组高于对照组(P<0.05)。结论云南白药可下调RANKL mRNA的表达,上调OPG mRNA的表达,以抑制破骨细胞的形成,提高骨的修复能力,从而抑制骨的吸收,促进骨的修复。

S100A9诱导单核细胞分泌血管内皮生长因子-A的初步机制研究

目的探讨S100A9诱导单核细胞分泌血管内皮生长因子-A(VEGF-A)的分子机制。方法收集体检健康者外周血,利用免疫磁珠分选技术分离纯化出CD14+单核细胞,流式细胞术检测晚期糖基化终产物受体(RAGE)的表达,然后在体外加入S100A9刺激培养,或预先加入抗RAGE抗体或NK-κB信号抑制剂孵育1h后再进行刺激培养,酶联免疫吸附试验检测VEGF-A水平。结果S100A9受体RAGE高表达于单核细胞表面,S100A9刺激的单核细胞以剂量和时间依赖的方式分泌VEGF-A;加入抗RAGE抗体阻断后,单核细胞分泌VEGF-A的能力明显下降(P<0.01)。进一步利用NK-κB信号抑制剂可明显抑制S100A9诱导单核细胞分泌VEGF-A的作用(P<0.01)。结论 S100A9通过RAGE-NK-κB信号途径诱导单核细胞上调VEGF-A的分泌,从而有利于新生血管的生成。